PRO-IA-DN-UNP-06.43

•.
•
INTENDENCIA DE ADUANAS
PROCESO:
DE GESTiÓN ADMINISTRATIVA Y CONTROL
SUBPROCESO:
Procedimiento
PRO-IA-DN-UNP-06.43
DETERMINACiÓN DE ALCOHOLES (SUPERIORES) Y
ACETATO DE ETILO EN LICORES DESTILADOS.
MÉTODO POR CROMATOGRAFIA DE GAS
ELABORADO POR:
Fecha (dd mm aa)
11 de agosto de 2010
Nombre Completo
Fabiola Isabel Monroy de
Javier
Puesto que ocupa
Jefe del Laboratorio
Quími~Fiscal
Versión
1
No. Folios
20
REVISADO POR:
APROBADO POR:
~20\O
Marvi7
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/efe de.!-.....
/
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Herrera
,~ .. ,~ .. .u
I
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Monroy
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Determinación de Alcoholes (superiores) y Acetato de Etilo en Licores Destilados,
Método por Cromatografía de Gas
Versión 1
29 de septiembre de 2010
1. Objetivo
Proveer al personal del Laboratorio Químico Fiscal (LQF). la metodología para realizar el análisis de determinación de
alcohol etílico o determinación del grado alcohólico real, en muestras de bebidas alcohólicas destiladas recibidas, para dar
cumplimiento al Decreto número 536 del Congreso de la República de Guatemala, "Ley de Alcoholes , Bebidas Alcohólicas
y Fermentadas·.
11. Alcance
El presente procedimiento lo debe aplicar el Analista del LQF, a todas las muestras de alcohol y bebidas alcohólicas
destiladas que ingresan, para la determinación del grado alcohólico real o porcentaje de etanol en volumen de cada una.
Inicia desde que se establece el método para realizar el análisis, según se determine por medio del procedimiento de
análisis fisicoquímico PRO-IA-DN-UNP.06.20 y finaliza con el registro de los resultados obtenidos por dicho análisis en el
formato de informe de análisis fisicoquímico y su traslado para revisión, conforme al procedimiento referido.
111. Actores Involucrados
ro~~edimiento
Analistas delll",l)or",tnlrin Químico Fiscal
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Método por Cromatografia de Gas
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IV. Marco Legal y Documentos Relacionados
Decreto número 536 del Congreso de la República de Guatemala, "Ley de Alcoholes , Bebidas Alcohólicas y Fermentadas"
Método 9.9091 -9. descrito en "Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, AOAC , 14th
edition, 1984"
Método AOAC 26.1 .30; "Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, AOAC, 18th edition,
968.09 Alcohols (Higher) and Ethyl Acetate in Distilled Liquors. Gas Chromatographic Method. First Action 1968. Final Action
1969"
Método para la determinación de alcohol y componentes secundarios, del Laboratorio Unificado de Control de Alimentos y
Medicamentos, LUCAM, del Ministerio de Salud Públ ica y Asistencia Social de Guatemala
Norma Guatemalteca Recomendada (Obligatoria), COGUANOR NGO 33 010 h 13
Norma ISO 17025:2005 "Requisitos generales para la
comn",t,~.iir:ia
de
laboratorios de ensayo y calibración"
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Método por Cromatografía de Gas
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v.
Normas Internas
1. Previo a determinar el método de análisis a utilizar para identificación o determinación de materias y al finalizar el análisis,
deben seguirse los lineamientos establecidos en el procedimiento para Análisis Fisicoquímico, número PRO-IA-DN-UNP06.20.
2. La determinación de alcoholes y acetato de etilo en licores destilados se debe realizar con el cromatógrafo de gas. La
descripción de este equipo se da en el anexo 2, para más referencia.
3. Todos los reactivos que se utilicen deben ser de calidad analítica reconocida, el agua debe ser destilada o de pureza
equivalente (ver Anexo 2) .
