formulacion a base de exo-s-mecamilamina y su utilizacion en

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OFICINA ESPAÑOLA DE
PATENTES Y MARCAS
A01N 33/18 (2006.01)
A01N 33/24 (2006.01)
A61K 31/13 (2006.01)
A61K 31/015 (2006.01)
C07C 209/88 (2006.01)
C07D 217/26 (2006.01)
ESPAÑA
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11 Número de publicación: 2 260 959
51 Int. Cl.:
TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA
T3
86 Número de solicitud europea: 99967401 .3
86 Fecha de presentación : 16.12.1999
87 Número de publicación de la solicitud: 1139743
87 Fecha de publicación de la solicitud: 10.10.2001
54 Título: Formulación a base de exo-S-mecamilamina y su utilización en tratamientos médicos.
30 Prioridad: 16.12.1998 US 112534 P
73 Titular/es: University of South Florida
4202 Fowler Avenue, Fao 126
Tampa, Florida 33620-7900, US
45 Fecha de publicación de la mención BOPI:
01.11.2006
72 Inventor/es: Shytle, Douglas;
Sanberg, Paul;
Newman, Mary y
Silver, Archie
45 Fecha de la publicación del folleto de la patente:
74 Agente: Ungría López, Javier
ES 2 260 959 T3
01.11.2006
Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de
la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea
de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se
considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art. 99.1 del
Convenio sobre concesión de Patentes Europeas).
Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. Pº de la Castellana, 75 – 28071 Madrid
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DESCRIPCIÓN
Formulación a base de exo-S-mecamilamina y su
utilización en tratamientos médicos.
Campo técnico
La presente invención está dentro del campo de la
síntesis química de estereoisómeros y más particularmente del enantiómero exo-S-mecamilamina y a su
utilización en tratamientos médicos.
Antecedentes
La mecamilamina (clorhidrato de N,2,3,3tetrametilbiciclo-[2.1.1]heptan-2-amina, 826-39-1)
fue desarrollada y caracterizada por Merck & Co.,
Inc., como un bloqueante ganglionar con acciones hipotensoras clínicamente significativas (Stone y col., J.
Med. Pharm. Chem., 5(4): 665-90, 1962). Las características exclusivas de la mecamilamina - incluyendo
una eficacia oral excepcional, una rápida aparición
de los efectos, una larga duración de su acción y una
absorción casi completa en el tracto gastrointestinal hicieron que la mecamilamina fuera en ese momento
más deseable que los bloqueantes ganglionares existentes (Baer y col., 1956).
A pesar de la eficacia demostrada de la mecamilamina en el tratamiento de la hipertensión, sus efectos
colaterales resultantes de una inhibición parasimpática general condujeron a su fallecimiento como tratamiento de primera línea para la hipertensión esencial.
El bloqueo ganglionar generalizado puede tener como resultado una atonía de la vejiga y del tracto gastrointestinal, una función sexual disminuida, cicloplejia, xerostomía, transpiración disminuida e hipotensión postural. Entre los efectos colaterales de la mecamilamina experimentados a la dosis antihipertensiva de 25 mg/día, estaban efectos cardiovasculares, hipotermia, temblores, antidiuresis, antinocicepción, visión borrosa, impotencia, disuria, temblor, movimientos coreiformes, aberraciones mentales, nerviosismo,
depresión, ansiedad, insomnio, dificultad para hablar,
debilidad, fatiga, sedación, dolor de cabeza, estreñimiento e insuficiencia renal. Incluso a dosis más bajas, tal como 7,5 mg/día, se ha informado de cierta evidencia de estreñimiento. Se observaron incrementos menores de tergiversación del gusto (sentido
del gusto alterado), mareo, insomnio y dispepsia. La
mecamilamina continuó siendo utilizada en situaciones especiales, tales como la encefalopatía hipertensa
(Moser, 1969), crisis hipertensivas y disreflexia autónoma (Baddom y Johnson, 1969; Braddom y Rocco,
1991). Aparte de unos cuantos laboratorios y de algún
estudio clínico ocasional, las ventas de mecamilamina
son escasas.
Además de sus acciones bloqueantes de los ganglios periféricos, la mecamilamina atraviesa la barrera hematoencefálica y funciona como un antagonista
selectivo de los receptores nicotínicos a dosis que no
tienen un efecto significativo sobre la función parasimpática (Banerjee y col., 1990; Martin y col., 1993).
Como resultado, la mecamilamina bloquea la mayoría de los efectos fisiológicos, comportamentales y de
refuerzo del tabaco y la nicotina (Martin y col., 1989).
En estudios sobre la dependencia de nicotina, se han
administrado a sujetos humanos dosis agudas de 2,5
a 20 mg. Por ejemplo, Rose y col. (1989) encontraron
que dosis bajas de mecamilamina (2,5 a 10 mg), que
eran bien toleradas, reducían los efectos subjetivos del
tabaco en fumadores adultos.
En un estudio reciente doble ciego controlado con
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placebo que investigaba los beneficios de la mecamilamina oral (5 mg/día b.i.d.) en adultos en un tratamiento para dejar de fumar, no hubo un incremento significativo con respecto a los controles de los
efectos adversos descritos con el tratamiento de mecamilamina para la mayoría de los síntomas, incluyendo visión borrosa, mareo al estar de pie, sequedad de boca, debilidad, dolores abdominales o dificultad para orinar. El síntoma más prevalente con
el tratamiento de mecamilamina era un estreñimiento leve; en algún punto durante las cinco semanas de
tratamiento con mecamilamina, el 70% de los sujetos informó de tal síntoma frente al 32% en el grupo placebo (Rose y col., 1994). Se ha descrito también que la mecamilamina altera el funcionamiento
cognitivo (Newhouse, P.A. y col., Neuropsychopharmacology 10: 93-107, 1994), las ondas eléctricas cerebrales (Pickworth, W.B., Herning, R.I., Henningfield, J.E., Pharmacology Biochemistry & Behavior,
30: 149-153, 1988) y el flujo sanguíneo cortical (Gitalman, D.R., Prohovnik, I., Neurobiology of Aging,
13: 313-318, 1992).
Aunque la mayoría de los estudios con animales utilizaban más de 0,5 mg/kg, Driscoll encontró
que una dosis pequeña de únicamente mecamilamina
(<0,3 mg/kg, no 0,5 mg/kg) a ratas que presentaban
un nivel elevado de evitación, incrementaba su éxito
de evitación casi tanto como 0,1 mg/kg de nicotina
(pero menos que 0,2 mg/kg de nicotina). Sobre la base de sus experimentos, Driscoll concluyó: “mecamilamina puede ejercer efectos impredecibles sobre las
ratas a los niveles de dosis utilizados para bloquear la
nicotina en ensayos de comportamiento” (Driscoll, P.,
Psychopharmacology (Berl.), 46: 119-21, 1976).
Muchos compuestos orgánicos existen en formas
ópticamente activas, esto es, tienen la capacidad de
rotar el plano de la luz polarizada. En la descripción
de un compuesto ópticamente activo, se utilizan los
prefijos R y S para indicar la configuración absoluta de la molécula acerca de su(s) centro(s) quiral(es).
Los prefijos (+) y (-), o d y l se emplean para designar el signo de la rotación de la luz polarizada por
el compuesto, (-) y l significando que el compuesto es levógiro. Un compuesto con el prefijo (+) y d
es dextrógiro. Para una estructura química dada, estos
compuestos, denominados estereoisómeros, son idénticos excepto en que son imágenes especulares uno de
otro. Un estereoisómero específico puede ser referido
también como un enantiómero, y una mezcla de tales
isómeros es denominada a menudo mezcla enantiomérica o racémica.
La pureza estereoquímica tiene importancia en el
campo de los productos farmacéuticos, en el que 12 de
los 20 fármacos más recetados son ópticamente activos. Un ejemplo es la forma l del propranolol, que es
100 veces más potente aproximadamente que la forma d. La pureza óptica es importante ya que ciertos
isómeros pueden ser nocivos en lugar de simplemente inertes. Otro ejemplo es la d-talidomida que parece
ser un sedante seguro y eficaz para controlar los mareos matutinos durante el embarazo; mientras que se
cree que la l-talidomida es un potente teratógeno.
La mecamilamina ha sido comercializada como
una mezcla racémica que contiene los isómeros ópticos clorhidrato de exo-S-mecamilamina y de exoR-mecamilamina. Estudios previos encaminados a investigar la farmacología de estos dos isómeros han encontrado generalmente poca o ninguna diferencia en
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potencia o eficacia. Por ejemplo, Stone y col. (1962)
compararon los efectos del clorhidrato de (+)-mecamilamina con el clorhidrato de mecamilamina racémica sobre las convulsiones y la dilatación pupilar inducidas por nicotina y esencialmente no encontraron
diferencias significativas entre los dos compuestos y
concluyeron que “el isomerismo óptico no desempeña una función significativa para determinar el grado
de actividad” (Stone, supra, p. 675). Schonenberger y
col. (1986) describieron “diferencias interesantes” en
las acciones del clorhidrato de d- y l-mecamilamina
en ensayos que medían la transmisión neuromuscular. Sin embargo, no proporcionaron detalles sobre las
diferencias.
