1 UNIVERSIDAD AUSTRAL DE CHILE FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS INSTITUTO DE MEDICINA PREVENTIVA VETERINARIA DEMOGRAFÍA, SEROPREVALENCIA Y FACTORES DE RIESGO DE INFECCIÓN POR EL VIRUS DE LA LEUCEMIA FELINA EN GATOS DOMÉSTICOS (Felis silvestris catus) DE ZONAS URBANAS Y RURALES EN TRES ÁREAS DE LA REGIÓN DE LA ARAUCANÍA Memoria de Título presentada como parte de los requisitos para optar al TÍTULO DE MÉDICO VETERINARIO VICTOR HUGO GUERRERO TORRES VALDIVIA – CHILE 2014 2 PROFESOR PATROCINANTE _________________________________ Gerardo Acosta J. PROFESORES INFORMANTES _________________________________ Julio Thibaut L. _________________________________ Gustavo Monti A. FECHA DE APROBACIÓN: 14 de enero de 2014 3 ÍNDICE Capítulo Página 1. RESUMEN…………………………………………………………..…. 01 2. SUMMARY……………………………………………………..………. 02 3. INTRODUCCIÓN……………………………………………..………. 03 4. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………..….... 06 5. RESULTADOS……………………………………………………..…... 10 6. DISCUSIÓN………………………………………………………..…... 15 7. REFERENCIAS…………..………………………………………….… 19 8. ANEXOS……………………………………………………………...... 22 9. AGRADECIMIENTOS……..……………………………………..….... 28 1 1. RESUMEN Con el propósito de poder conocer la seroprevalencia del virus de leucemia felina (FeLV), factores de riesgo y algunas características demográficas de los gatos domésticos (Felis silvestris catus) en un gradiente urbano-rural de las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea, Región de la Araucanía, Chile, se realizó una encuesta epidemiológica en 444, 360 y 356 viviendas en Angol, Curacautín y Gorbea respectivamente, tanto en la parte urbana como rural. Además, se obtuvieron 125 muestras de sangre de gatos domésticos de la zona urbana y 70 muestras de la zona rural, las cuales fueron analizadas mediante el uso de una prueba de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). Para este estudio se utilizó un kit comercial (ViraCHEK®/FeLV Lab Pack, Synbiotics Corporation, USA) con el fin de determinar la seropositividad al antígeno viral. La información obtenida de las encuestas y muestras analizadas se ordenó en una planilla digital utilizando el programa Microsoft Excel 2010®, generando una base de datos utilizada para realizar un modelo de regresión logística multivariada, con un nivel de confianza de un 90%. Del total de viviendas encuestadas se observa que hay una relación de 6:1 personas por gato en la zona urbana y de 2,7:1 en la zona rural. Se aprecia una relación de 0,49:1 gatos por vivienda en la zona urbana y de 1,16:1 en la zona rural. En cuanto a la presencia de un gato o más por vivienda, se encontró que en la zona urbana el 27% de las casas tiene a lo menos un gato y en la zona rural este porcentaje aumento a un 46%. Se puede observar que la población felina está constituida en la zona urbana por un 46% de machos y un 54% de hembras, obteniéndose una relación macho: hembra de 0,86:1. Por otra parte, se puede apreciar que la población felina rural está constituida por un 58% de machos y un 42% de hembras, lo cual dio una relación macho: hembra de 1,4:1. Del total de gatos de la zona urbana, el 57% visita al médico veterinario, mientras que en la zona rural solo el 12% tiene atención médico veterinaria. Se obtuvo una seroprevalencia al FeLV de un 23% en la zona urbana y de un 41% en la zona rural, estas diferencias fueron estadísticamente significativas (p≤0,1). El análisis multivariado indicó que los animales que provienen de zonas rurales, tienen 2,6 veces más posibilidades de contagiarse del FeLV en comparación con los animales que provienen de la zona urbana. Con respecto a la variable edad, se observó que para el rango de más de 2 años la posibilidad de encontrar seropositivos es 2,9 veces mayor que para el rango de 2 años o menos. Palabras clave: leucemia felina, localidad rural, localidad urbana, factores de riesgo. 2 2. SUMMARY DEMOGRAPHICS, SEROPREVALENCE AND RISK FACTORS FOR INFECTION WITH FELINE LEUKEMIA VIRUS IN DOMESTIC CATS (Felis silvestris catus) IN URBAN AND RURAL ZONES IN THREE AREAS OF THE REGION OF ARAUCANIA In order to know the seroprevalence to feline leukemia virus (FeLV), risk factors and demographic characteristics of domestic cats (Felis silvestris catus) in an urban-rural gradient in the cities of Angol, Caracautin and Gorbea, Region of Araucanía and rural areas surrounding these cities, an epidemiological survey was conducted in 444, 360 and 356 households in the areas of Angol, Caracautin and Gorbea respectively. In addition, we obtained blood samples from 125 domestic cats in the urban area and 70 rural samples, which were analyzed by using a test-linked immunosorbent assay (ELISA). For this study we used a commercial kit (ViraCHEK ® / Lab Pack FeLV, Synbiotics Corporation, USA). Data obtained from the survey and results from the ELISA test were ordered into a digital form using Microsoft Excel 2010®. Risk factors were calculated using a multivariate logistic regression model, with a confidence level of 90%. Demographic results indicated a ratio of 6:1 people: cat in urban and 2,7:1 in the rural area. Additionally, a ratio of 0,49:1 cats per household in urban and 1,16:1 in the rural area was calculated. It was found that in the urban area 27% of households have at least one cat and in the rural area this percentage rise to 46%. Feline population in the urban area is comprised by 46% of males and 54% of females, giving a male: female ratio of 0,86:1. On the other hand, in rural areas the rural cat population consisted of 58% of males and 42% of females, which gave a male: female ratio of 1,4:1. Veterinarians have visited 57% of urban cats. While in rural areas only 12% have veterinary medical care. FeLV seroprevalence differed statistically between urban (23%) and rural areas (41%). Multivariate logistic regression analysis indicated that the animals from rural areas are 2.6 times more likely to become infected with FeLV in comparison with the animals that come from the urban sites. Additionally, cats older than 2 years are 2.9 times more likely to be seropositive to FeLV than younger cats. Key words: feline leukaemia, rural town, urban location, risk factors. 