CLASE 1: MORFOLOGÍA Y FISIOLOGÍA BACTERIANA Camilo A. 0:00-00:06:46 Nota - Tips para el curso : ● ● ● ● ● Cuál es la importancia de ser pequeño Siempre usar la terminología precisa para describir cada microorganismo Se debe describir la morfología bacteriana, es decir que clase de bacteria es, su aplicación (para que se estudia esto desde la clínica) Aprender como estan constituidas las bacterias Entender la infección desde el punto de vista hospitalario (aprender el tamaño del punto (hace relación a las bacterias), se refiere al tamaño del microorganismo, para clasificar si es bacteria, virus etc . por ejemplo diferenciar un virus de la influenza de una pseudomonas (bacteria)) REINO: en la naturaleza, se refiere a toda la creación tanto minerales, animales, vegetales etc DOMINIO: hace referencia a los organismos vivos , es decir los que se pueden multiplicar ,por tanto: (Por ejemplo, Las bacterias pertenecen tanto a un reino como a un dominio) ● ● ● Hongos pertenecen al dominio hongo Animales al dominio animalia Bacteria pertenece al dominio Bacteria Las bacterias son diferentes, por ejemplo algunas son capaces de metabolizar hidrocarburos pesados como petróleo, a estas las llamamos Arqueobacterias, por el hecho de metabolizar hidrocarburos no podemos suponer que no están presentes en nuestro cuerpo, se han encontrado en el intestino. La mayoría de bacterias son eubacterias las cuales presentan algunas diferencias como su pared, por ejemplo que tenga pseudomureina. Serotipo o Serovar : ser: significa suero, el cual contiene anticuerpos, es decir hay un suero que se produce generando una estimulación antigénica, inmunogénica en un animal para sacar anticuerpos que sirven para identificar bacterias, por ejemplo se tiene estreptococos serotipos ,se hace el serotipo para la proteína M, para determinar si las bacterias son iguales Por ejemplo: Todos los estreptococos son iguales, pero desde el punto de vista de sus proteínas hay diferencias, las cuales son importantes porque, por ejemplo un tipo de serotipo de ellos puede producir fiebre reumática, otros tienen tendencia a producir glomerulonefritis, por ende estos datos son importantes desde el punto de vista de epidemiología molecular, para saber que estreptococo es el que está enfermando (ejemplo en niños, en quienes la mayoría de infecciones son causadas por estas bacterias). Similar en Streptococo pneumoniae, los cuales son iguales pero se diferencian por los azúcares de su cápsula, los cuales son identificados por anticuerpos que actúan sobre su cápsula. Streptococcus agalactiae, que produce problemas neonatales, donde la madre puede ser portadora vaginal, la cual infecta al recién nacido lo que puede generar neumonitis, infecciones neonatales. E. coli, las bacterias son similares desde el punto de vista fenotípico, sus diferencias genotípicas están en la envoltura de la bacteria (el lipopolisacárido) por ellos hay 160 serotipos de esta bacteria, se ubica en el colon, todos los animales de sangre caliente las tenemos. El término serovar, similar a serotipo, se lo usa generalmente cuando hablamos de leptospira. Podemos tener una infección que puede ser producida por un bacilo que puede ser Mycobacterium tuberculosis, muy común en Cali con un nuevo caso cada mes. Si se estudia el genoma de la bacteria una persona puede tener varios genotipos en su granuloma pulmonar, debemos tipificar a la bacteria desde la parte molecular y así aparecen los diferentes genotipos, que también sirven para identificar las bacterias. Helicobacter pylori, se identifica por genotipo, para saber si esta bacteria puede producir cáncer de estómago, o si esta bacteria ha hecho coevolución con el humano. Cepa: se refiere cuando una infección está apareciendo constantemente, es decir en el diagnóstico aparece esa bacteria, por ende está circulando en una forma constante y estable. El término cepa se puede usar si se tiene un antecedente de que siempre aparece la misma bacteria, por ejemplo: En los niños, S. pneumoniae, produciendo meningitis en una unidad de recién nacidos, las cepas dependen de la resistencia a los antibióticos, es igual a todas las que han sido aisladas, en el transcurso del tiempo... A las eubacterias también se les conoce como “bacterias verdaderas”, y son organismos microscópicos que tienen células procariotas. Karol A. El perfil de resistencia a los antibióticos es igual a todas las que han sido aisladas en el transcurso del tiempo. Cepa se refiere realmente a que una bacteria es muy altamente estudiada, son totalmente conocidas sus partes cómo su pared, etc, se ha consolidado que cualquier bacteria es una cepa, sin embargo, el término no está bien empleado. Aislado: Lo que se hace en infecciones son aislamientos como por ejm: con una muestra de pus, a cierta Tº y se producen unas colonias. Ecotipo: Hay ciertas bacterias que circulan en las mismas áreas geográficas y hablamos de ecotipo como por ejemplo: leptospira. Las bacterias están en todos lados, y siempre están “atacando” todo. Ellas se encuentran a Tº extremas como en calderas a 100ºC, porque de allí se saca la cadena de polimerasa que resiste los 96ºC, son llamadas hipertermófilas. Las bacterias son muy pequeñas, no son visibles a simple vista, ya que su tamaño en general es de 0.2 a 0.5 de diámetro por 3 a 5 micrómetros de longitud. MORFOLOGÍA DE LAS BACTERIAS ● ● ● Cocos Bacilos Bacilos Curvos La parte más externa de las bacterias es la cápsula y ésta normalmente está elaborada por.. Alison E. 13:32 - 20:18 por polisacáridos, normalmente son polisacáridos, entonces ¿qué pasa cuando uds dejan una banana encima de la mesa sin cubierta? se hidrata; eso mismo hace la cápsula de la bacteria, la cápsula de la bacteria coge humedad (porque es un polisacárido) del ambiente y entonces cuando la bacteria no tiene más mecanismos para resistir esa pérdida de la humedad toma humedad de la cápsula, entonces le sirve para sobrevivir, entonces sirve para que la bacteria sobreviva. Sigue algo muy duro, esa parte muy dura es la pared, entonces la pared le da la forma, por eso tenemos la forma de “coquito”, entonces esa pared le está dando la forma a ese “bombón”, entonces ahora vamos a ver como son las paredes de estas bacterias. Y dentro de ella primero, no le va a entrar agua (sigue hablando sobre la pared), uds dejan el coco en un vaso con agua y no le va a entrar agua porque protege de la presión osmótica a la bacteria. Tiene un “palito” o pueden ser varios “palitos”, ese “palito” es un flagelo; pero en las bacterias ese “palito” puede ser de varias longitudes. Y si cuando lo van chupando le salen unos pedacitos de coco esos pueden ser los pilis, y esos pilis le sirven para varias cosas a la bacteria, eso lo vamos a ver ahora. Entonces miren uds, un coco es mucho más pequeño que un bacilo, se ve mucho más grande el bacilo. El bacilo puede tener un radio de 2 micrómetros y el coco un radio de 1 micrómetro, entonces cuando vamos a aplicar la fórmula de la area de superficie que