En la Patente de EE.UU. Nº 5.039.801, Brossi y
Schonenberger describieron que “las antípodas (-)- y
(+)-mecamilamina fueron obtenidas aquí a partir de
las metilbencilureas correspondientes con un 40% de
rendimiento de cada una y tenían una elevada pureza
óptica (95%, HPLC), produciéndose las sales clorhidrato que eran ópticamente puras después de una cristalización” (col. 3, líneas 32-37). Sin embargo, en la
descripción de sus hallazgos experimentales, mencionan que el “extracto etéreo de la mezcla de reacción
concentrada, acidificada, fue concentrado y el residuo destilado (Kugel, 180º, 20 torr) para dar 6,08 g
(96%) de (-)-12 como un líquido incoloro puro en tlc.
que se convirtió en un sólido cerúleo al mantenerse
en frío: [α]D = -77,0º (c+2,6 en benceno) lit. (+)-12:
[α]D = +80,1º (c=3 en benceno). Los extractos orgánicos combinados de la fase acuosa alcalina fueron
concentrados, el líquido resultante fue mezclado con
20 ml de Et2 O y el (+)-1·HCl clorhidrato bruto fue
precipitado por la adición de un ligero exceso de HCl
en Et2 O. Después de filtrar, el sólido incoloro en polvo fino fue recristalizado a partir de 2-propanol para
1,02 g (64%) de (+)-1·HCl como agujas [A]D +20,1º
(c+1,7 en CHCl3 ). La urea 3 más polar (1,85 g, 5,89
mmoles) fue tratada exactamente de la misma manera
para dar 752 mg (63%) de (-)-1·HCl como agujas incoloras: [A]D -20,0º (c=2,2 en CHCl3 )”. Col. 6, líneas
20-37. Sin embargo, no se describían datos in vitro ni
in vivo.
Suchocki y col. (1991), J. Med. Chem, Vol. 34, Nº
3, pp. 1003-1010, investigaron las acciones del clorhidrato de d- y l-mecamilamina en ensayos que medían la depresión inducida por nicotina de la actividad
locomotora espontánea y de la antinocicepción. Encontraron que ambos isómeros ópticos tenían una potencia similar para bloquear la antinocicepción causada por nicotina, mientras que la potencia del isómero
(+)-mecamilamina para bloquear la depresión inducida por nicotina de la actividad locomotora espontánea
no pudo ser determinada debido a una confusión experimental.
El síndrome de Tourette (ST) es una enfermedad neuropsiquiátrica autosómica dominante caracterizada por una variedad de síntomas, incluyendo
múltiples tics motores y fónicos. Es un trastorno hipercinético del movimiento expresado principalmente por movimientos motores (tics motores) o sonidos
(tics fónicos) estereotipados, no rítmicos, recurrentes, breves, rápidos, repentinos, experimentados como impulsos irresistibles pero que pueden ser suprimidos durante periodos de tiempo variables (Tourette Symdrome Classification Study Group, Arch. Neurol., 50: 1013-16). Los tics motores incluyen generalmente parpadeo de ojos, sacudidas de la cabeza, en-
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cogimiento de hombros y muecas faciales, mientras
que los tics fónicos o vocales incluyen aclaramiento
de garganta, sorber por la nariz con ruido, chillidos,
chasquidos de la lengua y coprolalia. Los síntomas
comienzan típicamente en la infancia y varían desde
relativamente leves a muy graves a lo largo del curso de la vida del paciente (Robertson, M.M., Br. J.
Psychiatry, 154: 147-169, 1989). Muchos pacientes
con ST presentan también otras anormalidades neuropsiquiátricas, incluyendo síntomas obsesivo compulsivos (Pauls, D.L. y col., Psychopharm. Bull., 22:
730-733, 1986), hiperactividad y déficit de atención
(Comings, D.E., Himes, J.A., Comings, B.G., J. Clin.
Psychiatry, 51: 463-469, 1990). Son también frecuentes problemas debidos a un temperamento extremo o
a un comportamiento agresivo (Riddle, M.A. y col.,
Wiley Series in Child and Adolescent Mental Health,
Eds. Cohen, D.J., Bruun, R.D., Leckman, J.F., New
York City, John Wiley and Sons, pp. 151-162, 1988;
Stelf, M.E., Bornstein, R.A., Hammond, L., A survey
of Tourette syndrome patients and their families: the
1987 Ohio Tourette Survey, Cincinnati, Ohio Tourette Syndrome Association, 1988), igual que lo son el
rechazo en la escuela y la discapacidad para el aprendizaje (Harris, D., Silver, A.A., Learning Disabilities,
6(1): 1-7, 1995; Silver, A.A., Hagin, R.A., Disorders
of Learning Childhood, Noshpitz, J.D., ed. New York
City: Wiley, pp. 469-508, 1990).
Aunque la patogénesis del ST es todavía desconocida, se ha propuesto un exceso de dopamina estriatal y/o una hipersensibilidad de los receptores de
dopamina (Singer, H.S. y col., Ann. Neurol., 12: 361366, 1982), sobre la base principalmente de la eficacia terapéutica de los antagonistas de los receptores
de dopamina. El ST es tratado frecuentemente con el
antagonista de dopamina haloperidol (Haldol®, McNeil Pharmaceutical, Raritan, NJ), que es eficaz en
un 70% de los casos aproximadamente (Erenberg, G.,
Cruse, R.P., Rothner, A.D., Ann. Neurol., 22: 383385, 1987; Shapiro, A.K., Shapiro, E., Wiley series in
child and adolescent mental health, Eds. Cohen, D.J.,
Bruun, R.D., Leckman, J.F., New York City, John Wiley and Sons, pp. 267-280, 1988). Otros neurolépticos
incluyen pimozida (Shapiro, E.S. y col., Arch. Gen.
Psychiatry, 46: 722-730, 1989), flufenazina (Singer,
H.S., Gammon, K., Quaskey, S., Pediat. Neuroscience, 12: 71-74, 1985-1986) y risperidona (Stamenkovic y col., Lancet, 344: 1577-78, 1994). El agonista α-adrenérgico clonidina, que es también eficaz para la enfermedad de hiperactividad asociada con un
déficit de atención (ADHD), tiene solamente una tasa de éxito del 40% para los tics motores y vocales
(Bruun, R.D., J. Am. Acad. Child Psychiatry, 23: 126133, 1984; Cohen, D.J. y col., Arch. Gen. Psychiatry,
37: 1350-1357, 1980). Otras medicaciones con grados variables de eficacia incluyen clonazepam (Gonce, M., Barbeau, A. Can. J. Neurol. Sci., 4: 279-283,
1977), naloxona (Davidson, P.W. y col., Appl. Res.
Ment. Retardation, 4: 1-4, 1983) y fluoxetina (Riddle,
M.A. y col., J. Am. Acad. Child Adol. Psychiatry, 29:
45-48, 1990). Una medicación comúnmente utilizada
es el haloperidol (Erenberg, G., Cruse, R.P., Rothner,
A.D., Ann. Neurol., 22: 383-385, 1987). Sin embargo, las dosis terapéuticas de haloperidol causan frecuentemente dificultad para concentrarse, somnolencia, depresión, ganancia de peso, síntomas similares
a los del Parkinson y - con una utilización de larga
duración - disquinesia tardía (Shapiro, A.K., Shapi3
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ro, E., Tourette’s syndrome and Tic Disorders: Clinical Understanding and Treatment. Wiley series in
child and adolescent mental health. Eds. Cohen, D.J.,
Bruun, R.D., Leckman, J.F., New York City, John Wiley and Sons, pp. 267-298, 1988). El efecto colateral de la disquinesia tardía es particularmente preocupante porque puede añadir movimientos involuntarios
anormales adicionales de la lengua, la mandíbula, el
tronco y/o las extremidades.
Erenberg y col. (Erenberg, G., Cruse, R.P., Rothner, A.D., Ann. Neurol., 22: 383-385, 1987) encontraron que la mayoría de los pacientes con ST deja de
utilizar su mediación con haloperidol o con otros neurolépticos hacia la edad de 16 años, debido a menudo
a los efectos colaterales. Una vez que los pacientes
con ST dejan la medicación, tienen menos control sobre el lenguaje y el movimiento, lo cual descalifica a
muchos para obtener empleos responsables a tiempo
completo. El público, incluyendo los oficiales que hacen cumplir la ley, identifican a menudo los síntomas
con una intoxicación. Los movimientos inesperados y
la coprolalia causan grandes dificultades sociales.
Se ha observado que el 50% de los niños que presentan ST tienen también el Trastorno de Hiperactividad con Déficit de Atención (ADHD). El ADHD es
un trastorno neurobiológico caracterizado por una capacidad de atención disminuida, una impulsividad incrementada e hiperactividad. El ADHD es actualmente la condición psiquiátrica más comúnmente diagnosticada en la infancia, con cerca de 3,5 millones de
afectados. Además, el 60% de los adolescentes con
ADHD continúa teniendo síntomas en la fase adulta,
representando otros 2,5 millones de pacientes.
Muchas enfermedades neuropsiquiátricas implican movimientos anormales o involuntarios, incluyendo, pero sin limitarse a, el trastorno obsesivo compulsivo (OCD), ST, ADHD, hemidistonía y Enfermedad de Huntington. Estas enfermedades pueden estar causadas por desequilibrios neuroquímicos en los
ganglios basales del cerebro. La acetilcolina regula la
actividad motora en los humanos mediante la activación de los nAChrs en los ganglios basales (Clarke,
P.B.S., Pert, A., Brain Res., 348: 355-358, 1985). La
estimulación nicotínica excita la actividad en las células productoras de dopamina (DA) de los ganglios
basales (Clarke, P.B.S. y col., J. Pharmacol. Exper.
Therapeutics, 246: 701-708, 1988; Grenhoff, J., Aston-Jones, G., Svennson, T.H., Acta Physiol. Scand.,
128:351-358, 1986; Imperato, A., Mulas, A., Di Chiara, G., Eur. J. Pharmacol., 132: 337-338, 1986), mientras que la mecamilamina bloquea los nAChr e inhibe
la liberación de DA por las estructuras de los ganglios
basales (Ahtee, L., Kaakkola, S., Br. J. Pharmacol.,
62: 213-218, 1978).
La Patente de EE.UU. Nº 5.774.052 para Rose y
Levin describe combinaciones de agonista-antagonista para reducir la utilización de nicotina y de otros fármacos. El antagonista nicotínico mecamilamina fue
administrado, en combinación con nicotina, para tratar la dependencia del tabaco. Rose y Levin propusieron la inclusión de nicotina y mecamilamina juntas
en un parche. Rose y Levin sugirieron también que
tales combinaciones de agonista-antagonista podían
ser utilizadas en otros trastornos psicopatológicos y
en casos que implicaran una disfunción neuronal (por
ejemplo, depresión maníaca, esquizofrenia e hipertensión debida a un trastorno autónomo simpático).