3 3. INTRODUCCIÓN Los gatos (Felis silvestris catus) son mascotas muy prácticas para la forma de vida de la sociedad moderna por su independencia y adaptabilidad, aunque todavía es posible encontrar a muchos sin dueño o que no tienen control de salud (Azocar 2008). Los felinos domésticos son animales apropiados para ser modelos de estudio de enfermedades en condiciones naturales y en el laboratorio (Courchamp y col 1997) porque constituyen un excelente ejemplo para la evaluación de la influencia de características poblacionales en la dinámica de presentación de algunos agentes infecciosos (Fromont y col 1998). Como las infecciones retrovirales representan una importante causa de morbilidad en los felinos y pueden afectar a muchos animales de una población, en esta especie se han realizado investigaciones durante más de 30 años y se le considera como un modelo animal relevante de estas infecciones (Azocar 2008). El virus de la Leucemia Felina (FeLV) causa enfermedades frecuentes en la práctica clínica y es reconocido como agente causal de una amplia variedad de afecciones incluyendo enfermedades proliferativas y degenerativas (Miyazawa 2002). Este virus provoca infecciones graves, presenta distribución mundial y afecta tanto a gatos domésticos como a felinos silvestres (Willett 2012). El FeLV es capaz de inducir un déficit de la inmunidad que deja al huésped susceptible a enfermedades secundarias (Berríos 2011). El FeLV fue el primer retrovirus descrito en gatos domésticos. Fue descubierto por William Jarrett en Escocia en 1964 (Jarrett 1999, Willett 2012). Antecedentes señalan que este virus se desarrolló a partir de un agente derivado de la rata que pudo haber cruzado la barrera interespecie por la predación de roedores por parte de los felinos. Afecta a gatos domésticos de todo el mundo y de manera esporádica a felinos silvestres (Willett 2012). El FeLV pertenece al género Gammaretrovirus; es un virus ARN de cadena simple y mide entre 100 a 110 nm de diámetro (Azocar 2008). Todos los genomas de los retrovirus contienen tres genes esenciales llamados gag, pol y env, que codifican proteínas muy importantes para el virus, flanqueados por repeticiones terminales largas (LTR) en cada uno de los extremos, que poseen la información necesaria para el inicio y la terminación de la expresión génica (Palmero 2010). El gen gag es el responsable de la producción de las proteínas estructurales p10, p12, p15 y p27 que constituyen la base para el diagnóstico de la enfermedad. Una de las más importantes es la proteína p27, la cual se puede identificar en los gatos con infección persistente (Willett 2012). El gen pol codifica la enzima transcriptasa reversa y las proteínas p14, p80, y p46 y el gen env forma las proteínas de la envoltura gp70 y p15e; la primera es importante en la formación de los subgrupos virales y en la respuesta inmune humoral y la segunda es conocida por provocar inmunosupresión (Couto 2010, Willett 2012). 4 Otro componente en la estructura del FeLV es el Antígeno de Membrana Celular Asociado al Oncornavirus Felino (FOCMA) que está presente en la membrana de algunas células infectadas, considerándose relevante ya que los gatos con un alto título de anticuerpos anti FOCMA, son resistentes al desarrollo de ciertas enfermedades neoplásicas (leucemia y linfomas), pero no neutralizan el virus (Azocar 2008, Berríos 2011). Las transmisión del virus es principalmente por vía horizontal a través de la saliva (lamidos entre gatos o compartir comederos y bebederos), pero también existen otras formas de contagio tales como secreciones nasales, lágrimas, heces, orina, leche, semen, fluidos vaginales y placenta (Palmero 2010, Berríos 2011). Si bien la infección suele ocurrir por vía oral, las heridas por mordeduras pueden inocular el virus directamente; también puede haber transmisión por medio de transfusiones de sangre (Sparkes y col 1995). Se considera además que el FeLV puede ser ingerido por la pulga del gato (Ctenocephalides felis) y excretarse con sus heces o durante la picadura, pero aún no existe evidencia que este tipo de transmisión tenga importancia in vivo (Palmero 2010). El virus penetra a través de la mucosa nasal, oral y respiratoria. Días después pasa a la sangre y médula ósea, luego se disemina por todo el organismo. La fase aguda de la infección es asintomática o presenta una sintomatología inespecífica. La mayoría de los gatos infectados produce una adecuada respuesta inmune que logra eliminar el virus; sin embargo, una pequeña proporción no lo hace, quedando infectados en forma persistente. Otros quedan infectados en forma latente en la médula ósea y los ganglios linfáticos. Los virus latentes pueden ser reactivados cuando el gato se le aplica corticosteroides en dosis inmunosupresivas. Los gatos con viremia transitoria eliminan paulatinamente el virus entre 6 y 30 meses después de la infección. La susceptibilidad de los gatos disminuye con la edad, siendo los más susceptibles los gatos recién nacidos y esta susceptibilidad decrece aproximadamente a los 4 meses de edad. (Berríos 2011). El período de incubación entre la infección y la aparición del virus en la sangre es de aproximadamente dos semanas luego de la inoculación experimental del virus en la orofaringe. En condiciones naturales el período de incubación es entre 4 a 30 semanas (Palmero 2010, Berríos 2011). Las manifestaciones clínicas de la enfermedad se atribuyen a los efectos oncogénicos, citopáticos e inmunosupresores del virus. Por ejemplo, las neoplasias pueden ser linfoides o mieloides; los efectos citopáticos y degenerativos ocurren sobre distintos tipos de células e incluyen las de la médula ósea, linfocitos, células fetales y placentarias; los efectos inmunosupresores inducen una inmunodeficiencia severa que hace al paciente susceptible a una amplia variedad de infecciones oportunistas y además puede inducir la aparición de enfermedades inmunomediadas (Azocar 2008, Palmero 2010). El FeLV presenta distribución mundial, pero la prevalencia difiere entre países con rangos bastantes amplios, por ejemplo, se ha calculado en 2,0% en Estados Unidos (Hartmann, 2012), 6,2% en São Paulo, Brasil (Jorge y col, 2011), 12,2% en Malasia peninsular (Bande y col 2012) y 18% en Italia (Lee