IVD Diagnóstico in vitro - Sólo para uso profesional Agar bismuto-sulfito según WILSON-BLAIR Agar bismuto-sulfito según WILSON-BLAIR Art. Núm. 1.05418.0500/5000 (500 g, 5 kg) Agar selectivo para aislamiento y diferenciación de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de material clínico, alimentos y agua según WILSON y BLAIR (1927). Corresponde a las recomendaciones de la United States Pharmacopeia Ver también Modo general de empleo Para advertencias y precauciones, ver www.merck-chemicals.com Principio Método microbiológico. Modo de acción El Verde brillante y el bismuto-sulfito inhiben considerablemente los gérmenes de acompañamiento. El sulfato de hierro (III) es un indicador del sulfuro de hidrógeno que producen las colonias de Salmonella H2S-positivas. Habitualmente, esta reacción produce una precipitación marrón o negra en el medio de cultivo así como colonias de color negro o verde con brillo metálico. Composición típica (g/litro) Extracto de carne 5,0; peptona de carne 5,0; peptona de caseína 5,0; D (+)-glucosa 5,0; hidrogeno fosfato di sódico 4,0; sulfato de hierro (III) 0,3; Verde brillante 0,025; indicador bismuto-sulfito 8,0; Agar agar 15,0. Preparación y almacenamiento Guardado en un lugar seco y estando bien cerrado, es utilizable hasta la fecha de caducidad si se conserva entre +15 y +25 °C. Proteger de la luz. Una vez abierto el frasco por primera vez, es utilizable hasta la fecha de caducidad si se conserva entre +15 y +25 °C en un lugar seco y bien cerrado. Disolver 47,5 g en 1 litro de agua desmineralizada. Mezclar bien y calentar hasta la ebullición agitando continuamente. Dejar enfriar a 45 - 50 °C. Remover y vaciar realizando placas de capa gruesa (25 ml). No tratar en autoclave. pH: 7,6 ± 0,2 a 25 °C Las placas de cultivo preparadas son turbias y presentan una precipitación coposa así como un color gris verdoso. El medio de cultivo fresco es fuertemente inhibitorio, por lo que se recomienda su uso especialmente para muestras con una contaminación importante (p. ej. heces). Según la FDA-BAM, los medios de cultivo deberían ser preparados 1 día antes de su uso y guardados en un lugar oscuro. Después de 48 horas se reduce el efecto selectivo. Uso y evaluación Sembrar finamente la superficie de las placas con el material objeto de prueba o con material procedente de un cultivo de enriquecimiento. Incubación: hasta aprox. 48 horas a 35 °C, ambiente aerobio. Colonias Colonias negras con brillo metálico, rodeadas de zonas parduzcas-negras Microorganismos Salmonella typhi Colonias Colonias negras o verdosasgrises, algunas veces con brillo metálico, con o sin ennegrecimiento del medio de cultivo rodeante Pequeñas, verdes hasta marrones, algunas veces mucosas Microorganismos Salmonella spp. Bacterias coliformes, Proteus y otras Restricciones 1. Es importante extender de tal manera que se produzcan colonias bien aisladas. 2. Si se presentan solapamientos de las colonias, no se desarrollarán las características de colonia típicas de Salmonella spp. 3. Algunas cepas de Salmonella son inhibidas con especial rigor, p. ej. Salmonella gallinarum, S. sendai, S. berta, S. abortus-equi. (Hajna 1951, Pub. Hlth. Rep. 9, 48-51) Por consiguiente, se debería someter en caso de duda casi todo crecimiento en el medio de cultivo a más pruebas, p. ej. producir un subcultivo en un medio menos selectivo para obtener colonias bien aisladas. Utilizar cultivos puros para la confirmación bioquímica y serológica. Información para realizar pedidos Producto N° de pedido Tamaño de envase Agar bismuto1.05418.0500 500 g sulfito WILSONBLAIR Agar bismuto1.05418.5000 5 kg sulfito WILSONBLAIR Control de calidad del medio de cultivo Colonias negras Cepas de prueba Crecimiento Brillo metálico Salmonella typhimurium ATCC 14028 Bueno/muy bueno + + Salmonella choleraesius ATCC 13312 Bueno/muy bueno + + Salmonella enteritidis NCTC 5188 Bueno/muy bueno + + Salmonella arizonae ATCC 13314 Bueno/muy bueno + + Salmonella aboni NCTC 6017 Bueno/muy bueno + + Escherichia coli ATCC 25922 Escaso/moderado - - Proteus mirabilis ATCC 29906 Bueno/muy bueno ± - Shigella sonnei ATCC 11060 Ninguno Staphylococcus aureus ATCC 25923 Ninguno Bacillus cereus ATCC 1 778 Ninguno Salmonella typhimurium Bibliografía American Public Health Association: Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 3ª Edición, 1992. McCOY, J.H.: The isolation of Salmonellae. - J. Appl. Bact., 25; 213-224 (1962). United States Pharmacopoeia XXIII, Capítulo "Microbial Limit Tests", 1995. WILSON, W.J., a. BLAIR, E.M. McV.: Use of glucose bismuth sulfite iron medium for the isolation of Bacillus typhosus and Bacillus proteus. - J. Hyg., 26; 374-391 (1927). WILSON, W.J., a. BLAIR, E.M. McV.: Further experience of the bismuth sulfite media in the isolation of Bacillus typhosus and Bacillus paratyphosus B from faeces, sewage and water. - J. Hyg., 31; 138-161 (1931). HAJNA, A.A.: (1951) Pub. Hlth. Rep. 9 48-51. © Versión 22.01.2009, Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany, tel. ++49 (6151) 720, www.merck.de
