Aislamiento hongos fitopatógenos Curso: Diagnóstico de enfermedades vegetales. Ing. Agr. Vivienne Gepp, MSc. 3 de junio de 2011 Objetivos • Conocer las principales técnicas que se usan para aislar hongos fitopatógenos. • ¿de dónde? • ¿cómo? ¿De qué aislar? ¿De qué aislar? ¿De qué aislar? ¿Cómo aislar hongos? • Objetivo: – obtener un cultivo puro del patógeno • Técnicas de aislamiento: – desde el signo – desde tejido afectado – indirecto Aislamiento directo a partir del signo. • Cuando la muestra vegetal presenta signo es posible tomar una pequeña porción del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo. Aislamiento directo a partir del signo. Aislamiento directo a partir del signo. Inducción del signo • Cámara húmeda Semillas • Rollo de papel absorbente – desinfección previa ? – 200 ppm 2,4D ? – -18 a -20ºC por 24 h ? • Medio de cultivo – PDA + antibiótico Aislamiento a partir de trozos vegetales • Sembrando trozos de tejido vegetal de la zona de avance del patógeno . Aislamiento a partir de trozos vegetales Aislamiento a partir de trozos vegetales Aislamiento indirecto • Inocular tejido/órgano sano • Aislar desde zona de avance Uso de cebos • Para capturar Phythophthora spp del suelo o agua: – trozos de manzana verde – trozos de limón Obtención de colonias puras • Trozo de hongo - ¿de dónde? Obtención de colonias puras • Trozo de hongo - ¿de dónde? Cultivos monospóricos Bibliografía - aislamiento • DHINGRA, O.D.; SINCLAIR, J.B. 1985. Basic plant pathology methods. Boca Raton : CRC, 355 p. • FOX, F. T. V. 1993. Principles of diagnostic techniques in plant pathology. Wallingford : CAB International, 213p. • FRENCH, E.R. y HERBERT, T. 1980. Métodos de investigación fitopatológica. Libros y materiales educativos, nº 43. San José, Costa Rica, IICA. 289p.