y col 2002). En Chile, Correa y col (1989), realizaron un estudio serológico en 39 gatos, de los cuales 28,2% eran positivos. Montero (2003) en Chillán, de una muestra de 100 gatos, obtuvo un 39,0% de resultados positivos. Cifuentes (2003), realizó una investigación en 34 5 comunas de Santiago y encontró una prevalencia de 20%. Otra investigación en Santiago por Muñoz (2005), de un total de 352 muestras determinó un 19,9% de reaccionantes serológicos al FeLV. Azocar (2008) en Valdivia, determinó una prevalencia de 13,7% al FeLV. Los estudios realizados en sectores rurales son escasos, por lo cual no se cuenta con datos sobre factores de riesgo o demografía de los gatos. Cataldo (2010), aporta algunos datos demográficos sobre el sector rural de Valdivia. Esto hace que realizar una investigación en las zonas urbanas y rurales de la novena región sea importante, debido a la escasa información que se maneja sobre los gatos en las zonas rurales, como también sus cuidados y manejos médico veterinarios, ya que con el tiempo, el gato ha tomado un rol más importante como mascota. 3.1. HIPÓTESIS Existe diferencia en la seroprevalencia con el virus de leucemia felina entre gatos de zonas urbanas y rurales, lo cual se explicaría por factores demográficos y de manejo de los animales. 3.2. OBJETIVOS 3.2.1. Objetivo general Determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo a leucemia felina en gatos domésticos en tres ciudades y zonas rurales aledañas a estas de la novena región. 3.2.2. Objetivos específicos Caracterizar la población felina con respecto a sus hábitos, cuidados y atenciones veterinarias. Determinar la seroprevalencia por infección al virus de leucemia felina en las zonas urbana y rural de las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea. Realizar un análisis descriptivo de los factores de riesgos asociados a la infección con el virus de la leucemia felina. 6 4. MATERIAL Y MÉTODOS 4.1. MATERIAL Se utilizó una encuesta que consta de una serie de preguntas referentes a las condiciones de tenencia de gatos, características de éstos, hábitos y comportamiento, aspectos reproductivos, vacunación y antecedentes de enfermedades (anexo 1). Toda la información obtenida fue tabulada en una planilla del programa computacional Microsoft® Excel 2010. Para la obtención de las muestras de sangre se ocuparon jeringas estériles de 3 ml con aguja 21G, algodón, tubos Vacutainer de 6 ml sin conservante, cooler con pack de frio, alcohol 70%, centrífuga, tubos Eppendorf, bozal, pipetas plásticas desechables, ketamina, medetomidina y pesa. Para la identificación de los animales seropositivos se ocupó un kit de identificación ELISA para FeLV (ViraCHEK®/FeLV Lab Pack, Synbiotics Corporation, USA). 4.2. MÉTODOS 4.2.1. Área de estudio Se realizó un estudio de tipo transversal, el cual abarcó tres zonas, la primera zona incluyó la ciudad de Angol (37° 48´ S, 72° 43´ O), la segunda zona desde la ciudad de Curacautín (38° 25′ S, 71° 52′ O) hasta el Parque Nacional Conguillío (38° 30’ S, 71° 30’ O) y la tercera zona, incluyó la ciudad de Gorbea (39° 6′ S, 72° 40′ O). Los estudios se realizaron tanto en zonas urbanas como rurales, de la región de la Araucanía, Chile. El clima de esta región se caracteriza por ser templado cálido lluvioso con influencia mediterránea, presentando temperaturas medias que fluctúan entre 17,3º C en verano y 5,7º C en invierno, con una media anual de alrededor de 11º C. Las precipitaciones se presentan durante todo el año con promedios anuales de 1.000 mm aproximadamente, y tiene una altura de 524 metros sobre el nivel del mar (INE 2007, 2010). La población objetivo para el estudio fueron los gatos domésticos (Felis silvestris catus). Los criterios elegidos para la inclusión de cada gato dentro del estudio fueron que tuviera propietario y más de 3 meses de edad. Se entiende como zonas urbanas aquellas que poseen concentraciones de viviendas con más de 2.000 habitantes o que fluctúen entre 1.001 y 2.000, además de tener el 50% o más de su población económicamente activa dedicada a actividades secundarias y/o terciarias. Las zonas rurales se han definido como asentamiento humano, concentrado o disperso, cuya población no supera los 1.000 habitantes o entre 1.001 y 2.000 en caso que la población económicamente activa dedicada a las actividades secundarias y/o terciarias sea inferior al 50% (INE 1992). 7 4.2.2. Diseño del estudio Con el fin de seleccionar al azar el número de viviendas a muestrear, se realizó un muestreo aleatorio estratificado por unidades vecinales (UV: áreas geográficamente definidas con características socioeconómicas relativamente homogéneas), como ha sido utilizado en estudios previos (Acosta-Jamett 2009). La población urbana de las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea son de 48.996, 16.970 y 15.222 personas respectivamente (INE 2002). Tomando en cuenta el párrafo anterior y dado que en estudios anteriores se calculó que había 1 gato cada 8 personas, se estimó que en las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea, podría haber 6.124, 2.121 y 1.902 gatos respectivamente. Con estos antecedentes, se calculó el tamaño de la muestra utilizando el programa WinEpiscope®, con una precisión deseada absoluta de 5% y con intervalos de confianza del 90%, dando como resultado que deberíamos muestrear 169 gatos en Angol, 59 en Curacautín y 52 en Gorbea. Se proyectó que habría cada 3 casas 1 gato, por lo cual se estimó que se encuestarían 400 casas en cada ciudad, esto debido a que este estudio está inmerso en un proyecto mayor en donde está considerado dentro de las encuestas además de gatos, perros y otras mascotas, como también animales silvestres. El tamaño de la muestra en la ciudad de Angol fue de 400 viviendas, de las cuales 309 hogares participaron del proyecto. En la ciudad de Curacautín fue de 351 viviendas, de las cuales, 215 hogares participaron del proyecto y en la ciudad de Gorbea fue de 300 viviendas, de las cuales el 100% de los hogares participaron del proyecto. Se analizó la zona rural de Angol, Curacautín y Gorbea y se procedió a evaluar todas las casas que fueron encontradas. Dando un tamaño muestral de 135 viviendas para Angol, 145 viviendas para Curacautín y 57 para Gorbea. Solo 1 casa en Gorbea no participó en el proyecto. Dentro de las personas que participaron podemos destacar dos categorías: las que poseían mascotas y las que no. A las personas que no poseían mascotas se les preguntó el número de personas que viven en la casa para realizar los análisis estadísticos. 