UNIVERSIDAD VERACRUZANA

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TESIS:
“DETERMINACIÓN DE FLORA MICROBIANA EN VÍAS
RESPIRATORIAS ALTAS DE DELFINES NARIZ DE BOTELLA
(Tursiops truncatus) CAUTIVOS EN CANCUN, Q.R.”
QUE PARA OBTENER EL TITULO DE MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
PRESENTA:
ARTURO MIGUEL NOGUEIRA MORALES
ASESOR: MVZ NICOLAS A. DE MIGUEL VALERA
H. VERACRUZ, VER A ABRIL DEL 2003.
2
INDICE
1.- INTRODUCCIÓN_______________________________________3
2.- JUSTIFICACIÓN________________________________________6
3.- ANTECEDENTES_______________________________________6
4.- OBJETIVO GENERAL___________________________________ 7
5.- OBJETIVOS PARICULARES______________________________7
6.- HIPÓTESIS_____________________________________________8
7.- MATERIAL Y METODOS_________________________________9
7.1.- TOMA DE MUESTRAS_______________________________9
7.2.- AISLAMIENTO_____________________________________10
7.3.- OBSERVACIÓN_____________________________________10
7.4.- IDENTIFICACIÓN___________________________________ 10
8.- RESULTADOS Y DISCUSIÓN______________________________11
8.1.-TABLA 1 Y GRAFICO 1 _______________________________12
8.2.-TABLA 2 Y GRAFICO 2 _______________________________13
8.3.-TABLA 3 Y GRAFICO 3 _______________________________14
9.- CONCLUSIONES_________________________________________15
10.- BIBLIOGRAFÍA_________________________________________16
11.- ANEXOS_______________________________________________18
11.1.-ANEXO 1 __________________________________________18
11.2.-ANEXO 2 __________________________________________19
11.3.-ANEXO 3 __________________________________________20
11.4.-ANEXO 4 __________________________________________21
3
A LA MEMORIA DE MIS QUERIDOS ABUELOS
SRA. BLANCA LILIA DEL ROSARIO MORALES HERNÁNDEZ. (Q.E.P.D.)
“ MADRE ADORADA, INFINITAMENTE TE DOY LAS GRACIAS POR
DERRAMARNOS TODO EL AMOR DE TU INMENSO CORAZON, LOS ULTIMOS
AÑOS DE TU VIDA”
SR. FACUNDO NOGUEIRA JIMÉNEZ. (Q.E.P.D.)
“ABUELO: SIEMPRE SERAS EJEMPLO DE SERIEDAD, FORTALEZA,
HONESTIDAD Y TRABAJO, CUALIDADES QUE ALGUNOS IGNORAN Y QUE
REPRESENTAN TU MEJOR HERENCIA”
“ ALGUN DIA NOS VOLVEREMOS A ENCONTRAR”
4
“TAMBIEN DEDICO ESTE TRABAJO A MIS PADRES: SRA. LILIA PATRICIA
MORALES MORALES Y EL SR. ARTURO NOGUEIRA MATIANO, GRACIAS
POR TODO SU APOYO A PESAR DE TODO”
“A MI ABUELO EL SR. MIGUEL MORALES GONZALEZ, QUE SIN SU AYUDA
NO HUBIERA SIDO POSIBLE LA REALIZACIÓN DE ESTE PROYECTO”
“A MI QUERIDO HERMANO: DENEB EDUARDO NOGUEIRA MORALES, QUIEN
CON SU SONRISA HA VENIDO A ALEGRAR LOS MOMENTOS MAS DIFÍCILES Y
CON LA LUZ DE SUS OJOS TODO LUCE MEJOR”
A TODA MI FAMILIA:
“A MI ABUELA, SRA. CATALINA MATIANO LOZANO, A MIS TIOS: CARLOS,
MARIO, CELIA, JORGE, MIGUEL, ROSA MARIA, NELSA, SILVIA, LUZ DEL
CARMEN Y FERMIN, A MIS PRIMOS: CARLOS MIGUEL, ERICA(Q.E.P.D.),
YAMEL, XOCHITL, MARIO, GUADALUPE, ADRIANA, DORINDA, MARIA DE LOS
ANGELES, YOLOTZIN, ALEJANDRO, ITZEL GUADALUPE, LILIA YAZMIN,
NELIDA RUTH, ADRIANA BERENICE Y MIGUEL ANGEL.