es 4pi Radio al cuadrado nos daría 50.3 micrómetros cuadrados, cuando aplicamos el volumen (4/3pi radio al cubo) nos da 33.5, si dividimos superficie por volumen nos da 1.5, siendo mucho más grande nos da una relación volumen superficie mucho más pequeña; en cambio con el coco tendríamos una relación superficie volumen de 3, entonces ¿qué quiere decir esto? que es mejor ser coco y el coco es mucho más pequeño porque la actividad metabólica, la actividad por unidad de tiempo, la actividad química que puede hacer la bacteria por unidad de tiempo es mucho más eficiente cuando tiene una mayor relación superficie volumen, entonces es mucho más eficiente el coco, por eso uds van a mirar que muy probablemente es más fácil encontrar en un ambiente hospitalario bacterias contaminando espacios que tienen forma de coco: estafilococos, acinetobacter que es cocoide. Entonces las formas de las bacterias básicamente son: ● Redondos que son cocos ● Largas que son bacilos ● Curvos. Podemos tener los curvos como vibrios o como helicobacter, campylobacter que es un espiral corto; y las más larguitas que son las espiroquetas que produce la sífilis, la que produce la leptospirosis, la enfermedad de lyme. Las bacterias pueden tener diferentes agrupaciones, entonces el coco se puede agrupar en parejas que sería un diplococo, diplococo es un característica morfológica, no es un género, parece un granito de café, alargadito con una división en la mitad. Un diplococo importante como el que produce la blenorragia que se llama Neisseria Gonorrhoeae. Se denominan estreptococos porque es una cadena, varios cocos juntos y son flexibles, entonces se refiere a que es una cadena que no es rígida sino flexible. Esto de la cadena sí le da nombre de género a la bacteria, entonces estreptococo si es un género bacteriano. Tenemos tétradas (entre 4) o sarcinas que no tiene importancia en patogenicidad, no son patógenas. Y tenemos otros que cuando se van dividiendo van quedando pegaditos y forman como unos racimos de uvas, ese racimo, en griego sería estafilo, entonces este es un género bacteriano que se llama estafilococo, entonces tenemos que el que se agrupa en racimos se llama estafilococo. Entonces tenemos aquí unos diplococos que parecen corbatincitos, tenemos estafilococo, tenemos estreptococos y tenemos aquí unos cocos sueltos que son difíciles de mirar. Hay bacilos cortos, largos, hay bacilos muy delgados como el bacilo de la tuberculosis que casi no se colorea con coloraciones específicas. Y tenemos otros bacilos que tienen una forma de resistencia a evitar la muerte, en vez de morirse esporulan y la espora dura muchísimo tiempo hasta que encuentra un tejido y en el tejido encuentra sangre y en la sangre hay vitaminas, azúcar, proteínas, entonces, va a germinar y produce la enfermedad, cuando llega a un tejido bien profundo como por ejemplo en el caso del tétano, una bacteria que le hace daño el oxígeno pero como está en forma de espora el oxígeno no le va a hacer daño a la forma esporulada porque no es una forma de reproducción. Nathalie tenemos aquí entonces las espiroquetas que son tan delgadas que tenemos que verlas con microscopio de campo oscuro (no las podemos ver normalmente con un microscopio de campo claro). Entonces uds tienen por ej una madre sifilítica, tiene un recién nacido con secreciones oculares y requiere analizar si dichas secreciones tienen Treponema pallidum. En Cali solo hay microscopio de campo oscuro en el departamento de microbiología de la Universidad del Valle, por lo que la muestra puede tardar en llegar y ser inviable; ya que después de 20 minutos de tomada los treponemas mueren. Recordar: juzgamos una bacteria por la movilidad que tenga, por eso una muestra debe ser analizada rápidamente. Coloración de Gram Las bacterias son tan pequeñas (la más pequeña tiene 0,1 micrómetros) que requieren ser teñidas para poderse observar, sino las teñimos no las podemos mirar, por lo que existe una coloración básica para la mayoría de las bacterias llamada coloración de Gram, la cual a pesar de que tiene más de 100 años sigue funcionando bien. Fue descrita por Christian Gram y es rápida; además se puede realizar también Gram de tejidos, que se realiza en patología, pero es distinta a la coloración de Gram para bacterias, que en este caso es para confirmar aislados. Procedimiento: 1. Tomar muestra de una lesión seca o costra 2. Realizar suspensión en solución salina y con ella realizar extendido sobre portaobjetos del material de la lesión. 3. Esperar que se seque, se fije, y luego se colorea con la coloración de Gram 4. Agregar cristal violeta (o violeta genciana) que colorea la pared bacteriana, no otras estructuras, evidenciando así la forma de la bacteria dada por la pared. Lavar. 5. Agregar Lugol, el cual es un mordiente que fija el violeta a la pared. Lavar. 6. Agregar yodo. Sigue violeta. Lavar 7. Agregar alcohol acetona que actúa dependiendo del grosor de la pared bacteriana: a. Bacteria de pared gruesa: Cuando le agrego alcohol acetona Baja la porosidad, entonces se cierran los poros, entonces la pared deja de ser permeable y la bacteria permanece de color violeta (¨morado¨no es color, es un hematoma). b. Bacteria de pared delgada (una sola capa de mureína) y encima tiene un Lipopolisacárido (LPS): el alcohol acetona penetra la pared porque la mureína es muy pequeña, y difunde eliminando el color violeta, por lo que la bacteria queda sin color. 8. Agregar color de contraste: fucsina 9. Observar: a. Bacteria violeta: Gram+ b. Bacteria rosa/roja: GramSolo las bacterias muy delgadas no se colorean con la coloración de Gram, ej: Mycobacterium tuberculosis, para la cual se usa la coloración de Ziehl-Neelsen, que tiñe las bacterias de rojo, gracias a la fucsina fenicada que es de la coloración de Ziehl-Neelsen. Las esporas tampoco se colorean, se pueden observar como espacios dentro de la bacteria. Lina Ch (00:27:04-00:33:50) Glosario de generalidades: ● Serotipo: población bacteriana reconocida por un anticuerpo. La importancia de ser pequeño radica en la eficiencia del microorganismo, esto se explica por la relación entre superficie y volumen, es mucho mayor esta relación en el coco que en el bacilo. En la naturaleza existen dos tipos celulares: los procariotas y los eucariotas, las bacterias son procariotas, que quiere decir en favor de tener un núcleo. Las bacterias son haploides, no se necesitan dos individuos para crear otro, el cromosoma de la bacteria es una molécula bicatenaria, súper enrollada, cerrada, circular, que tiene toda la información genética para producir una fusión. Hay unas bacterias que tienen genomas con menos genes que las demás (menos de 4000 genes), a estas les cuesta mucho trabajo crecer in vitro, como Mycobacterium leprae, crece dentro de patas de ratón o armadillo de nueve bandas, animales de criaderos. Las bacterias tienen un paquete extra cromosomal que se llama plásmido, generalmente lo adquieren por conjugación entre dos bacterias, tienen la