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ESPERMATOBIOSCOPÍA
OBJETIVOPARTICULAR
Alfinalizarlaprácticaelalumnoserácapazde:
Conocereluso,utilidadeindicacionesdelaespermatobioscopíacomométodo
paraclínicodiagnóstico.
OBJETIVOSESPECÍFICOS
1.
AprenderlosvaloresnormalesyanormalesparaelanalisisdelsemenporlaOMS
2.
Deacuerdoaloaprendidorealizarunaespermatobioscopíaenbasealmaterial
disponible
3.
Aplicarlosconocimientosaprendidosparalarealizacióndelasdiferentestinciones
CONSIDERACIONESTEÓRICAS
Introducción
Elanálisisdelliquidoseminalesunestudioqueseutilizaenlaevaluacióndelafertilidad
masculina,detecciondeprocesosinfecciosos,monitoreodeunavasectomia,realizacionde
chequeos pre y post operatorio, entre otros. Consiste en la evaluacion macroscópica y
microscópicadeunamuestradesemenparadeterminarsuestadogeneral.
Auncuandoenlamayoriadeloslaboratoriosdondeserealizaestetipodeestudiosesiguen
las normas básicas recomendadas por la Organización Mundial de la Salud (OMS), las
interpretaciones y reportes de los resultados obtenidos pueden presentar algunas
diferencias,yaqueestosdependendelaexperienciadelprofesionalqueevaluelamuestra,
de la diversidad de las caracteristicas de los varones (ubicación geográfica, factores
ambientalesqueloafectan,hábitosdevida)delosterminosyvocabularioutilizados,asi
comoelcomplejoconocimientonecesarioparaalcanzarlosdiagnósticos.EnMéxicoaunno
sehalogradounaestandarizacionimportantedelAnálisisdesemenenlamayoriadelos
laboratoriosclínicos.
Espermatobioscopía
Laespermatobioscopíaeselmétodoutilizadoparaestudiarlascaracterísticasdelsemen:
Elsemenestáconstituidopordoscomponentes:
1. Componentecelular:representadoporlascélulassexuales(espermatozoides).
2. Líquidoseminal:mediodetransporteparalascélulassexuales
Elvolumendellíquidoseminaldependedelaportedetresglándulas(vesículasseminales,
próstatas,glándulasdeCowper)
Eyaculacióndelsemen
El volumen normal de una eyaculación de un adulto joven es de 1.5 ml a 6 ml. Está
compuesto por dos componentes, espermatozoides y plasma seminal, el cual puede ser
separadofácilmenteporcentrifugación.
Laconcentracióndeespermatozoidesenunmililitroesde15x10⁶espermatozoides/mlyla
cuentatotaldebesermayora39x10⁶espermatozoides.
Elsemeneseyaculadodemanerasecuencialentresdiferentes“coleccionesoporciones”,
laprimeraesricaenespermatozoidesycomponentesdelapróstatacomoloeselácido
cítrico,yeslademayorvolumen.Lasegundaproporcionaunvolumenmayordelíquido
seminal,sinembargolacantidaddeespermatozoidesesmenoralaprimera.Laterceray
última de las colecciones es la más pobre en espermatozoides, pero aporta el mayor
volumendesecreciónsucontenidoesricoenfructuosa.
¿Quédebessaberparaentenderunespermiograma?
VARIABLESMACROSCOPICAS
Volumen
Color
Coagulo
Licuefacción
Viscosidad
pH
LIMITESDEREFERENCIA
>=1.5ml
Grisáceoaligeramenteamarillento
Presente
60minutos
Normal
7.2–8.0
VARIABLESMICROSCÓPICAS
Concentración
Cuentatotal
Motilidad total (progresivos
progresivos)
Motilidadprogresiva
Viabilidad
Morfología
Leucocitos
Otrostiposcelulares
Célulasinmaduras
Bacterias
Aglutinación
y
LIMITESDEREFERENCIA
15x106espermatozoides/ml
>39x106espermatozoides
no >=40%
>=32%
>=58%vivos
>=4%
<1x106/ml
Valoresnormales
>5porcampo
Escasas
>10%
TERMINOLOGIA
Aspermia
Hipospermia
Oligozoospermia
Azoospermia
Astenozoospermia
Teratozoospermia
Necrozoospermia
Oligoastenoteratozoospermia
VARIABLE
Nohayeyaculado
<1.5ml
<15x106espermatozoides/ml
Ausenciadeespermatozoides
<40%(CategoriasAyB)
<5%espermatozoidesnormales
<58%deviabilidad
Perturbacióndetresvariables
MATERIALYMÉTODO
Paralaóptimarealizacióndelaprácticasecontaracon:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Muestradesemenporequipo
Recipienteestérilparamuestra
TrestirasdepapelpHporequipo
Microscopioóptico
Diluyentedeespermatozoides
Hemocitometro
Eosinanigrosina
Pipetas
Portaobjetosycubreobjetos
Pipetapasteur
Kitdetinciónrápida
INDICACIONESPARALATOMADEMUESTRA
Recoleccióndelamuestradesemenhumano.