A MI HONORABLE JURADO:
MVZ NICOLAS A. DE MIGUEL VALERA
MVZ MIGUEL CANALES RUBIO
MVZ NELLY DEL J. IBARRA PRIEGO
MVZ DORA ROMERO SALAS
MVZ MIGUEL ANGEL LEANO ORTIZ
5
RINDO UN SINCERO AGRADECIMIENTO A LAS SIGUIENTES
PERSONAS E INSTITUCIONES:
GRUPO DISCOVERY
EN ESPECIAL A:
BIOL. MAURICIO CORTEZ AGUILAR.
DR. RENATO LENZI
MVZ ROBERTO SÁNCHEZ OKRUCKY.
HARBOR BRANCH OCEANOGRAPHIC INSTITUTION
EN ESPECIAL A :
DR. GREGORY D. BOSSART.
RED DE VARAMIENTOS DEL ESTADO DE VERACRUZ
EN ESPECIAL A:
BIOL. BLANCA E. CORTINA JULIO.
BIOL. GIBERTH GORDILLO MORALES.
UNIVERSIDAD VERACRUZANA:
EN ESPECIAL A:
MVZ NICOLAS A. DE MIGUEL VALERA
MVZ ERICKA LANDA CANSIGNO
BIOL. CARLOS ALBERTO MARTINEZ HERNÁNDEZ
6
RESUMEN
El presente trabajo se realizó en tres delfinarios localizados en Cancún, Quintana Roo, de
donde se tomaron 16 ejemplares de delfines nariz de botella (Tursiops truncatus), ocho
hembras y el mismo número de machos de diferentes edades y clínicamente sanos, todos
estos condicionados (entrenados) para la toma de muestras biológicas. La toma de muestras
se realizó mediante el uso de dos técnicas de recolección de esputo, una invasiva y otra no
invasiva, para aislamiento y citología respectivamente. Para el aislamiento se sembró en
estría en varios medios de cultivo y a diferentes temperaturas, se utilizó la técnica de Gram
para mostrar morfología y tinción. Se utilizaron las tablas de identificación basadas en el
medio de Triple Azúcar Hierro, así como las fermentaciones de azúcares para identificar las
bacterias, las observaciones microscópicas se compararon con las ilustraciones de un
manual de citología de cetáceos, el cual presenta algunas de las bacterias saprofitas y
patógenas de las vías respiratorias de estos animales. Posteriormente se practicaron pruebas
bioquímicas a las bacterias Gramnegativas que se lograron aislar para determinar el género
de las mismas, estas pruebas fueron: Agar de triple azúcar y hierro, urea, citrato de sodio,
oxidasa, sim, rojo de metilo y Voges-Proskauer. Para poder determinar el género y especie
se utilizaron tablas de identificación bacteriológica de Biberstein, E.L., Jang, S. y Barajas,
J.A.
7
INTRODUCCIÒN.