información genética para algunas funciones bacterianas, una de la más importante es la que le confiere resistencia a los antibióticos; se comparten las BLEES (betalactamasas de espectro extendido), KPC, etc. Los ribosomas son más pequeños que en las bacterias eucariotas, pero tienen la misma función: síntesis de proteínas. La pared celular está constituida por unos ladrillos de LPS que son N-acetil-glucosamina y N-acetil-muramico, esos ladrillos están pegados por enlaces peptídicos, que van a unir cada una de las cadenas de LPS, formando una pared fuerte. Los enlaces peptídicos para cada bacteria son diferentes, de ahí surgen los diferentes géneros bacterianos. La pared se llama péptido porque tiene enlaces peptídicos, glican porque tiene polisacáridos, mureina porque es el muro que protege la bacteria o mucopeptido por su conformación. Cuando una bacteria Gram+ pierde su pared celular, por ejemplo con el uso de antibióticos, para que este actúe se necesita que la bacteria este en crecimiento, este no puede romper la pared compacta, el antibiótico lo que hace es interponerse en la síntesis de la nueva bacteria para poder de esta forma dañar la pared, generando huecos. Las bacterias que están en crecimiento entonces serán las afectadas por el antibiótico. Cuando un paciente no completa su tratamiento antibiótico, se da la formación de un protoplasto, este se forma cuando la bacteria pierde la pared, pero ya no hay más antibiótico, entonces la bacteria vuelve a crecer, aparece la recidiva: el residuo que quedó de la bacteria, que no se alcanzó a eliminar porque no se recibió la cantidad suficiente de antibiótico puede volver a producir la infección. En el caso de las Gram-s, como lo que se afecta es la mureína, el LPS queda intacto, se denomina esferoplasto, estas son las que causan las recidivas de las infecciones del tracto urinario. Damly G. Entonces esas bacterias que pierden la pared se llaman protoplasto y esferoplasto Como es la bacteria Gram +: tiene una mureina muy gruesa, muchas capas de ladrillos, tiene ácido teicoico, que es una molécula muy difícil de degradar por parte de los polimorfonucleares y los macrófagos, se muere el macrófago por su vida media y el ácido teicoico queda en el citoplasma, es inmunogénica, nos sirve para hacer titulación de anticuerpos y mirar si ha habido una infección por ejemplo en el líquido cefalorraquídeo, si hay una meningitis por neumococo (es un Gram+) mirar si hay anticuerpos allí, para mirar si es por el Gram+, esto debe ser así por que no siempre se ven las bacterias (se puede tener un paciente con una infección de líquido cefalorraquídeo, y en examen directo sale negativo, porque la sensibilidad de examen directo no es muy alta, tienen que haber muchas bacterias para que se pueda mirar en el examen directo. Lo mismo con tuberculosis, para que detecte una cruz de bacilos (porque se hace semicuantificación en cruces), tenemos que tener cinco mis bacilos por mililitro de esputo, esto es mucha cantidad por lo tanto su sensibilidad tampoco es muy alta). Entonces por esto es que podemos titular los anticuerpos, sirve como adhesina, también controla la autolisis, entonces controla la actividad a nivel del lisozima evitando la autolisis de la bacteria. Por otro lado, como tiene una carga eléctrica negativa, controla la entrada de iones magnesio (Mg) que son importantes para la estabilidad del cromosoma bacteriano y el metabolismo de la bacteria. Por eso el ácido teicoico es bien importante, cuando este se combina con lípidos se llama ácido lipoteicoico y es una enzima muy importante en estreptococos piógenas que producen la faringitis. La membrana es igual como cualquier membrana biológica. Las bacterias Gram negativas: tienen en la parte más externa tienen la membrana externa que es un LPS. el LPS la parte del lípido está incluido en la membrana, cuando la bacteria se divide y quedan pedacitos de LPS, eso se comporta como una toxina, y la persona que haga un cuadro de septicemia, una sepsis, puede hacer un shock endotóxico y es muy difícil salvarle la vida, (ese lípido cuando está circulando en la sangre hace mucho daño), este LPS que es lípido más polisacárido, tiene una región central que es común a todo el género de la misma bacteria, entonces los anticuerpos que reconocen esta parte me identifican el género de la bacteria, ejemplo Escherichia todas tienen esa parte común, Perciela (que es Gram -) Neisseria (Gram -) todas tiene esta parte igual, pero también tiene una parte terminal, y se llama el antígeno somático que es diferente y es la que me da los serotipos, con esta diferencia tengo especies diferentes o genotipos, ejemplo; hay diferentes tipos de bacterias Helycobacter, diferentes tipos de neisseria. Los anticuerpos como es la parte más externa que está manifestando lo se está expresando la bacteria que está creciendo en los tejidos del cuerpo, en un órgano, entonces los anticuerpos se dirigen contra los LPS, entonces estos anticuerpos se pueden buscar dirigidos contra ese LPS en las enfermedades importantes como la Salmonelosis (es una Bacterias Gram-) tienen unas porinas que son muy importantes en la resistencia a los antibióticos, las porinas son como un canal para que entren moléculas, cuando la porina cambia, el canal se cierra, y el antibiótico no puede entrar, tienen un espacio periplásmico ancho, las Gram+ también tienen un espacio periplásmico pero muy angosto, en este espacio periplásmico como las bacterias han evolucionado, (el hombre se inventa un antibiótico para controlar las bacterias, y las bacterias se inventan un mecanismo para evadir los antibióticos) en el espacio periplásmico muchas bacterias Gram-, no todas, tienen betalactamasa de tal forma que de la familia betalactamasa excepto Salmonella y Protozoo que son resistentes a la penicilina y tienen betalactamasa que rompe el anillo de la penicilina tienen lipoproteínas comparación de la Gram- con las Gram+: la Gram+ la pared muy gruesa, pueden tener flagelos que les sirven para moverse para buscar nutrientes o para alejarse de lo que le hace daño, tiene ácido teicoico y lipoteicoico, tiene pili. La Gram- tiene pili que son constitutivos que son muy importantes por que las bacterias generalmente están atacando cosas Camilo V. y si no tienen algo que atacar, ¿qué alternativa les queda a las bacterias? R/. Por ejemplo, en el tracto urinario y en la vejiga, donde todo está lleno o rodeado de líquido, las lleva a la formación de biopelículas utilizando sus pilis, los cuales se entrelazan para formar estas estructuras. En la cavidad oral por ejemplo, muchas infecciones son producidas por las biopelículas. Adicionalmente, es importante resaltar que hacen parte de los mecanismos de resistencia a los antibióticos. Las biopelículas tienen distintas capas o niveles de bacterias. Las del nivel superior pueden ser sensibles a un antibiótico, sin embargo, las de los niveles inferiores, reciben esta información y pueden volverse resistentes a éste. Según el