Sería beneficioso para los pacientes el poder con4
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tar con un mejor control de los síntomas y menos
efectos colaterales. Nuestra experiencia clínica con
el racemato de mecamilamina en pacientes humanos
con una variedad de enfermedades apoya una variedad de utilizaciones. Se describe en la presente un
control mejorado de los síntomas con exo-R-mecamilamina para el tratamiento de una variedad de trastornos neuropsiquiátricos sensibles a nicotina.
Descripción de la invención
La invención proporciona la utilización de exo-Smecamilamina o de una sal de la misma farmacéuticamente aceptable, sustancialmente libre de exo-R-mecamilamina, para la fabricación de un medicamento
para el tratamientos de trastornos neuropsiquiátricos
en un humano. Preferiblemente, la cantidad de dicha
exo-S-mecamilamina o de la sal es de 0,5 mg aproximadamente a 20 mg aproximadamente. Un medicamento preferido contiene clorhidrato de exo-S-mecamilamina y un vehículo farmacéuticamente aceptable. El medicamento puede ser adaptado para administración oral, intravenosa. El medicamento puede
ser un parche transdérmico, una preparación sólida o
una forma de liberación mantenida. Preferiblemente,
la exo-S-mecamilamina sustancialmente pura es más
de un 95% en peso y la exo-R-mecamilamina es menos de un 5% en peso. Más preferiblemente, la exoS-mecamilamina sustancialmente pura es más de un
99% en peso y la exo-R-mecamilamina es menos de
un 1% en peso. Incluso más preferiblemente, la exoS-mecamilamina sustancialmente pura es más de un
99,5% en peso y la exo-R-mecamilamina es menos
de un 0,5% en peso. Muy preferiblemente, la exoS-mecamilamina sustancialmente pura es más de un
99,7% en peso y la exo-R-mecamilamina es menos
de un 0,3% en peso.
Se describen en la presente tratamientos de condiciones médicas mediante la administración de una
cantidad terapéuticamente eficaz de exo-S-mecamilamina o de una sal de la misma farmacéuticamente
aceptable, sustancialmente libre de su exo-R-mecamilamina, siendo dicha cantidad suficiente para mejorar la condición médica. Preferiblemente, el método
proporciona la administración de exo-S-mecamilamina intravenosamente, transdérmicamente, intratecalmente, oralmente o mediante una inyección en bolus.
Preferiblemente, la dosificación de exo-S-mecamilamina es de 0,5 mg aproximadamente a 20 mg aproximadamente. Preferiblemente, la exo-S-mecamilamina es administrada de una a cuatro veces al día. Las
condiciones médicas incluyen, pero no se limitan a,
adicción a sustancias (implicando cocaína, alcohol,
anfetaminas, opiáceos, otros psicoestimulantes y una
combinación de los mismos), Síndrome de Tourette y
otros temblores, trastorno bipolar, depresión, un trastorno de ansiedad, esquizofrenia, un trastorno convulsivo, Enfermedad de Parkinson, trastorno de hiperactividad con déficit de atención, trastorno obsesivo
compulsivo, hemidistonía y Enfermedad de Huntington.
Se describe también en la presente un método para producir un efecto anti-nicotina que tenga mayor
duración que el efecto de una dosis comparable de
mecamilamina racémica. Este método incluye la administración a un individuo con necesidad de ello de
una cantidad de exo-S-mecamilamina que produzca
un efecto anti-nicotina con una duración de más del
doble que el producido por la mecamilamina racémica, conteniendo la exo-S-mecamilamina al menos un
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90% en peso de exo-S-mecamilamina y menos de un
10% aproximadamente en peso de exo-R-mecamilamina.
Breve descripción de las figuras
La Figura 1 es una gráfica de una cromatografía de
gases que muestra que la exo-S-mecamilamina eluye
puramente 63,971 minutos después de su colocación
en la columna.
La Figura 2 muestra las estructuras de la mecamilamina en general (+/-), de la exo-R-mecamilamina y
de la exo-S-mecamilamina.
La Figura 3 es una gráfica que muestra la distancia total recorrida en 60 minutos por ratas que han
sido sometidas a siete días de sensibilización con solución salina o con mecamilamina a una de 3 dosis. El
símbolo de cruz indica diferencias significativas con
respecto al grupo Sal/Sal. El asterisco identifica diferencias significativas respecto al grupo Sal/Nic.
La Figura 4 es una gráfica que muestra la distancia recorrida en la zona central por ratas en el mismo
estudio.
La Figura 5 es una gráfica que muestra la actividad
vertical de las ratas en el mismo estudio.
La Figura 6 es un gráfico de barras que muestra el
comportamiento ambulatorio entre el grupo de tratamiento y el grupo control.
La Figura 7 es un gráfico de barras que muestra el
comportamiento de empinamiento sobre las patas traseras entre el grupo de tratamiento y el grupo control.
La Figura 8 es un gráfico de barras que muestra
los recuentos de comportamiento estereotípico entre
el grupo control y el grupo tratado.
La Figura 9 es un gráfico de barras que muestra la
distancia media recorrida en la zona central después
de la inyección con solución salina o con una forma
de mecamilamina.
La Figura 10 es un gráfico de barras que muestra la respuesta locomotora (distancia total) a nicotina
sola 24 horas antes y 24 horas después de un tratamiento de dos días con una combinación de mecamilamina/nicotina.
Las Figuras 11A y 11B muestran los efectos de las
formas de mecamilamina sobre la catalepsia inducida
por haloperidol. La Figura 11A muestra los valores
medios; la Figura 11B muestra los valores de la mediana.
Modo mejor de llevar a cabo la invención
Aunque existe cierta variabilidad de un paciente a
otro, se observa generalmente que mediante la administración de una cantidad eficaz de únicamente exoR-mecamilamina, es posible realizar una terapia más
“dirigida” que proporcione el efecto deseado sin las
consecuencias de todos los demás efectos farmacológicos. Esto es importante ya que no es deseable que
a todos los pacientes se les administre un compuesto
con tal espectro de actividad de múltiples facetas.
La síntesis de mecamilamina ha sido descrita en
tres patentes: las Patentes de EE.UU. Nos 2.831.027
(1958), 2.885.428 (1959) y 5.986.142 (1999).
Para la síntesis de mecamilamina un material de
partida es canfeno, el racemato o cualquier enantiómero. Los enantiómeros están disponibles a partir de
fuentes naturales o pueden ser obtenidos mediante separación utilizando cromatografía líquida empleando
un medio quiral (Armstrong, J. Chrom. A, 666: 445,
1994). Pueden ser producidos también utilizando separación cinética en la que un reactivo quiral reacciona selectivamente con un enantiómero, dejando al
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otro intacto (Jenke, J. Organomet. Chem., 405: 383,
1991). Los enantiómeros de canfeno pueden ser también producidos a partir de precursores quirales (Hana, Chem. Ber., 111: 2527, 1978).
El canfeno, racémico o enantiomérico, puede hacerse reaccionar en medio ácido con una fuente de
nitrógeno tal como azida (Pancrazi, Bull. Chim. Soc.
(Fr.), (1977) 162), cianuro (Stein, J. Am. Chem. Soc.,
78: 1514, 1956; Stone, J. Med. Pharm. Chem., 5:
665, 1962; Pfister, Patente de EE.UU. Nº 2.831.027
(1958)) o tiocianato (Luskin, Patente de EE.UU. Nº
2.885.428; CA 53: 20124h). Los productos intermedios así producidos pueden ser convertidos en mecamilamina, el racemato o cualquiera de los enantiómeros.
El canfeno, racémico o enantiomérico, puede ser
convertido en clorhidrato de canfeno (Gream, Aust.
J. Chem., 27: 567, 1974) que puede hacerse reaccionar con nitrito (Huckel, Ann. 528 (1937) 57; CA.
31: 3033-4) para producir un producto intermedio que
puede ser convertido en mecamilamina, el racemato o
cualquiera de los enantiómeros. El clorhidrato puede
hacerse reaccionar también con una amina para producir mecamilamina, racémica o enantiomérica (Stone, J. Med. Pharm. Chem., 5: 665, 1962) o un producto intermedio que puede ser convertido en mecamilamina, racémica o cualquiera de los enantiómeros.
La canfenilona, racémica o como cualquiera de
sus enantiómeros, puede hacerse reaccionar con un
metil litio o con un metilo nucleofílico similar para
producir un alcohol (Stone, J. Med. Pharm. Chem., 5:
665, 1962; Gream, Aust. J. Chem., 27 (1974) 567).
El alcohol o sus derivados pueden ser sometidos a las
reacciones ácidas descritas anteriormente para el canfeno con el fin de producir mecamilamina, racémica
o como cualquiera de sus enantiómeros, o bien productos que pueden ser convertidos en la misma (Stone, J. Med. Pharm. Chem., 5: 665, 1962). Un alcohol similar puede ser producido a partir del canfeno,
racémico o enantiomérico (Coxon, Tetrahedron, 26:
3755, 1970) y ser sometido a las mismas reacciones
que producen productos similares.
La reacción de azidas orgánicas con canfeno, racémico o como cualquiera de sus enantiómeros, seguida por descomposición fotolítica o térmica (Huisgen,
Chem. Ber., 98: 3992, 1965; Franz, J. Org. Chem.,
29: 2922, 1964) del producto de reacción da lugar a
una aziridina cuyo anillo puede ser abierto (Gold, J.
Org. Chem., 37: 2208, 1972) y ser transformada en
mecamilamina, el racemato o cualquiera de los enantiómeros.
La mecamilamina puede ser sintetizada en forma
racémica o como cualquiera de los enantiómeros. El
producto racémico puede ser separado en sus enantiómeros mediante la formación de sales utilizando ácidos quirales (carboxílico, sulfónico, fosfórico) (Pfister, Patente de EE.UU. Nº 2.831.027 (1958); Stone, J.
