Curso de Transferencia de Embriones.

ESPECIALIZACION EN REPRODUCCIÓN BOVINA
INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC)
Jerónimo Luis de Cabrera 106 (5000) Córdoba, Argentina
Telefax: 54 351 471 5418
e-mail: [email protected],ar
Curso de Transferencia de Embriones.
Fecha:__________________________________________________
Nombre: ______________________________________________
1. 20 puntos. Formule dos protocolos de superovulación: uno para vacas Holstein y otro
para vacas Brahman. Fundamente cada uno de los procesos y drogas a utilizar y las
ventajas y desventajas del tratamiento elegido para cada caso.
2. 10 puntos. Si Ud. decide superestimular una vaca de Simmental con un tratamiento de 8
dosis decrecientes cada 12 horas. Por que vía administraría la Folltropin?
A: Intramuscular
B: Subcutánea en la tabla del cuello
C: Subcutánea detrás de la paleta
3. 10 puntos. Si Ud. decide superestimular una vaca Angus qué dosis utilizaría?
A.- 200 mg NIH-FSH-P1
B.- 320 mg NIH-FSH-P1
C.- 500 mg NIH-FSH-P1
4. 20 puntos. Ud. debe programar la sincronización de receptoras para 4 vacas Simmental
que va a colectar. Describa un tratamiento de sincronización de estas receptoras utilizando
prostaglandina e indique cuántas receptoras debe sincronizar para transferir todos los
embriones frescos.
5. 20 puntos. Ud. debe programar la sincronización de receptoras para 4 vacas Brahmam que
va a colectar. Describa un tratamiento de sincronización de estas receptoras utilizando
progestágenos, estrógenos y eCG e indique cuántas receptoras debe sincronizar para
transferir todos los embriones frescos.
6. 20 puntos. Se colectan embriones de 10 vacas para transferirlos frescos en vaquillonas y/o
congelarlos. De las 10 vacas se obtuvo un total de:
10 blastocistos grado 1
10 blastocistos tempranos grado 1
10 mórulas grado 1
10 mórulas grado 2
1
Se revisan las receptoras y se determinan como aptas 30 vaquillonas de las cuales:
5 estuvieron en celo hace 5.5 días
5 hace 6 días,
10 hace 7 días,
5 hace 8 días y
5 hace 8.5 días.
Determine cuáles embriones congela y cuáles transfiere tratando de que coincida el
estadío del embrión con el día del ciclo de la receptora.
DESARROLLO
1) PROTOCOLOS PARA VACAS DONADORAS BRAHMAN Y HOLSTEÍN
VENTAJAS DE LOS PROTOCOLOS.
Los protocolos de superovulación tanto para la vaca Holsteín como la Brahmán
deben tener las siguientes características ventajosas: Protocolos fáciles de efectuar,
sin tener que detectar celos base, sin importar el momento del ciclo estral en que se
encuentre la donadora; se seleccionaran protocolos prácticos y de fácil ejecución en
campo y que permitan obtener el mayor número de embriones transferibles de alta
calidad.
PROTOCOLO PARA VACA BRAHMAN
2.5 mg EB + 50 mg P4
mgP4 P4
Folltropín am- pm/3dia. eCG 200ui ampm día 7.(Novormón).
Colecta de
embriones
PGF am-pm
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Dispositivo con
progesterona (Prociclar)
IATF am
12
13
14
15
Días de tratamiento
GnRH am
IATF pm
En el día 0 se aplican 2.5 mg de EB, Prociclar y 50 mg de P4, para inducir la atresia
de todos los folículos y el comienzo de una nueva onda de desarrollo folicular.