gráfico, ¿las bacterias Gram- son las únicas que tienen pili? R/. No, las Gram+ también lo tienen, sólo que ahí no aparece. En la gráfica, se observa la cápsula que está compuesta de polisacárido (solamente el Bacillus anthracis tiene cápsula de ácido glutámico. Esta bacteria es usada como arma biológica). La cápsula tiene carga eléctrica negativa y la carga de la membrana de los PMN (que son las primeras células que van a reconocer las bacterias además de las APC) también es negativa, por lo tanto, el polisacárido es repelido, dándole un comportamiento antifagocítico a la bacteria. De esta forma, hasta que no se divida y no empiece a expresar otros antígenos, no va haber opsonización por el sistema del complemento (por la fracción C3b y su receptor) y por lo tanto, no habrá muerte bacteriana. En una infección, las personas pueden morir por distintos factores, mas no por el no reconocimiento del polisacárido; en algún momento la bacteria será opsonizada y combatida con antibióticos y por el sistema inmune en individuos inmunocompetentes. Otros Apéndices Los flagelos son usados para locomoción, las fimbrias o pili para adherencia y el pili sexual para conjugación. El género define dónde está el flagelo. Puede estar en un poro o puede estar como un penacho de flagelos. Las bacterias también tienen reservas energéticas. Cuando no hay disponibilidad de azúcar o no hay nada que fermentar u oxidar, las bacterias tienen en su citoplasma algunos corpúsculos o gránulos de glucógeno (fosfatos polimerizados), cuerpos lipídicos y vacuolas gasíferas, que le permiten tomar nutrientes cuando su energía se agota. Algunas bacterias (sólo bacilos Gram+ como el género Bacillus y Clostridium botulinum) cuando escasea su alimento, o perciben que no hay más nutrientes en el ambiente, no hay humedad para solubilizar los nutrientes y llevarlos al citoplasma (atravesando la pared), éstas sufren mucho estrés, lo que las obliga a activar los genes de la esporulación y forman esporas. La forma de bacilo que queda, es lisada y queda la espora, la cual resiste a diversas condiciones físicas extremas: resisten el sol, la desecación, agentes bactericidas, etc. Tienen mucho calcio, lo que las hace muy resistentes y hasta que no encuentren un ambiente favorable no germinan para producir su forma vegetativa. Es de esta forma cómo Bacillus ( aerobia) y Clostridium ( anaerobia) se conservan. Henry C. 47.22 a 54.08 Componentes de las Bacterias Material genético (plásmidos y su cromosoma/genoma), pilis, flagelos, pared de mureína, una pared de polisacáridos. La cápsula no es indispensable, una bacteria la puede tener y perderla y no se va a morir. La bacteria que es capsulada es más patógena que la no capsulada, pero no quiere decir que las no capsuladas no sean patógenas. Conclusión a una pregunta de Mejía que no es clara: las esporas no tienen que ver con anaerobiosis, la forma vegetativa que es la forma de bacilo, es la anaeróbica, cualquier presión de oxígeno impedirá su crecimiento pues es tóxico para ellas. Las esporas resisten condiciones extremas. Estudio de la Morfología Bacteriana Examen directo: Es mirar la bacteria en todas sus formas, mirarla en cultivo, en una coloración, mirar su ADN; es todo lo que se haga directamente con la bacteria. Sirve para determinar la etiología de la infección cuando hay muchas bacterias. Por ejemplo, en la infección del tracto urinario hay muchas bacterias, aquí se puede hacer una coloración del sedimento del tracto urinario para mirar si hay un infección urinaria y aquí se observa por qué tipo de bacteria se está generando. También se puede realizar para determinar qué tantas bacterias hay en una muestra de pus; usualmente en pus de tejidos más superficiales (como la piel) hay muchos tipos de bacterias, entonces con este tipo de muestras se puede determinar cuál es el predominio bacteriano para así dar el tratamiento antibiótico, además, la secreción purulenta se debe drenar. Examen indirecto: Es la respuesta inmune. El Examen directo: -Tienen valor preprueba para guiar el manejo clínico. -Tienen valor pronóstico, es decir si están desapareciendo las bacterias. Hay infecciones que con muy pocas bacterias producen una sintomatología muy severa, por ejemplo, la fiebre tifoidea en donde con 5 bacterias por ml de sangre, el paciente puede hacer perforación intestinal. - Epidemiología: Básicamente el comité de infecciones es quien se encarga de ver y analizar cómo están las infecciones en el ambiente hospitalario, incluso más allá de saber el nombre de la bacteria, es más importante encontrar a qué son resistentes esas bacterias, en una unidad específica, pues lo que pasa en el servicio de quemados es distinto a lo que sucede en recién nacidos, traumatología, médica hombres, etc. Todas las unidades se comportan de diferente manera, porque los antibióticos también se manejan diferente. - Tinciones: ● ● ● ● ● ● ● ● Gram Kinyoun: para micobacterias. Auramina: para micobacterias. Albert: para difteria Inmunofluorescencia (IF), es una coloración, es buenísimo usar anticuerpos monoclonales, porque se están identificando en la superficie de la bacteria. Campo oscuro. Histología. Molecular: PCR. Por lo general los Gram- tienen nombre (género) femenino y los Gram+ tienen nombre masculino, aunque hay algunas excepciones. Ver imagen. Esto es importante en las rotaciones clínicas por el tratamiento con antibióticos que se prescribirán, entonces se dice que un Gram- de tracto urinario se trata con tal medicamento y un Gram+ con otro. La coloración de Gram sirve por ejemplo en: - Si se tiene una secreción uretral, se le hace una coloración y se busca si se tiene uretritis gonocócica aguda. Entonces si resulta que se tiene una secreción desde hace 4 días y no se le observa nada, la bacteria que produce esta uretritis gonocócica es la Chlamydia y ésta no se tiñe con Gram; así se puede determinar si se trata de una uretritis por Gonococo o por Chlamydia. - En sífilis primaria, se haría un campo oscuro para ver si hay espiroquetas. - Para diferenciar Gram+ de Gram- en un frotis de esputo. Un paciente que tenga EPOC tiene riesgo de hacer neumonía por Klebsiella (Gram-). Con el Gram se puede saber si es Klebsiella o Neumococo (Gram+). Inmunofluorescencia sirve para: Legionella, que en nuestro medio no tenemos casos confirmados. También útil para M. tuberculosis. Básicamente Gram se utiliza para: Uretritis, absceso, LCR, sangre y líquidos (sinovial, urinario) Para estos se hace el examen directo, para observar qué bacterias hay allí. Esa es la aplicación de la morfología en el diagnóstico de infecciones bacterianas. En la imagen se observa el diplococo Gram-. Cuando se hace un examen directo, es importante mirar toda esta reacción inflamatoria dada por PMN, si no hay reacción inflamatoria muy probablemente se trate de un estado portador de una bacteria específica. Hay que recordar que la reacción inflamatoria se presenta con síntomas como el dolor, por ello es importante mirar la extensión. En