Med. Pharm. Chem., 5: 665, 1962) y posteriormente
el enantiómero puede ser regenerado por derivatización con moléculas quirales. Los diastereómeros resultantes pueden ser separados por cristalización o por
cromatografía simple (Schonenberger, Helv. Chim.
Acta, 69 (1986) 283) y posteriormente el enantiómero
puede ser regenerado, o mediante cromatografía líquida utilizando un medio quiral.
Definiciones
La “exo-S-mecamilamina” incluye el enantiómero
d del clorhidrato de N,2,3,3-tetrametilbiciclo-[2.1.1]
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heptan-2-amina, 826-39-1. Este enantiómero es referido también como clorhidrato de exo-S-N,2,3,3-tetrametil-biciclo-[2.1.1]heptan-2-amina.
Los “compuestos relacionados con exo-S-mecamilamina” incluyen varios estereoisómeros y análogos sustituidos activos de mecamilamina (Stone y
col., J. Med. Pharm. Chem., 5(4): 665-90, 1962, incorporada a la presente por referencia). La actividad
puede ser analizada en ratas mediante convulsiones
por nicotina, dilatación de la pupila y mediante otros
métodos tales como los descritos posteriormente. Tal
actividad era rutinariamente perdida con sustituciones
más grandes de los grupos metilo, que no son parte
de esta invención. Los grupos metilo o dimetilo en el
grupo amino eran más activos que otros sustituyentes y están incluidos en la presente. La forma d era
activa; sin embargo, el racemato dl parecía ser ligeramente más activo. Por consiguiente, la forma l parece
tener una actividad significativa. Stone y col. informaron que la forma exo (el grupo metilamino está en el
mismo plano que el puente de metileno) era siempre
más potente que la forma endo (el grupo metilamino
está por debajo del puente de metileno y tiende a situarse en la celda creada por el puente). Además, una
estructura parcial, el 2,2-dimetil-3-metilaminobutano,
era también activa. Stone concluyó que las ligeras diferencias de actividad entre diferentes modelos para
la forma d y otros análogos no eran significativas.
El término “sustancialmente libre del clorhidrato
de exo-R-mecamilamina”, según se utiliza en la presente, significa que la composición contiene al menos
un 90% aproximadamente en peso de exo-S-mecamilamina y menos de un 10% en peso aproximadamente
de exo-R-mecamilamina. En una realización más preferida, la composición contiene al menos un 95% en
peso de exo-S-mecamilamina y menos de un 5% en
peso aproximadamente de exo-R-mecamilamina. En
la realización más preferida, la composición contiene
al menos un 99% en peso de exo-S-mecamilamina y
menos de un 1% aproximadamente en peso de exo-Rmecamilamina.
Un “efecto beneficioso” es una notable mejora con
respecto a los signos y síntomas basales clínicamente
observables y puede incluir informes de mejora subjetivos por parte del paciente. Por ejemplo, un efecto
beneficioso sobre los trastornos motores incluye disminuciones en la frecuencia o en la gravedad de los
tics, pero las mejoras pueden manifestarse también indirectamente mediante una reducción de la ansiedad,
de los estallidos agresivos y de las urgencias premonitorias que a menudo preceden o componen la gravedad de los movimientos anormales. Los efectos del
tratamiento pueden ser cuantificados mediante observaciones clínicas y valoración en una cinta de vídeo.
Los efectos beneficiosos pueden ser también pronosticados por los resultados de un estudio de selección
en animales. Por ejemplo, Suemaru y col. (ibid) han
propuesto que el temblor de la cola de la rata inducido
por nicotina pueden ser utilizado con el fin de seleccionar compuestos para tratar temblores. La administración repetida de nicotina puede inducir hiperactividad locomotora y un temblor de la cola de las ratas
que es bloqueado con mecamilamina (0,1-1 mg/día,
ip) pero no por hexametonio que no entra fácilmente en el cerebro (Suemaru, K., Oishi, R., Gomita, Y.
Arch. Pharm., 350: 153-57, 1994).
La Escala de Gravedad Global de los Tics de Yale
(YGTTS) es la escala de valoración para determina6
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ción clínica más ampliamente utilizada para evaluar
los síntomas de tics. Proporciona una medida objetiva
de la frecuencia y de la gravedad de los tics basada
en observaciones clínicas. Esta escala incluye un inventario de síntomas de tics que es rellenado sobre
la base del recuerdo personal del paciente de los tics
que ocurrieron durante la semana previa. Utilizando
este inventario como una guía, el médico valora posteriormente la gravedad de los tics motores y vocales
en cinco dimensiones separadas: número, frecuencia,
intensidad, complejidad e interferencia. Además, hay
también una valoración separada del deterioro global
que caracteriza el impacto del trastorno sobre la función social, la autoestima, etc., del paciente a lo largo
de la semana previa.
Un método objetivo para valorar los síntomas de
tics emplea la grabación en vídeo de los pacientes. Se
visiona una cinta de vídeo de al menos cinco minutos y se registra la frecuencia y la gravedad de los tics
motores y vocales. La cinta de vídeo ha demostrado
ser un accesorio valioso para los sistemas de valoración clínica en los ensayos de fármacos (Leckman,
J.F. y col., Arch. Gen. Psychiatry, 48: 324-328, 1991;
Shapiro, E.S. y col., Arch. Gen. Psychiatry, 46: 722730, 1989; McConville, B.J., Fogelson, M.H., Norman, A.B., Klykylo, W.M., Manderscheid, M.A., Parker, K.W., Sanberg, P.R., Am. J. Psychiatry, 148: 793794, 1991; Silver, A.A., Shytle, R.D., Philipp, M.K.,
Sanberg, P.R., The Effects of Nicotine on Biological Systems II. P.B.S. Clarke, M. Quik y K. Thurau,
(Eds.); Advances in Pharmacological Sciences, Birkhauser Publishers, pp. 293-299, 1995; Reveley, M.A.
y col., Journal of Psychopharmacology, Suplemento
A30, 117, 1994).
Los efectos beneficiosos en los trastornos obsesivo compulsivos incluyen la disminución del comportamiento obsesivo o compulsivo, que puede ser confirmada por los informes del paciente o de la familia.
Los efectos beneficiosos sobre el abuso de alcohol o
de cocaína incluyen periodos más largos sin drogas
así como sentimientos subjetivos de menor necesidad
de la droga.
Los “efectos colaterales” son acciones no deseadas que pueden incluir, pero que no se limitan a, efectos cardiovasculares, hipotermia, temblores, antidiuresis, antinocicepción, visión borrosa, impotencia, disuria, temblor, movimientos coreiformes, aberraciones mentales, nerviosismo, depresión, ansiedad, insomnio, hablar dificultoso, debilidad, fatiga, sedación, dolor de cabeza, estreñimiento, insuficiencia renal, tergiversación del gusto (sentido del gusto alterado), mareo y dispepsia.
El término “cantidad eficaz” se refiere a la cantidad de exo-S-mecamilamina que es necesaria para proporcionar beneficio. La cantidad precisa requerida variará dependiendo de la edad y del peso del
sujeto, de la gravedad de la enfermedad, de la vía
de administración, etc., pero puede ser determinada fácilmente mediante experimentación rutinaria, según se describe más adelante en los ejemplos clínicos. En general, sin embargo, una cantidad eficaz
de exo-S-mecamilamina varía de 0,001 mg/kg aproximadamente a 6 mg/kg por día aproximadamente,
preferiblemente de 0,002 mg/kg aproximadamente a
3 mg/kg aproximadamente, más preferiblemente de
0,005 mg/kg aproximadamente a 2 mg/kg aproximadamente y, muy preferiblemente, de 0,01 aproximadamente a 1,5 mg/kg aproximadamente. Una dosis ini-
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cial para adultos con ST resistente a fármacos es de
2,5 mg por día aproximadamente, con la dosis ajustada según el retorno de los síntomas. Un niño pequeño
con ADHD leve comienza preferiblemente con 1 mg
por día o menos.
El término “farmacéuticamente aceptable” se refiere a la ausencia de toxicidad inaceptable en un compuesto, tal como una sal o un excipiente. Las sales
farmacéuticamente aceptables incluyen aniones inorgánicos tales como cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, sulfito, nitrato, nitrito, fosfato y similares, y aniones orgánicos tales como acetato, malonato, piruvato,
propionato, cinamato, tosilato, citrato y similares. Excipientes farmacéuticamente aceptables están descritos en profundidad por E.W. Martin en Remington’s
Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing, Co.).
Las composiciones farmacéuticas que contienen
exo-S-mecamilamina pueden contener uno o más vehículos farmacéuticos. El término “vehículo farmacéuticamente aceptable” se refiere a cualquier excipiente aceptable de manera general que sea relativamente inerte, no tóxico y no irritante. Cuando el vehículo sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido que actúe como vehículo,
excipiente o medio para el ingrediente activo. Pueden prepararse formas farmacéuticas de dosificación
unidad para la administración mediante cualquiera de
varias vías incluyendo, pero sin limitarse a, oral y parenteral (especialmente mediante inyección intramuscular e intravenosa, o mediante implante subcutáneo o
administración transdérmica). Son representativas de
tales formas las tabletas, cápsulas de gelatina blanda
y dura, polvos, pastillas, gomas de mascar, emulsiones, suspensiones, jarabes, soluciones, soluciones inyectables estériles y polvos envasados estériles. Las
composiciones que contienen antagonistas de nicotina pueden ser formuladas mediante procedimientos
conocidos en la técnica para proporcionar una liberación rápida, mantenida o retardada de cualquiera o de
todos los componentes después de la administración.
Además de las formas de dosificación común presentadas anteriormente, los compuestos de la presente invención pueden ser también administrados mediante
medios y/o dispositivos de administración de liberación controlada tales como los descritos en las Patentes de EE.UU. Nos 3.845.770; 3.916.899; 3.536.809;
3.598.123; 4.008.719; 5.910.321; 5.348.746 y similares por los diferentes fabricantes de medios y/o dispositivos de administración de liberación controlada.