2
En el día 4 se inicia la superestimulación de los ovocitos con FSH, debido a que la
vida media de esta hormona es solo de cinco horas; administrar cada doce horas por
vía intramuscular dosis decrecientes o constantes durante tres días. La dosis total
para vacas Brahmán es de 200mg (aplicar los días 4,5 y 6). El día 6 (am y pm) se
aplica PGF para lisar el cuerpo lúteo; el día 7 se remplaza el Folltropín por dos (2)
dosis (am y pm) de eCG (Novormón, Syntex), 200 ui a mañana y tarde. Con esta
hormona lo que se pretende es ayudar en el desarrollo de los folículos ya que además
de contener FSH, también contiene LH quien contribuye en la terminación del
crecimiento del ovocito y provoca la dehiscencia folicular. Según estudios del
desarrollo folicular los folículos en crecimiento necesitan principalmente FSH durante
la fase de reclutamiento hasta llegar a un tamaño de 8.5 mm en B. taurus y 6.2 en B.
indicus, después de este tamaño el folículo dominante adquiere receptores en las
células de la granulosa y se cree que su crecimiento hasta su ovulación pasa a ser LH
dependiente. Como los folículos de B indicus son más pequeños que los de B taurus
requieren una dosis menor de Folltropin 200 a 250 mg vs 350 a 450 mg.
En el día 7 se retira el dispositivo intravaginal en horas de la tarde, en el día 8 se
aplica (am) GnRH y se IATF en horas de la tarde, en el día 9 (am) IATF y en el día
15 colecta de embriones.
DESVENTAJAS DEL PROTOCOLO
- El uso del EB está siendo restringido en algunos países por su posible efecto en la
cadena alimenticia sin embargo en Colombia esto todavía no sucede y lo podemos
utilizar. Este protocolo permite tener un buen número de embriones por hembra
tratada.
- Otra desventaja de este protocola es que la e CG tiene una vida media de 40 horas y
persiste por más de 10 días y puede provocar una permanente estimulación del
ovario, produciendo embriones de mala calidad, lo que se puede evitar aplicando
antisuero de e CG al momento de la primera IA.
VENTAJAS DEL PROTOCOLO
- Se han logrado incrementos significativos en el número de ovocitos/embriones
colectados (10) con e CG.
- Este protocolo es de fácil aplicación puesto que no se requiere detectar celos ni
importa el momento del ciclo estral en que se encuentre la vaca.
PROTOCOLO PARA VACA HOLSTEÍN
Como el EB ha venido siendo prohibido en algunos países, se crea la necesidad de
desarrollar protocolos que permitan sincronizar el comienzo de una nueva onda
folicular que no requieran de esteres de estradiol, la alternativa que se plantea es la
utilización de la hormona PGF, que permite la superestimulación en donantes,
independientemente del momento del ciclo estral en que se encuentren, sin afectar la
respuesta superovulatoria y sin tener que detectar celos.
Las donantes reciben un dispositivo liberador de progesterona (Cue - Mate) junto con
una dosis de PGF (Día 8) y una dosis de GnRH 7días después (Día 1). El dispositivo
liberador de progesterona atresia los folículos existentes en ese momento, la PGF lisa
el cuerpo lúteo y la GnRH factor liberador de FSH y LH inician la estimulación de
una nueva onda folicular, que se continua con el Folltropin como se explica a
continuación. En el día 0 (36 horas después de la GnRH) se inicia el tratamiento con
3
FSH (Folltropin – V) en 8 dosis decrecientes (La dosis total para vacas Holsteín es
de 400 mg administradas cada 12 horas y por 4 días). Se administra PGF con las dos
últimas inyecciones de FSH y se retira el Cue- Mate con la última FSH.
Seguidamente se induce la ovulación con la p LH a las 24 horas de la remoción del
Cue – Mate, y las donantes son IATF 12 y 24 horas después. Los embriones son
colectados a los 7 días de la p LH.
Colecta de
embriones
PGF D3 PM y D4
AM
PGF2α
GnRH
pLH
IA
IA
FSH
Cue – Mate
D-8
PM
D-1
AM
Do
PM
D3 D4 D5
PM AM AM
D5 D6
PM AM
D12
AM
VENTAJAS DEL PROTOCOLO
La superestimulación de la primera onda de desarrollo folicular puede ser empleada
en donantes, independientemente del momento del ciclo estral en que se encuentren y
sin afectar la respuesta superovulatoria, sin necesidad del uso de estradiol para
sincronizar la emergencia de la onda folicular.
DESVENTAJAS DEL PROTOCOLO
Una desventaja de este protocolo es el estrés a que pueden ser sometidos los animales
por tener que pasar por la manga tantas veces, se podría aplicar una sola dosis de
Foltropin vía subcutánea detrás de la paleta, o también utilizar un polímero de
liberación lenta de FSH.