esta otra imagen se observan estafilococos, estreptococos: En la siguiente imagen unos bacilos que aún no han esporulado La siguiente es una muestra del tracto urinario con PMN, con bacterias Gram+. La siguiente imagen presenta LCR con una Neisseria, meningitis por Neisseria, también se tiene, aunque no se vea muy bien, un Haemophilus. A continuación se observa un examen directo de exudado vaginal que es normal (izquierda), donde tenemos los Lactobacillus, como los bacilos de Döderlein. Normalmente se ven células epiteliales limpias y se ven los bacilos largos. Esta célula (derecha) es una célula que se llama célula clave, es la célula de la vaginosis bacteriana porque no se ven polimorfonucleares, no se ve reacción inflamatorias, pero se ve la célula alterada. El aspecto “sucio” de la célula es el diagnóstico para vaginosis bacteriana. En la siguiente imagen, se tiene unos bacilos esporulados que la espora no se colorea, la espora no tiene mureína sino que tiene mucho calcio, tiene ácido glicolínico no se colorea, por lo que se va a ver como un “espacio” dentro de la bacteria lo vamos a observar en prácticas. A continuación se ve unos Haemophilus (cocobacilo), una bacteria curva pequeña Gram-. También se pueden observar bacterias que tiene fosfatos polimerizados, tienen gránulos que son típicos de las corinebacterias. La siguiente imagen muestra unas espiroquetas en campo oscuro. Se ve una Leptospira interrogans (que tiene forma interrogación). La siguiente imagen es una histopatología para cáncer por infección por Helicobacter pylori. Aquí se ven los vibrios la forma de coma espiral cortó, formando a veces gaviotitas y eso es diagnóstico de la infección; gastritis crónica, gastritis atrófica. Esa es la coloración de la mureína-rodamina que la vamos a ver cuando veamos TBC, esta es la coloración de Kinyoun para la Mycobacterium tuberculosis o micobacterias en generales. Morfología de bacterias en diagnóstico de enfermedades bacterianas ¿para qué sirve, en qué se aplica? (rtas de estudiante) ● Identificación primaria del microorganismo ● Tratamiento el pronóstico de una enfermedad ● En epidemiología. Tenemos bacterias en el ambiente hospitalario muy importantes: bacterias endógenas y bacterias exógenas: ● ● Endógenas: tanto el personal del hospital, como de los pacientes Contacto directo: ➔ Del personal enfermo que infecta otras personas, los pomos de las puertas, al toser e infecta superficies donde otra persona va a tocar después va a tener contacto con los ojos y se va a infectar. ➔ Portadores (importantes) como de Estreptococo pyogenes, Neisseria meningitidis en nasofaringe. ➔ Manos ➔ Fómites: como las gasas, los algodones. ● ● ● ● En el aire encontramos muchos Aspergillus, los alimentos y los medicamentos no se deben dejar abiertos al aire; porque en el aire vamos a encontrar mucha contaminación a no ser que el área sea estéril, esta área casi que es para trasplantes. Agua Legionella, q ue no hemos encontrado. Alimentos con bacilos Gram-s ¿de dónde vienen estos bacilos? del intestino de del manipulador de alimentos, por eso se recomienda no comer en la calle ya que esto puede causar diarrea por múltiples días. Fómites: Estafilococos aureus y Estreptococo que es resistente a la vancomicina (complicado para instaurar tratamiento), en los equipos también hay mucha contaminación; por ello es importante hacer una correcta desinfección de los mismos entre pacientes. Cuando se tiene un procedimiento como una endoscopia se recomienda pedir la primera cita la mañana, el médico está recién levantado y el equipo está desinfectado, equipos como catéter de succión, broncoscopio, equipo de terapia respiratoria y tubo nasogástrico estos tienen contaminación que puede producir infecciones por el cuidado de la salud. Los pacientes pueden tener influenza, Haemophilus, Estafilococo, Pseudomonas y cepas que son multiresistentes a los antibióticos. Es muy importante saber que siempre hay posibilidades de tener riesgo infecciones en este ambiente hospitalario donde las enfermedades de origen bacteriano son muy comunes. El Estafilococo es resistente a la meticilina, cuando es resistente a la meticilina tiene muchos factores de virulencia en el genoma, en el pedacito que tiene los genes resistentes a la meticilina tiene también unos genes de resistencia de producción de toxinas. Entonces tenemos que: ➔ En una cortina de tela puede durar 9 días y estas no se lavan todos los días o las persianas, ➔ Sobrevive 11 días en una tarjeta de plástico, si se comparte esta tarjeta de plástico con otra persona, ésta ùltima se va a contaminar. ➔ Más de 12 días en una superficie de mesa, y en el protector del teclado. entonces es comùn ver al funcionario de salud atender al paciente y simultáneamente manipulando el celular o escribiendo en el computador, de esta forma está contaminando todo a través de los guantes que nunca se quitó. Se sabe que aún teniendo guantes puestos, las manos se contaminan, posiblemente podría ser por la porosidad de los mismos. David O. Tenemos un agente infeccioso y una infección. ● S. pyogenes = Faringitis ● N. meningitis= Meningitis ● S. pneumoniae= Neumonía ● E. coli= Infección del tracto urinario Pero hay infecciones que pueden ser mixtas, no solamente por un solo agente. Se acepta que algunas infecciones sean mixtas cuando la contaminación u origen proviene de las mucosas, porque en las mucosas existen muchas bacterias, así como en la piel. “las infecciones asociadas a mucosas pueden ser infecciones mixtas”. Importante mirar si la bacteria es extra hospitalaria o si es hospitalaria. Si es hospitalaria, evaluar cómo está la resistencia a los antibióticos. ● ● ● ● ● ● ● Si un paciente tiene un mieloma múltiple como enfermedad de base (tipo de cáncer de médula ósea), probablemente tiene infecciones por neumococo y por Haemophilus influenzae. Leucemia, leucopenia y quemaduras: básicamente infecciones por pseudomonas. Diabetes: estafilococo infecciones por anaerobios, tendencia de las bacterias más comunes en causar una infección Hay que mirar el foco primario de la infección, si es tracto urinario o si es la vía biliar. Entonces hay que hacer un Gram, dónde van a predominar Gram negativos entéricos, porque estamos hablando de tracto urinario. Principalmente en las mujeres el periné es muy corto y fácilmente se contamina con contenido intestinal y entonces se diría que son bacterias entéricas. Endocarditis infecciosa: generalmente por Streptococcus viridans. Sistema nervioso central: neumococo, meningococo, Haemophilus. Foco de infección no drenado o desbridado: importante mirar por que no se ha hecho y si se está generando una sepsis importante para evitar que el paciente se complique. Repaso ● Es importante considerar que no todas las infecciones están dadas por un solo agente también tenemos infecciones mixtas. ● La virulencia está dada por la resistencia a los antibióticos, más que todo ¿Cuál es la diferencia entre endógeno y exógeno en ambiente hospitalario? por