Como la formulación de exo-S-mecamilamina de
la presente invención es muy adecuada para administración oral, los vehículos preferidos facilitan la
formulación en forma de tabletas o cápsulas. Pueden
utilizarse excipientes farmacéuticos sólidos tales como estearato de magnesio, carbonato de calcio, sílice,
almidón, sacarosa, dextrosa, polietilén glicol (PEG),
talco y similares con otros adyuvantes farmacéuticos convencionales incluyendo agentes de carga, lubricantes, agentes humectantes, agentes conservantes,
agentes desintegrantes, agentes aromatizantes y aglutinantes tales como gelatina, goma arábiga, celulosa,
metilcelulosa y similares, con el fin de formar mezclas que pueden ser utilizadas como tales o que pueden ser convertidas en tabletas, encapsuladas o preparadas en otras formas adecuadas según se indicó
anteriormente. Una descripción general de formulación está presentada en Remington’s Pharmaceutical
Sciences (Mack Publishing Co.).
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Modos de administración
La administración se realiza preferiblemente mediante dosificación oral pero puede ser mediante aplicación transdérmica, pulverización intranasal, inhalación bronquial, supositorios, inyección parenteral
(por ejemplo inyección intramuscular o intravenosa)
y similares. Los vehículos para administración parenteral incluyen, sin limitación, soluciones acuosas de
dextrosa, manitol, manosa, sorbitol, solución salina,
agua pura, etanol, glicerol, propilén glicol, aceite de
cacahuete, aceite de sésamo, polímeros de bloque de
polioxietileno-polioxipropileno y similares. Pueden
incluirse adicionalmente conservantes, estabilizantes,
antioxidantes, antimicrobianos y agentes tamponantes adecuados, por ejemplo BHA, BHT, ácido cítrico, ácido ascórbico, tetraciclina y similares. Alternativamente, la formulación del antagonista de nicotina puede ser incorporada o encapsulada en una matriz polimérica o membrana adecuada, proporcionando así un dispositivo de administración de liberación
mantenida adecuado para implantación o aplicación
cutánea. Otros dispositivos incluyen catéteres y dispositivos internos tales como las minibombas Alzet®.
La invención ha sido desvelada mediante descripción directa. Lo siguiente son ejemplos que muestran
la eficacia del método para proporcionar beneficio.
Los ejemplos son únicamente ejemplos y no debe ser
considerados de ninguna manera como limitantes del
alcance del método.
Análisis del Clorhidrato de exo-S-Mecamilamina
El cloruro de mecamilamina (Lote 2351) era un
99,95% puro mediante cromatografía de gases, según
está mostrado en la Figura 1. El cromatógrafo de gases retenía el clorhidrato de exo-S-mecamilamina durante 63,971 minutos y no se observaron otros picos
significativos. El contenido de cloruro era un 17,2%,
que estaba por debajo del límite teórico del 17,8%, pero dentro de la especificación. No se detectó canfeno
ni otras impurezas. La rotación óptica era +19,4º. Este
lote fue utilizado en los Ejemplos 1 y 9 siguientes. Las
estructuras de la mecamilamina y de los enantiómeros
están mostradas en la Figura 2.
Farmacología
Métodos Generales
Animales
Se utilizaron ratas Sprague-Dawley macho (ZiciMiller Laboratories, Allison Park, PA) que pesaban un
promedio de 463 gramos. Fueron alojadas en grupos
de 2-4 por jaula, se les dejó acceso libre a la comida
y al agua y se mantuvieron en un ciclo inverso de iluminación de 12 horas de luz/12 horas de oscuridad,
siendo la noche desde las 8:00 AM hasta las 8:00 PM.
Todos los ensayos tuvieron lugar durante el ciclo nocturno de las ratas.
Medidas y Aparatos
Para todos los ensayos locomotores, se utilizó
un Monitor de Actividad Animal Digiscan (Modelo
RXYSCM, Accuscan, Inc., Columbus, OH). Las dimensiones de las cajas eran 42 cm x 42 cm x 30 cm y
las paredes y los suelos eran de material acrílico transparente. Cada caja utilizada en este estudio tenía fotocélulas que, cuando el haz de luz era interrumpido
por el movimiento de la rata, calculaban un número
de variables. Toda la actividad locomotora era capturada automáticamente y registrada con un programa
de ordenador Digipro.
Para evaluar la catalepsia (la capacidad para mantener una posición después de ser colocada en la mis7
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ma) inducida por haloperidol y bloqueada por el tratamiento, se utilizó el ensayo de la barra. La barra fue
colocada 9 cm por encima del tablero de la mesa. Las
patas delanteras de la rata fueron colocadas simultáneamente sobre la barra y las patas traseras colocadas
bajo la rata para apoyo. Se midió el tiempo desde el
segundo en el que las patas delanteras fueron colocadas sobre la barra hasta que la rata retiró ambas patas de la barra. El tiempo mínimo era 1 segundo y el
tiempo máximo permitido fue de 60 segundos. Cuando más corto era el tiempo sobre el barra, mayor era
el bloqueo de la catalepsia inducida por haloperidol.
Fármacos
La mecamilamina HCl fue obtenida de Layton
Bioscience, Inc., Atherton, CA. Los isómeros ópticos
de la mecamilamina fueron separados del racemato
según los procedimientos descritos por Stone y col.
(supra), pero con modificaciones significativas para
mejorar la pureza óptica y los rendimientos (ver anteriormente). La (-)-nicotina fue obtenida de Sigma
Chemical Co. (St. Louis, MO). El lactato de haloperidol (Solopak®) fue obtenido de una farmacia local.
Todos los fármacos fueron disueltos en solución salina en un volumen de 1 mg/ml e inyectados subcutáneamente.
Ejemplo 1
Ochenta y ocho ratas derivadas de Sprague-Dawley adultas macho sin utilizar experimentalmente fueron alojadas dos por jaula y se les permitió libre acceso a la comida y al agua. Cada rata recibió una condición de pretratamiento durante siete días consecutivos
asignada aleatoriamente. Cada día de este periodo de
pretratamiento, las ratas recibieron una inyección de
solución salina, de mecamilamina racémica, de exoR-mecamilamina o de exo-S-mecamilamina 20 minutos antes de recibir una segunda inyección de solución
salina o de nicotina (0,4 mg/kg s.c.) y se dejaron en
sus jaulas. El pretratamiento asignado fue dispuesto
de tal manera que se comenzó a la vez con 2 ratas de
cada condición y fueron analizadas juntas para controlar los efectos de la secuencia. Las ratas no recibieron tratamiento ni fueron sometidas a ensayo el día 8.
El día 9, las ratas fueron analizadas para determinar la
presencia de la respuesta estimulante locomotora sensibilizada a nicotina. Cada rata fue colocada en una
caja para determinar la actividad locomotora durante
un periodo de acostumbramiento de 60 minutos, seguido por una inyección de nicotina (0,4 mg/kg s.c.)
y posteriormente colocadas inmediatamente de nuevo
en la caja para medir la actividad locomotora. Un ordenador registraba los datos a lo largo de los siguientes 60 minutos a intervalos de 5 minutos.
Las Figuras 3-5 ilustran 3 variables dependientes respectivamente para todos los grupos después de
una inyección de ensayo de 0,4 mg/kg de nicotina el
día 9. El grupo con el pretratamiento de solución salina/nicotina (sal/nic) presentaba una respuesta locomotora sensibilizada a nicotina, que no era evidente
en ninguno de los grupos de pretratamiento con mecamilamina/nicotina (mec/nic). Comparaciones posteriores adicionales indicaban que la respuesta locomotora a nicotina era significativamente mayor para
el grupo de pretratamiento con sal/nic cuando se comparó con los demás grupos (p<0,05). La respuesta a
nicotina en los grupos de pretratamiento con mec/sal
no era significativamente diferente de la de los grupos que no recibieron nicotina en el grupo de pretratamiento con sal/sal (p<0,05), excepto en el caso de la
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actividad vertical, en el que todos los grupos mec/sal
tenían significativamente menos actividad que el control. A una dosis de solamente 0,1 mg/kg, la exo-Rmecamilamina bloqueaba eficazmente la actividad de
la nicotina respecto a la distancia total del control.
El pretratamiento con mecamilamina y con ambos
de sus estereoisómeros en los días de exposición a nicotina, impedía de manera dependiente de la dosis el
desarrollo de respuestas locomotoras sensibilizadas a
nicotina. Se encontró una disminución de la actividad
vertical después de la inyección de ensayo de nicotina
sola (día 9) en las ratas que habían recibido una exposición crónica a mecamilamina/nicotina con relación
a aquéllas que habían recibido una exposición crónica
a solución salina/solución salina. Esto sugiere que la
exposición crónica a mecamilamina reduce realmente
la respuesta locomotora a nicotina hasta niveles por
debajo de los observados en el grupo de solución salina/solución salina. Aunque ambos isómeros de mecamilamina seguían el mismo patrón general, la exoR-mecamilamina era generalmente más eficaz a dosis
más bajas, particularmente para la distancia recorrida en la zona central y la actividad vertical. Y lo que
es más interesante, la pre-exposición a exo-R-mecamilamina, pero no a exo-S-mecamilamina, impedía la
expresión de la respuesta sensibilizada a nicotina en
la distancia recorrida en la zona central. Esto sugiere que la exo-R-mecamilamina puede ser más eficaz
que el isómero (+) o que la mecamilamina racémica,
para reducir los efectos ansiolíticos de la nicotina en
fumadores.
Ejemplo 2
Este experimento fue diseñado para determinar si
los enantiómeros difieren en su capacidad para influir
sobre la actividad locomotora espontánea. Después de
un periodo de lavado de siete días las ratas fueron
asignadas aleatoriamente a nuevos grupos de 8 ratas
cada uno. Los animales fueron inyectados con una de
las sustancias siguientes: solución salina, 3,0 mg/kg
de (+/-)-mecamilamina, 3,0 mg/kg de exo-S-mecamilamina o 3,0 mg/kg de exo-R-mecamilamina. Las ratas fueron colocadas en la caja del aparato para medir
la actividad locomotora durante 60 minutos, siendo
recogidos los datos a intervalos de 5 minutos.