8 Figura 1. Distribución geográfica de las 3 localidades en la novena región, Chile. 4.2.3. Encuesta epidemiológica y obtención de la muestra Una vez seleccionadas las viviendas se procedió a la visita de éstas, donde se realizó la misma encuesta epidemiológica en la zona urbana como rural. A través de esta se obtuvo información para evaluar los siguientes factores de riesgo individuales: localidad (urbano o rural), edad (se determinó a través de los propietarios, 2 años o menos y más de 2 años), sexo (macho/hembra), origen de cada animal (nacido en casa o no), función (solo para cazar/mascota), permiso para vagar libremente (si/no), esterilizado (si/no), hábitos de caza (si/no), contacto de la mascota con la basura domiciliaria (si/no), vacunas (si/no), desparasitación (si/no), visita al médico veterinario (si/no) y los siguientes factores de riesgo grupales: cantidad de gatos por hogar (1 o más de un gato por casa), presencia de gatos sin dueño (si/no), presencia de roedores en la vivienda (si/no). Tanto en la zona rural como en la urbana, se marcó mediante GPS cada hogar encuestado y muestreado, dejando esto registrado para su posterior traspaso a coordenadas UTM y de esta manera poder elaborar un mapa que muestre la seropositividad a FeLV en las distintas áreas. En aquellas viviendas que tuvieran gatos mayores a 3 meses de edad, se procedió a la obtención de muestra de sangre, contando con la autorización del propietario, por punción de la vena cefálica con previa limpieza y desinfección de la zona. Los gatos seleccionados fueron inmovilizados por sujeción manual o en casos extraordinarios por anestesia general, usando medetomidina (50 microgramos por kilo de peso vivo) combinada con ketamina (10 miligramos por kilo de peso vivo) inyectada por vía intramuscular. Se recolectó un total de 195 muestras de sangre (1-2 ml). La sangre extraída fue depositada en dos tipos de tubos vacutainer, con anticoagulante (EDTA) y sin anticoagulante, para luego ser centrifugados (3.000 RPM). Una vez centrifugada la sangre, se separó el suero para conservarse 9 congelado en tubos Eppendorf a -18º C en congeladores eléctricos, para después proceder con los análisis de laboratorio. 4.2.4. Análisis de laboratorio El análisis de las muestras sanguíneas se realizó en el Laboratorio de Virología Veterinaria de la Universidad Austral de Chile, mediante el uso de una Prueba de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). Para este estudio se utilizó un kit comercial (ViraCHEK®/FeLV). Este kit ha demostrado tener una sensibilidad del 98,7%, una especificidad del 95,8%, un valor predictivo positivo del 99,4% y un valor predictivo negativo del 92,0%. El análisis de las muestras fue realizado siguiendo el procedimiento establecido por el fabricante, descrito en detalle en el Anexo 2. 4.2.5. Análisis estadístico Una vez obtenida las respuestas de la encuesta epidemiológica, se ordenaron en una planilla computacional del programa Microsoft Excel 2010®, con lo cual se generó una base de datos, la que sirvió para desarrollar el estudio demográfico. Para obtener la prevalencia se calculó según la proporción de las muestras positivas del total de las muestras analizadas y multiplicado por 100. Para determinar los factores de riesgos se realizaron pruebas de chi-cuadrado para comparar las frecuencias de animales seropositivos entre los factores analizados y obtenidos de la encuesta como factores univariados, para esto se utilizó el programa estadístico EpiInfo™ 7 (7.1.0.6). Se utilizó un nivel de significancia de α ≤ 0,1. Las variables que dieron un p<0,25 se retuvieron para la realización de una regresión logística multivariada, la cual se realizó utilizando el software Stata 11.1. En los modelos se utilizaron las siguientes variables predictoras: localidad (urbano o rural), cantidad de gatos por hogar, edad, sexo, origen de cada animal, función, si se permite vagar libremente, si está esterilizado, hábitos de caza, presencia de gatos sin dueño, si la mascota tiene contacto con la basura domiciliaria, presencia de roedores en la vivienda, visitas al médico veterinario y vacunas. Para todos los cálculos se utilizó un nivel de confianza de un 90%. 10 5. RESULTADOS 5.1. DEMOGRAFÍA Los hogares visitados fueron 1.388, pero sólo se logró realizar la entrevista en 1.160 hogares. De estos, 824 correspondieron a la zona urbana y 336 a la zona rural, obteniendo un porcentaje de participación de un 78,4% y 99,7% respectivamente (Cuadro 1). Cuadro 1: Cantidad de hogares, personas y gatos participantes en la zonas urbana y rural de las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea, Chile. Localidad Angol Urbano Rural Curacautín Urbano Rural Gorbea Urbano Rural Total N° Hogares visitados N° Hogares entrevistados (% participación) N° Personas N° Gatos Rel. P:G* Rel. G:V** 400 135 309 (77%) 135 (100%) 1135 451 161 81 7,05 5,57 0,52 0,60 351 145 215 (61%) 145 (100%) 664 431 81 210 8,20 2,05 0,38 1,45 300 57 300 (100%) 56 (98%) 618 159 162 98 3,82 1,62 0,54 1,75 1388 1160 (84%) 3458 793 4,36 0,68 * Relación persona: gato ** Relación gato: vivienda Se observa en el Cuadro 1, que la relación entre el número de habitantes de los hogares entrevistados con el número de gatos varía entre 3,82 y 8,20 personas por gato en la zona urbana y entre 1,62 y 5,57 en la zona rural. Respecto a la relación de hogares y gatos, se aprecia una relación entre 0,38 y 0,54 gatos por vivienda en la zona urbana y entre 0,6 y 1,75 en la zona rural. En el 73% de las viviendas de la zona urbana y el 54% de las viviendas de la zona rural no se encontraron gatos. En un 16% en la zona urbana y en un 18% en la zona rural había un gato por 11 vivienda. En un 11% en la zona urbana y en un 28% en la zona rural se encontró más de 2 gatos por vivienda (Cuadro 2). Cuadro 2: Cantidad de viviendas sin gatos o con 1 o más gatos, en la zonas urbana y rural de las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea, Chile. Angol Urbano Rural N % N % Cantidad Ninguno Sólo 1 2 o más 229 44 36 74 14 12 Total 309 100 101 14 20 Curacautín Urbano Rural N % N % 75 10 15 161 36 18 135 100 75 17 8 215 100 59 33 53 Gorbea Urbano Rural N % N % 41 23 36 214 53 33 145 100 71 18 11 20 14 22 300 100 36 25 39 56 100 Dentro del total de hogares entrevistados, se registró un total de 793 gatos, de los cuales 404 correspondieron a la zona urbana y 389 a la rural. De éstos, solo se pudo recoger la información individualizada de 380 gatos en la zona urbana (94,29%) y de 263 gatos en la zona rural (67,61%). 