ejemplo, Acinetobacter baumannii es una bacteria que es de baja virulencia, pero se acomoda a cualquier ambiente, se puede encontrar contaminando superficies, contaminando agua, contaminando lavamanos, contaminando sanitarios. Esta bacteria se ha vuelto resistente a los antibióticos y se a convertido en un super microbio y las exógenas son las que son traídas de la comunidad al ambiente hospitalario. Síntomas de infección Cuando tenemos una herida, se presenta: eritema, edema, calor, dolor, aumenta la sensibilidad, hay pus, fiebre, ganglios comprometidos y hay una lenta sanación. Cuando aparecen esto signos se piensa en una infección de herida quirúrgica, debido a mal manejo de la herida, por ello se deben hacer las limpiezas adecuadas asépticamente. Quemaduras por calor, por radiografía, por radiaciones o por elementos químicos: Hay dolor, hay eritema, edema, puede aparecer líquido o pus, mal olor, presencia de vesículas abiertas con riesgo de infección (debido a que las membranas de las vesículas son muy delgadas son susceptibles a romperse). Faringe: hay dolor, dificultad para tragar, lesiones rojas o blancas, puede haber cefalea y anorexia. presente en faringitis Tracto urinario: sensación de quemazón al orinar, poliuria, orina turbia, dolor abdominal y fiebre. Neumonía: tos, dolor torácico, fiebre, sudor, escalofríos, disnea y fatiga. Infección transmitida por alimentos: náusea, vómito, diarrea y calambre abdominal. De acuerdo a la sintomatología se puede enfocar cuál sería el proceso infeccioso por el que está pasando un paciente. FISIOLOGIA BACTERIANA Las bacterias tienen un nombre, el nombre es establecido por una característica de la bacteria, por ejemplo, Haemophilus, que indica que "le gusta la sangre" por lo tanto Haemophilus obtiene los nutrientes de la sangre, por eso necesita siempre crecer en presencia de sangre. Escherichia, por ejemplo, es un homenaje a la persona que la descubrió por primera vez Theodore von Escherich Salmonella por Salmon (apellido del investigador) que estudió una diarrea en cerdos que estaba siendo producida por Salmonella. Eyder R. El género siempre va escrito en cursiva y con la primera letra en mayúscula. Y la especie va en cursiva con minúscula. Por ejemplo Escherichia coli, que es una bacteria que siempre está en el colón. Haemophilus influenza ¿qué podemos decir de esta? que está en tracto respiratorio. Staphylococcus aureus, que tiene una morfología en racimos, es Gram+, y es dorado, por eso se llama aureus, que viene de oro, este es el color de la colonia. Cuando crece en ambiente primario produce podobromhidrosis (pecueca), el paciente que tiene esta condición normalmente tiene Staphylococcus en el pie, ese mismo olor está en el medio de cultivo. Cuando se habla de serotipo la letra va igual y en mayúscula, por ejemplo Salmonella Typhimurium, que no es una especie sino un serotipo. Entonces Salmonella en cursiva y Typhimurium con letra normal con la primera en mayúscula. Las bacterias son microorganismos unicelulares que hacen metabolismo, tienen necesidades de aire, humedad, temperatura, nutrientes, etc. Por eso producen infecciones en nosotros, porque les proporcionamos todo lo que necesitan. Fisiología bacteriana No todas las bacterias tienen las mismas necesidades, entonces se pueden clasificar según su necesidad. Clasificación según lo que necesitan Hay unas bacterias que necesitan luz o fuente de energía química. Macronutrientes, de los cuales el 95% son H, O, C, N, S, P, Ca, Mg, K, Fe y Na. Básicamente lo mismo que nosotros necesitamos es lo que las bacterias necesitan para su metabolismo, estabilizar su ADN, generar proteínas, etc. Micronutrientes, de los que necesitan cantidades muy pequeñas y en determinados momentos podrían obviarse. Como Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, etc. Factores de crecimiento como las vitaminas y las bases, que son necesarias para poder crecer. Estas bases no se obtienen de nosotros, sino de las bacterias que mueren, no compiten ni dañan el ADN de nuestras células, aunque algunas bacterias si tienen endonucleasas. Las bacterias que utilizan la luz son autótrofas, solamente con la luz pueden hacer metabolismo. Fuente de carbono, CO2, como las cianobacterias y las algas púrpuras y azules. También pueden utilizar compuestos orgánicos como las algas púrpuras y verdes. Compuestos inorgánicos como sulfuro de hidrógeno y óxido nítrico que utilizan el potasio, como las arqueobacterias y algunas eubacterias. Las heterótrofas que son las importantes en medicina humana y que utilizan los compuestos orgánicos, en estas también hay eubacterias y algunas arqueobacterias. El metabolismo es muy amplio en todas las bacterias, encontramos bacterias que están en todos los ambientes, con todas las fuentes de nutrientes. Y las importantes en la medicina humana son entonces las heterótrofas o quimioheterótrofas. Son importantes tanto en enfermedades infecciosas como en producción de alimentos, como por ejemplo el queso, la cerveza, el yogur, el kéfir, que son alimentos fermentados. Estas bacterias tienen deshidrogenasas, hacen respiración y fermentación. Y los anaerobios tienen un aceptor final de electrones diferente al oxígeno, porque son an-aerobias. Las bacterias halófilas son aquellas que crecen en una concentración de sal mayor a la solución salina. La concentración de sal de las lágrimas es 0.95%, mientras que la concentración de sal del mar es de 3% (Luis O). y a esa concentración muchas bacterias pueden crecer, incluso el Estreptococo puede crecer al 10% de sal. Vibrio que es halófilo se mueve en alta concentración de sal, y produce el cólera. Un cólera mal hidratado puede ocasionar la muerte en un dia, porque el paciente pierde mucho líquido. Y el Staphyloccus aureus que contamina el queso de la costa que es muy salado y es fuente de intoxicaciones alimentarias . En las fosas marinas hay altas presiones atmosféricas, allí también podemos encontrar bacterias. Macronutrientes ● Potasio: Sirve para la enzimas y las proteínas ● Calcio: Termorresistencia de las esporas, ya vimos que el ácido ficolenico da fuerza a las esporas. ● Hierro y citocromos: Cofactor de enzimas, muchas bacterias apenas llegan al cuerpo buscan en circulacion hierro. El flagelo las orienta rápido a circulación. ● Magnesio: Tiene muchas funciones en la bacteria, como cofactor enzimático, estabiliza ribosomas, componente de proteínas y ácido nucleico. Factores del ambiente ● ● ● Ambiente físico: temperatura, presión osmótica Químicos: Nutrientes , sustancias antimicrobianas, gases, pH. Biológicos: Otros microorganismos, membranas biológicas (ej. vegetales), también sirven de fuente de nutrientes para las bacterias. Reacciones Hacen todas las reacciones: respiración, alimentación, biosíntesis, polimerización, ensamblaje. Lo único que no tienen es mitocondrias, ni retículo endoplasmático, ni aparato de Golgi. Por lo demás tienen toda la maquinaria-laboratorio para hacer todas las reacciones de una célula y poderse