M-021 - Universidad Nacional del Nordeste

Resumen: M-021
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Diagnóstico molecular de infección congénita por citomegalovirus (CMV)
en las ciudades de Resistencia y Corrientes.
Marín, Héctor M. - Gorodner, Jorge O.
Instituto de Medicina Regional
Av. Las Heras 727. CP: 3500. Resistencia. Chaco
03722 – 422793 – 428213
Antecedentes
La infección por citomegalovirus (CMV) es muy frecuente en nuestro entorno, siendo de elevada morbi-mortalidad en
pacientes inmunodeprimidos (transplantados, pacientes con SIDA, neoplásicos, etc) que pueden desarrollar
complicaciones como neumonía, hepatitis, encefalitis y coriorretinitis. También es de alto riesgo en los neonatos, que la
adquieren durante el periodo fetal y que desarrollan la enfermedad de inclusión citomegálica. Algunos de los siguientes
signos y síntomas característicos de esta patología son: retraso del crecimiento intrauterino, petequias, púrpuras y
trombocitopenia, hepatoesplenomegalia, ictericia, microcefalia, coriorretinitis, calcificaciones cerebrales, hipoacusia
sensorineural (uni o bilateral).
Más del 80% de los neonatos sintomáticos y aproximadamente un 15 % de asintomáticos desarrollan secuelas durante la
infancia; entre las más probables se encuentran: retardo del crecimiento psicomotriz u alguna otra anormalidad
neurológica(70%), hipoacusia sensorineural (50%), defectos de la dentición (30%) y coriorretinitis(15%). El
diagnóstico oportuno es muy importante ya que estas secuelas son progresivas y pueden ser tratadas a tiempo con
agentes antivirales (ganciclovir, foscarnet, cidofovir), además deben someterse a exámenes audiométricos y
evaluaciones del desarrollo seriadas.
El CMV infecta personas de todas de las edades, razas y niveles socioeconómicos. En nuestro país tiene una
distribución general del 88%. A pesar de estas estadísticas, no existen, a la fecha, datos epidemiológicos concretos
acerca de infección congénita por citomegalovirus en la región nordeste de nuestro país.
Materiales y Métodos
Se estudiaron 75 neonatos de hasta diez días de vida, asintomáticos y síntomáticos, que son aquellos que presentan
algún patrón clínico o parámetro de laboratorio alterado y que se puede relacionar con infección intrauterina por
citomegalovirus.
También se estableció, en la ficha epidemiológica, la búsqueda de alguna infección viral (sea CMV o no) detectada en
la madre durante el embarazo, para su posterior correlación.
Se aplicó Nested-PCR que es una variación de la técnica de PCR tradicional (reacción en cadena de la polimerasa), que
consiste en una segunda amplificación del primer producto mediante cebadores “primers” que flanquean un segmento
ADN interno de este producto, aumentando aún más la sensibilidad y especificidad.
Material de muestra: Para obtener la muestra (mancha de sangre seca) se debe punzar el talón del bebé con lanceta
estéril, y se colocan 2 o 3 gotas de sangre en la tarjeta de screening neonatal, se deja secar la gota a temperatura
ambiente por tres horas como mínimo, luego se puede proceder al ensayo.
Fuentes del material estudiado: Las muestras obtenidas provienen del Servicio de Neonatología del Hospital “Julio C.
Perrando” de la ciudad de Resistencia, y del Servicio de Neonatología del Hospital “Juan R. Vidal” de la Ciudad de
Corrientes.
Discusión de Resultados
Se llevan estudiadas hasta el momento 75 muestras con el siguiente análisis:
Tipo de muestra
Positivos
Negativos
En proceso* Total
Sangre seca en papel
13
42
20
75
En proceso*: se considera a aquellas muestras que se encuentran en la fase de extracción de ADN.
Resumen: M-021
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Distribución de positivos de acuerdo a la presencia de signos o síntomas
Neonatos con clínica o signos de laboratorio
Neonatos asintomáticos
9
4
Fotografía digital correspondiente a una corrida
electroforética en gel de agarosa teñida con
bromuro de etidio.
Obsérvense las manchas blanquecinas (bandas)
de las muestras positivas y sus correspondientes
controles.
Conclusiones
Si bien aún no se ha establecido la prevalencia de infección congénita por CMV, estos resultados preliminares permiten
evaluar la frecuencia de positividad entre la población sintomática y la asintomática, y por lo tanto la validez de los
datos clínicos indicadores de esta patología.
Bibliografía
1_ FIELDS, D.M; KNIPE, P.M; HOWLEY, M.; LIPPINCOTT, L. Fields Virology, Third Edition, Raven Publishers,
Philadelphia 1996. Chapter 76, 2447-2479 and chapter 77, 2493-2512.
2_ CARBALLAL- OUBIÑA .Virología Médica.. 2º Edición. Capítulo 19: 327-334.
3_ NELSON, M.; DEMMLER, L. M. Cytomegalovirus infection in the pregnant mother, fetus and newborn infant.
Clin. Perinatol. 1997; Chapter 24: 151-160.
