Resumen Urocultivo 4102C

Instituto Politécnico Nacional
Centro de Estudios Científicos y Tecnológicos No. 6
“Miguel Othón de Mendizábal”
García Ruiz Alan Jair
Hernández Osornio Nancy
Hernández Zavala Oscar
López Obregón Ana Karina
Lucas Pineda Marina
Pérez Mendieta Lucia Brenda
Romero Galicia Elizabeth
Semestre: Cuarto
Grupo: 4IM2/4102C
Unidad de Aprendizaje: Bacteriología Clínica
Tema: Urocultivo
Q.B.P. Miguel Ángel Morales Gil
Turno: Matutino
Ciclo Escolar: Enero 2012 – Agosto 2012
Urocultivo
I.
Introducción
Las enfermedades crónicas que suelen ser reconocidas en un estadio
relativamente tardío, es decir, después de que ha ocurrido un daño severo, y que
evidentemente en tales circunstancias el tratamiento es menos eficaz, y que por lo
tanto se requiere de un conocimiento oportuno de este tipo de enfermedades con
el objeto de efectuar una prevención adecuada.
El diagnóstico de las infecciones de las vías se hace demostrando bacteriuria por
medio del cultivo.
El urocultivo cuantitativo permite distinguir la bacteria significativa de la simple
contaminación de la muestra.
II.
Fundamento
Entre las enfermedades crónicas debilitantes destaca la insuficiencia renal como
consecuencia de un proceso infeccioso que se manifiesta tardíamente. La
presencia de bacterias en la orina debe detectarse a tiempo para evitar el
desarrollo de una infección en las vías urinarias de graves consecuencias.
La orina que normalmente se encuentra estéril en la vejiga resulta un medio de
cultivo excelente para diversos microorganismos como las enterobacterias. La
orina de pacientes con pielonefritis tiene mayor número de leucocitos que el
normal, y el número de bacterias viables de la porción media de la micción excede
de 100 000 en un ml.
En la actualidad existen diversos métodos para cuantificar las bacterias en la
orina; la eficiencia reproductibilidad y facilidad de cada uno de ellos ha sido
cuidadosamente valorado.
III.
Material y equipo
1. Asas calibradas (de 4 mm de diámetro de 0.01 ml).
2. Medios de cultivo: gelosa sangre y EMB.
3. Solución de cloruro de benzalconio.
4. Algodón.
5. Equipo habitual en un laboratorio de microbiología.
IV.
Método
IV.1 Material biológico
La orina es tomada por el paciente en su domicilio con previo aseo general,
haciendo énfasis en los órganos genitales externos. La orina se recolecta en un
frasco estéril.
Una vez que empieza la micción, se desecha la primera orina que arrastrará los
organismos contaminantes; se interrumpe la micción para recoger el frasco estéril
la porción media de la muestra y se desecha el resto de la orina.
En los niños también se asean los órganos genitales externos y regiones vecinas,
se aplica después el dispositivo de Machuca o bolsas de plástico adhesivas.
El urocultivo debe hacerse, dentro de la hora siguiente a la recolección de la orina,
o bien si esto no es posible, debe guardarse la orina en el refrigerador a 4°C hasta
que pueda cultivarse, sin exceder de algunas horas.
IV. 2 Cuenta de bacterias
Método con asa calibrada. El método cuantitativo que se utiliza de rutina es el de
asa calibrada para inocular. Dicha asa es de 4 mm de diámetro y de 0.01 ml de
capacidad.
Se toma una asada de la orina y se hace una siembra por estrías en toda la
superficie de la placa. Como en las infecciones del tracto urinario pueden
encontrarse bacterias Gram positivas (estreptococos y estafilococos) y bacilos
Gram negativos (E. coli, Proteus) es conveniente sembrar la orina en una placa de
agar sangre y en uno de los medios selectivos para las bacterias Gram negativas
tal como el medio EMB. En ambas placas la orina debe sembrarse del modo
descrito anteriormente, incubarlas a 37°C y examinarlas después de 24 a 48 horas
y se multiplica por 100 el número de colonias que aparecen en la placa para
determinar el número de bacterias que existen en un mililitro de orina.
Ordinariamente se hace antibiograma a las bacterias encontradas en el urocultivo.
V.
Observaciones
V. 1 Estimación cuantitativa de las colonias
En general, cuentas menos de 10 000 colonias por mililitro de orina indican
contaminación. Cuando el numero esta entre 10 000 y 100 000 se sospechará
infección cuando solo existe un tipo colonial, y si es mayor de 100 000 se
confirmará la sospecha.