2) La vía de administración del Folltropin en este caso sería intramuscular profunda. La
vía subcutánea detrás de la paleta se utiliza para una única dosis.
3) Para superestimular una vaca Angus utilizaría una dosis de 320 mg de NIH-FSH-P1.
4) SINCRONIZACIÓN DE RECEPTORAS PARA 4 VACAS SIMMENTAL CON
PROSTAGLANDINAS.
El uso de prostaglandina es el método tradicional PGF, este tratamiento produce
regresión del cuerpo lúteo entre los días 5 – 17 del ciclo estral. El número de hembras
que responde al tratamiento es limitado. La PGF no es efectiva cuando las vacas están
en anestro, una condición común en el trópico.
Las receptoras sincronizadas con PGF deben ser tratadas 12 a 24 horas antes que las
donantes por que el celo inducido por la PGF ocurrirá a las 60 a 72 horas en las
receptoras, y en las donantes superovuladas a las 36 a 48 horas después de la PGF.
4
PROTOCOLO CON PROSTAGALANDINA
Aplicación de dos (2) dosis de PGF con 11 o 14 días de intervalo y detección de celos
por 5 a 7 días después de la segunda aplicación de PGF. Con este protocolo la tasa de
aprovechamiento (Receptoras Transferidas/Receptoras Tratadas) es muy bajo solo del
50%; otra desventaja es que hay que realizar detección de celos.
2da Dosis PGF
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26
D
I
A
S
1Era Dosis PGF
(0,15mg + Cloprostenol)
DETECCIÓN
CELOS POR
DÍAS
DE
5-7
7 DÍAS POSTCELO
TETF
No de embriones colectados por vaca Simmental: 5
No Total de embriones frescos que se esperan colectar: 20.
No de receptoras a sincronizar: para transferir 20 embriones frescos con una
tasa de aprovechamiento entre 45 y 50% se requieren entre 40 y 44 receptoras
tratadas.
5) SINCRONIZACIÓN DE RECEPTORAS PARA 4 VACAS BRAHMAN
Este tratamiento consiste en la inserción de un dispositivo de progesterona,
administración de EB im y progesterona P4 im, en el día 0. En el día 5 se administra
PGF y 400UI de e CG, remoción del dispositivo en el día 8, y EB en el día 9. En este
protocolo de sincronización de receptoras no se detecta celo si no que se realiza
transferencia de embriones a tiempo fijo en el día 17. Las receptoras que posean un
CL mayor de 10 mm reciben un embrión.
2 mg EB + 50 mg P4
PGF + eCG
Transferencia de embriones a
tiempo fijo
1 mg EB
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
12
13
14
Dispositivo con
progesterona
15
16
17
Días de tratamiento
No de embriones colectados por vaca Brahmán: 5
Total No de embriones frescos que se esperan colectar: 20.
5
No de receptoras a sincronizar: Para transferir 20 embriones frescos con una
Tasa de Aprovechamiento entre 70 y 80%, se requiere tratar 30 receptoras.
6) Determinar cuáles embriones se congelan y cuales se transfieren tratando de
que coincida el estadio del embrión con el día del ciclo de la receptora.
De acuerdo a la información lo más conveniente sería congelar las mórulas grado
1, ya que las mórulas grado 2, no son aptas para congelar por sus bajos %
de preñez. Los resultados de preñez con mórulas grado 1 congeladas son buenos.
5 Vaquillonas en celo hace 5.5 no reciben embrión porque el útero no presenta
condiciones apropiadas de anidación.
5 Vaquillonas en celo hace 6 días reciben 5 mórulas grado 2
10 Vaquillonas en celo hace 7 días reciben: 5 mórulas grado2 y 5 blastocistos
tempranos grao 1.
5 Vaquillonas en celo hace 8 días reciben 5 blastocistos tempranos grado 1.
5 Vaquillonas en celo hace 8.5 días reciben 5 blastocistos grado 1.
A congelación van: 10 mórulas grado 1 y 5 blastocistos grado 1.
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