La Figura 6 es la clave para las tres figuras siguientes. Las Figuras 7, 8 y 9 muestran que la mecamilamina racémica reducía la actividad locomotora espontánea, incluyendo la distancia total recorrida (Figura
6), el tiempo en posición vertical (Figura 7) y el comportamiento estereotípico (Figura 8). Este patrón de
reducción de la actividad locomotora espontánea fue
también real para la exo-R-mecamilamina. Por otra
parte, la exo-S-mecamilamina no producía esencialmente ningún efecto sobre la locomoción espontánea
o, en algunos casos, incrementaba el comportamiento
locomotor. Por ejemplo, las ratas que recibieron exoS-mecamilamina presentaban significativamente más
actividad locomotora en el campo central que las ratas
tratadas con solución salina (Figura 9).
Cuando se administra sola, la exo-R-mecamilamina tiende a disminuir la locomoción espontánea,
mientras que la exo-S-mecamilamina no tiene efecto
o incrementa realmente el comportamiento locomotor. Por ejemplo, la exo-S-mecamilamina incrementaba significativamente la distancia recorrida en el centro del campo abierto. Como la investigación previa
con fármacos que reducen la ansiedad en humanos
(por ejemplo, el Valium) demostró que incrementa-
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ban también la distancia recorrida en el centro de un
campo abierto, la exo-S-mecamilamina puede reducir
también la ansiedad.
Ejemplo 3
Este experimento fue diseñado para determinar si
los isómeros difieren en la duración de su acción bloqueante de los efectos locomotores de la nicotina.
Después de un periodo de lavado de siete días, las ratas fueron asignadas aleatoriamente a dos grupos de
ocho ratas cada uno. A todas las ratas se les administraron inyecciones s.c. de 0,4 mg/kg de nicotina una
vez al día durante cinco días. Cada grupo recibió posteriormente la dosis umbral de 0,3 mg/kg de (-)-mecamilamina o de 0,3 mg/kg de exo-S-mecamilamina a
intervalos de 1, 3 y 6 horas antes de recibir la nicotina.
En los días intermedios, las ratas de cada grupo recibieron solución salina a intervalos de 1, 3 y 6 horas
antes de recibir 0,4 mg/kg de nicotina. Se permitió a
las ratas un periodo de acostumbramiento de 30 minutos en la caja locomotora antes de recibir la nicotina
y posteriormente se sometieron al ensayo durante 30
minutos.
La Figura 10 muestra que las ratas pretratadas con
exo-R-mecamilamina dos días seguidos no presentaron una respuesta estimulante a la nicotina que fue administrada 24 horas después de la última dosis de exoR-mecamilamina (p<0,01, comparando antes y después mediante el test t de 2 colas pareado). Esencialmente no había diferencia en la respuesta estimulante
de las ratas tratadas con exo-S-mecamilamina. Esto
indica que la exo-R-mecamilamina tiene una mayor
duración de acción (al menos 24 horas en este ensayo). Tiene que determinarse todavía si este efecto
implica diferencias farmacocinéticas o farmacodinámicas entre los isómeros.
Ejemplo 4
Este experimento analizaba los efectos de los
enantiómeros de mecamilamina sobre la catalepsia inducida por haloperidol. Cuarenta y ocho ratas fueron
asignadas aleatoriamente a 4 grupos de 12 ratas cada
uno. Éste era un diseño entre sujetos, sometiéndose
cada grupo de ratas a uno de los tratamientos siguientes: solución salina, 3,0 mg/kg de (+/-)-mecamilamina, 3,0 mg/kg de exo-S-mecamilamina o 3,0 mg/kg
de exo-R-mecamilamina. Las ratas recibieron inyecciones s.c. de 0,3 mg/kg de haloperidol 30 minutos
antes de una inyección s.c. del tratamiento. Después
de 30 minutos adicionales, las ratas fueron colocadas
sobre la barra. Posteriormente, después de un periodo
de lavado de siete días, las ratas recibieron una inyección s.c. de solución salina 30 minutos antes de
una inyección s.c. del fármaco de tratamiento y fueron colocadas sobre la barra 30 minutos después de la
inyección. Los experimentadores no conocían el tratamiento de las ratas y el mismo experimentador administró el producto problema cada vez.
Las Figuras 11A y 11B muestran que la exo-Rmecamilamina tendía a incrementar la catalepsia inducida por haloperidol, mientras que la exo-S-mecamilamina tendía a reducir la respuesta cataléptica al
haloperidol. Este hallazgo sugiere que la exo-R-mecamilamina puede ser útil para trastornos de movimiento hipercinéticos, mientras que la exo-S-mecamilamina puede ser útil para trastornos de movimiento hipocinéticos.
Ejemplo 5
Se ha demostrado recientemente que algunos trastornos convulsivos, incluyendo pero sin limitarse a la
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epilepsia mioclónica juvenil, la epilepsia del lóbulo
frontal nocturna autosómica dominante y posiblemente la epilepsia idiopática heredada, están mediados
por los mismos receptores a los que se une la nicotina en el cerebro. Se ha demostrado que la nicotina
induce cortos periodos de actividad convulsivante en
las ratas. Okamoto y col. (Jpn. J. Pharmacol., 59: 44955, 1992) mostraron que una única dosis elevada de
mecamilamina (1,0 mg/kg) bloqueaba las convulsiones inducidas por nicotina en ratas. El presente experimento evalúa el efecto de la exo-R-mecamilamina
para bloquear las convulsiones inducidas por nicotina en ratas. La dosis de la exo-R-mecamilamina varía
de 0,1 a 3,0 mg/kg/día y la de la nicotina de 2,5 a 5
mg/kg/día. La administración es por vía intraperitoneal o por otra vía factible. Se administra una inyección i.p. aguda de exo-R-mecamilamina o de solución
salina 15 minutos antes de la administración de nicotina. Después de la administración del fármaco, cada
rata es colocada en una caja de ensayo para observación durante 30 minutos, y se registra la actividad
convulsivante.
Ejemplo 6
Los efectos sobre el comportamiento del agonista
de dopamina apomorfina han proporcionado un modelo animal útil de trastornos hiperdopaminérgicos tales como el Síndrome de Tourette. Cuando se administra a las ratas, la apomorfina induce un movimiento estereotípico y un comportamiento de lameduras.
De manera dependiente de la dosis, la nicotina altera (aumenta a dosis de 0,05 y 0,5 µg/kg y disminuye
a 250 µg/kg) el comportamiento de lameduras cuando es administrada antes de la apomorfina. La mecamilamina (1 y 3 mg/kg) disminuía la respuesta a
la nicotina e incrementaba el acicalamiento espontáneo (Zarrindast y col., J. Psychopharmacol., 12: 3759, 1998). La mecamilamina (0,05, 0,25 y 0,5 mg/kg
i.p.) reducía enormemente la respuesta de lameduras
de la rata a la apomorfina (Zarrindast y col., Eur. Neuropsychoparmacol., 9: 235-8, 1999). El enantiómero
exo-S-mecamilamina es analizado para determinar su
capacidad para bloquear la respuesta estereotípica a
la apomorfina en ratas. La vía de administración es
inyección s.c. o i.p. Las dosis de exo-S-mecamilamina son de 0,1-3,0 mg/kg/día aproximadamente, las
de apomorfina 0,5-2,0 mg/kg/día y la de nicotina 0,4
mg/kg/día. En el ensayo agudo, cada rata recibe solución salina o exo-S-mecamilamina 15 minutos antes de recibir la apomorfina o la nicotina. Inmediatamente después de la segunda inyección, cada rata es
colocada en una caja para determinar la actividad locomotora durante una hora de ensayo. Las ratas pueden ser utilizadas en un estudio crónico y recibir un
tratamiento similar, excepto en que su pretratamiento
incluye 7 días de exposición a solución salina o a exoS-mecamilamina.
Ejemplo 7
Este experimento evalúa el efecto de la exo-S-mecamilamina sobre los receptores nicotínicos implicados en la respuesta neuroendocrina al estrés. Este experimento utiliza estrés agudo causado por una breve exposición a un gato. Una dosis baja (0,1 mg/kg)
de mecamilamina racémica impide la respuesta neuroendocrina al estrés causado por la exposición a un
gato (Shytle y col., Soc. Neurosci. Abstr., 24: 371-15,
1998). Las ratas son pretratadas con solución salina o
con exo-S-mecamilamina inyectadas s.c. Las dosis de
exo-S-mecamilamina son de 0,01-3,0 mg/kg/día apro9
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ximadamente. A continuación, las ratas son colocadas en un recipiente circular de plexiglás transparente
que está dividido en 8 secciones, una para cada rata.
El gato es colocado posteriormente en la parte superior del recipiente durante 20 minutos. Controles sin
estrés son colocados en sus propias jaulas. Después
de 20 minutos, las ratas son retiradas y decapitadas
inmediatamente para la realización de ensayos neuroquímicos. Se recoge sangre de cada rata para medir
los niveles plasmáticos de corticosterona. Se extrae el
cerebro de cada rata para los ensayos de los niveles de
CRF y catecolaminas.