dividir y formar células iguales. ¿Cuáles son las necesidades nutritivas de las bacterias? Aminoácidos, macronutrientes, micronutrientes, minerales carbón, oxígeno, nitrógeno. Clasificación según parámetros ● ● ● ● Atmósfera : Necesidades que tengan de crecimiento en determinada atmósfera. Temperatura pH Humedad: No da un nombre específico para las bacterias, pero es una necesidad. Utilización de gases Bacterias aerobias: M. Tuberculosis, porque en la mayoría de los casos la transmisión es por vía aérea, se va al pulmón, sobre todo en los lóbulos superiores. En los ápices tienen muy buena atmósfera de oxígeno y allí está la bacteria en su ambiente, no quiere decir que la bacteria siempre va a ser aerobia, cuando produce la latencia se vuelve anaerobia. Bacterias anaerobias: El oxígeno les hace daño, porque este es directamente tóxico para la bacteria, no pueden resistir ningún atmósfera de oxígeno. Le puede hacer daño porque sus enzimas no trabajan en un estado oxidado si no en estado reducido. Y que no tiene enzimas, cuando se está haciendo el metabolismo del oxígeno se están acumulando muchas especies reactivas del oxígeno, muchos radicales libres que la bacteria no tiene enzimas para poderlos degradar, entonces la bacteria se muere en presencia de oxígeno. ¿Es dañino para cual bacteria anaerobia? Para clostridium - Aerotolerante: Puede haber algunas trazas de oxígeno en el ambiente y no se muere - Estricta: La bacteria no soporta ninguna traza de oxígeno para crecer. Por ejemplo, Clostridium tetani. - Facultativa : Le da igual que haya o no oxígeno, por ejemplo las enterobacterias del intestino, los bacilos Gram- del intestino crecen tanto en presencia de aerobiosis como en anaerobiosis. Bacterias microaerofilicas: necesitan poco oxígeno. ¿Cómo bajamos el oxígeno? subiendo el CO2 , la batería crece bien,, por ejemplo Helicobacter pylori. Bacterias capnófilas: Siempre necesita CO2 para crecer, sus enzimas trabajan cuando hay una buena atmósfera de CO2. Cómo se estudian las bacterias anaeróbicas ? Tenemos una cabina para la que los gases valen 1 millón de pesos mensuales, o se puede comprar jarra de anaerobiosis; es una jarra donde caben las cajas acá, tiene una tapa hermética que tiene abajo una red que tiene un catalizador, un manómetro, Tiene un sobre el cual se rompe, se abre, se agrega agua y tiene una pastilla que libera CO2, hidrógeno y oxígeno. Esto con el catalizador consume el oxígeno de la jarra, entonces la bacteria anaerobia puede crecer allí , si son bacterias anaerobias que no son tan estrictas se puede usar la jarra, pero si son estrictas se debe usar la cabina, por que la que es estricta no resiste ninguna atmósfera de oxígeno (Victor G) y cuando abramos esto, pues se va a llenar de oxígeno y no podremos trabajar con las que son estrictas. Tenemos en esta tabla ejemplos de bacterias: aerobias estrictas como Mycobacterium tuberculosis, Micrococcus luteus y Neisseria, estas bacterias hacen respiración; anaerobias estrictas como Clostridium, hacen fermentación; facultativas como Enterobacteriaceae (familia) y los estafilococos, hacen respiración y fermentación; indiferente/aerotolerante como Streptococcus y Lactobacilus, hacen fermentación; y, microaerofílicas y capnofílicas como Helicobacter pylori y Campylobacter, que hacen fermentación. En conclusión, la atmósfera es la que orienta qué metabolismo hace la bacteria. Estos tubos son unos medios de cultivo con caldo de tioglicolato que son reducidos, es decir, tienen la capacidad de tener poco oxígeno. De izquierda a derecha, de acuerdo a lo que ya vimos, tenemos los siguientes tipos de bacterias: (A) aerobia; (B) anaerobia; (C) facultativa; (D) aerotolerante; y (E) microaerofílica. Las difusión del oxígeno va disminuyendo a mayor profundidad. La anaerobia estricta hace fermentación, la facultativa hace respiración y fermentación y la aerotolerante sólo fermentación. Hacen una pregunta, pero no se escucha bien, la profesora responde lo siguiente: sí, porque el oxígeno es tóxico para ellas, sus enzimas no trabajan en estado oxidado, el oxígeno es tóxico para ellas, no tienen enzimas que vayan a desdoblar los radicales que se van acumulando, por ejemplo, dentro del polimorfonuclear como el peróxido de hidrógeno y el anión superóxido, todo eso no lo pueden desdoblar por la falta de esas enzimas y por eso no pueden hacer la respiración; no es tanto respiración, sino ganancia de energía, una forma de tener energía por oxígeno como receptor final de electrones. Pregunta: ¿cuál es la diferencia entre la facultativa y la aerotolerante? Respuesta: la aerotolerante es indiferente, es decir, en presencia de oxígeno sólo hace fermentación; la facultativa hace respiración y fermentación. Básicamente, la diferencia es metabólica. Si se acumula el superóxido, es muy importante que la bacteria tenga la enzima superóxido dismutasa (SOD), que son las enzimas que no están en las anaerobias para poder desdoblar estos metabolitos que se están acumulando y le hacen daño a la bacteria; tienen que tener las enzimas catalasa y peroxidasa para desdoblar el peróxido de hidrógeno. Aquí tenemos una reacción de una catalasa: catalasa negativa y catalasa positiva. La curva de crecimiento la vemos más adelante, donde las altas concentraciones de oxígeno prolongan la fase lag. Ambiente anaeróbico: lo encontramos en los sedimentos profundos del suelo, es muy importante si tienen algún problema a nivel del pie como una tiña, pedis o una cortadura, no ingresar en los estuarios o manglares, donde es muy espeso ese lodo, ya que puede ser una fuente de infección por bacterias anaerobias; también en aguas tranquilas y en el fondo del océano donde no hay fotosíntesis, en tracto gastrointestinal también hay bacterias anaerobias, la mayoría son de este tipo. Cuando se interrumpe o detiene la circulación hay necrosis y es medio de cultivo para los anaerobios obligados (estrictos), hay muerte de tejido y podemos tener un caso de tétanos, ya que si hay contaminación por esporas de Clostridium tetani, estas esporas pueden germinar y producir la enfermedad; antes las madres ponían ceniza al muñón umbilical y ahí podía haber esporas de esta bacteria y así producían el tétanos infantil. Aquí vemos un pie diabético, las personas con diabetes tienen muchos problemas, tanto inmunes como de circulación, entonces, si presentan algún problema de necrosis, muy fácilmente se puede contaminar con bacterias del ambiente, como las de la tierra si no hay buen aseo, y agravar el pie diabético; ese es un problema muy grande de las personas diabéticas, no sanan muy rápido las heridas, que pueden ser producto del calzado apretado o lesiones durante el arreglo de uñas. Los anaerobios obligados (estrictos) no tienen SOD, catalasa ni peroxidasa, por eso no pueden hacer todas esas reacciones de respiración, se acumulan esos metabolitos y le hacen daño a las bacterias. Las aerotolerantes no tienen catalasa pero sí SOD. El agua es muy importante para todos los seres