EXTRACCION ARTESANAL DE DNA INTRODUCCION: El DNA

EXTRACCION ARTESANAL DE
DNA
INTRODUCCION: El DNA tiene varios
métodos para llevar a cabo su extracción, entre
ellos el método artesanal que no es muy exacto
ya que en comparación con los métodos más
avanzados, el DNA no puede verse
correctamente, las proteínas no se han
separado y esto se presta a confusiones, para la
presente experiencia aplicamos el protocolo de
shawn carlson utilizamos arveja verde fresca,
espinacas, cebolla cabezana mediana, banano,
hígado de pollo, brócoli y fresas. En algunos
de los materiales hubo mayor presencia y
visibilidad del DNA, en los demás se observó
solamente proteínas o el acido y las proteínas
disueltos.
MATERIALES Y METODOS: Para el
tampón 240 ml de Agua de Mineral, 3 g de sal,
10 g de bicarbonato, 10 ml de shampoo.
Material de laboratorio 1 tubo de ensayo
grande, 2 tubos de ensayo pequeño para
centrifuga, 1 pipeta de 10 ml, 1 vaso
precipitado pequeño, 1 agitador de vidrio, 1
pipeta Pasteur, isopropanol, azul de metileno.
Material biológico o de extracción arveja
verde, espinaca fresca, una cebolla cabezona
mediana, un banano, hígados de pollo, brócoli
y fresas.
Se mezclaron los materiales del tampón y se
dejo enfriar a 0ºC, el material biológico se
trituró, se mezclaron con agua destilada hasta
50 m en un vaso de precipitado, se trituró en
una licuadora dándose tres pulsos de 10
segundos cada uno. Se tomaron 5 ml del
triturado y se depositaron en un tubo de
ensayo grande. Se añaden 10 ml del tampón
frio. Se agitó durante 2 minutos.
El contenido del tubo de ensayo se separó en
dos tubos de ensayo pequeños, de modo que
ambos tenían la misma masa, se pusieron
ambos tubos en la centrifuga durante 5
minutos. Se recoge el sobrenadante después
de la centrifugación con el cuidado de no
haber recogido el precipitado de cada tubo. El
sobrenadante lo pusimos en e vaso de
precipitado pequeño.
Se añadieron 10 ml de isopropanol frio
cayendo sobre las paredes del vaso de
precipitado, quedaron dos fases, una superior
que contiene el isopropanol y otra inferior. Se
introduce el agitador de vidrio en la interfase
entre el isopropanol y el resto de la muestra, se
movió el agitador durante un minuto. Se saca
el agitador y en ella tenemos pegado el DNA.
Por ultimo se añade una gota de azul de
metileno al tubo de ensayo y podemos apreciar
el DNA.
RESULTADOS:
Material Biológico
Arveja verde
Espinaca
Cebolla Cabezona
Banano
Hígado de Pollo
Brócoli
Fresas
DISCUSION:
Resultado
Se pueden ver las
fases y el DNA con
algunas hebras y
algunas proteínas.
Presencia de DNA y
proteínas.
Presencia de DNA
muy escasa.
Presencia de DNA y
proteínas
Abundancia
de
proteínas debido a
que los hígados y
vísceras son ricos en
ellas, poca presencia
de DNA
Presencia de DNA y
proteínas,
aunque
menos del acido.
Es donde se ve mejor
el
DNA
y su
consistencia es mejor