MÓDULO BIOQUÍMICA CLINICA II/2021 APUNTE: EXAMEN COMPLETO DE ORINA 1. ANÁLISIS FÍSICO 2. ANÁLISIS QUÍMICO 3. ANÁLISIS DE SEDIMENTO URINARIO ANÁLISIS FÍSICO ASPECTO: La orina normal es transparente o límpida, pero puede enturbiarse por la precipitación de algunos cristales o por la presencia de células leucocitarias o epiteliales, también puede tomar un aspecto lechoso en el caso de la presencia de grasa. El aspecto ya sea normal o anormal siempre debe describirse. Este podría ser turbio, opalescente, turbio o muy turbio (piuria o cristaluria), etc. Procedimiento Colocar en un tubo de ensayo limpio alrededor de 10 ml de orina sin filtrar y agitada suavemente, observar al trasluz y anotar el aspecto que ella presenta. COLOR: La orina normal tiene un color muy variable, que está determinado principalmente por su concentración. Este color puede variar de amarillo pálido a ámbar oscuro, según la concentración. Su color se debe principalmente al pigmento urocromo y a pequeñas cantidades de urobilina y uroeritrina. Varios factores y componentes pueden alterar el color normal de la orina, como los medicamentos y la dieta, también ciertas sustancias que pueden aparecer en algunas patologías, es por ello que se pueden encontrar una gran gama de colores, roja, rosa, café o marrón, azul, verde, etc. Procedimiento: Observar la muestra de orina en un envase transparente y anotar el color. OLOR: Aunque en la actualidad el olor de la orina no se informa en forma sistemática, éste puede ser un dato importante. El olor de la orina es ligeramente aromático de origen indeterminado (sui generis). Pero en estados patológicos o por el consumo de ciertos alimentos este olor puede variar. Así es el caso de cuando estamos en presencia de cetonas, la orina adquiere un olor frutal o dulce, y en el caso de una orina contaminada con bacterias este se describe como un olor amoniacal. Procedimiento: el aroma es más fácil percibirlo en frasco de boca ancha, agitando suavemente, y luego anotar el olor que presenta. pH: Una de las funciones del riñón es ayudar a mantener el equilibrio acido-base. El pH de la orina refleja la capacidad del riñón para mantener una concentración normal de hidrogeniones en el plasma y en los líquidos extracelulares. En la práctica pueden encontrarse orinas con pH que oscilan entre 5,0 y 8,0, teniendo un promedio de 6,0, por ende, es ligeramente ácida. En este punto es importante destacar que existen grandes diferencias respecto al pH en sujetos que siguen tanto una dieta vegetariana como una proteica. Procedimiento: uso de tiras de orina o tiras de pH sumergir por unos 3 seg y destilar el exceso de orina, para luego comparar con cartilla de colores. DENSIDAD O GRAVEDAD ESPECÍFICA: La gravedad especifica es el cociente del peso de un volumen de orina y el peso del mismo volumen de agua destilada a una temperatura constante. Este es un indicador de la concentración del material disuelto en la orina, sin embargo, dependerá de la cantidad de las partículas y el peso que ellas posean en la solución. La gravedad específica se emplea para medir la capacidad de concentración y dilución del riñón (variar el volumen de la orina excretada) en su intento por mantener la homeostasis de los líquidos corporales y de los electrolitos. Procedimiento: colocar orina en tubo de ensayo y empelar tiras de orina. MÓDULO BIOQUÍMICA CLINICA II/2021 ANÁLISIS QUÍMICO A toda muestra de orina se le determinan rutinariamente: proteínas, glucosa, cuerpos cetónicos, pigmentos biliares, entre otros. En el caso de proteínas y glucosa si la determinación semicuantitativa de glucosa y proteína es positiva, se procede a determinar la cantidad exacta de estos componentes. El análisis químico de orina en una primera etapa se realizará utilizando una tira reactiva para orina. PROTEINURIA La proteinuria es probablemente el signo más frecuente de que existe una enfermedad renal y es en ello donde radica la importancia de este examen. Fundamento tira reactiva proteínas: está basado en el cambio de color del indicador azul de tetrabromofenol, en presencia de proteínas. Una reacción positiva está indicada por un cambio de color del amarillo verdoso, al verde y luego al verde intenso. Si la reacción en la tira es positiva, se deberá cuantificar para informar cantidad exacta de proteínas. METODO PARA CUANTIFICACIÓN DE PROTEINAS: EXTON-ROSE FUNDAMENTO:Las proteínas en presencia de ácido sulfosalicílico precipitan, ya que se trata de un ácido de tipo aniónico que se une a las cargas positivas de la molécula de proteína. La turbidez es proporcional a la cantidad de proteínas presentes en la orina. L: 0,1 y 1 g de proteínas por litro de orina Procedimiento Tubos Orina Estándar o calibrador Suero fisiológico Ácido sulfosalicílico 3% 1 0,125 ml 2 - 0,625 ml 0,125 ml 0,625 ml 3 0,125 0,625 ml Agitar por inversión, esperar 10 min y leer la absorbancia 600-660 mm en el fotómetro clínico. Como la orina es coloreada se debe preparar blanco de muestra. COMO LA MUESTRA ES UNA ORINA AL AZAR Y NO DE 24 HORAS, EL RESULTADO DEBE EXPRESARSE EN g/l orina GLUCOSURIA La glucosa puede encontrarse en la orina con distintos niveles de concentración sanguínea, que dependen de cada individuo. En su aparición influyen no sólo el nivel plasmático sino también el flujo sanguíneo glomerular, el flujo urinario y de, los transportadores SGLT1 y SGLT2 a nivel de los túbulos renales. En general, se produce glucosuria cuando la glicemia esta sobre los 180 - 200 mg/dl, es decir excede el umbral renal. Fundamento tira reactivas glucosa: está basado en una reacción enzimática secuencial donde la glucosa oxidasa cataliza la oxidación de la glucosa dando ácido glucónico y peróxido de hidrógeno. Luego la peroxidasa cataliza la segunda reacción con o-toluidina, formándose productos coloreados que van del celeste verdoso al azul. Si la reacción es positiva, cuantificar usando Kit disponible para glucosa