Presentación de PowerPoint - Instituto Nacional de Salud

AVANCE DEL ESTUDIO PILOTO EN
ESPECTROMETRÍA DE MASAS EN TÁNDEM
Dirección Redes en Salud Pública
Noviembre 13 de 2015
TEMAS A TRATAR
• Espectrofotometría vs Espectrometría
• Espectrometría de masas en tándem
• Estudio piloto por ms/ms
• Avances
Declaro no tener conflicto de intereses
TEMAS A TRATAR
• Espectrofotometría vs Espectrometría
• Espectrometría de masas en tándem
• Estudio piloto por ms/ms
• Avances
ESPECTROFOTOMETRÍA
•Medición de la cantidad de luz (energía radiante)
absorbida o trasmitida por una solución con una
cantidad de soluto desconocida en función de la
longitud de onda utilizada y comparada contra un patrón
•La Ley de Beer: la cantidad de luz absorbida por un
cuerpo depende de la concentración en la solución.
•La Ley de Lambert: la cantidad de luz absorbida por un
objeto depende de la distancia recorrida por la luz.
• A= - log T
•Análisis óptico - radiaciones ultravioletas, visibles e
infrarrojas - técnica no destructiva
•Aplicaciones: química sanguínea
http://www.materialesdelaboratorio.net/portfolio/patron-para-espectrofotometria-uv-visible/
ESPECTROMETRIA DE MASAS EN TANDEM
Técnica analítica en la que moléculas y átomos de una muestra son ionizados y
separados de acuerdo a su relación masa/carga (m/z) y posteriormente registrados
ESPECTROMETRIA DE MASAS EN TANDEM
Cuantificación de compuestos conocidos – tamizaje
Identificación de compuestos desconocidos
Identificación de productos metabólicos
Indicadores de procesos biológicos normales, procesos patogénicos o respuestas
farmacológicas
Elucidación de la estructura de moléculas orgánicas y biológicas
Determinación del peso molecular de péptidos, proteínas y oligonucleicos
Identificación de los compuestos de cromatogramas en capa fina y papel
Determinación de secuencias de aminoácidos en muestras de polipéptidos y proteínas
Detección e identificación de especies separadas por cromatrografía y electroforesis capilar
Identificación de drogas de abuso y sus metabolitos en sangre, orina y saliva.
Búsqueda de biomarcadores – Enf Cardiovasculares, oncología, reumatología y nefrología
Proteómica – modificaciones postraduccionales
Determinación de residuos de pesticidas en alimentos.
Control de compuestos orgánicos volátiles en el agua de suministro
ESPECTROFOTOMETRÍA VS ESPECROMETRÍA
ESPECTROFOTOMETRÍA
ESPECTROMETRÍA
TÁNDEM
DE
MASAS
EN
•Técnica analítica que se basan en la absorción
de energía electromagnética que lleva una
molécula de su estado basal a un estado
excitado y luego vuelve al basal.
•No utiliza ningún tipo de radiación por
lo que no puede ser considerada una
técnica espectroscópica.
•Los procesos que se originan son puramente
físicos, no se altera la naturaleza química de la
molécula, no son destructivas.
•Es destructiva, forma y utiliza iones de
las moléculas.
•La muestra se puede recuperar
•La muestra no se puede recuperar
TEMAS A TRATAR
• Espectrofotometría vs Espectrometría
• Espectrometría de masas en tándem
• Estudio piloto por ms/ms
• Avances
ESPECTROMETRIA DE MASAS EN TANDEM
(MS/MS)
ESPECTROMETRIA DE MASAS EN TANDEM
(MS/MS)
software
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
ESPECTRÓMETRO DE MASAS
1
2
3
4
5
1. INTRODUCCIÓN DE LA MUESTRA
2. IONIZACIÓN DE LA MUESTRA
Ionización por Electrospray (ESI)
www.perkinelmer.com
www.chm.bris.ac.uk
ESPECTRÓMETRO DE MASAS
1
2
3
4
5
3. ANALIZADOR DE MASAS
Entrada de gas de colisión - Argón
Fuente
Detector
Primer Cuadrupolo Celda de colisión Segundo Cuadrupolo
Q1
Q3
Q2
Ión seleccionado
Ión precursor
Iones producto
Iones procedentes
para la detección
de ESI
www.eez.csic.es
4. DETECTOR
Dinodos
5. SISTEMA DE DATOS
TEMAS A TRATAR
• Espectrofotometría vs Espectrometría
• Espectrometría de masas en tándem
• Estudio piloto por ms/ms
• Avances
ERRORES INNATOS DEL METABOLISMO (EIM)
Comprenden una serie de enfermedades
genéticas, habitualmente monogénicas y de
herencia autosómica recesiva.