A lo largo del tiempo, los delfines y el hombre han mantenido una estrecha relación la
cual permanece hasta nuestros días, misma a la que se le atribuyen varias explicaciones,
pero a ciencia cierta no se sabe que es lo que mantiene tan cerca de los humanos a estos
cetáceos, existen relatos que narran cómo estos cetáceos han rescatado a varios náufragos
en peligro de morir ahogados trasladándolos hasta tierra firme. (4)
En la cultura griega, eran considerados como deidades, ellos tenían la creencia de que eran
almas de personas que habían muerto recientemente y de esta manera aguardaban su turno
para llegar al cielo y en ese lapso de tiempo debían ayudar a los humanos en todo lo
posible, cabe mencionar las experiencias de varios buzos que han sido protegidos
valerosamente del ataque de tiburones por estos torpedos del mar. Sin duda alguna, son
demasiadas la cualidades de estos mamíferos marinos, entre las que destacan, su
excepcional inteligencia y gran nobleza, al grado que los hemos entrenado para nuestra
diversión y ellos asumen su papel con humildad y sumisión en la mayoría de los casos. (5)
El delfín mular o nariz de botella (Tursiops truncatus) es un mamífero marino más de la
lista, pero sin duda alguna es uno de los animales más evolucionados y mejor adaptados a
su elemento natural, el agua. A lo largo de su proceso evolutivo, desde que era un mamífero
terrestre cubierto de pelo y de largos bigotes, parecido a un perro de talla pequeña
(Mesonyx), hasta que evolucionó a un animal acuático, el cual transformó sus miembros
pélvicos en una poderosa aleta caudal que le permite alcanzar velocidades de hasta 50
km/h. Sus miembros torácicos se convirtieron en un par de aletas pectorales que junto con
la aleta dorsal contribuyen a mantener el equilibrio y a cambiar de dirección súbitamente,
su nariz se fusionó a un solo orificio (espiráculo) y emigró hasta la parte posterior de la
cabeza, inmediatamente caudal al melón, esto le facilita respirar sin necesidad de exponer
toda su cabeza. Se convirtió en un excelente buzo tras desarrollar unas complicadas
estructuras anatómicas denominadas "redes admirables" que intervienen para almacenar
grandes cantidades de oxígeno y mioglobina, mismas que utiliza para poder permanecer
8
debajo del agua por lapsos de tiempo hasta de ocho minutos. Su oído casi se atrofió, pero
en su lugar posee un poderoso sonar biológico también llamado sistema de ecolocalización
que consiste en la emisión de complicados silbidos y chasquidos de alta frecuencia casi
imperceptibles para el oído humano que le permite orientarse y localizar su alimento de
manera extraordinaria en aguas oscuras o demasiado profundas donde la visibilidad es casi
nula, incluso, pude localizar objetos tan pequeños como piezas de alambre hasta de dos
milímetros de diámetro. (12)
Actualmente, las poblaciones de varias especies de delfines, incluyendo al delfín mular
(Tursiops truncatus) se ven notablemente amenazadas por diversos factores, en primer
lugar, la contaminación, seguida de la pesca inadecuada del Atún y en ocasiones la caza
inmoderada por parte de algunos países como Japón, Noruega y Perú en Suramérica. En los
últimos años, la imagen del delfín se popularizó con la proliferación de zoológicos marinos
o "delfinarios" uno de los primeros en el Mundo fue "Marineland of the Pacific” en
California, Estados Unidos de América, mismo que fue financiado por el Ejército de ese
país para realizar investigaciones sobre el sonar biológico o sistema de ecolocalización y el
proceso de regeneración de su piel (mitosis acelerada) por una constante fricción con el
agua. (14)
En la actualidad casi todos los delfinarios se preocupan por la salud de sus ejemplares,
pero son muy pocos los que practican procedimientos adecuados y sistemáticos, tomando
en cuenta que en la mayoría de los casos, éstos se encuentran en un espacio muy reducido y
poco profundo, con una mala calidad del agua por el hecho de ser salada artificial y tratada
con varios químicos como: hipoclorito de sodio, permanganato de potasio, ozono, entre
otros. En el caso de los delfinarios al aire libre o descubiertos el problema se complica si