70% 60% 50% 40% 30% más de 2 años 20% 2 años o menos 10% Urbano Angol Rural Urbano Rural Curacautín Urbano Hembra Macho Hembra Macho Hembra Macho Hembra Macho Hembra Macho Hembra Macho 0% Rural Gorbea Gráfico 1: Distribución, en porcentaje, de gatos domésticos por edad y sexo de las zonas urbana y rural de las ciudades de Angol, Curacautín y Gorbea, Chile. En el gráfico 1, se puede apreciar que la edad de los gatos tanto de la zona urbana como rural, el mayor porcentaje se encontró en el rango de 2 años o menos tanto en machos como hembras. 12 De los datos de las encuestas (anexo 3), se puede observar que la población felina está constituida en la zona urbana por un 46% de machos y un 54% de hembras, obteniéndose una relación macho: hembra de 0,86:1. Por otra parte, se puede apreciar que la población felina rural está constituida por un 58% de machos y un 42% de hembras, lo cual dio una relación macho: hembra de 1,4:1 (Anexo 4). 5.2. ANÁLISIS SEROLÓGICO Del total de gatos individualizados, solamente se pudo extraer muestras de sangre de 125 y 70 gatos de las zonas urbana y rural respectivamente (Cuadro 3). Cuadro 3: Porcentaje de muestras de suero obtenidas de gatos de la zonas urbana y rural de Angol, Curacautín y Gorbea, Chile. Localidad Angol Urbano Rural Curacautín Urbano Rural Gorbea Urbano Rural Total N° Gatos N° Sueros obtenidos % Muestras 161 81 47 9 29 11 81 210 46 46 57 22 162 98 32 15 20 15 793 195 25 Cuadro 4: Seroprevalencia (%) a FeLV de la zonas urbana y rural de Angol, Curacautín y Gorbea, Chile. Angol Urbano Rural * ** + % +* %** Curacautín Urbano Rural * ** + % +* %** Gorbea Urbano Rural * ** + % +* %** 10 13 6 21 2 22 * Muestras positivas ** Seroprevalencia a FeLV 28 17 37 19 7 47 13 De un total de 195 muestras de felinos provenientes tanto de la zona urbana como rural se obtuvo una seroprevalencia a FeLV de un 23% en la zona urbana y de un 37% en la zona rural (Cuadro 4). 100% 80% 60% más de 2 años 40% 2 años o menos 20% 0% Urbano Rural* Urbano Angol Rural Curacautín Urbano Rural Gorbea Gráfico 2: Seroprevalencia obtenida mediante prueba de ELISA para FeLV, según edad y zona (urbana y rural) de las zonas Angol, Curacautín y Gorbea. * No se pudo obtener los datos que relacionan edad con zona En el gráfico 2 se puede apreciar que en la distribución según rango de edad, a nivel urbano y rural se registró la mayor seroprevalencia en el grupo de felinos de la categoría más de 2 años en las localidades de Angol y Curacautín, mientras que en la localidad de Gorbea, la mayor seroprevalencia se obtiene en el rango de 2 años o menos (anexo 5 y 6). 5.3. FACTORES DE RIESGO Al realizar pruebas de chi-cuadrado con cada uno de los probables factores de riesgo estudiados se encontró que la seropositividad a FeLV se relacionaba con la localidad, la edad, contacto con la basura domiciliaria y si presenta o no vacunas, siendo estos los que pasaron a un análisis multivariado. Con relación a los demás factores no se encontraron diferencias significativas (ver anexo 7). Al incluir dentro de la modelación mediante regresión logística múltiple las variables seleccionadas previamente, se seleccionaron dos variables con riesgo estadísticamente significativo que pueden explicar la presencia de seropositividad a FeLV en gatos domésticos. Los animales que provienen de zonas urbanas, tienen 2,6 veces menos posibilidad de contagiarse de FeLV en comparación con los animales que provienen de la zona rural. Con respecto a la variable edad, se observó que para el rango de 2 años o menos, la posibilidad de encontrar gatos seroprevalentes o infectados con el FeLV, son 2,9 veces menor que para el rango de más de 2 años (Cuadro 5). 14 Cuadro 5: Modelo multivariado de regresión logística de los factores asociados a la seropositividad de FeLV en las áreas de estudio. Factor de Riesgo OR IC 90% p 1,00 2,61 1,43 – 4,74 <0,01 1,00 2,98 1,64 – 5,40 <0,01 Lugar Urbano Rural Edad ≤ 24 m > 24 m 15 6. DISCUSIÓN 6.1. DEMOGRAFÍA Mediante el presente estudio se expusieron diferentes características demográficas de la población de gatos domésticos de las zonas de Angol, Curacautín y Gorbea, tanto en el área urbana como rural. Siendo estos datos comparados con algunos estudios previos sobre características demográficas de felinos, sus manejos y seroprevalencia al virus de leucemia felina. Dentro del total de hogares entrevistados, sólo se pudo recoger la información individualizada de 404 gatos en la zona urbana y de 389 en la zona rural. Se pudo extraer muestras de sangre de 125 gatos de la zona urbana (31%) y de 70 de la zona rural (18%). Las razones por las cuales no se les pudo extraer muestras fueron: dificultades durante el manejo de los animales, disponibilidad limitada de tiempo por vivienda para la realización de la encuesta y toma de muestra, disposición de las personas en entregar la información requerida (en muchas ocasiones estaban apurados o no manejaban la información de cada gato) y la ausencia de éstos a la hora de la entrevista. Del total de viviendas encuestadas (n = 1.160) en las ciudades en estudio, en la zona urbana encontramos que el 27% poseía gatos, lo cual es similar a lo encontrado en Chillán, en donde un 25,5% de las viviendas tenía gatos (Rossi 2006). En Viña del Mar, se observó un 23% (Morales y col 2006), en Valdivia se observó un 30,8% (Zúñiga 2007), lo cual es menor a la cantidad observada en la ciudad de Entre Lagos que tiene 37% de casas con gatos. En la zona rural, el 46% de las viviendas encuestadas poseía gatos, este mayor porcentaje de felinos en la zona rural se puede atribuir