Tarea11-142R

Tarea No. 11
Se me olvidó comentar que por un error en Breed puse cuadro en vez de campo y en la
cámara de Petroff Hauser campos en vez de cuadros.
01) Método de Breed. De un cultivo de levaduras se obtuvieron los siguientes resultados
Campo 1
Campo 2
Campo 3
Campo 4
Campo 5
18
12
15
09
16
Calcula el resultado de esta muestra por mL, si el valor del diámetro del objetivo es de 100
m y el volumen empleado para es de 10 L
Determinar área del campo
Acampo=3.1416*(50m)2 = 7,824 m2
Caso 1
Se suman los 5 campos y tenemos 70 mo.
Caso 2
Promedio por campo (70/5) = 14 por lo tanto
1 Campo tiene 14 mo
Si son 5 campos tenemos:
A5 campos = (7,824 m2 * 5) = 39,120 m2
Entonces:
39,120 m2 tiene 70 mo
2X108 m2 tiene X
X= (70 mo * 2X108 m2)/ 39,120 m2
X= 357,873.21 mo en 10 L
Por lo tanto:
7,824 m2 tiene 14 mo
2X108 m2 tiene X
X = (14 mo * 2X108 m2)/ 7,824 m2
X= 357,873.21 en 10 L
Por mL
357,873.21 mo en 10 L
Y en 1000 L
Y= (357,873.21 mo * 1000 L) 10 L = 3.578X107 mo/mL
Para un cultivo de cocos Gram positivos se obtuvieron los siguientes resultados
Campo 1
Campo 2
Campo 3
Campo 4
Campo 5
41
86
90
73
51
Calcula el resultado de esta muestra por mL, si el valor del diámetro del objetivo es de 120
m y el volumen empleado para es de 5 L
Determinar área del campo
Acampo=3.1416*(60m)2 = 11,309 m2
Caso 1
Se suman los 5 campos y tenemos 341 mo.
Si son 5 campos tenemos:
A5 campos = (11,309 m2 * 5) = 56,545 m2
Entonces:
56,545 m2 tienen 341 mo
2X108 m2 tienen X
X= (341 mo * 2X108 m2)/56,545 m2
X= 1,206,119.02 mo en 5 L
Caso 2
Promedio por campo (341/5) = 68.2 por lo
tanto
1 Campo tiene 68.2 mo
Por lo tanto:
11,309 m2 tienen 68.2 mo
2X108 m2 tienen X
X = (68.2 mo * 2X108 m2)/ 11,309 m2
X= 1,206,119.02 en 5 L
Por mL
1,206,119.02 mo en 5 L
Y en 1000 L
Y= (1,206,119.02 mo * 1000 L) 5 L = 2.412X108 mo/mL
02) Cámara de Petroff Hauser. De un cultivo se obtuvieron los siguientes resultados
Cuadro 1
Cuadro 2
Cuadro 3
Cuadro 4
Cuadro 5
35
28
40
29
32
Calcula el resultado de esta muestra por mL
Nota: La cámara de Petroff Hauser es estándar no se cambia el volumen considerado de
0.02 mm3
Si se suman hay en 5 cuadros 164 mo
Por lo tanto
5 cuadros tienen 164 mo
25 cuadros tienen X
Si se promedia tenemos que (164/5) = 32.8
mo
Por lo tanto:
1 Cuadro tiene 32.8 mo
25 cuadros tienen X
X= (164 mo* 25)/5 = 820 mo
X= (32.8* 25)/ 1 = 820 mo
Si hay 820 mo en 0.02 mm3
Y en 1000 mm3
Y= (820 mo * 1000 mm3)/ 0.02 mm3 =4.10X107 mo/mL
03) Dilución y vertido en placa. De una muestra de quesadilla se tuvieron los resultados
siguientes, al sembrar en agar cerebro corazón:
Dilución
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
Serie
1
Incontables
Incontables
251
24
2
2
Incontables
Incontables
258
27
3
3
Incontables
Incontables
295
30
4
Haz los cálculos necesarios para determinar el valor por mL de la muestra. En este caso al
ser el mismo medio se puede promediar el valor que se considere para el cálculo.
Considerar que valores de colonias quedan entre 25 y 250. Por lo tanto hay que promediar
en la dilución 10-5 sólo las series 2 y 3, la serie 1 no queda entre los valores de referencia.
Por lo tanto tenemos (27+30)/2 = 28.5
Y si: 28.5 UFC X 1/10-5 = 28.5 UFC X 105 = 2.85X106 UFC/mL
04) Extensión superficial. Realiza los cálculos necesarios para determinar el valor de cada
muestra (son diferentes y el medio utilizado es agar nutritivo):
Muestra A se usaron 250 L y se contabilizaron 65 colonias.
Muestra B se usaron 300 L y se contaron 28 colonias
Muestra C se usaron 100 L y se determinaron 17 colonias
Muestra D se usaron 50 L y se determinaron 53 colonias
65 en 250 L
28 en 300 L
17 en 100 L
X en 1000 L
X en 1000 L
X en 1000 L
53 en 50 L
X en 1000 L
X= 260 UFC/mL
2.60X102 UFC/mL
X= 1060 UFC/mL
1.06X103 UFC/mL
X= 93.33 UFC/mL
9.333X101 UFC/mL
X= 170 UFC/mL
1.7X102 UFC/mL
05) Problema: De un cultivo en fermentador para producción de levadura de cerveza se
tienen los siguientes datos de cuantificación
Cámara de Petroff Hauser: el total de microorganismos es 468 en la cámara.
Por dilución y vertido en placa se tiene, la dilución que se usó para cuantificar fue la de 10 -4 y
se determinaron 195 colonias.
A) Realiza los cálculos para cada determinación y repórtalos como se debe.
B) ¿Los resultados son congruentes entre sí (son lógicos)? Si, No y por qué.
C) ¿Por qué es más tardado tener los resultados de la dilución y vertido en placa?
A) Petroff Hauser
Dilución
468 mo en 0.02 mm3
195 X1/10-4 = 195X104 = 1.95X106 UFC/mL
X en 1000 mm3
X=23400000= 2.34X107 mo/mL
B) Si, ya que los viables son menos que los totales, la diferencia permite identificar que hay
varias células muertas.
C) Porque hay que incubar al menos 24 horas para contar las colonias, con Petroff Hauser se
hace el conteo en minutos