están localizados en grandes urbes, puesto que en ocasiones la contaminación atmosférica
alcanza cifras alarmantes, teniendo como consecuencia la formación de lluvias ácidas que
directamente alteran el pH del agua, por consiguiente un pH menor a 7 representa una
amenaza para la salud de los delfines. (10)
9
En este caso la opción mas adecuada la engloban los delfinarios localizados en playas,
costas, rivieras o lagunas, con agua salada natural, fresca y casi sin contaminantes o en
algunas ocasiones sin estos, con el objeto de que los delfines se encuentren en condiciones
lo mas semejante a la libertad (semicautiverio), con todo esto es posible disminuir el estrés
y prolongar la longevidad de los ejemplares, además de facilitar alguna posible liberación
de aquellos individuos inadaptables a las condiciones de cautividad.(1)
Por último, se puede agregar que estos animales han sido utilizados en diversas disciplinas,
como es el caso de un grupo de científicos extranjeros, que han propuesto aplicarlos en
beneficio de pacientes humanos con alguna afección del sistema nervioso central, como el
síndrome de Down, parálisis cerebral, parálisis muscular, autismo y en últimas fechas se
han comenzado a utilizar en la estimulación temprana de niños recién nacidos y en los
cursos de parto psicoprofiláctico, todo esto dentro de un programa denominado
“Delfinoterapia” que actualmente no atraviesa su mejor momento, puesto que se mencionan
opiniones demasiado encontradas por parte de algunos especialistas en cuanto a las
aplicaciones y resultados de dicho programa. (1)
10
JUSTIFICACIÓN
En la actualidad, el área de mamíferos marinos en Medicina Veterinaria, es un terreno poco
incursionado en nuestro país, por lo tanto, existe un número muy reducido de especialistas
en la misma y por consiguiente existen muy pocas publicaciones al respecto, por todo esto
el objeto de esta investigación, es ampliar los conocimientos en la materia, mismos que
permitan establecer programas de medicina preventiva así como dar a conocer algunos de
los procedimientos clínicos utilizados en esta área. Identificar y revisar constantemente la
flora microbiana de las vías respiratorias altas puede prevenir brotes de graves
enfermedades respiratorias de estos cetáceos, o alguna posible transmisión de agentes
infecciosos a seres humanos (ZOONOSIS), a los propios entrenadores, manejadores e
incluso a los turistas que estén en contacto directo (nado interactivo) con delfines, así como
también determinar el origen de un caso inverso.
ANTECEDENTES
Dentro de la medicina mastozoológica marina se cuenta con varios trabajos realizados por
especialistas en otros lugares del orbe. Algunos estudios sobre neumonías bacterianas en
cetáceos cautivos que terminaron en muertes, fueron realizados por Medway y Schryver en
1973; Sweeney y Ridgway en 1975; Buck y Spott en 1986 (citados por Dunn, L., Buck J.
D., y Robeck T. R. 2001), ellos reportaron: Staphylococcus aureus y Pseudomonas
aeruginosa. Sweeney en 1978 reportó: Pasteurella multocida y
P. hemolítica en
necropsias realizadas a 45 delfines que murieron por neumonía. Bernardelli et al en 1990,
Castro Ramos et al en 1998 y Dunn et al en el 2000 reportaron: Mycobacteruim bovis, M.
Avium, M. smegmatis, M. fortuitum, M. chelonei y M. Marinum. Kinoshita et al en 1994,
reportó Staphylococcus aureus en necropsias realizadas a varios delfines nariz de botella
que murieron por neumonía (6-7-8-9).
11
OBJETIVO GENERAL
Identificar y determinar la patogenicidad de los organismos microbianos de las vías
respiratorias altas de delfines nariz de botella (Tursiops truncatus) en cautiverio, para tratar
de diseñar programas de medicina preventiva que garanticen en gran medida la salud de
los ejemplares.
OBJETIVOS PARTICULARES
-
Determinar los géneros y especies de las bacterias presentes.
-
Determinar la frecuencia de las mismas.
12
HIPÒTESIS
Las bacterias aisladas de la vías respiratorias altas de los delfines, no son potencialmente
patógenas, para estos, ni para las personas que permanezcan en contacto directo con los
mismos.
