DOCTORADO EN CIENCIA TECNOLOGIA DE LOS ALIMENTOS N° PAPER : 06 ALUMNO : COCA QUILLAY CARLOS UN MÉTODO MEJORADO PARA UNA REJILLA HIDROFÓBICA DE LA MEMBRANA DE FILTRO SISTEMA PARA DETECTAR PATÓGENOS TRANSMITIDOS POR ALIMENTOS EN LA CARNE MOLIDA (HGMF) • RESUMEN • La recuperación de patógenos al calor ( Escherichia coli O157: H7, Listeria monocytogenes , Salmonella, Typhimurium , y Yersinia enterocolitica) en muestras de carne molida fue estudiado por la capa de agar delgada (TAL) y TAL + Oxyrase ® ( TALO) métodos en conjunción con la ISO-GRID ® filtro de rejilla-membrana hidrófoba (HGMF). Esta nueva combinación usando HGMFs ISO-GRID con los métodos TAL y TALO mejoró la eficiencia ( P < 0,05) de la recuperación de patógenos. Además, el método TALO mostró un mayor porcentaje de aumento de la recuperación que el método TAL debido a la estimulación de Oxyrase en el crecimiento de patógenos. La combinación permite la detección de cantidades muy bajas de patógenos en los alimentos. • LA TÉCNICA HGMF A MICROORGANISMOS • Enumerar ha sido ampliamente aplicado para el uso con alimentos. Con este sistema, la suspensión de alimentos se hace pasar primero a través de un aparato de filtración para eliminar los restos y después se filtró a través de la membrana. • La membrana inoculada se coloca entonces en soportes adecuados para la reparación y • recuperación en las temperaturas de incubación (Sharpe y otros, 1979a; Sharpe y otros, 1979b; • Peterkin y Sharpe 1980; Entis y otros 1982). La técnica HGMF también se utilizó para estudiar • el efecto de la tensión y recuperación de bacterias indicadoras de los alimentos mediante la • colocación de filtros en un no • OBJETIVO • El objetivo de este estudio fue aplicar el método TAL 1-paso y TAL + Oxyrase ® ( TALO) • Métodos para sistema ISO-GRID HGMFs para la evaluación de la recuperación de • patógenos transmitidos por alimentos lesionado al calor ( Escherichia coli O157: H7, Listeria • monocytogenes, Salmonella Typhimurium, y Yersinia enterocolitica) en la carne molida. • MEDIOS Y MÉTODOS DE RECUPERACIÓN • TSA (Difco, Detroit, Mich., EE.UU.) se utilizó como medio no selectivo y MacConkey • sorbitol Agar (MSA, Difco) se utilizó para E. coli O157: H7, que se desarrolló colonias • incoloras. Cuando se aplica con el filtro de membrana ISO-GRID, cuadrados que contienen • colonias incoloras se consideraron como positivos para E. coli O157: H7 para una puntuación • de presunción. Modificado Oxford (MOX, Difco) medio se utilizó para L. monocytogenes. Los • cuadrados que contienen colonias de color negro fueron considerados como positivo en el • filtro de membrana ISO-GRID. La xilosa desoxychlolate lisina (XLD, Difco) medio se utilizó • para S. Typhimurium. colonias de color negro en los cuadrados de filtro de membrana • ISO-GRID se consideraron como positivos para S. Typhimurium para una puntuación de • presunción. Cefsulodina-irgasan-novobiocina (CIN, Oxoid, Inglaterra) se utilizó para • ANÁLISIS DE LOS DATOS • La recuperación de 4 transmitidas por los alimentos patógenos indica en agar patógeno • selectiva, placas TAL, y las placas TALO usando se evaluó ISO-GRID HGMFs. TSA no podría • ser utilizado para patógeno diana diferencian de flora mixta y sólo proporcionan recuentos • totales de las mezclas en el estudio. Los experimentos se repitieron 3 veces. El porcentaje de • aumento de la recuperación se calculó utilizando el número de bacterias reales contados a • partir de los medios de comunicación por la fórmula: Porcentaje de aumento de la • recuperación = [(cuenta con medio de recuperación - cuenta con medio selectivo) / cuenta con • medio selectivo] • 100. nú- bacteriana • fibras también se convirtieron a log 10 CFU / mL para el análisis estadístico. El diseño • experimental fue de bloques completos al azar (RCB). El análisis de varianza (ANOVA) se • realizó en el recuento de células utilizando los modelos SAS lineales generales (GLM) con • SAS versión de software 6.12 (SAS Inst., Cary, NC, EE.UU.). Medios de 3 repeticiones se • representaron en gráficos y diferencias significativas determinan en el límite de confianza • del 90% o 95%. Las diferencias entre tratamientos (comparación por pares) fueron • evaluados por el diferen- mínimos cuadrados • RESULTADO Y DISCUSIONES • Los 4 patógenos heridos se recuperaron en mayor número por los métodos TALO y • Tal que medios selectivos específicos de patógenos, cuando se combina con el • sistema ISO-GRID HGMFs. Estos resultados indican que la aplicación del método • TALO o TAL con el sistema isorreticular HGMFs mejoraría la eficiencia y la exactitud de • HGMFs isorreticular originales con medios selectivos comerciales. Además, el método • TALO tuvo un incremento por ciento más alto de recuperación que el método TAL, lo • que aumentaría la sensibilidad para la detección de microorganismos en los alimentos • CONCLUSIONES • T él TAL y TALO métodos utilizados en conjunción con la norma ISO-GRID éHl TGAMLF ys T mALeOjo rmarésteod laos c uatpilaizcaiddoasd edne cl opnrojucnecdióimn iceonnto o nriogrimnaal ,I SsOug-GerRidIDa por ISO-GRID • HGMFs, con medios selectivos específicos de patógenos para la enumeración de • patógenos lesionados. Esta nueva combinación es también una mejora sobre • manipulaciones demasiado complicado el engorroso del método 2 a paso, que se utilizó • con isorreticular HGMFs para la recuperación de patógenos lesionados. Con el sistema de • filtración, esta combinación permite la detección de muy bajo número de células (1 a 10 • células / ml o células / g, heridos y no lesionados) en sistemas alimentarios.