4. El analista debe seguir los lineamientos del presente procedimiento para determinación de alcoholes y de productos
congenéricos, según se describe en el anexo 3 de este procedimiento, si tuviera alguna duda puede consultar los manuales
correspondientes o verificar los resultados con la jefatura del laboratorio.
5. El informe de análisis debe llenarse con la información uu'" / ',,,
Fisicoquímico, número PRO-IA-DN-UNP-Oo.20.
en la norma 9 del procedimiento de Análisis
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VI. Narrativa
1
Analista del LQF Establecido el m
a seguir para
de
alcoholes (superiores) y acetato de etilo, según lo indicado en el
procedimiento PRO-IA-DN-UNP-06.20, procede con el análisis de la
muestra.
i
actividades según se
en el instructivo
Determinación de alcoholes (supel·iore.s).
acetato de etilo por
de
del anexo
resultados en el formato
en
para revisión, según se describe en
análisis
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VII.
rama de FI
rama
Analista del LQF
1.Establece el
método a seguir,
según PRO-LAON-UNP-OB.20
2. Realiza el
I
segUn Instructivo de
Detenninaci6n de
alcoho6es (superiores)
Ver Anexo 1.
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VIII. Registros
Nombre del Registro
Tipo de Registro (papel/electrónico)
Informe de análisis
Papel y digital (software)
IX.
Glosario
Productos congenéricos . Son compuestos qu ímicos formados nrilor.ilo"l,mAntA durante los procesos de fermentación y
maduración, y en menor escala durante la destilación por
entre algunos ácidos orgánicos con el alcohol
etílico para formar esteres. Los productos congenéricos contri
bebida alcohólica el sabor y aroma propios de la
materia prima con que ésta se elabora. Los compuestos
ésteres, aldehídos, ácidos orgánicos, alcoholes
superiores y
Nota. Los
pr~IUUClUIS r.lnn(1Arlérir.n~\ se
designan también
nomb~ de ilrnnl~r",7"~.
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x. Listado de Anexos
Tipo de Anexo:
Fonnatos I Fonnulirloe;
Requisitos Requeridos (REQ;
Instructivo I Gula (INS);
Identificación del
Anexo
ANEXO 1
Nombre del Anexo
mS,IrIJClI\rn
para
Versión
(superiores)
n/a
2
n/a
3
n/a
4
de
n/a
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ANEXO 1 INSTRUCTIVO PARA DETERMINACiÓN DE ALCOHOLES (SUPERIORES) Y ACETATO DE
ETILO EN LICORES DESTILADOS, MÉTODO POR CROMATOGRAFíA DE GAS
se
Analista de
LQF
Analista de
3.
4.
mna
I
condiciones descritas en el anexo 2
Inyecta la
de la muestra y
Si es necesario. verifica la respuesta
de
en
los
en
el manual de equipo, ajusta el
I de validación del método.
estándar, según se
se
con
en
en
"'U"UdIUd
Herrerr:
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en el
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ANEXO 2
Cromatografía
A. Aparato
a. Cromatógrafo de gas. Equipado con detector de llama de ionización. En el LOF se utiliza un cromatÓQrafo marca
Shimadzu, modelo 2010 equipado con los detectores de llama de ionización (FPD), de captura de electrones (EC) yel
detector selectivo para Nitrógeno y Fósforo (NPD) .
b. Columna . 23 % Carbowax 1500 (w/w) en Chromosorb W (60-80 mesh, lavado con ácido) o equivalente. En el LQF se
utiliza una columna marca Alltech, con fase AT™-Petro, de 100 m. de longitud, con diámetro interno de 0.25 mm., grosor
de film de 0.50 ~m , serie No. 507344, utilizando N2 como gas portador.