13
MATERIAL Y METODOS
TOMA DE MUESTRAS
Para la toma de muestras, se utilizó una técnica invasiva para recolección de esputo, misma
que se practicó en ocho ejemplares hembras y el mismo numero de machos todos estos
condicionados (entrenados) para este fin. La cuál consiste en colocar a los ejemplares en
flotación mediante una señal (de estación) hecha por el entrenador, para evitar la
contaminación por el agua, posteriormente se les da otra señal para provocar el surtidor,
soplido o “chuff “ (exhalación) y de esta manera conseguir la abertura del respiráculo, que
es el orificio por el cual respiran estos animales, esta segunda señal consiste en realizar un
ligero golpe alrededor de este orificio con los dedos pulgar, índice y mayor formando una C
invertida, acto seguido, se introdujo un hisopo en este lugar a una distancia no mayor a tres
centímetros y se realizó un ligero movimiento de fricción en el interior del mismo,
procurando no demorar mas de dos segundos durante este procedimiento (13). Una vez
colectadas las muestras, éstas se introdujeron en tubos con medio de transporte de Stuart
para su posterior traslado al laboratorio.
Simultáneamente, se tomaron muestras de citología de las vías respiratorias de los mismos
animales, esta vez utilizando una técnica no invasiva, la cual consiste en colocar a los
individuos en la posición antes mencionada mediante la misma señal de estación. Después,
sujetar un portaobjetos entre los dedos pulgar, índice y mayor como se indicó
anteriormente, para de ésta manera, darles la segunda señal a los animales condicionados
para provocar el surtidor y al mismo tiempo colectar la muestra de esputo, directamente del
respiráculo (13). Posteriormente, las muestras se fijaron con CITOSPRAY®
para su
traslado al laboratorio.
14
Para la toma de éstas y otras muestras en animales no condicionados, es necesario realizar
maniobras para retirar a los animales del agua y, una vez afuera y bajo contención física
(nunca química) se procede a la toma de las mismas.(6)
AISLAMIENTO
Se utilizó la técnica tradicional que consiste en sembrar por estría y practicando la dilución
de la muestra, calentando el asa de platino entre cada siembra, todo esto en cajas de Petri
con agar entérico de Hektoen, agar sangre, agar Bordette Gengou, agar de gonococos y agar
micótico a 37º C en una estufa de cultivo y a temperatura ambiente durante 48 horas, para
el establecimiento y aislamiento de bacterias aeróbias mesófilas.
OBSERVACIÓN
Todas las muestras de citología fijadas con anterioridad se tiñeron mediante el uso de la
técnica de Gram para demostrar morfología y tinción. De las muestras sembradas en los
diversos medios de cultivo, se tomaron algunas colonias y se extendieron en porta-objetos y
luego se tiñeron por el método de Gram.
IDENTIFICACIÓN
Se utilizaron las tablas de identificación basadas en el medio de Triple Azúcar Hierro, así
como las de fermentaciones de azúcares para identificar Cocos y Bacilos. Las
observaciones microscópicas se compararon con las ilustraciones de un manual de citología
de cetáceos el cual presenta algunas de las bacterias saprofitas y patógenas de las vías
respiratorias de estos animales. Asimismo se practicaron pruebas bioquímicas a las
bacterias Gramnegativas que se cultivaron, para determinar el genero de las mismas, estas
pruebas fueron: Agar de triple azúcar y hierro, urea, citrato de sodio, oxidasa, sim, rojo de
metilo y Voges-Proskauer. Para determinar el género y especie se utilizaron las tablas de
identificación bacteriológica de Biberstein, E.L., Jang, S. y Barajas, J.A. (2).
15
RESULTADOS Y DISCUSION
Mediante las pruebas bacteriológicas se logró aislar un total de 22 agentes infecciosos, los
cuales al hacer la identificación se determinó que pertenecen al menos a cinco géneros y
dos especies.(Ver cuadro 1 y gráfico 1). De ellos se destaca la presencia de una levadura
identificada como del género Candida spp.; también la presencia de un agente saprofito
perteneciente el género Simonsiella spp. De los organismos aislados, Staphylococcus
aureus, Gramnegativo (3) representa una etiología de varias muertes por neumonía, sin
embargo la muestra no es representativa dada la frecuencia que presentó. En cuanto a la
presentación bacteriana por sexo del hospedero, se observó un mayor número de agentes
infecciosos y de su frecuencia en las hembras en comparación con los machos. (ver cuadros
2 y 3, y gráficos 2 y 3).
