Laboratori de Referència de Catalunya S.A. Información Clínica VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA, Ac-VIH-1/2 INTRODUCCIÓN El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) es el agente causante del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Es un virus ARN que pertenece a la familia Retroviridae, género Lentivirus. El nombre del género describe una de sus principales características: la lentitud y el largo período entre la infección y la enfermedad. La transmisión de la enfermedad se realiza por contacto sexual, a través de jeringas o agujas contaminadas, por transfusiones sanguíneas y por vía transplacentaria. Hasta el día de hoy se han identificado dos tipos de virus de inmunodeficiencia humana, denominados VIH-1 y VIH-2. El VIH-2 es endémico en países del África occidental pero raro en Europa y América. Se han descrito varias proteínas con poder antigénico asociadas con el core (p53, precursora de la p24, principal componente el core, p17, p15, p9, p7) y con la envoltura glicoproteica (gp160, precursora de la gp120 extracelular y gp41 de la membrana) El virus presenta un tropismo específico para la subpoblación linfocitaria T4 . Al alterarse la capacidad funcional de los linfocitos T4, inductores de la respuesta inmune, se origina un profundo deterioro de la inmunidad. La acción patógena viral puede dar lugar a variadas manifestaciones clínicas conocidas con el nombre de síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA o AIDS). El SIDA totalmente desarrollado, aparte de los signos hematológicos (disminución de linfocitos, disminución de los linfocitos T4, inversión del cociente T4/T8, anemia, leucopenia, trombocitopenia), se manifiesta con fiebre continuada, pérdida progresiva de peso, sarkoma de Kaposi e infecciones oportunistas. DIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN POR HIV Diagnóstico directo - Aislamiento del virus en líneas celulares. - Las técnicas de hibridación del ADN y las de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permiten detectar el virus en el organismo incluso cuando el número de partículas víricas es mínimo. La PCR es actualmente, el método más sensible para detectar infección por HIV. Diagnóstico indirecto Se utilizan para confirmar el diagnóstico clínico, determinar la prevalencia de la enfermedad en la comunidad y seleccionar donantes de sangre u órganos: - Enzimoinmunoanálisis (ELISA). Técnica de referencia para despistaje de población. Sensibilidad diagnóstica casi del 100%. Electroquimioluminiscencia. Presenta la misma utilidad que el ELISA, mejorada mediante la detección combinada del antígeno viral (proteína p24) y de los anticuerpos anti VIH-1, VIH-2. -1- Laboratori de Referència de Catalunya S.A. - Información Clínica Western blot. Técnica altamente específica que emplea componentes antigénicos de varias proteínas víricas, reduciendo casi a cero la posibilidad de falsos positivos. Se basa en la electroforesis. UTILIDAD CLÍNICA La determinación de los anticuerpos anti-VIH sirve para detectar infección por el virus HIV. Evolución de los marcadores de la infección A diferencia de otros procesos infecciosos, la presencia de anticuerpos no indica protección sino infección. Una vez que el virus penetra, el antígeno puede detectarse en suero a los 15 días y persiste hasta 3 meses o más. Los anticuerpos contra las proteínas del HIV pueden encontrarse en suero generalmente dentro de 6 a 12 semanas tras contraer la infección, a excepción del período neonatal. Los primeros anticuerpos que se detectan son los anti-p24 y los anti-gp41, que corresponden al estado de portador asintomático que se mantiene durante 1-10 años o más. La reaparición del antígeno precede a la declaración de los síntomas de inmunodeficiencia y se acompaña de la disminución hasta la negativización de los anti-p24. La evolución de la infección se puede resumir en tres fases: primoinfección, período de patencia y fase final. -2- Laboratori de Referència de Catalunya S.A. Información Clínica Primoinfección - Dura unas pocas semanas - Las pruebas serológicas diagnósticas del laboratorio pueden dar negativas aunque el paciente esté infectado.Aunque algunas personas desarrollan anticuerpos alrededor de las 3 semanas tras la exposición, el 97% no lo hace hasta 6 u 8 semanas. En el momento de la infección hay una viremia alta. Período de patencia - Disminución de la viremia en sangre. - Disminución paulatina de los niveles de linfocitos T, CD4 - Se trata de un equilibrio dinámico entre el virus y las defensas del organismo que puede durar muchos años, incluso sin tratamiento, y que explica esta etapa asintomática. Fase final - Incremento de la viremia circulante - Disminución considerable de los linfocitos T, CD4 - Desarrollo de las infecciones oportunistas características del SIDA Evolución de los tres marcadores -3- Laboratori de Referència de Catalunya S.A. Información Clínica MÉTODO Electroquimioluminiscencia. Al aplicar una corriente eléctrica definida se produce una reacción quimioluminiscente cuya emisión de luz se mide directamente con un fotomultiplicador. El presente ensayo VIH de 4ª generación permite detectar simultáneamente y en una única determinación el antígeno p24 del VIH-1 y los anticuerpos antiVIH-1 y anti-VIH-2. Esta prueba no reemplaza los ensayos de detección exclusiva del antígeno del VIH. Las muestras reactivas deben comprobarse mediante técnicas confirmatorias. INTERFERENCIAS El ensayo no se ve afectado por ictericia, hemólisis, lipemia ni biotina. En pacientes en tratamiento con altas dosis de biotina (>5 mg/día) la extracción de muestra no debería efectuarse antes de 8 horas tras la última administración. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Resultados expresados de forma cualitativa: P/N Las muestras reactivas se confirman por Western blot Un resultado negativo de la prueba no descarta la posibilidad de una infección por VIH. Las muestras de suero o plasma en una fase muy temprana (previa a la seroconversión) o tardía de la infección por HIV pueden proporcionar resultados ocasionalmente negativos. Variantes aún desconocidas de VIH también pueden producir hallazgos negativos para el VIH. La presencia del antígeno del VIH-1 o de anticuerpos contra el VIH no equivale a un diagnóstico de SIDA. La reactividad de las proteínas del ensayo frente a anticuerpos del HLA o bien individuos que han recibido gammaglobulina intravenosa pueden dar falsos resultados positivos. El Western blot descartará dichos falsos resultados positivos. ESPECIFICACIONES Límite de detección de la técnica para la detección de antígeno: Sensibilidad diagnóstica: 100% Especificidad diagnóstica: 99.8% 6 U/mL BIBLIOGRAFÍA Microbiología clínica aplicada, Dr P.García Marcos, Dra MT Fernández del Barrio, Dr F Paredes Salido. Ed Díaz de Santos, 1996 Notas técnicas Test Elecsys HIV combi Laboratory Test Handbook, 4th Edition, David S. Jacobs, 1996 -4-