Larecoleccióndelasmuestrasdesemenesimportanteparaunbuenanálisisseminal,por
elloesnecesariocubrirunaseriedepasosquenospermitiránobtenerunbuenresultado.
Instruccionesalospacientes.
a)
b)
c)
d)
e)
Abstinenciasexualde2a7días
Efectuarlavadogenitalconaguayjabón
Colectarlamuestrapormasturbación
Depositarlamuestradesemenenunrecipientedepolipropilenoestéril
Silamuestraescolectadadesdesuhogar:entregarallaboratorioconunmáximo
de1horadespuésdehabersidocolectadaymantenerlalomáscercanoa
temperaturacorporal.
Característicasmacroscópicas
Olor:Ocre.
Coagulación:Instantánea.
Licuefacción:Dentrodelosprimeros60min.
Aspecto:GrisoBlancoopalescente.
Volumen:1.5a6ml.
Viscosidad:2cmaproximadamente.
pH:7.2a8.
Elanálisismacroscópicodelsemensedebehacerconlamuestrafrescaesdecirqueno
debepasarmásdeunahoraentrelatomadelamuestraysuanálisis,yaquedelocontrario
no se podrán evaluar algunos aspectos como la licuefacción, y se podrían alterar los
parámetros de movilidad y viabilidad, ya que transcurrido cierto periodo de tiempo los
espermatozoides comienzan a pararse y morir debido a las condiciones ambientales, es
especialdetemperatura,porloquetambiénesmuyimportantequesemantengaa37°C
durantesuevaluación.
Parámetrosmacroscópicos
Su evaluación se realiza a simple vista y con la ayuda de algunos instrumentos de
laboratorio, como pipetas Pasteur, tiras indicadoras de pH o tubos para centrifuga
graduados.
Coagulación.-Elsemenseemiteenestadolíquidoperorápidamentesetrasformaenun
estadosemisólido.
Licuefacción.- La muestra se licua a 37°C dentro de los primeros 60 minutos de su
obtención.
Aspecto.-Serefierealcolorquepresentaeleyaculado.Unamuestranormalesdecolorgris
o blanco opalescente o ligeramente amarillenta con el incremento de los días de
abstinencia.
Volumen.-Semidetransfiriendodirectamentelamuestracompletaauntubocónicode15
ml.Elvolumennormaldeleyaculadotras3a5díasdeabstinenciasexualesde1.5a6ml.
Viscosidad.- Para medir la viscosidad se aspira la muestra con una pipeta Pasteur
permitiendo la caída libre de gotas, en las que se observa la longitud del filamento y se
clasificacomo:Normal,DisminuidaoAumentada.
pH.- Se coloca una gota de la muestra de semen, previamente homogenizada en la tira
reactivadepH,colocadalagotasecomparaelcolorobtenidodelatiraconlaescaladel
contenedordelpapelindicador.ElrangoqueabarcaelpHdesemendebeestarde7.8a8.
Análisismicroscópico
Se realiza para el correcto análisis de la viabilidad, morfología y concentración de los
espermatozoidesenlamuestradesemenhumano.
Viscosidadespermática.-Eselgradodecoagulaciónquetieneunamuestra,lacualdebe
pasarporunprocesodelicuefacciónparasumanejoenellaboratorio.Lavaloramosaldejar
caer la muestra de una pipeta Pasteur a una probeta cónica graduada, los valores de
referenciason:
•
•
•
Viscosidadnormal:Gotaagota
Viscosidadaumentada:Formafilamentos
Viscosidaddisminuida:Caeachorro
TécnicadeValoracióndeViscosidad:
1. TomarconunapipetaPasteurunacantidadconsiderabledemuestradelfrascode
polipropilenoestéril
2. DejarcaerelsemendelapipetaPasteuralaprobetacónicagraduada
3. Verificarlaviscosidadyelvolumen.
Movilidad espermática.- Los espermatozoides deben presentar movilidad para poder
migrarporelmococervicaleneltractovaginalfemeninoypenetrarelcumulusoophorus
querodeaalovocito.
Paralaevaluacióndelamovilidad;estossedebencontarendirecciónalasmanecillasdel
relojyseclasificaenporcentajesenlassiguientescategorías:
A. Movilidadprogresiva
B. Movilidadnoprogresiva
C. Inmóviles
LamovilidadtotalseexpresaenporcentajeyeslasumadelamovilidadAmáslamovilidad
B.