4_ MURRAY-BARON-PFALLEN-YOLKEN. Manual of Clinical Microbiology. 7ªEdition. American Society for
Microbiology. Chapter 66: 888-895.
5_ Apuntes adquiridos durante el curso “Infecciones de origen viral en la embarazada y el recién nacido”,dictado en el
Instituto Malbrán. agosto del 2000. Carga horaria:50 hs.
6_ Apuntes adquiridos durante ”Curso teórico de Diagnóstico Virológico en el Laboratorio de Bioquímica Clínica”,
realizado en la ABA, abril del 2000. Carga horaria: 80 hs.
7_ DUFF, P. Cytomegalovirus infection in pregnancy. Infect. Dis. Obst. Gynecol. 1994, 2: 146-152.
8_ MORRIS, D.; SIMS, D.; CHISWICK, M.; DAS, V.; NEWTON, V. E. Symptomatic congenital cytomegalovirus
infection after maternal recurrent infection. Ped. Infect. Dis. J. 1994, 13: 61-64.
Resumen: M-021
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
9_ BALCAREK, K.; WARREN, W.; SMITH, R.; LYON, M. ; PASS, R. Neonatal screening for congenital
cytomegalovirus infection by detection of virus in saliva. J. Infect. Dis. 1993, 167: 1433-1436.
10_ GUERRA, B.; LAZZAROTTO, T.; QUARTA, M.; LANARI, O. J.; BOVICELLI, L.; NICOLOSI, J.; LANDINI,
M.P. Prenatal diagnosis of symptomatic congenital cytomegalovirus infection. Am. J. Obstet. Gynecol. 2000, 183: 476482.
11_ CATES, C.R.; GRAY, J.; ROBERTSON, N.; WALKER. J. Acquisition of cytomegalovirus infection by premature
neonates. J. Infect. 1994, 28: 25-30.
12_ MINAMISHIMA, I.; UEDA, K.; MINEMATSU, T.; UMEMOTO, M.; TAKE, H.; KURAYA, K. Role of breast
milk in acquisition of cytomegalovirus infection. Microbiology-Immunology 1994, 38: 549-552
13)JIM WT, SHU CH, CHIU NC, KAO HA, HUNG HY, CHANG JH, PENG CC, HSIEH WS, LIU KC, HUANG FY.
Transmission of cytomegalovirus from mothers to preterm infants by breast milk. Pediatr Infect Dis J. 2004
Sep;23(9):848-51.
14_ SIA, K.; WILSON, M.; GROETTUM, P. L.; ESPY, J. N.; SMITH, H.; PAYA, F. N. Cytomegalovirus DNA load
predicts relapsing CMV infection after solid organ transplantation. Journal of Infect. Dis. 2000, 181: 717-720.
15_ BALCAREK, K.; WARREN, W.; SMITH, R.; LYON, M. ; PASS, R. Transmision of cytomegalovirus to preterm
infant trough breast milk. Pediat. Infect. Disease. J. 1998; 17: 53-58.
16_ Morgan MA, el-Ghany el-SM, Khalifa NA, Sherif A, Rasslan LR. Prevalence of cytomegalovirus (CMV) infection
among neonatal intensive care unit (NICU) and healthcare workers. Egypt J Immunol, 2003;10(2):1-8.
17_ JOUK, P.S.; CANS, C.; GRATACAP, B. Cytomegalovirus infection at birth: What frequency ?. Med. 1997, 26:
277.
18_ BARBI, -BINDA-PRIMACHE-CLERICI. Congenital cytomegalovirus infection in a northern Italian region.
European Journal of Epidemiology 1998, Pág.: 1-5.
19_ GRACA, A.; SILVERIO, C.; FERREIRA, J.P.; BRITO, A.; ALMEIDA, S.; PAIXAO, P.; PINHEIRO, L.
Congenital or neonatal cytomegalovirus infection?. Acta Med Port. 2004 Jul-Aug;17(4):335-40. Epub 2004 Aug 31.
20_ KERSHISNI, M. M.; KNISELY, A. S.; SUN, C. ; ANDREWS, J.; WITTWER, C. T. Cytomegalovirus infection,
fetal liver disease, and neonatal hemochromatosis. Hum. Patol. 1992, 23: 1075-1080.
21_ BRADFORD, RD; CLOUD, G; LAKEMAN, AD; BOPPANA, S; KIMBERLIN, DW; JACOBS, R; DEMMLER,
G; SANCHEZ, P; BRITT, W; SOONG, SJ; WHITLEY, RJ. Detection of cytomegalovirus (CMV) DNA by polymerase
chain reaction is associated with hearing loss in newborns with symptomatic congenital CMV infection involving the
central nervous system. J Infect Dis. 2005 Jan 15;191(2):227-33. Epub 2004 Dec 16.
22_ NAGY, A; ENDREFFY, E; STREITMAN, K; PINTER, S; PUSZTAI, R. Incidence and outcome of congenital
cytomegalovirus infection in selected groups of preterm and full-term neonates under intensive care. In Vivo. 2004
Nov-Dec;18(6):819-23.