Fisiopatología
Grupo I: involucra la alteración en la síntesis o
catabolismo de moléculas complejas
Grupo II: las alteraciones que conllevan a
intoxicación por acúmulo de metabolitos
Grupo III: los defectos en la síntesis o utilización
de energía a nivel celular.
HIPÓTESIS
Se plantean las siguientes preguntas:
¿Cuáles son los puntos de corte para la medición de moléculas
pequeñas para identificar EIM en niños colombianos?
¿Un niño identificado con un EIM puede recibir tratamiento y
seguimiento?
¿Cuáles son los limitantes y barreras que se presentan para que
un niño con un EIM pueda recibir su tratamiento y seguimiento
adecuados y oportunos?
OBJETIVOS DEL ESTUDIO PILOTO
Objetivo general
Analizar variables asociadas a la implementación del tamizaje
expandido de Errores Innatos del Metabolismo mediante la
metodología de espectrometría de masas en tándem.
OBJETIVOS DEL ESTUDIO PILOTO
Objetivos específicos
1. Establecer los puntos de corte poblacionales, para las moléculas
pequeñas del metabolismo de los aminoácidos, los ácidos orgánicos y
los ácidos grasos de cadena ramificada, corta, mediana y larga, en
sangre de talón de recién nacidos con 24 horas de vida y exposición
previa a alimentación, mediante análisis por ms/ms.
2. Identificar los casos probables de tener un EIM que serán notificados
al sistema de Salud (EPS, IPS) para iniciar el proceso de diagnóstico,
manejo y seguimiento pertinentes.
OBJETIVOS DEL ESTUDIO PILOTO
Objetivos específicos
3. Caracterizar el proceso de tamiz neonatal, mediante la cuantificación del
número de casos por patología tamizada, según sean probables,
confirmados, re-tamizados, tiempo de entrega de resultados,
oportunidad en el re-llamado, oportunidad en el inicio de tratamiento,
oportunidad en el seguimiento y otros parámetros relacionados con el
proceso.
OBJETIVOS DEL ESTUDIO PILOTO
Objetivos específicos
4. Determinar las posibles barreras de acceso al diagnóstico, manejo y
seguimiento de los casos confirmados y otros aspectos operativos del Tamiz
Neonatal que puedan ser potenciales limitantes para que el programa sea
efectivo.
5. Presentar a las Autoridades de Salud las evidencias sobre los resultados
obtenidos mediante Tamizaje neonatal por ms/ms
METODOLOGÍA DEL ESTUDIO PILOTO
Tipo de estudio: Estudio analítico - descriptivo de tipo transversal
Tamaño de la muestra: 30.000 neonatos
Selección de las maternidades (IPS) de estudio (mx de cordón y alta antes de las 24 h)
•Tener un número elevado (>100) de partos al mes.
•Tener organizado el tamizaje de hipotiroidismo congénito.
•Contar con capacidad de atención de alto riesgo.
•Atención de diferentes regímenes de aseguramiento.
•Tener actividad rutinaria de notificación al SIVIGILA.
•Tener comunicación fluida con el Laboratorio de Salud Pública Departamental
Consentimiento informado
ESTUDIO PILOTO
Se pretende mostrar que mediante el estudio por perfiles
metabólicos, es posible realizar el tamizaje neonatal en muestras
de 24 horas, con un resultado entregado de manera oportuna,
para prevenir el desarrollo de discapacidad intelectual y física,
evitar muertes perinatales y contribuir a la formulación de la
política en Salud Pública para alcanzar uno de los objetivos de
desarrollo del milenio, que es reducir la mortalidad infantil.