principalmente al uso que se les da como controladores de roedores dados sus hábitos de caza (Haro 2003). La cantidad de gatos por vivienda fue de 0,49: 1 en la zona urbana, siendo este valor semejante al registrado en otro estudio realizado en las ciudad de Chillán de 0,42: 1 (Rossi 2006) y en Valdivia y Antofagasta de 0,5: 1 (Rojas 2005, Zúñiga 2007) pero difiere de otro trabajo efectuado en la localidad de Los Muermos en donde fue de 0,3: 1 (Andrade 2003). La relación gato: vivienda obtenida en la zona rural fue de 1,16: 1; dato que no pudo ser comparado con otras localidades por falta de estudios demográficos. En la zona urbana se obtuvo una relación persona: gato de 6: 1, cercano a lo descrito en Valdivia (Zúñiga 2007) quien registró un 8,1: 1, pero bastante alejado de lo encontrado en la ciudad de Los Lagos en donde la razón fue de 10: 1 (Haro 2003). Por su parte, en la ciudad de Chillán, se registró una relación de 9,3: 1 (Rossi 2006). En la zona rural se obtuvo una razón persona: gato de 2,7: 1, valor superior al descrito por Cataldo (2010), en un trabajo realizado en zonas rurales de Valdivia, el cual presentó una relación más estrecha de 1,64: 1. Este parámetro es importante en la Salud Pública, ya que está directamente relacionado con la transmisión de zoonosis, siendo de mayor riesgo cuando los valores de la relación son menores. La razón más estrecha registrada en la zona rural se puede atribuir a que los gatos son mantenidos como controladores de roedores más que presentar una función de mascota o compañía (Guajardo 2003, Rossi 2006). Cabe 16 considerar que los controles de natalidad y las visitas al médico veterinario son casi nulos en las zonas rurales (Cataldo 2010). Se puede apreciar que la edad de los gatos tanto de la zona urbana como rural, el mayor porcentaje se encontró en el rango de 2 años o menos, tanto en machos cómo en hembras, alcanzando un 62% (n= 362) en la zona urbana y un 69% (n= 243) en la zona rural, lo cual podría ser una las causas por la que se encontró una seroprevalencia alta, ya que es una edad en la que el gato esta mas susceptible a contagiarse con el FeLV. En un estudio realizado en Chillán, el mayor porcentaje de edad se encontró en un rango entre 1 a 5 años, alcanzando un 47,6%, pero también se encontró que un alto porcentaje (44,1%) de los felinos era menor de 1 año de edad (Rossi 2006). En otro estudio realizado en Santa Cruz, VI Región del Libertador General Bernardo O'Higgins por Guajardo (2003), se encontró un 57% de gatos entre 0 y 2 años. El promedio de edad de los gatos de la zona urbana es de 26 meses, mientras que para la zona rural el promedio es de 27 meses. Esto es similar a la edad promedio de 32 meses obtenida en la ciudad de Santa Cruz (Guajardo 2003) y en Viña del Mar (Morales y col 2006). El factor edad es considerado importante, porque a mayor edad, es menor la posibilidad de que un gato se contagie del FeLV (Palmero 2010). La relación macho: hembra obtenida en la zona urbana fue de 0,86: 1, comparable con el 0,87: 1 registrado por Cataldo (2010) en Valdivia, pero muy inferior a lo encontrado en Santa Cruz con una relación macho: hembra de 2,07: 1 (Guajardo 2003). En la zona rural fue de 1,4: 1, mayor a los resultados obtenidos en las zonas rurales de Valdivia que fueron de 1: 1 (Cataldo 2010). La relación más estrecha en la zona urbana se podría asociar a que las personas no tienen complicaciones en tener hembras por disponer de mayores medios que permiten el control de la natalidad y los problemas asociados a las hembras (Rossi 2006). En la zona rural, la mayor proporción de machos se puede asociar a una mayor preferencia de estos debido a la escasa oportunidad de acceso de la población rural a programas de control de natalidad para las hembras, lo cual llevaría a tener machos en las casas y no tener hembras que constantemente estén preñadas (Cataldo 2010). Del total de gatos de la zona urbana, el 57% visita al médico veterinario, mientras que en la zona rural solo el 12% visita o tiene atención médico veterinaria. Esto contrasta con el estudio en Santa Cruz en donde el 94,92% de la población felina nunca han recibido atención médico veterinaria (Guajardo 2003), mientras que el estudio realizado por Cataldo (2010) en las localidades rurales de Valdivia, arrojo que muy pocos han tenido atención médico veterinaria, lo cual es similar a lo encontrado en el presente estudio. Por otra parte, en la ciudad de Chillán el 30,9% de la población felina recibe atención médico veterinaria. Se pudo observar que el 66% de los gatos de la zona urbana tenían vacunas (triple felina y antirrábica), contrastando con la zona rural, en donde el 99% de los gatos no poseía vacunas. Los valores obtenidos en la zona urbana son muy superiores a los obtenidos en la ciudad de Chillán, en donde el 27,4% de los gatos poseían vacunas (Rossi 2006). Esto tiene importancia, ya que se ha visto en estudios anteriores que cuando los dueños mantienen una tenencia responsable de su mascota y los llevan constantemente al Médico Veterinario, las posibilidades de contraer enfermedades virales, disminuye (Azocar 2008). 17 Al presentar los animales de compañía un considerable valor para sus propietarios, uno de los objetivos de los Médicos Veterinarios dedicados a la epidemiología debiera ser prolongar la vida y salud de las mascotas, para esto es necesario, llevar a cabo investigaciones que mejoren las técnicas preventivas como vacunaciones contra FeLV y desparasitaciones, las cuales en la actualidad se ven obstaculizadas por la falta de datos básicos sobre demografía y composición de las poblaciones de los animales de compañía. Por lo anteriormente expuesto, se advierte la importancia que presenta para la Salud Pública y la Epidemiología Veterinaria, los registros demográficos de poblaciones felinas, tanto actuales como sus proyecciones (Rossi 2006). 