Método Cromatografía (Propuesta-FINAL)

[METODOLOGÍA CROMATOGRAFÍA] Suelo, Ciudad y Alimentos
Materiales.
A continuación se presenta la lista de materiales necesarios para las pruebas
cromatográficas, se muestran algunos materiales alternativos que pueden utilizarse.
- Originales
Papel filtro Whatman
Tubos de Ensayo c/tapón
Probetas de 100mL y 50mL
Tamiz
Mortero
Cajas de Petri
Balanza sensible, jeringas, guantes de látex,
botellas de plástico con tapa.
- Alternativos
Papel filtro Whatman
Botellas de plástico c/tapa
Taza medidora de cocina
Colador de cocina
Mortero de cocina
Platos de cocina
papel higiénico o de cocina, caja de cartón,
METODOLOGÍA CROMATOGRAFÍA EN PAPEL
1) Preparación de las Soluciones.
-Hidróxido de Sodio (NaOH 1%)
Para preparar 100 mL de solución se utiliza 1g de NaOH en un recipiente cerrado (botella
c/tapa) y posteriormente se agregan 100 mL de agua destilada (hervida o embotellada) y
se mezclan (agitando) hasta que se disuelva el NaOH completamente.
-Nitrato de Plata (AgNO3 0,5%)
Para preparar 100 mL de solución se utilizan 0,5g de AgNO3 en un recipiente cerrado*
(botella c/tapa) y posteriormente se agregan 100 mL de agua destilada (hervida o
embotellada) y se mezclan (agitando) hasta que se disuelva el AgNO3 completamente.
*Se sugiere que la botella se mantenga protegida de la luz (envuelta en papel opaco), con
la finalidad de mantener las propiedades de la solución.
PRECAUCIONES:
-Aunque las concentraciones que se utilizan para las soluciones son muy bajas, debe
tenerse en cuenta lo siguiente:
 Evitar contacto directo entre la piel, ojos, mucosas y alguna de las sustancias (El
NaOH es muy irritante para la piel; El AgNO3 produce manchas oscuras al
contacto con la piel y superficies). En caso de contacto, lavar con abundante agua.
 Recomendable uso de guantes protectores.
 Para realizar las pruebas, se sugiere hacerlas en un área exclusiva para ello y
despejada (para evitar derrames o accidentes).
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2) Preparación de las Muestras.
Para cada muestra se realiza lo siguiente:
-Pulverizar la muestra con un mortero, posteriormente pasarlo por un tamiz (o colador de
cocina) y pesar 2,5g.
-Colocar esta muestra en un tubo con tapón de rosca de 50mL (botella c/tapa) y agregar
25 mL de la solución de NaOH al 1%. Agitar por un minuto y dejar reposar un minuto más,
repetir una vez más y posteriormente a los 15 minutos; para finalizar, 1 hora más tarde
agitar por 1 minuto y una vez alcanzadas las 4-6 horas, tomar la cantidad necesaria de
solución (sin agitar).
3) Preparación del Papel Filtro.
Para cada papel filtro se realiza lo siguiente (Dependiendo el número de muestras):
-Colocar una marca aproximadamente a 6 cm del centro del círculo de papel filtro y
rotularlo con el número e información de la muestra. Posteriormente, perforar su centro
con un bolígrafo y colocar un pedazo pequeño de papel filtro enrollado en el orificio,
brindando soporte al centro del círculo de papel filtro.
-A continuación, este sistema que acabamos de crear se coloca en cajas Petri, a las
cuales (en pasos anteriores), les fueron adicionadas la solución de AgNO3 al 0,5%*,
esperamos el tiempo suficiente para que la humedad de la solución llegue hasta la marca
(6 cm). Ocurrido esto, se retira el papel filtro de la caja Petri y se coloca envuelto en papel
absorbente en un sitio oscuro, protegido de la luz por aproximadamente 4 horas.
-Una vez transcurrido este tiempo, se procede a vaciar en cajas Petri (platos e cocina) con
ayuda de jeringas, las soluciones de las muestras de suelo previamente preparadas con
NaOH 1% y colocamos cada papel filtro impregnado (de AgNO3) sobre estas soluciones.
Los dejamos reposar hasta que la humedad de las muestras, llegue a la marca del papel
filtro.
-Finalmente, retirar el papel filtro impregnado de muestra de la caja Petri y dejarlo secar al
aire. Interpretar resultados y contrastar con información existente.
*Se recomienda el uso de guantes protectores, pues el AgNO3 mancha al contacto con la
piel y superficies.
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