TEMAS A TRATAR
• Espectrofotometría vs Espectrometría
• Espectrometría de masas en tándem
• Estudio piloto por ms/ms
• Avances del estudio
AVANCES
1. Establecer los puntos de corte poblacionales
Valores de referencia de la casa comercial y ajustar a los 2000 y
cada 1000 nuevos casos, para cada analito.
Con estos valores se identifican los casos positivos.
Los controles internos tienen en cuenta ±3 sd de los valores del
certificado respectivo.
Se participa en el programa de control de calidad NSQAP del CDC
de Atlanta USA, para tamizaje neonatal.
AVANCES DEL ESTUDIO
2. Identificar los casos probables de tener un EIM que serán notificados al sistema
de Salud
Caso positivo para EIM-- EPS -- confirmar el diagnóstico, manejo y seguimiento de
acuerdo con la normatividad vigente en el País.
Sistema de vigilancia en Salud Pública, SIVIGILA – seguimiento de anomalías
congénitas y los problemas funcionales como los EIM.
No tiene el alcance de confirmar diagnóstico ni hacer tratamientos, pero sí dar
apoyo a la familia en:
•Asesoramiento genético
•Orientación a la familia
•Recomendaciones a la EPS
AVANCES DEL ESTUDIO
3. Caracterizar el proceso de tamizaje neonatal
Registro de las variables en el software Enterprise al momento del
ingreso a la central de muestras del INS.
El análisis se hará por medio de estadística descriptiva y análisis
geográfico.
AVANCES DEL ESTUDIO
4. Determinar las posibles barreras de acceso al diagnóstico, manejo y
seguimiento de los casos confirmados
Aplicación de un instrumento de medición, en formato de encuesta
estructurada para aplicar de forma presencial a las madres o padres de
los casos que sean captados por el tamizaje con resultado positivo.
Se analizará la información obtenida para captar la percepción del
usuario
AVANCES DEL ESTUDIO
5. Presentar a las Autoridades de Salud las evidencias sobre los resultados
obtenidos mediante tamizaje neonatal por ms/ms
Presentar documento de justificación basado en evidencias para la inclusión del
Tamizaje Expandido en la atención del recién nacido sano bajo la “Estrategia de cero
a siempre” de la Presidencia de la república.
Análisis de frecuencias de EIM encontrados en el estudio.
Análisis de las barreras de acceso al Tamizaje neonatal.
Análisis de costos directos por caso detectado en este estudio.
Contextualización en el entorno mundial del tamizaje neonatal
Importancia para la reducción de la mortalidad infantil
AVANCES DEL ESTUDIO
DEPARTA
MENTO
INICIO ENVIO INICIO ENVIO
MUESTRAS RESULTADOS RECIBIDAS ANALIZADAS RECHAZADAS
Mayo de
Atlántico 2013
Huila
Junio de
2013
Julio de
2015
1735
746
989
Mayo de
2015
1160
821
2209
septiembre Abril de
Risaralda 2014
2015
Cauca
febrero
2015
Mayo de
2015
Boyacá
Septiembre Noviembre
2015
2015
%
GOTAS
SOBRESATU COAGULA INFORMACIÓN INFORMACIÓN
INSUFICIENTE MÚLTIPLES HEMOLIZADA RADAS
DAS
COMPLETA
INCOMPLETA
53
117
7
14
2
154
222
339
57%
29,20
%
24
126
9
0
1
109
475
2153
56
2.5%
52
4
0
0
0
1161
1048
139
126
13
9,30%
2
11
0
0
0
48
91
1133
1054
79
7%
19
52
4
0
4
945
188
6376
4900
1476
150
310
20
14
7
2417
2024
AVANCES DEL ESTUDIO
DEPARTAMENTO
# MUESTRAS INICIO ENVIO MUESTRAS
Magdalena
2
Agosto de 2015
Antioquia
1
Septiembre de 2015
Bogotá
10
Septiembre de 2015
AVANCES DEL ESTUDIO
CALIDAD DE LA MUESTRA
ADECUADA
INADECUADA
AVANCES DEL ESTUDIO
INADECUADAS
AVANCES DEL ESTUDIO
ADECUADAS
GRACIAS
Dirección Redes en Salud Pública
Subdirección Laboratorio Nacional de Referencia
Grupo Genética Crónicas
Dora Beatriz Robayo G
[email protected]