Dunn et al (6) citan, que se ha determinado la presencia de diversos patógenos en varias
especies de cetáceos, incluyendo al delfín nariz de botella (Tursiups truncatus), los cuales
no fueron hallados en esta investigación, quizá debido a que la muestra analizada
corresponde a delfines mantenidos en condiciones controladas por al menos dos años. A
excepción de uno de los animales, del cual se aisló Candida spp. que había llegado al
delfinario hacía un par de meses y se encontraba enfermo, presentando un absceso
subcutáneo en el pedúnculo de la cola, al cual se le mantenía en aislamiento.
Como resultado de las muestras tomadas por la técnica no invasiva, es decir la citología de
lo espirado y adherido al porta-objetos, se logró identificar morfológicamente a los mismos
agentes infecciosos aislados, además de algunos protozoarios ciliados (Kyaroikeus cetarius)
comensales comunes de las vías respiratorias de cetáceos, así como la presencia de una
especie de parásito de importancia clínica del género Halocercus spp. en su fase adulta y
estadios larvarios. El cual es un parásito pulmonar frecuentemente observado y de gran
importancia clínica como indican (15-16) (ver ANEXOS.)
16
Tabla 1. Aislamientos bacterianos de vías respiratorias altas de delfines (Tursiops
truncatus) cautivos en Cancún, Q. R.
BACTERIA
N
%
Candida sp.
3
13.6
Diplococcus sp.
1
4.6
Simonsiella sp.
11
50.0
Staphyloccocus aureus
3
13.6
Staphyloccocus epidermidis
3
13.6
Tetradas
1
4.6
22
100
TOTAL
Gráfico 1. Porciento de aislamientos bacterianos de delfines cautivos en Cancún Q. R.
5%
14%
13%
Candida sp.
5%
Diplococcus sp.
Simonsiella sp.
S.aureus
14%
S. epidermidis
49%
Tetradas
17
Tabla 2. Agentes infecciosos observados en muestras de machos
BACTERIA
N
%
Simonsiella sp.
7
70
Candida sp.
1
10
Staphylococcus epidermidis
2
20
10
100
TOTAL
Gráfico 2. Porciento de aislamientos bacterianos de delfines cautivos en Cancún Q.
R. (Machos)
20%
10%
70%
Simonsiella sp
Candida sp.
S. epidermidis
18
Tabla 3. Agentes infecciosos observados en muestras de hembras
BACTERIA
N
%
Simonsiella sp.
4
33.4
Candida sp.
2
16.7
Staphylococcus aureus
3
25.0
Staphylococcus epidermidis
1
8.3
Diplococcus sp.
1
8.3
Tetradas
1
8.3
12
100
TOTAL
Gráfico 3. Porciento de aislamientos bacterianos de delfines cautivos en Cancún Q. R.
(Hembras)
Simonsiella sp.
8%
8%
34%
8%
Candida sp
S. aureus
S. epidermidis
25%
17%
Diplococcus sp.
Tetradas
19
CONCLUSIONES
En este trabajo se determinó la presencia de diversos agentes infecciosos y aunque algunos
de ellos son potencialmente patógenos, también es posible que sean identificados dentro de
la flora microbiana normal de órganos, aparatos y superficies corporales del hombre y los
animales, incluyendo al delfín nariz de botella (Tursiups truncatus). La patogenicidad de
estos agentes infecciosos normalmente se pone de manifiesto cuando el hospedero se
encuentra inmunocomprometido en forma natural o inducida y esto trae como consecuencia
el desarrollo de una neumonía con resultados fatales en la mayoría de los casos si no se
diagnostica para ser tratada a tiempo.