TécnicadeValoracióndeMovilidad:
1. Colocarenunportaobjetosunagotadesemen
2. Colocarencimauncubreobjetos
3. Valorarenunobjetivode40x
Viabilidad espermática.- La viabilidad espermática nos proporciona información de la
cantidad de espermatozoides vivos, estos se someten a un colorante vital según las
estimacionesdelaevaluacióndelaintegridaddelamemebranadelascélulas,sepuede
determinarrutinariamenteentodaslasmuestrasperoesespecialmenteimportantepara
lasmuestrasconmenosde40%espermatozoidesconmovilidadprogresiva.
TécnicadeValoracióndevitalidad:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
SehomogenizalamuestraconunapipetaPasteur
Secolocan10µloungotadeEosinaenunportaobjetos
Seañaden10µlounagotadesemen
Sehomogenizanambasmuestrasconunhisopo
Secubreconuncubreobjetos
Sedejaestabilizarpor1minuto
Sehaceelconteodeespermatozoidesvivosymuertosatravésdelmicroscopio.
Morfologíaespermática:
Debidoaqueexisteunagranvariabilidadenlamorfologíaespermáticaesdifícilestablecer
laapariencianormaldelosespermatozoidesconcapacidadfertilizante.Lascaracterísticas
morfológicasparadefiniraunespermatozoidecomonormalsebasanenlaaparienciade
los observados en el moco del canal endocervical durante una prueba postcoital. La
determinación de la morfología permite distinguir la cabeza, pieza media y la cola del
espermatozoide.
Enelespermatozoideideallacabezadebeserovaladatenerunalongituddeentre4-5µm,
tomandoencuentaelcambiodetamañoqueinducelafijaciónyelteñido;yunanchode
2.5-3.5 µm, debe presentar una región acrosomal claramente definida, delgada, con un
anchomenora1µm,colocadaenlaregiónapicaldelacabezaycubrirmásdelamitadde
lamisma.Lapiezaintermediaesdelgadayrepresentamenosdelatercerapartedelancho
de la cabeza, se encuentra alineada con el eje longitudinal de la cabeza. Las gotas
citoplasmáticasdebensermenoresquelamitaddeunacabezanormal.Lacoladebeser
derechayuniforme,másestrechaquelapiezamediaymediraproximadamente45µmde
largo.
Técnicadevaloracióndemorfologíaespermática:
1. Realiza un barrido de la muestra de semen en un portaobjetos y dejar secar
completamente
2. ColocartincióndeWrightpreviamenterebajadaconaguadestilada,latincióndebe
decubrirtodalalaminilla
3. Esperar5minutos
4. Lavarconsolucióndebuffer
5. Esperar5minutos
6. Secarcompletamenteyobservaralmicroscopio
Realizadopor:GarcíaAntonioCarlosDaniel
Análisisdesemen
Paciente______________________________________Edad:_____Fecha_____________
ANALISISMACROSCOPICO
Diasdeabstinencia
Aspecto
Licuefaccion
Viscosidad
Volumen
pH
ANÁLISISMICROSCÓPICO
Motilidad
A:
B:
C:
A+B:
Concentración:
Concentracióntotal:
Vitalidad
Aglutinacion
Agregación
Otrascelulas:
Leucocitos
Eritrocitos
Céls.Epiteliales
Céls.Germinales
Detrituscelulares:
Bacterias
VALORESDEREFERENCIA
3-7
Normal(blanco,grisblanco
opalescente o ligeramente
amarillenta)
Anormal(coloresdistintos)
15a60minutos
Normal(gotasdefinidas)
Disminuida(consistenciade
agua)
Aumentada(filancia>2cm)
>1.5ml
7.2-8
>=40%
>=15mill/ml
>=39mill/eyaculado
>=58%
<5%
<5%
-
-<5céls/campo
-
-
Escasa(+)
Moderadas(++)
Abundantes(+++)
>=4%
Morfologia
Normales:
Anormales:
Defectosdecabeza:
Defectosdepiezamedia:
Defectosdeflagelo:
Observaciones:____________________________Diagnostico_______________________
Bibliografia:
• WorldHealthOrganization,DepartmentofReproductiveHealthandResearch.
WHOlaboratorymanualfortheexaminationandprocessingofhumansemenFifth
edition.2010(Citadoel18deAgostodel2015)Obtenidode:
http://www.who.int/reproductivehealth/publications/infertility/9789241547789/e
n/
• OMS(2002).ManualdeLaboratoriodelaOMSparaelexamendelsemenhumano
ydelainteracciónentreelsemenyelmococervical.EditorialPanamericana4ta
edición,Madrid,España.1-32.
• Remohí,J.,Bellever,J.,Matorras,R.,Ballesteros,A.&Pellicer,A.(2012).Manual
practicodeEsterilidadyReproduccionHumana.4taedición.EditorialMedica
Panamericana.España.