Hay casos de pielonefritis en los que el número de bacterias es menor de 100 000
en un mililitro de orina. Esos casos se presentan cuando un volumen de orina es
muy grande y por lo tanto disminuye la concentración de bacterias en la unidad de
volumen. Cuando el paciente tiene micciones frecuentes, y cuando estas siendo
tratado con agentes antimicrobianos o cuando el pH de la orina es menor de 5.
V. 2 Microorganismos presentes en el tracto urinario
Las infecciones bacterianas del tracto urinario pueden presentarse en pacientes
de cualquier edad y cualquier sexo y pueden variar desde infecciones inaparentes
hasta enfermedades sistemáticas severas. El diagnóstico clínico de pielonefritis
frecuentemente pasa inadvertido, debido a la ausencia de síntomas en el tracto
urinario.
La relación entre bacteriuria y pielonefritis activa inaparentemente solo ha sido
demostrada recientemente en autopsias.
La demostración de los microorganismos por cultivos apropiados es, por lo
preciso, la única manera posible de hacer el diagnóstico.
Debido a que las muestras de orina frecuentemente se contaminan en su
recolección, el desarrollo de los microorganismos, aún de los patógenos
conocidos, no establece necesariamente el diagnóstico de infección de tracto
urinario. La cuenta de bacterias en orina fresca de pacientes con infección de las
vías urinarias es habitualmente mayor de 100 000 en un mililitro, mientras que las
muestras de personas no infectadas y normales o son estériles o no contienen
más de 10 000 colonias en un mililitro.
Por lo tanto, para valorar el significado clínico de un cultivo de orina, se
recomienda tomar en cuenta el número de bacterias presentes en la muestr
Microbiota Patógena
Microbiota No Patógena
Estreptococo beta hemolítico
Lactobacilus
Staphylococcus aereus coagulasa positivo
Difteroides
Candida albicans
Bacilus subtilis
Enterobacterias
Staphylococcus coagulasa negativo
(S. epidermis)
(S. saprophyticus)
1.- Organismos que son uropatógenos reconocidos y crecen bien en medios de
rutina en 24 horas
Estos
incluyen E.coli, Klebsiella
pneumoniae,
Proteus
mirabilis, y Pseudomona aeruginosa. Estos patógenos constituyen la causa del
80% de los bacilos Gram negativos aislados. Enterobacter y Citrobacterson
también comúnmente aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus,
Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae son los Gram positivos más
frecuentemente aislados.
2.Organismos que son uropatogenos reconocidos y no crecen en medios
de rutina
Mycobacterium tuberculosis, es un uropatógeno infrecuente que se asocia
a altos recuentos de leucocitos.Chlamidia trachomatis se desarrolla
solamente
en
cultivos
celulares y se
asocia
a
uretritis
y
salpingitispudiendo provocar
UTI. Ureaplasma urealyticum,
se asocia
a otros uropatógenos. Neisseriae gonorrhoeaese desarrollla en Medio Thayer
Martin.
3.-Organismos que pueden ser uropatógenos, pueden requerir medios
especiales y más de 24 hrs
Hay microorganismos pertenecientes a la flora normal y que aislados en
recuentos
altos
se
hanasociado
a UTI entre
ellos se encuentran: Corynebacterium urealyticum,
Corynebacterium
seminale éstosse desarrollan en A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae,
H. parainfluenzae, estos de desarrollan enA.chocolate Gardenella vaginalis en
altos recuentos se ha asociado a UTI éste se desarrolla en Human BloodAgar.
Todos estos medios especiales deben incubarse por 48 hrs. En CO2
Microorganismos Patógenos
Escherichia coli,
Normalmente vive en el intestino. Infección de orina o del tracto urinario son
expresiones que engloban diferentes enfermedades infecciosas (producidas por
un microorganismo o germen) y que afectan a cualquier parte del sistema urinario
(riñón, uréteres, vejiga urinaria o uretra).
E. coli es la especie tipo del género Escherichia. Incluye gérmenes
generalmente móviles, que producen ácido y gas a partir de la glucosa, la
arabinosa, y habitualmente de la lactosa y otros azúcares. Producen reacción
positiva de rojo de metilo, y negativa.
Proteus mirabilis
Es
una bacteria Gram-negativa,
facultativamente anaeróbico.
Muestra aglutinación, motilidad, y actividad ureasa.
