RECOPILADO POR: EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS NMX-K-402-1973. DETERMINACIÓN DEL ÍNDICE DE PERÓXIDO EN ACEITES ESENCIALES. PEROXIDE INDEX DETERMINATION - IN ESSENTIAL OILS. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS. 1. ALCANCE Esta Norma establece el método para determinar los peróxidos orgánicos en los aceites esenciales. Se describen dos métodos: uno cualitativo y otro cuantitativo, este último debe ser empleado en caso de que el primero sea positivo. 2. DEFINICIÓN. 2.1 Indice de Peróxido: Es la cantidad en microgramos de oxígeno activo, en un gramo de substancia, que nos indica el grado de envejecimiento en los aceites esenciales. 3. MÉTODO CUALITATIVO 3.1 FUNDAMENTO 3.1.1 Este método se basa en la reacción de los peróxidos orgánicos con el ácido vanádico, en medio ácido, produciendo una coloración rosa. 3.2 APARATOS Y EQUIPO • Equipo común de laboratorio 3.3 MATERIALES Y REACTIVOS Los reactivos que a continuación se indican, deben ser grado analítico a menos que se indique otra cosa. Cuando se hable de agua se entiende agua destilada. • • Acido sulfúrico concentrado. Acido vanádico. Preparación del reactivo de Jorissen. En un matraz volumétrico de 100 ml se disuelven 0.4 g de ácido vanádico en 4 ml de ácido sulfúrico. Se lleva a un baño de agua, hasta disolución. Cuando ya se ha disuelto el ácido vanádico, se saca del baño y se le agrega agua hasta el aforo. Este reactivo debe ser de color azul verdoso. 3.4 PROCEDIMIENTO En un tubo de ensayo se coloca 1 ml de aceite, se le añade 1 ml de reactivo de Jorissen y se agita bien. 3.5 INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS De acuerdo con el color al cual vira el reactivo, el resultado se interpreta en la forma siguiente: El color no vira: ausencia de peróxidos. El color vira a rosa: trazas de peróxidos. El color vira a rojo: alto contenido de peróxidos. 4. MÉTODO CUANTITATIVO 4.1 FUNDAMENTO Este método se basa en la determinación yodométrica de los peróxidos orgánicos. 4.2 APARATOS Y EQUIPO • • • • Balanza analítica con sensibilidad de 0.0001 g. Placa eléctrica con regulador de temperatura. Matraz Erlenmeyer de 250 ml con tapón esmerilado. Equipo común de laboratorio. 4.3 MATERIALES Y REACTIVOS Los reactivos que a continuación se expresan deben ser grado analítico, a menos que se indique otra cosa. Cuando se hable de agua se entiende por destilada. • • • • • • • • Fuente de nitrógeno. Papel filtro Whatman No. 4 Acido acético glacial. Cloroformo. Disolución de tiosulfato de sodio 0.01 N. Disolución de ácido acético y cloroformo en la proporción de tres volúmenes de ácido acético glacial, por dos de cloroformo. Disolución saturada de yoduro de potasio recientemente preparada. Se disuelve yoduro de potasio en agua recién hervida y a temperatura ambiente, en cantidad tal que quede un exceso de sólido sin disolver. Disolución indicadora de almidón. Se mezcla aproximadamente 1.0 g de almidón con agua fría hasta formar una pasta, se añade esta mezcla a 100 ml de agua hirviente, se agita enérgicamente y se filtra si es necesario. 4.4 PROCEDIMIENTO En un matraz Erlenmeyer con tapón esmerilado, al que previamente se le ha expulsado el aire con una corriente de nitrógeno, se pesan con exactitud de 2 a 5 gramos de muestra, de acuerdo con los resultados obtenidos en el método cualitativo. En estas condiciones se le agregan: 20 ml de disolución de ácido acético y cloroformo y 1 ml de la disolución saturada de yoduro de potasio. Se tapa, se agita durante un minuto y se deja reposar durante 15 minutos, protegiéndolo de la luz. Se agregan 25 ml de agua destilada, se agita para disolver el yodo liberando en el agua. Se valora con la disolución de tiosulfato de sodio 0.01 N, hasta ligero color amarillo en la fase acuosa. Después de agregar unas gotas de disolución de almidón, se continúa la valoración hasta la desaparición del color azul en la fase acuosa. Se hace una prueba testigo. Se anotan en cada caso los mililitros de disolución de tiosulfato 0.01 N gastado en las valoraciones. El volumen usado en el testigo, no debe exceder en 0.1 ml de tiosulfato. Las determinaciones se efectúan por duplicado cuando menos. 5. CÁLCULOS Y RESULTADOS Dado que 1 ml de tiosulfato de sodio 0.01 N representa 80 microgramos de O2 y que el índice de peróxido corresponde a la cantidad de microgramos de oxígeno activo en un gramo de sustancia, se determina el índice de peróxido de acuerdo con la siguiente fórmula: (A - B) 80 I.P = --------------P En donde: I.P = Indice de peróxido expresado hasta una cifra decimal. A = Cantidad de mililitros de tiosulfato de sodio 0.01 N - utilizada en P gramos de muestra. B = Cantidad de mililitros de tiosulfato de sodio 0.01 N usada en el testigo. P = Gramos de muestra. 80 = Miliequivalente del tiosulfato. 6. PRECISIÓN O REPETIBILIDAD La diferencia en las determinaciones efectuadas por duplicado, no debe ser mayor de 0.3 microgramos, en su defecto se repiten las determinaciones. 7. APÉNDICE 7.1 BIBLIOGRAFÍA Association Official Agricultural Chemists. (AOAC) Edición 1960. Esquema 1o. de Recomendación COPANT 8:2-006 Aceites Esenciales. Determinación de peróxidos orgánicos. 7.2 PARTICIPANTES Firmenich de México. Fritsche Dodge y Olcott de México. Pepsi-Cola, S.A. Unión de Productores de Aceite de Limón.