Ejemplo 8
Los efectos antihipertensivos del enantiómero
exo-S-mecamilamina se demuestran midiendo el bloqueo de la respuesta presora producida por la estimulación nerviosa simpática en la rata desmedulada. Las
ratas son anestesiadas con halotano (2% en O2 ), se
canulan la arteria carótida derecha y la vena yugular
derecha, y ambos nervios vagos son cortados a nivel
cervical medio. Además, la arteria carótida izquierda
y la vena yugular izquierda son ligadas para reducir
el riego sanguíneo cerebral. El catéter arterial es unido a un transductor de presión para registrar continuamente la presión sanguínea sistémica y el ritmo cardíaco. El catéter venoso es utilizado para la inyección
de compuestos. Las ratas son desmeduladas mediante la inserción de una varilla de acero a través de la
órbita y el foramen magnum hacia la médula espinal
hasta la primera vértebra sacra. Esta varilla es utilizada también para aplicar una estimulación eléctrica al
flujo simpático. Inmediatamente después de que los
animales sean desmedulados, se comienza a aplicar
respiración artificial con aire enriquecido en O2 , se inserta un electrodo indiferente bajo la piel del lomo y
se administra galamina (20 mg/kg, i.v.) para prevenir las contracciones musculares. Se deja un tiempo
de reposo de 30 minutos para estabilizar los parámetros cardiovasculares. Las respuestas presoras inducidas por la estimulación antes y después del tratamiento con exo-S-mecamilamina son medidas provocando
un flujo simpático a 1 Hz, 40 V, con una duración del
pulso de 1 ms mientras se monitorizan continuamente
los parámetros cardiovasculares. Las reducciones de
las elevaciones de la presión del pulso inducidas por
la estimulación reflejan la inhibición simpática producida por la exo-S-mecamilamina. Si la presión no
aumenta, eso indica que el fármaco tiene un efecto
simpaticolítico y es un candidato para análisis antihipertensivos posteriores. Alternativamente, el ensayo
es predictivo de la hipotensión ortostática como efecto colateral.
Ejemplo 9
Este experimento evalúa la eficacia y la potencia
de la exo-S-mecamilamina sobre los receptores α3 β4 ,
α4 β2 , α3 β2 y α7 humanos expresados en oocitos de
Xenopus y compara su actividad con la de la mecamilamina. Se determinan también la dependencia del
voltaje y la reversibilidad de la unión. Se utilizan como fuente de oocitos sapos africanos Xenopus laevis hembra maduros. Después de la linealización y
de la purificación de los ADNcs clonados, se preparan transcritos de ARN in vitro utilizando el kit apropiado mMessage mMachine® de Ambion Inc. (Austin, TX). Los oocitos recogidos son tratados con colagenasa (Worthington Biochemical Corporation, Frehold, NJ) durante 1 hora a temperatura ambiente en
una solución sin calcio. Posteriormente, se aíslan oo10
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citos en el estadio 5 y se inyecta cada uno con 50 nl
de una mezcla de los ARNcs de la(s) subunidad(es)
apropiada(s). Los registran se realizan alrededor de 17 días después de la inyección de ARNc.
Para electrofisiología, los registros de los oocitos se realizan con un amplificador para oocitos (por
ejemplo, Warner Instruments, CT, Nº OC-527-C) y
una cámara de registro. Los oocitos son colocados
en la cámara de registro con un volumen total de 0,6
ml aproximadamente y son perfundidos a temperatura ambiente con solución de Ringer para ranas (NaCl 115 mM, KCl 2,5 mM, HEPES 10 mM, pH 7,3 y
CaCl2 1,8 mM) conteniendo atropina 1 µM para inhibir las potenciales respuestas muscarínicas. Se utiliza
un matraz Mariotte lleno de solución de Ringer con
el fin de mantener una presión hidrostática constante
para la administración de los fármacos y los lavados.
Los fármacos son diluidos en la solución de perfusión
y cargados en un circuito de 2 ml en el extremo de la
conducción de perfusión. Una derivación del circuito
de carga del fármaco permite que la solución del baño fluya continuamente mientras se carga el circuito
del fármaco. La aplicación del fármaco es sincronizada con la adquisición de datos mediante la utilización
de una válvula electrónica de 2 vías. La velocidad de
intercambio de la solución del baño y de la aplicación del fármaco es preferiblemente de 6 ml/minuto
aproximadamente. Los electrodos de corriente están
rellenos de una solución que contiene CsCl 250 mM,
Csf 250 mM y EGTA 100 mM y tienen resistencias
de 0,5-2 MΩ. Los electrodos de voltaje están rellenos
de KCl 3 mM y tienen resistencias de 1-3 MΩ. Los
oocitos con potenciales de membrana en reposo más
positivos de -30 mV no se utilizan.
Las medidas de las respuestas de corriente a la
aplicación de exo-S-mecamilamina son estudiadas
bajo una pinza de voltaje de dos electrodos. Las
corrientes de retención inmediatamente antes de la
aplicación de exo-S-mecamilamina son restadas de
las medidas de la respuesta máxima al fármaco. Todas
las aplicaciones de fármacos están separadas por un
periodo de lavado de al menos 5 minutos, más largo
si hay un efecto persistente del fármaco. Al comienzo
del registro, todos los oocitos reciben dos aplicaciones control iniciales de ACh. La segunda aplicación
de ACh control minimiza los efectos de descarga que
tienen lugar ocasionalmente después de una respuesta
inicial a la ACh. La segunda aplicación de ACh se utiliza también para normalizar por el nivel de expresión
de canales en cada oocito. Con el fin de determinar los
efectos inhibidores residuales, la aplicación de ACh
con inhibidor o del inhibidor solo es seguida por otra
aplicación de ACh sola y comparada con la respuesta
a la ACh control pre-aplicación.
Para cada subtipo de receptores, se selecciona una
concentración de ACh control que sea suficiente para
estimular los receptores hasta un nivel que represente
un valor razonablemente elevado de pabierto en el pico de respuesta mientras que se minimiza la descarga
procedente de sucesivas aplicaciones de ACh. Tales
condiciones son adecuadas para conseguir una inhibición máxima. La concentración de ACh control para receptores que contienen α3 es típicamente de 100
µM aproximadamente y para receptores α4 β2 es de 10
µM, debido a que concentraciones superiores de ACh
inhiben la respuesta máxima obtenible.
Para los experimentos que determinan la dependencia del voltaje de la inhibición por fármacos, se
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aplica inicialmente a los oocitos una pinza de voltaje
con un potencial de retención de -50 mV, y se administra una aplicación control de ACh sola. Se obtiene posteriormente una segunda respuesta de control
al potencial de ensayo designado. El potencial de retención es mantenido al voltaje designado para la coaplicación de ACh con exo-S-mecamilamina. La inhibición residual se evalúa con una aplicación posterior
de ACh sola al potencial de ensayo, después de un
periodo de lavado de 5 minutos.
Para los oocitos con receptores α3 β4 , la mecamilamina racémica y la exo-S-mecamilamina tenían curvas dosis-respuesta normalizadas y CI50 similares, de
lo que puede deducirse que la exo-R-mecamilamina
sería también similar. Sin embargo, las curvas dosisrespuesta de la mecamilamina racémica y de la exoS-mecamilamina después de un periodo de lavado de
5 minutos eran diferentes, produciendo la exo-S-mecamilamina una respuesta más elevada a la mayoría
de las dosis. Esto sugiere que la exo-S-mecamilamina tiene un bloqueo menos persistente del receptor y
que el enantiómero R es responsable de una actividad
más prolongada con este importante receptor periférico. La CI50 para el enantiómero S era casi el doble
de grande que la del racemato.
Cuando oocitos con el receptor α4 β2 expuestos
previamente fueron lavados, se dejaron recuperar y se
trataron con mecamilamina racémica, se produjo una
curva bifásica, lo cual sugiere una disociación bifásica del racemato también para este receptor. Alrededor
de un 50% de la inhibición se va en 7-8 minutos y el
50% restante tarda mucho más, se calcula que de 5 a
10 veces más. El clorhidrato de exo-R-mecamilamina
puede tener una semivida muy larga en este importante receptor del sistema nervioso central.
En resumen, estos experimentos muestran diferencias farmacológicas importantes en las acciones
de la exo-R-mecamilamina y la exo-S-mecamilamina. Estos isómeros son eficaces en el tratamiento de
las indicaciones siguientes (pero no se limitan a las
mismas): Síndrome de Tourette, trastornos del humor
(por ejemplo, trastorno bipolar y depresión), trastornos de ansiedad, temblor, alcoholismo, adición a opiáceos y a anfetaminas, trastornos convulsivos y trastornos sensibles a nicotina (por ejemplo, esquizofrenia,
Enfermedad de Parkinson y trastorno de hiperactividad con déficit de atención), adicción a sustancias de
abuso tales como cocaína y alcohol. Este descubrimiento indica que ambos isómeros actúan como potentes antagonistas de nicotina, mientras que se evitan los efectos adversos habituales asociados con la
mezcla racémica de clorhidrato de mecamilamina.
Otros Usos
Informes recientes sugieren que la nicotina reduce los síntomas de la esquizofrenia (Adler, L.E. y
col., Am. J. Psychiatry, 150: 1856-1861, 1991), del
Trastorno de Hiperactividad con Déficit de Atención
(ADHD) (Levin, E.D. y col., Psychopharmacology,
123: 55-62, 1995) y de la depresión (Salín-Pascual,
R.J. y col., Psychopharmacology, 121(4): 476-479,
1995). Aunque se cree generalmente que la activación de nAChr es responsable de las acciones terapéuticas de la nicotina en estos trastornos “sensibles
a nicotina” (Decker, M.W. y col., Life Sci., 56: 545570, 1995), está claro que, igual que muchos otros fármacos, la nicotina tiene efectos neurofarmacológicos
complejos. Por tanto, mucha gente con tales trastornos sensibles a nicotina podría ser ayudada con un
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bloqueante de nAChr que ha sido descrito en la presente con el ejemplo de mecamilamina, un bloqueante
de nAChr, que redujera los síntomas en los trastornos
sensibles a nicotina, ST y ADHD.
La esquizofrenia, un trastorno psiquiátrico que se
ha teorizado que implica un tono hiperdopaminérgico, es tratada muy a menudo con neurolépticos; pero
actualmente se especula que es un trastorno sensible
a nicotina. Por ejemplo, estudios de pacientes esquizofrénicos han demostrado tasas de fumadores de entre un 74% y un 92%, en comparación con entre un
35% y un 54% para todos los pacientes psiquiátricos y entre un 30%-35% para la población general.