c. Parámetros aproximados. Temperatura en la columna 70 OC (isotérmica); detector e inyector 150 OC; flujo de gas
portador He 150 mUmin. En el LOF, se emplean las siguientes condiciones: temperatura del inyector de 150 OC Y del
detector 220 OC; en el horno de la columna se utiliza una rampa de temperatura de 90 a 170 OC., utilizando N2 como gas
portador, con un flujo de 0.7 mUmin.
d. Jeringa. De 1O ~L, Hamilton Co. No. 701 , o equivalente.
modelo AOC -20i con jeringa de 10 ~L Y capacidad de inv!~ción
1.0 ~L de cada l))IJ<estI~
Las condicio
soluciones
s óptimas de peración varían de acuerdo
Se d be hacer el ajuste de n,.,rÁn,et,lOs
'ng. ,M:;±(ool~
J9f! DEPA
Jefe de
~
utiliza un inyector automático marca Shimadzu,
lIorn,.'I.",. de 6 muestras; programado para inyectar
~~__~::--_
inActru.mento
y deben ser determinadas utilizando
.~~~ agudeza de pico y óptima separación.
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Utilizando un estándar de alta pureza de n-propanol, debe haber una completa separación entre los picos de n-propanol y
etanol en la línea base.
B. Reactivos:
Entre los reactivos utilizados se mencionan los siguientes:
a.
b.
c.
d.
e.
f.
Alcohol Isobutílico.
Alcohol Isoamílico.
Alcohol n-propílico
Acetato de Etilo
Alcohol n-butílico
Soluciones de estándar interno de alcohol n-butílico:
i. Alto Nive/.- Diluir 10 mL de n-butanol a 100 mL. , con etanol al 40 % . (1 mL., añadido a una muestra o
solución estándar de 100 mL., es aproximadamente equivalente a 81 g. de n-butanol por 100 L.)
ii. Bajo Nive/.- Diluir 1 mL de n-butanol a 200
etanol a 95 %. (1 mL., añadido a una muestra o
solución estándar de 100 mL., es
uivalente a 4.1 g. de n-butanol por 100 L.)
g. Solución estándar de alto nivel de alcoholes n_r\rn,ní
'f;:t,~('k. -
Pesar con exactitud 1
mL., de acetato de etilo
isoamílico y acetato de etilo.
mL de alcohol isobutílico, 2 mL de alcohol
"fn,r"clt\ de 100 mL y diluir a volumen con alcohol
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ii.
Solución Intermedia .- Diluir 10 mL de la Sol. Stock a 200 mL. , con alcohol al 40 %.
iii. Solución de Trabajo .- (Aproximadamente 40.2, 41.1, 81.2 Y 45.1 g/ 100 L. , de alcohol n-propílico,
alcohol isobutílico, alcohol isoamílico y acetato de etilo, respectivamente) . Diluir 5 mL de solución
Stock a 100 mL con etanol al 40 % . Añadir 1 mL de solución de estándar interno de alto nivel de nbutanol (f) (1), Y mezcle. Esta solución debe prepararse (fresca) cada semana.
h. Solución de trabajo de bajo nivel de alcohol n-propílico, isobutílico, isoamílico y acetato de etilo.
(Aproximadamente 2.0, 2.1, 4.1 Y 2.3 g/ 100 L. , de alcohol n-propílico, alcohol isobutílico, alcohol isoamílico y
acetato de etilo, respectivamente) .
Diluir 5 mL de solución intermedia de alto nivel (g) (2), a 100 mL. , con
alcohol etílico al 95 %.
Añadir 1 mL de solución de estándar interno de bajo nivel, (f) (2) Y mezclar. Esta
solución debe prepararse (fresca) cada semana.
i.
Soluciones de Etanol Absoluto: Prepare soluciones patrón de concentraciones similares a la de la muestra.
