Introducción La microbiología es el estudio biológico encargado de los diversos tipos de microorganismos que se encuentran presentes en todos los ecosistemas y hábitats de la tierra, su relevante importancia radica en los distintos metabolismos que poseen los cuales son utilizados tanto en industrias como en ingeniería genética. Para profundizar aún más el estudio y la correcta manipulación de los microorganismos es necesario conocer las principales normas de bioseguridad, materiales básicos de laboratorio de microbiología (asa, mechero, placas Petri, microscopio óptico) además de saber una serie de conceptos, métodos y técnicas básicas, como es el caso de la esterilización y desinfección de los materiales de trabajado antes y después de ser usados, como también los diversos tipos de siembra a medios de cultivo (solido, liquido) de los cuales se deben aislar las colonias bacterianas inocuas para tener un cultivo puro. Los microorganismos no son visibles a simple vista ya que estos son muy pequeños por lo que es necesario el uso de un microscopio óptico, el cual está formado por dos sistemas; el sistema óptico y el sistema mecánico permitiendo estudiar, visualizar y diferenciar la microestructuras y características específicas de cada especie. El estudio macroscópico del crecimiento bacteriano radica en la observación de las unidades formadoras de colonias (UFC) el cual se diferencia en tamaño, color, forma, borde, superficie, aspecto, consistencia, luz reflejada, luz transmitida. Sin embargo el caso del crecimiento en medio líquido se puede observar a simple vista por el aumento de la turbidez del medio. Agar Características Descripción Recipiente de trabajo MacConkey Selectivo y diferencial Crecimiento de bacterias Gram (-) e indica si son fermentadores de lactosa Placa Petri Prueba positiva: colonias rosadas-rojizas. Prueba negativa: colonias del color del medio, incoloras. Sabouraud Dextrose Selectivo Crecimiento de hongos y levaduras debido a su alta concentración de Tubo glucosa. ensayo Hierro triple azúcar Selectivo -Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa. -Pico ácido/fondo ácido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa. -Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares. -La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas. -El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce ácido sulfhídrico. Tubo ensayo Hierro Lisina Selectivo Tubo ensayo Simmons Citrato Selectivo Decarboxilación de la lisina: -Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta. -Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo. Desaminación de la lisina: -Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del género Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp. Producción de ácido sulfhídrico: -Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo) -Prueba positiva: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad. -Prueba negativa: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color. Tubo ensayo Tubo ensayo