vivos. Tenemos que es muy importante la actividad de agua o actividad acuosa (Aw) que sería la presión de agua de tejido sobre la presión del agua pura. Nosotros podemos tener partes húmedas en nuestro cuerpo, como las mucosas, pero no necesariamente hay agua libre, el agua allí (...) Jessica G. (...) está unida a la mucina, por lo tanto, no hay agua disponible para las bacterias, siendo ésta una de las primeras barreras para hacer la adhesión a las mucosas. Otra barrera para que las bacterias no se adhieran a las mucosas es la IgA, este anticuerpo se mezcla con la bacteria para evitar que ella se adhiera al tejido. Es muy importante que haya agua disponible y no solamente tejido, dado que no crecerían bien. Se define como agua libre disponible de 0 a 1.0. La congelación, el secado o la salazón reducen el agua libre de los alimentos, por ello una de las formas de conservar los alimentos consiste en adicionarles sal, vinagre, congelarlos, etc. Sabemos que hay bacterias halófilas, que puede necesitar una concentración importante de sal, pero la mayoría de bacterias no son de este tipo, especialmente aquellas con importancia en medicina. Temperatura En cuanto a la temperatura, muy importante esto: es considerada la zona de peligro las temperaturas de 4 a 60°C, es decir, en este rango las bacterias van a crecer. Lo anterior significa que, en alimentos que son conservados entre estas temperaturas, si hay contaminación, se posibilita el crecimiento bacteriano, no mucho por la poca disponibilidad del agua libre, pero hay sobrevida de bacterias, lo que produce una intoxicación alimentaria. Este rango de temperatura no solamente es importante tenerlo en cuenta con los alimentos, sino también con la vida diaria. Bacterias que crecen en refrigeración: La Listeria monocytogenes es una bacteria que puede producir granulomatosis infantil séptica por las madres que están infectadas, les da diarrea durante el embarazo, esto afecta a su bebé al nacer (https://www.msdmanuals.com/es-co/professional/pediatr%C3%ADa/infecciones-en-reci%C3%A9n -nacidos/listeriosis-neonatal). También el Clostridium botulinum Tipo E. Son bacterias que pueden crecer a temperaturas bajas. En resumen, la clasificación de las bacterias según la temperatura son los observados en esta tabla. La temperatura de los congeladores domésticos es de -18°C aproximadamente, el refrigerador debe estar a una temperatura menor a 4°C, porque recuerden que el rango de peligro es de 4°C a 60°C. Las bacterias pueden ser: ● Psicrófilos: con temperatura óptima de 12 a 15°C. ● Psicrótrofos: son aquellos que van a contaminar los alimentos y que les generan una textura babosa. Con temperatura óptima de 25 a 30°C. ● Mesófilas: son las importantes en medicina. Son aquellas que nos colonizan, que hacen parte de la microbiota normal, y también las que producen infecciones. Su temperatura óptima es 37°C ya que su metabolismo lo hace rápidamente a esta temperatura. Ejemplos: Listeria y Clostridium botulinum. ● Termófilos: pueden resistir una temperatura máxima de hasta 90°C. Entre estas cuatro clases de bacterias, según la temperatur,a hay rangos como, por ejemplo, las extremófilas. pH No es muy común la clasificación de bacterias según el pH. Pueden ser neutrófilas, acidófilas, basófilas. Las acidófilas se encuentran en el estómago, cuyo pH es de 2 - 3; también se encuentran en la mucosa vaginal, siendo una barrera para las bacterias patógenas, por ejemplo, los lactobacilos, que utilizan el glucógeno para su metabolismo y predominan en el estado normal de la mucosa vaginal, mantienen el pH bajo. Karina V. ¿Cómo podemos cultivar las bacterias en el laboratorio? Para cultivar las bacterias en el laboratorio tenemos medios de cultivo donde se les da a las bacterias todo lo que necesitan: la atmósfera, el agua, nutrientes, etc. Si necesita sangre se hace el cultivo en agar de sangre de cordero; si necesita sal, se hace el cultivo en presencia de esta; si necesita anaerobiosis se cultiva en ambientes anaeróbicos. Los líquidos se llaman caldos y los sólidos se llaman agares, entonces tenemos varias clases de agares: hay unos que son inhibitorios otros que son diferenciales. ¿Como crecen las bacterias en los medios de cultivo? Las bacterias crecen: si están en un caldo (como el líquido cefalorraquídeo o en la vejiga), producen turbidez. Si están en un agar producen colonias; entonces se van a ver las colonias formadas allí diferentes para poderlas identificar, para hacerles coloración de Gram y para hacerle estudio de metabolismo. División bacteriana Las bacterias se dividen por fisión binaria: una bacteria da origen a dos. Cuando esto ocurre el tiempo que se demore en dar dos células nuevas (no son hijas, son nuevas) se llama tiempo de generación; éste no es igual para todas las bacterias, por eso tenemos que la tuberculosis es una enfermedad crónica porque la micobacteria se demora mucho en replicarse en el pulmón o donde esté. La enfermedad refleja lo mismo del metabolismo de la bacteria. Las bacterias hacen una fase de crecimiento típica: 1. Fase Lag: Las bacterias primero identifica lo que hay en el ambiente, se adaptan a lo que encuentran allí (evalúan si hay agua, sal, proteínas, vitaminas) entonces la bacteria crece y gana un poquito de masa. 2. Fase de crecimiento exponencial: Después empieza a hacer un crecimiento exponencial donde empieza a hacer la fisión binaria, entonces activa todos sus genes para hacer el metabolismo de acuerdo con lo que tenga allí, se van a tener muchas bacterias creciendo. 3. Fase estacionaria: Después se tiene que ya no se intercambian nutrientes ni hay aporte de estos y entonces se tienen muchas células muertas y células vivas (combinadas). Las células muertas aportan nutrientes y metabolitos tóxicos a las células vivas. 4. Fase letal: Hasta que llega un momento en el que no hay nutrientes y la bacteria muere y hace la fase de latencia. Esto podría reflejar con una infección se tendría: incubación, aparición de los síntomas, respuesta inmune, antibióticos, salida adelante de ese proceso infeccioso. ● ● ● E. Coli: in vitro se divide cada 20 minutos, in vivo no porque demora más, más difícil. Mycobacterium tuberculosis: 20 horas se demora en multiplicarse, por eso la enfermedad es crónica, porque la bacteria se multiplica lentamente dentro del pulmón. Mycobacterium leprae: se demora 20 días en multiplicarse; es un proceso de años en el que el proceso de incubación puede ser de 15 a 20 años y la aparición de los síntomas es muy lenta, y eso está reflejado en el metabolismo que hace la bacteria. Respecto a la curva de crecimiento bacteriano: se tienen las 4 fases anteriormente vistas, y: ★ Las bacterias esporulan en la fase estacionaria porque se están agotando los nutrientes. La bacteria esporula cuando no hay nutrientes. ★ El tratamiento antibiótico es más eficaz en la fase de crecimiento exponencial, donde se está haciendo la división, si no lo hace la bacteria no recibirá el antibiótico para hacer eliminada.