Esta bacteria de colonias redondeadas tiene la habilidad de producir grandes
niveles de ureasa. La ureasa hidroliza urea a amoníaco, (NH3) y eso hace a la
orina más alcalina. Y al subir la alcalinidad puede liderar la formación
de cristales de estruvita, carbonato de calcio, y/o apatia. Esta bacteria puede
encontrarse en cálculos, y esas bacterias escondidas allí, pueden reiniciar una
infección post tratamientos antibióticos. Al desarrollarse los cálculos, después de
un tiempo pueden seguir creciendo más y causar obstrucción dando fallas renales.
Enterobacter cloacae
Es una bacteria que pertenece al género Enterobacter, de la familia de
las Enterobacteriaceae. Es un bacilo Gram negativo Oxidasa negativo y Catalasa
positivo presente en el aparato digestivo humano.
Se han descrito casos de infecciones del tracto urinario, de herida quirúrgica e
incluso bacteriemia.
No
obstante,
lo
más
frecuente
son
infecciones nosocomiales en pacientes inmunocomprometidos.
El tratamiento de elección en las infecciones por E. cloacae consiste en la
asociación
de
un carbapenem (ertapenem, imipenem, meropenem)
y
un aminoglucósido (gentamicina). Se recomienda hacer siempre un antibiograma,
dado que se conoce la aparición de múltiples resistencias por expresión de
cefalosporinasas.
Serratia marcescens
Es un bacilo gramnegativo de la familia Enterobacteriaceae. Puede ser peligroso
para el hombre, ya que a veces es patógena, como causa de infecciones
nosocomiales y urinarias.
Es un bacilo motil que puede crecer a una temperatura que oscila entre 5-40 °C,
en niveles de pH que varían entre 5 y 9. El ambiente en el cual predomina es en
condiciones húmedas, por esa razón es posible encontrarla creciendo en los
baños y las alcantarillas, aunque puede ser eliminada mediante la aplicación
de lejía y otros desinfectantes (sin abusar de la dosis, porque sino la bacteria
puede volverse inmune a los efectos de los desinfectantes).
Bibliografía
Cruz Jiménez , G., Sainz Montoya, J. E., & Segura Ramírez , P. (1994). Manual de bacteriología
Clínica (Primera ed.). D.F., México : Universidad Nacional Autónoma de México . Pág 82-85
Urocultivo
Cultivo Y Aislamiento
A
35 + 2 °C
I
18-24 hr
5-10%
CO2
Taxo A
Agar Sangre
Agar Sangre c/Azida
Agar Columbia con 5% Sangre
Sensibilidad a
Bacitracina
Taxo P
Sensibilidad a
Optoquina
II
35 + 2°C
Selección de Colonias
Agar McConkey
Agar EMB
Agar Desoxicolato
Agar CLED
18-24 hrs
III
35 + 2°C
Selección de Colonias
Agar Estafilococos 110
Agar Sal Y Manitol
Agar Columbia con 5% Sangre
Identificación
1. Tinción de Gram
2.Pruebas Serológicas
3. Fermentación de carbohidratos
4. Hemólisis
5. pyogenes
18-24 hrs
1. Solubilidad en bilis
2. Hemólisis
3.Tinción de Gram
4. pneumoniae
Bioquímicas
TSI Agar de Hierro y Triple
Azucar
Agar Kligler
Medio MIO
Agar LIA
Caldo Urea
H2S (TSI, Kligler)
Nitratos
Agar Fenilalanina
Agar Citrato
Agar Prueba DNasa
Medio MR-VP
Identificación Serológica de
Enterobacterias
-Prueba de Coagulosa +
-Prueba de Coagulosa –
-Fermentación de Azúcares
-Agar Prueba DNasa
-Prueba de Susceptibilidad a
Novoblocina
s. aereus
B. Con enriquecimiento Medio
Líquido Tioglicolato sin
Indicador
35+ 2°C
24 hrs e
incubar
C. Hongos Y Levaduras
25 + 30°C
Agar Biggy
72 hrs
Agar Sangre
Agar EMB
Agar
MacConkey
Agar Sal y
Manitol
-Seguir procedimiento Al, Alt, Alt,
Allt
-Pruebas de suceptibilidad
-Frotis Azul de Algodón
-Agar para Clamidosporas
-Prueba tubo germinal
Candida albicans
Agar Dextrosa
Sabouraud
Colección de la Muestra y Transporte
Frotis de sedimento Gram
Orina
Transporte:
-A temperatura ambiente dentro de las primeras 2
hrs
-Refrigeración hasta 24 hrs