Se puede decir que la mayoría de las bacterias aisladas de las vías respiratorias altas de
delfines nariz de botella (Tursiops truncatus) cautivos en Cancún Q. R, no son
potencialmente patógenas para estos, así como para las personas que interactúan con ellos
de manera cotidiana, a excepción de Staphylococcus aureus, puesto que este organismo es
la principal etiología de la mayoría de los decesos de delfines y otros cetáceos por
neumonías, sin embargo, se considera que por las condiciones clínica y corporal de los
individuos muestreados, se le puede incluir como parte de la flora microbiana normal de las
vías respiratorias altas de estos individuos. El género Simonsiella spp. es miembro de la
familia Neisseriaceae y se considera saprófito para las especies de donde se ha aislado (17).
En la mayoría de los delfinarios el control bacteriano esta basado en la observación de lo
que arroje la muestra tomada mediante la vía no invasiva (citología) y no consideran
importante el hacer cultivos bacterianos para establecer sus programas de medicina
preventiva y de control de enfermedades.
La técnica no invasiva resultó muy útil para la observación de agentes no bacterianos
permitiendo la observación e identificación de parásitos, como el Halocercus spp, o como
el protozoario saprofito de la especie Kyaroikeus cetarius.(ver ANEXOS)
20
BIBLIOGRAFÍA
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Págs. 112-115. 4ª, Edición.
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Saunders Company, USA. Págs. 778-779,783-785.
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http://www.zihuatanejo-ixtapa-mexico.com/spaz/delfines.html
Octubre 2002).
21
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L.
Ballenas
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delfines:
Esos
desconocidos
(2001)
http://www.telesat.com.co/fedecas/contenidos/2-cc/byd.html
(consultado
en
Octubre 2002).
12. Sironi, M. La Evolución de los Cetáceos (1999) http://www.icb.org.ar (consultado
en Octubre 2002).
13. Sweeney, C. Reddy, M.L. Limpscomb, T. P. Bjorneby, J. M. Ridgway, S. H.
(1999). Handbook of Cetacean Citology. Editorial Dolphin Quest. USA. Pags 1115, 37-39.
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http://www.addaong.org/informedelfines.html (consultado en octubre 2002)
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Stenella coeruleoalba, (Cetacea: delphininidae), in the coast of Sao Paulo state,
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members of the Neisseriaceae. IJSEM Papers in press. Published on line 14
(consultada en diciembre del 2002).
december 2001. www.dx.doi.org
22
ANEXO 1
Aspecto Simonsiella spp. en el medio entérico de Hektoen.
Luz incidente
Luz transmitida
Aspecto Simonsiella spp. en el medio Bordet Gengou
Luz incidente
Luz transmitida
Microfotografía de Candida spp, 100X
Microfotografía de Simonsiella spp, 100X
23
ANEXO 2
ANATOMIA DEL DELFÍN NARIZ DE BOTELA (Tursiops truncatus)
24
ANEXO 3
FILOGENIA DEL GENERO Simonsiella Y OTROS MIEMBROS DE LA FAMILIA
Neisseriaceae.
Phylogeny of the genus Simonsiella and other members of the Neisseriaceae.
Brian P. Hedlund and James T. Staley
Simonsiella phylogeny
www.dx.doi.org/10.1099/ijs.0.01952-0
Correo electronico
[email protected]
25
ANEXO 4
Microfotografía de Simonsiella spp
(Citología) 100 X
Microfotografía de Simonsiella spp
(Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar con
vacuolas (Citología) 100 X
26
Microfotografía de Macrófago alveolar en
fagocitosis (Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar en
fagocitosis (Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar
con vacuolas (Citología) 100 X
27
Microfotografía de Macrófago alveolar en
fagocitosis (Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar en
fagocitosis con vacuolas (Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar en
fagocitosis (Citología) 100 X
28
Microfotografía de Halocercus spp estadio
adulto con células epiteliales (Citología)
100 X
Microfotografía de Halocercus spp estadio
adulto con células epiteliales (Citología)
100 X
Microfotografía de Halocercus spp estadio
adulto con células epiteliales (Citología)
100 X
29
Microfotografía de Macrófago alveolar
con materia extraña (Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar
con materia extraña (Citología) 100 X
Microfotografía de Macrófago alveolar en
fagocitosis (Citología) 100 X
30