Preparar soluciones estándar de similar concentración a las de la solución de la muestra, si estas últimas difieren
grandemente (de los estándares de alto o bajo nivel).
c. Determinación:
Hacer una inye'CCC~;i~ó~n~~~~ de 10 ~L. , de la muestra, para
total (contenido
I
substraer esta c,
estándar
nivel, dependiendo de
",Ion,..,¡" de n-butanol. (Si se encuentra presente,
p~·"'n,rl".
ac,~talto
interno) . Añadir 1 mL de solución de
de etilo) , a 100 mL de la porción de la
Tribublrla
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muestra en un balón aforado e inyectar en el cromatógrafo alícuotas de 10 ¡.¡L., de la muestra y de la solución estándar en
triplicado .
Medir la altura del pico de n-propanol, alcohol isobutílico, alcohol isoamílico y acetato de etilo con exactitud cercana a 0.05 cm
y calcular la razón entre las alturas de pico de cada compuesto y la altura del n-propanol (estándar interno) en las soluciones
de muestra y estándar. (Para una determinación más exacta de alcohol isoamílico, utilice el área de los picos.)
x = H x S / H'
Donde: X = concentración del alcohol superior o del acetato de etilo en la porción de la muestra (g / 100 L) ;
H = altura de pico (o área del alcohol isoamílico) razón entre el alcohol superior o el acetato de etilo
al n-butanol, en la porción de la muestra;
H' = altura de pico (o área del alcohol isoamílico) razón entre el alcohol superior o el acetato de etilo
al n-butanol, en la solución estándar (g / 100 L).
La suma de la concentración de alcohol isoamílico y alcohol isobkl1:t1l\"l<l es casi equivalente a la concentración de aceite de
fusel , como se determina en el método AOAC 936.10 (ver 26.1 .2
CAS-141 -78-6 (acetato de etilo)
.
CAS-78-83-1
CAS-71 -23-8 {,.¡f',nhnl n-plropi
CAS-71
,tíli",nl.
í
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Anexo 3
Determinación del grado alcohólico y productos congenéricos
Cristalería de Laboratorio:
Matraces volumétricos , de 100cm 3 .
Pipetas volumétricas, de 1, 2, 4, 5 Y 10 cm 3 Ó pipetas graduadas de 4 y de 10 cm 3 , Ó bu reta graduada de 10 mL.
Microjeringa, de 10 11L., o inyector automático con jeringa de 10 11L.
A un matraz volumétrico de 100 cm 3 se agregan 10 cm 3 de la muestra sin diluir, 7cm 3 de acetona como estándar interno, y se
completa el volumen con agua destilada; se prepara la solución estándar, en un matraz volumétrico de 100 cm 3 con 7 cm 3 de
acetona, 10 cm 3 de alcohol etílico de concentración similar a la muestra y se lleva a volumen con agua destilada; la
temperatura ambiente debe ser la misma al preparar la solución de la muestra y la solución del estándar, así como durante
todo el procedimiento para no tener error en la medición de los volúmenes de las soluciones.
La solución del estándar se prepara con 10 cm3 de Etanol de pureza yeltQcida en concentración similar a la muestra. Anota la
temperatura.
Se ajusta el c~~m~~gr,~~a~l!aS condiciones descritas en el
y a continuación
en triplicado, de la solución mrtró,rI
La respu'estqfdlel cromatógrafo
verificarse después de
inví~"t,,,
triplicado 5 I1L de la solución de la muestra
O soluciones de muestras.
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Expresión de los resultados. Los resultados se expresen en porcentajes en volumen y se calculan aplicando la fórmula
siguiente:
A*E*S
e =-'--~-'­
A, * E,
En laque:
C=Contenido de etanol, expresado en centímetros cúbicos por 100cm 3 de muestra.
A=Área del pico del estándar interno de la solución estándar de alcohol etílico.
E=Área del pico del etanol de la solución de la muestra.
S=Concentración de etanol en la solución estándar de alcohol etílico, expresada en centímetros cúbicos por 100cm3 de
solución .