6.2. SEROPREVALENCIA Y FACTORES DE RIESGO A LEUCEMIA FELINA El estudio tuvo como finalidad caracterizar la seroprevalencia del virus de leucemia felina, permitiendo identificar los animales que presentan el antígeno p27, pero no entrega información sobre cuantos animales presentarán la enfermedad clínica, ya que sólo un pequeño porcentaje de los gatos infectados manifestará signos clínicos (Berríos 2011). En este estudio se obtuvo una seroprevalencia de un 23% en la zona urbana y de un 37% en la zona rural, siendo esta diferencia estadísticamente significativa. La seroprevalencia de ambas zonas resultó relativamente alta, esto se fundamenta al comparar con estudio realizados en otros países, como por ejemplo, São Paulo, Brasil 6,2% (Jorge y col, 2011). Al comparar la seroprevalencia obtenida en este estudio con otras investigaciones realizadas en el país, como por ejemplo, Valdivia (Price, 1998) en donde encontramos un 32,9% de seroprevalencia o Montero en Chillán (2003) con 39,0% de seroprevalencia, podemos decir que los valores obtenidos se asemejan a las seroprevalencias encontradas tanto en la zona urbana como rural. Sin embargo, en otro estudio en Valdivia por Azocar (2008) obtuvo una prevalencia de 13,7%, valor muy inferior al encontrado en este estudio, pero se debe tomar en cuenta que un gran mayoría de los gatos muestreados asistían a alguna clínica veterinaria y en el estudio realizado la gran mayoría no tenía atención médico veterinaria. La seroprevalencia obtenida en gatos que se encuentran en un rango de edad de 2 años o menos, es de un 24%, mientras que para el rango de gatos mayores a 2 años, es de un 34%; siendo estas diferencias estadísticamente significativas, lo cual concuerda con un estudio realizado en la península de Malasia (Bande y col 2012) en donde encontró que la seroprevalencia aumenta mientras aumenta la edad del animal. Otros autores postulan que la infección es más frecuente en gatos de 1 a 6 años, con una tasa máxima de infección documentada en gatos menores a 2 años (Couto 2010). En un estudio realizado en la ciudad de Concepción por Troncoso y col (2010) dio como resultado que la enfermedad tenía una mayor prevalencia en individuos de entre 1 a 6 años de edad, con un promedio de 3 años. Estos valores se pueden deber a un factor común, pues los primeros 3 años de la vida los gatos mantienen relaciones intra-específicas más estrechas, lo que favorece la transmisión del virus. Tomando la variable sexo, se registró que las hembras tienen una seroprevalencia de 30% y los machos de 35%. Si analizamos la variable esterilizado, los gatos esterilizados tienen una seroprevalencia de 21% versus una seroprevalencia de 36% de los gatos sin esterilizar. Ambas variables no tienen diferencias estadísticamente significativas, lo cual coincide con el estudio realizado por Troncoso y col (2010), en donde no se encontró diferencia significativa entre las 18 variables sexo y esterilizado a pesar que la mayoría de los reportes epidemiológicos revelan que los gatos machos y callejeros presentan tres veces mayor riesgo de infectarse por FeLV. En cuanto a los factores de riesgo asociados a seroprevalencia de FeLV, destacan localidad, edad, contacto con basura domiciliaria y vacunas, pero el modelo de regresión logística utilizado expresa mayoritariamente los dos primeros y serían estos los que explicarían las diferencias encontradas. Los animales que provienen de zonas rurales, tienen 2,6 veces más posibilidades de contagiarse del FeLV en comparación con los animales que provienen de la zona rural. Con respecto al factor rural, este tiene relación a la mayor cantidad de gatos en las zonas campestres, andan más sueltos incrementando el riesgo de peleas y diseminación de enfermedades, lo cual aumenta las posibilidades de contagio con el FeLV (Cataldo 2010). Con respecto a la variable edad, se observó que para el rango de 2 años o más, la posibilidad de contagiarse es 2,9 veces mayor que para el rango de 2 años o menos. Esto es similar a lo encontrado en la península de Malasia (Bande y col 2012), en donde se encontró que la posibilidad de contagiarse un animal joven es 2 veces menor que un animal adulto. En estudios realizados en São Paulo (Jorge y col, 2011), se encontró que la posibilidad de que un gato menor a 3 años presente seroprevalencia a FeLV es 3 veces menor que gatos de mayor rango etario. Por otro lado, Montero (2003) en Chillán, no encontró diferencias estadísticas significativas en cuanto al sexo y edad. El factor edad estaría regido porque el gato a mayor edad va teniendo un contacto más estrecho con otros gatos, aumentan las peleas entre ellos, como también el acicalamiento, lo que aumentaría la posibilidades de contagio por FeLV (Berríos 2011). 6.3. CONCLUSIONES En las zonas rurales de las zonas de Angol, Curacautín y Gorbea, existen un alto número de gatos con respecto a la población humana, esto se ve reflejado en una relación persona: gato muy estrecha. Se puede observar que la población felina está constituida mayoritariamente por hembras en la zona urbana, mientras que en la zona rural está constituida mayoritariamente por machos. El virus de la leucemia felina está presente tanto en zonas urbanas como rurales, teniendo una mayor seroprevalencia en las zonas rurales, en donde esta diferencia es estadísticamente significativa. La seroprevalencia en los gatos de 2 años o menos fue menor con respecto a los gatos mayores a 2 años. En la zona rural es donde se detectó más gatos sin atención medico veterinaria (12%). 19 7. REFERENCIAS Acosta-Jamett G. 2009. The role of domestic dogs in diseases of significance to human and wildlife health in central Chile. Doctoral Thesis, Royal School of Veterinary Studies, University of Edinburgh, Edinburgh, UK. Andrade R. 2003. Características demográficas de la población canina y recuento de felinos en la ciudad de los Muermos, décima región, Chile. Memoria de título, Escuela de Medicina Veterinaria, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile. Azocar L. 2008. Estudio de prevalencia de las infecciones por los Virus de la Leucemia e Inmunodeficiencia Felina en la ciudad de Valdivia. Tesis de magister, Escuela de Medicina Veterinaria, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile. 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Nombre 1 Cuántos perros y/o gatos tiene____________________________ Cuántos son cachorros (< 3 meses) ________________________ Detalles de los animales: Especie Sexo (M/H) Edad Raza (S/N) Origen1 Función2 Sale 3 Esterilizado (S/N) Caza3 Contacto R: regalado, C: comprado, E: encontrado, N: nacido en casa C: proteger casa, G: proteger ganado, M: mascota, Cz: caza 3 N: nunca, S: siempre, AV: algunas veces. 