Se ha especulado que el fumar cigarrillos puede mejorar la psicopatología subyacente mediante el incremento de la concentración y la reducción de la ansiedad procedente de la hiperexcitación (Gopalaswamy,
A.K., Morgan, R., Br. J. Psychiatry, 149: 523, 1986).
Además, la nicotina puede tener alguna función que
desempeñar en la reducción de los déficits cognitivos
asociados con la esquizofrenia y con el tratamiento
con neurolépticos. Se ha encontrado que el fumar cigarrillos normaliza los déficits del control sensorial en
los pacientes esquizofrénicos (Adler, L.E. y col., Am.
J. Psychiatry, 150: 1856-1861, 1993) y un estudio reciente encontró que la nicotina transdérmica revertía
algunos de los efectos cognitivos adversos de la medicación antipsicótica estándar y mejoraba el funcionamiento cognitivo en general en los pacientes esquizofrénicos (Levin, E.D. y col., Psychopharmacology,
123: 55-62, 1996). Si como nosotros hipotetizamos
ahora la administración de nicotina puede tener realmente un efecto similar al de un bloqueante de nAChr, es posible entonces que un bloqueante de nAChr
tal como un isómero de mecamilamina revierta también los efectos cognitivos adversos de la medicación
antipsicótica y mejore el funcionamiento cognitivo en
los pacientes esquizofrénicos. Además, como la nicotina potencia los efectos terapéuticos de los neurolépticos en el ST (McConville, B.J. y col., Biological
Psychiatry, 31: 832-840, 1992), la utilización de mecamilamina como adjunta a los neurolépticos en los
trastornos “sensibles a neurolépticos” tales como esquizofrenia y corea de Huntington, puede permitir la
reducción de la dosis del neuroléptico, reduciendo así
los efectos colaterales del neuroléptico sin reducir sus
efectos terapéuticos.
La utilización de cocaína es un problema común
cada vez más frecuente en los Estados Unidos, con
cálculos de las tasas de frecuencia de uso durante la
vida del 2,5% y tasas de frecuencia actual de abuso
o dependencia de cocaína del 1% aproximadamente
(Regier y col., 1990). No se conocen tratamientos eficaces, aparte de programas caros de supervisión personal intensa y consejo.
Muchos pacientes esquizofrénicos y deprimidos
tienen también una incidencia elevada de consumo de
cocaína. Se estima que las tasas son de un 40-50%
(Shaner y col., 1995). De los que consumen cocaína, se ha calculado que tantos como un 75% son también dependientes de nicotina (Budney y col., 1993)
en oposición a una tasa de fumadores del 22% en los
controles.
Los resultados en animales con respecto a la cocaína, la nicotina y la mecamilamina son equívocos.
Por una parte, la cocaína y sus análogos se unen al
cerebro de ternera con una afinidad modesta al lugar
de los canales iónicos no competitivos en el nAChR
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de alta afinidad, el lugar de acción de la mecamilamina (Lerner-Marmarosh, N., Carroll, F.I. y Abood,
L.G., Life Sciences, 56(3): 67-70, 1995). La cocaína
fue moderadamente eficaz para antagonizar los efectos sobre el comportamiento de la nicotina. Sin embargo, en ratones, la administración sistémica de mecamilamina (1 mg/kg) y de dihidrido-beta-eritroidina (2 mg/kg) -antagonistas nicotínicos- y de atropina
(2 mg/kg) -un antagonista muscarínico- era ineficaz
contra la estereotipia inducida por psicoestimulantes
en animales normales no tratados. Los tres fármacos
eran todos ineficaces contra la inducción o la expresión de sensibilización a cocaína. Karler, Brain Res.,
1996 (1 de Julio) 725(2): 192-8. Spealman y Goldberg analizaron los efectos de la mecamilamina sobre
el comportamiento controlado programado por inyecciones intravenosas de nicotina y cocaína en monos
ardilla. J. Pharm. Exp. Therap., 223: 402-06, 1982.
La administración de mecamilamina antes de la sesión experimental hacía que la respuesta mantenida
por la nicotina, pero no por la cocaína, disminuyera
hasta los niveles del control solución salina. No obstante, sobre la base de las experiencias anteriores con
mecamilamina en pacientes con Tourette, en pacientes bipolares y en pacientes con síntomas similares a
esquizofrenia, es también probable que los adictos a
la cocaína se beneficien del tratamiento con mecamilamina y con otros antagonistas nicotínicos.
El tratamiento de las infecciones víricas, particularmente del herpes I y II, ha sido emprendido con
éxito con los agentes bloqueantes ganglionares ión de
tetraetilamonio o iones de hexametonio (Patente de
EE.UU. Nº 5.686.448). Como la exo-S-mecamilamina tiene acción bloqueante ganglionar, puede esperarse que sea eficaz de manera similar contra las infecciones víricas.
Se ha demostrado que la mecamilamina reduce la
toxicidad del envenenamiento por organofosfatos. Por
ejemplo, cuando se administró a ratas una dosis de 8
mg/kg de DFP (un organofosfato), murieron todas en
5 horas. Sin embargo, 3 de 4 ratas que recibieron mecamilamina a 30 mg/kg y la dosis letal de DFP so-
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brevivieron más de 5 horas. Ratas que recibieron una
combinación de mecamilamina y 2-PAM y posteriormente la dosis letal de DFP, sobrevivieron todas. Sería beneficioso disminuir la dosis de mecamilamina
mediante la administración de únicamente el isómero
eficaz.
Las subunidades alfa4 , pero no alfa3 ni alfa7 , del
receptor de acetilcolina nicotínico han desaparecido
de la corteza temporal en la Enfermedad de Alzheimer. Receptores de acetilcolina nicotínicos neuronales marcados con agonistas tritiados están disminuidos en la corteza cerebral en la Enfermedad de Alzheimer (EA). El tejido de la autopsia procedente de la
corteza temporal de 14 casos de EA y de 15 sujetos
control de la misma edad fue comparado utilizando
inmunotransferencia con anticuerpos contra péptidos
recombinantes específicos para las subunidades alfa3 ,
alfa4 y alfa7 , junto con unión de [3 H]epibatidina. Los
anticuerpos hacia alfa3 , alfa4 y alfa7 producían una
banda principal en las Transferencias Western a 59,
51 y 57 kDa, respectivamente. La unión de [3 H]epibatidina y la inmunorreactividad similar a alfa4 (utilizando anticuerpos contra el dominio extracelular y
el bucle citoplásmico de la subunidad alfa4 ) estaban
reducidas en los casos de EA en comparación con los
sujetos control (p<0,02) y con un subgrupo de sujetos control (n=9) que no fumaron antes de la muerte
(p<0,05) para los dos parámetros anteriores. La unión
de [3 H]epibatidina y la inmunorreactividad citoplásmica similar a alfa4 estaban significativamente elevadas en un subgrupo de sujetos control (n=4) que había
fumado antes de la muerte (p<0,05). No había cambios significativos en la inmunorreactividad similar a
alfa3 o a alfa7 asociados con la EA o con el consumo de tabaco. La implicación selectiva de alfa4 tiene
implicaciones para comprender la función de los receptores nicotínicos en la EA y dianas terapéuticas
potenciales (Martin-Ruiz, C.M. y col., Neurochem.,
Octubre de 1999, 73(4): 1635-40).
La descripción y los ejemplos precedentes están
destinados únicamente a ilustrar, no a limitar, la invención descrita.
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REIVINDICACIONES
1. La utilización de exo-S-mecamilamina o de una
sal de la misma farmacéuticamente aceptable, sustancialmente libre de exo-R-mecamilamina, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos neuropsiquiátricos en un humano.
2. La utilización de la reivindicación 1, en la que
dicha exo-S-mecamilamina o dicha sal es utilizada en
una cantidad de 0,5 mg a 20 mg.
3. La utilización de la reivindicación 1 ó 2, en
la que dicho medicamento comprende clorhidrato de
exo-S-mecamilamina.
4. La utilización de la reivindicación 1, 2 ó 3, en
la que dicho medicamento es adaptado para ser utilizado en administración oral, administración intravenosa, en una formulación transdérmica, en un parche
transdérmico, en una preparación sólida o en una formulación de liberación mantenida.
5. La utilización de la reivindicación 4, en la que
dicho medicamento es adaptado para ser utilizado en
una formulación de liberación mantenida y en una tableta, cápsula o cápsula de gelatina.
6. La utilización de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la cual:
(a) la exo-S-mecamilamina sustancialmente pura
es más de un 95% en peso y la exo-R-mecamilamina
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es menos de un 5% en peso;
(b) la exo-S-mecamilamina sustancialmente pura
es más de un 99% en peso y la exo-R-mecamilamina
es menos de un 1% en peso;
(c) la exo-S-mecamilamina sustancialmente pura
es más de un 99,5% en peso y la exo-R-mecamilamina es menos de un 0,5% en peso; o
(d) la exo-S-mecamilamina sustancialmente pura
es más de un 99,7% en peso y la exo-R-mecamilamina es menos de un 0,3% en peso.
7. Una utilización de acuerdo con cualquiera de
las reivindicaciones precedentes, en la que dicho trastorno neuropsiquiátrico es el trastorno bipolar, depresión, un trastorno de ansiedad, esquizofrenia, un trastorno convulsivo, Enfermedad de Parkinson, trastorno
de hiperactividad con déficit de atención, Síndrome
de Tourette, trastorno obsesivo compulsivo, hemidistonía, Enfermedad de Huntington, adicción a cocaína,
adicción a alcohol, adicción a anfetaminas o adicción
a opiáceos.
8. Una utilización de acuerdo con la reivindicación 7, en la que dicho medicamento es adaptado para
administración intravenosa, transdérmica, intratecal,
oral o para inyección en bolus.
9. Una utilización de acuerdo con la reivindicación 7 u 8, en la que dicho medicamento es adecuado
para ser administrado de una a cuatro veces al día.
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