A,=Área del pico del estándar interno de la solución de la muestra.
E,=Área del pico del etanol de la solución estándar de alcohol etílico.
Determinación de productos congenéricos
Cristalería de Laboratorio:
Matraces
Microjeringa,
Pipetas olur}létric,as
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a. Se ajusta el cromatógrafo a las condiciones descritas, se efectúan inyecciones preliminares de 10 IlL de la muestra sin diluir,
para verificar la ausencia de alcohol n-butílico; si dicho alcohol está presente al realizar los cálculos debe restarse esta
cantidad de la cantidad total que se determine, de alcohol n-butílico en la muestra, después de agregar al estándar interno.
b. A 100cm3 de la muestra se agrega 1cm 3 de la solución de estándar interno, se mezcla y se inyectan por triplicado 10 IlL de
la muestra con el estándar interno y a continuación 10 IlL, también en triplicado, de cada una de las soluciones estándares
de trabajo.
Expresión de los resultados . Los resultados se expresan en miligramos por 100cm 3 de la bebida alcohólica destilada, para cada
compuesto volátil analizado, y se calculan aplicando la fórmula siguiente:
e
I
=
A, * E, * SI
A, * E3
En la que:
C l =contenido del compuesto volátil expresado en miligramos por 100cm3 de bebida alcohólica destilada; véase nota.
A 2= Área del pico del estándar interno en la solución estándar de trabaj
espondiente.
E2= Área del pico del compuesto volátil en la solución de la muestra.
Sl= Concentración del compuesto volátil en la solución estándar de abajo, ex esada en miligramos por 100 cm 3 .
~= Área del pico del estándar interno de la solución de la mue Ira, después de restarle el área del pico del n-butanol que
pudiera haber estado
originalmente en la muestra.
E3= Área del pico
volátil en la solución estándar e trabajo corresp
Nota. Si se
alcohólico y
resultados en base a 100 cm 3 de JICOhOI a
ro se divide el valor de C l entre el grado
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Informe de Ensayo o Análisis
En el informe de análisis se debe indicar lo siguiente:
El método usado y el resultado obtenido en cada determinación.
Cualquier condición no especificada en la norma, o señalada como opcional, así como cualqu ier circunstancia que pueda haber
influido en los resultados.
Todos los detalles necesarios que permitan la completa identificación de la muestra.
Correspondencia
Para la preparación del presente procedimiento se tomaron en cuenta los siguientes documentos:
a) Método 9.9091-9. descrito en "Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, AOAC , 14th
edition, 1984";
b) Método para la determinación de alcohol y componentes secund . 5, del Laboratorio Unificado de Control de Alimentos y
Medicamentos, LUCAM, del Ministerio de Salud Pública y Asist cia
cial de Guatemala.
c) Método AOAC 26.1.30; "AOAC Official Method 968.09. Alco Is (High
and Ethyl Acetate in Distilled
Liquors". Gas Chromatographic Method. First Action 1968. inal Action 969.
d) Norma Guatemaltec
dada, COGUANOR NGR 3 010 h 13
f(J>,.,~Ht",r(
'C,'-¡'I<".':'I<M"TIVu
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ANEXO 4
Ejemplo de informe de Laboratorio
LABORArORlO Q(IMIC() RSCAL
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LISTA DE CONTROL DE CAMBIOS
No.
Fechada
V.,.lón ".bcnc:l6n
1
Septiembre
JuatlllCIICI6n del c.mblo
Primera versión
2010
\
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Intendente d
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LISTA DE DISTRIBUCiÓN
Número de
Puesto que ocupa
Jefe del Departamento Operativo
Ubicación FIsIca
Coplas
Contro.....
En
das
Archivo digital
Jefe de la Unidad de Laboratorio
Químico Fiscal
Archivo digital
Laboratorio
Archivo digital
Supervisor
del
Químico Fiscal
Analistas de Laboratorio Químico
Archivo digital
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