4 Contacto con animales de su especie: N: nunca, S: siempre, AV: algunas veces. Si es gato llega con heridas: si, no 2 4 23 4. ¿Ve perros o gatos vagabundos por el sector? (Marque con una X) a) Siempre b) Algunas veces c) Nunca Perros ______ ______ ______ Gatos _____ _____ _____ 5. ¿Sus animales tienen contacto con basurales? (marque con una X) a) Siempre b) Algunas veces c) Nunca Perros ______ ______ ______ Gatos _____ _____ _____ 6. ¿Hay presencia de roedores en la casa? a) Siempre b) Algunas veces c) Nunca 7. Si tiene gatos ¿tiene arena para que defeque y orine? Si/No. Si respuesta positiva llenar pregunta 8. 8. ¿Con qué frecuencia limpia la arena de su gato? a) Todos los días b) 3 veces a la semana c) 1 vez a la semana 9. Sus animales han sido vistos alguna vez por el veterinario? Si/No, Si respuesta es positiva contestar pasar a 10. 10. ¿Frecuencia de visita del veterinario a sus mascota(s) en los últimos 12 meses?__________ 24 11. Vacunaciones y desparasitaciones recibidas por su(s) mascota(s) Nombre Vacc (S/N) Tipo de vacuna(s)5 Fecha de vacunación(Mes/año) Revac (S/N) Última desparasitación ANEXO 2 PROTOCOLO DE USO KIT ViraCHEK®/FeLV Para realizar la prueba primero se tuvieron que descongelar las muestras a temperatura ambiente, luego se sacaron los pocillos de plásticos para las muestras, sumando 2 pocillos más para los controles. Se comienza agregando una gota de control positivo al pocillo uno, luego una gota de control negativo al pocillo dos y posteriormente 0,05 ml de la muestra en los restantes pocillos. A continuación se agrega una gota del reactivo uno, se homogeniza por 15 segundos y luego se espera 5 minutos con la mezcla. Posteriormente se descarta en una toalla de papel la mezcla que sobra y se procede a lavar cada pocillo con agua bidestilada. Se continúa el proceso agregando una gota del reactivo dos, se mezcla por 15 segundos y se vuelve a esperar 5 minutos para obtener resultados. Los resultados obtenidos se interpretaron de la siguiente forma: - 5 Cuando el recipiente de plástico cambiaba a cualquier tonalidad de azul, se consideraba la muestra positiva. Cuando el recipiente de plástico se mantenía inalterado y sin color alguno se consideraba la muestra negativa. Rabia (R), Parvo (P), Sextuple (S), Octuple (O), Triple (T) 25 ANEXO 3 DISTRIBUCIÓN DE GATOS DOMÉSTICOS POR EDAD Y SEXO DE LA ZONA URBANA DE LAS CIUDADES DE ANGOL, CURACAUTÍN Y GORBEA, CHILE. Edad (Años) Angol % Hembra % Macho 45 22 67 33 41 38 52 48 67 100 79 100 Macho 2 o menos Más de 2 Total Curacautín % Hembra Gorbea % Hembra % Macho % 18 16 53 47 23 18 56 44 53 13 80 20 46 29 61 39 34 100 41 100 66 100 75 100 ANEXO 4 DISTRIBUCIÓN DE GATOS DOMÉSTICOS POR EDAD Y SEXO DE LA ZONA RURAL DE LAS CIUDADES DE ANGOL, CURACAUTÍN Y GORBEA, CHILE. Edad (Años) Angol % Hembra Macho 2 o menos Más de 2 Total Curacautín % Hembra % Macho 22 11 67 33 12 7 63 37 33 100 19 100 Gorbea % Hembra % Macho % 61 27 69 31 42 18 70 30 15 5 75 25 15 8 65 35 88 100 60 100 20 100 23 100 ANEXO 5 RESULTADOS SEROLÓGICOS OBTENIDOS MEDIANTE PRUEBA DE ELISA PARA LEUCEMIA FELINA, SEGÚN EDAD Y ZONA URBANA DE ANGOL, CURACAUTÍN Y GORBEA. Angol Prevalencia Positivo (%) Curacautín Prevalencia Positivo (%) Gorbea Prevalencia Positivo (%) Edad (años) N 2 o menos Más de 2 28 19 4 6 14 32 23 23 5 8 22 35 22 10 5 1 23 10 Total 47 10 21 46 13 28 32 6 19 N N 26 ANEXO 6 RESULTADOS SEROLÓGICOS OBTENIDOS MEDIANTE PRUEBA DE ELISA PARA LEUCEMIA FELINA, SEGÚN EDAD Y ZONA RURAL DE ANGOL, CURACAUTÍN Y GORBEA. Angol Curacautín Prevalencia N Positivo (%) Gorbea Prevalencia N Positivo (%) S/D S/D 29 17 8 9 28 53 7 7 4 2 57 29 S/D 46 17 37 14 6 43 Edad (años) N Positivo Prevalencia (%) 2 o menos Más de 2 S/D S/D S/D S/D Total S/D S/D S/D: No se pudo obtener los datos. ANEXO 7 PRUEBA DE X2 DE FACTORES ASOCIADOS A POSITIVIDAD A LEUCEMIA FELINA EN LAS MUESTRAS DE SUERO OBTENIDAS EN LA CIUDAD DE ANGOL, CURACAUTÍN Y GORBEA. Factor de Riesgo Muestra de Suero + - X2 Valor de p Localidad Urbano 29 Rural 26 Cantidad de gatos por hogar 96 44 3,65 0,06 1 >1 Edad 21 32 63 70 0,63 0,43 2 años o menos > 2 años Sexo 26 26 83 50 1,89 0,17 Macho Hembra Origen del animal 26 27 71 61 0,18 0,67 Nacido en casa No Nacido en casa Función 9 44 36 97 1,58 0,21 Caza Mascota 22 31 41 92 1,48 0,22 27 ANEXO 7 CONTINUACIÓN PRUEBA DE X2 DE FACTORES ASOCIADOS A POSITIVIDAD A LEUCEMIA FELINA EN LAS MUESTRAS DE SUERO OBTENIDAS EN LA CIUDAD DE ANGOL, CURACAUTÍN Y GORBEA. Factor de Riesgo Muestra de Suero + - X2 Valor de p Vaga libremente Si No Esterilizado 43 9 101 31 0,51 0,47 Si No Hábitos de Caza 6 47 17 115 0,001 0,96 Si 36 No 16 Presencia de gatos sin dueño 90 41 0,01 0,91 Si 28 No 21 Contacto con otros gatos 78 54 0,004 0,95 0,04 0,83 1,97 0,16 Si 38 98 No 14 31 Contacto con la basura domiciliaria Si 7 34 No 41 97 Presencia de roedores en la vivienda Si 20 No 33 Visita a una clínica Veterinaria 57 76 0,23 0,63 Si No 18 35 52 81 0,24 0,63 4 39 21 83 1,84 0,18 Vacunas Si No 28 9. AGRADECIMIENTOS Quiero agradecer a las siguientes personas que hicieron posible la realización de esta memoria de título: A mi madre por estar presente siempre en mi vida, siendo un pilar importantísimo para la conclusión de mis estudios. Al profesor Gerardo Acosta J. por incluirme dentro de su proyecto y acompañarme en todo mi proceso como alumno memorista. A la señorita Marcela Rojas, por todo su apoyo y comprensión en esta última etapa de la carrera. A la señora Viviana Morales, por toda su ayuda prestada y por su calidad de persona. A la señora Cecilia Garrido por su ayuda en la presentación de mi memoria de título. A todos mis amigos que han sido participe de este largo proyecto, por sus aportes, compañía y apoyo en los momentos complicados. También quiero aprovechar de agradecer al proyecto de investigación: fragmentación de los bosques y el riesgo de infección de la enfermedad entre los carnívoros domésticos y salvajes en la interfaz rural en el sur de Chile. Fondecyt de Iniciación a la Investigación 2010. Proyecto N ° 11100303. Ya que financió e hizo posible esta memoria de título.