Micólogos del IMEDEA (CSIC-UIB) reproducen en el laboratorio el ataque de un hongo patógeno en distintas especies vegetales europeas para conocer los síntomas de la infección y así poder detectar los árboles enfermos en la naturaleza El laboratorio fue el primero que detectó la presencia en España de Phytophtora ramorum, el hongo que desde el año 1995 ha provocado enormes daños en los ecosistemas forestales de la costa de California. Los micólogos del IMEDEA participan en el proyecto europeo RAPRA que analiza el riesgo de una expansión del hongo en el continente Introducción Una especie del mismo género del hongo patógeno de la patata (Phytophthora infestans) es el agente causante de la elevada mortalidad detectada, desde 1995, en poblaciones de roble (Quercus ssp) y de especies del género Lithocarpus en la costa central de California, desde San Francisco al norte de Los Angeles. Se trata del mismo hongo que causa destrozos en ramas y hojas de Rhododendron y otras especies vegetales utilizadas en ornamentación y jardinería: Phytophthora ramorum. Phytophthora ramorum es ya conocido popularmente en California como sudden oak death (SOD), muerte súbita del roble. A pesar de esta denominación, el hongo afecta también a coníferas y fagáceas, provocando lesiones en la parte inferior del tronco, en las ramas y en las hojas. El número de especies afectadas alcanza ya las 23. Ante los enormes daños ecológicos y económicos causados por este oomicete en California, la PALABRAS CLAVE: Phytophthora, enfermedad, epidemiología, patogenicidad, encinar, evaluación de riesgos KEYWORDS: Phytophthora, disease, epidemiology, pathogenicity, holm oak, evaluation of risks Esporangios de Phytophthora ramorum. comunidad científica internacional reaccionó dando la En el año 2000 el laboratorio llevó a cabo una primera voz de alarma sobre una posible expansión del prospección en el marco de un proyecto financiado por patógeno en EE.UU. y también en Europa. El año la Conselleria de Agricultura y Pesca del ejecutivo 2002, después de dos años de investigaciones en autonómico balear: "Prospección de hongos laboratorios de todo el mundo, se celebró el Primer fitopatógenos de los géneros Pythium y Phytophthora Simposio Internacional sobre la muerte súbita del roble en cultivos de las Baleares". Por otra parte, entre los en Monterrey (California). años 2002 y 2003 el laboratorio se involucró en dos proyectos. En primer lugar, en el titulado "Prospección de Phytophthora ramorum en viveros y centros de ¿Phytophthora ramorum en Europa? jardinería de las Baleares"; y en segundo lugar en el titulado "Estudio de los hongos fitopatógenos La primera ocasión en que fue observado el hongo asociados al declive del encinar de Menorca", ambos patógeno en Europa fue sobre hojas de rododendros, financiados por la Conselleria de Medio Ambiente del concretamente en Alemania en 1993. Su peligrosidad, Govern de les Illes Balears. sin embargo, no fue correctamente apreciada hasta el año 2001, cuando ya había causado considerables Finalmente, desde el año 2004, el Laboratorio de daños a los ecosistemas forestales de la costa Micología del IMEDEA participa en el proyecto californiana. europeo (SSPE-CT-2003-502672) RAPRA "Risk analysis for Phytophthora ramorum, a recently Prueba de la preocupación por la posible presencia de recognised pathogen threat to Europe and the cause Phytophthora ramorum en Europa, y en las Islas of Sudden Oak Death in the USA", financiado por la Baleares en concreto, son los distintos proyectos en Unión Europea. En el proyecto, además del director los que, desde el año 2000, ha participado el del laboratorio, el doctor Enric Descals, participa muy Laboratorio de Micología del Instituto Mediterráneo de especialmente el investigador Eduardo Moralejo, así Estudios Avanzados (CSIC-UIB) que dirige el doctor como el becario José Andrés García Muñoz. Enric Descals. En 2003 Phytophtora ramorum fue detectado en ejemplares infectados de Quercus falcata (en el Reino Forestal del Reino Unido; el Central Science Unido) y de Quercus rubra, roble americano (en Laboratory, agencia del Departamento de Medio Holanda). Desde entonces, han sido localizados Ambiente, Alimentación y Asuntos Rurales del Reino catorce árboles infectados en el sur de Inglaterra con Unido; Plant Research International, de Holanda; el chancros potencialmente mortales en el tronco. Se Institute for Plant Protection in Horticulture, de trata de ejemplares de haya (Fagus sylvatica) y Alemania; el Plant Protection Service, de Holanda; el castaño de las Indias (Aesculus hippocastanum). En National Institute for Agricultural Research de Francia; otras especies, como la encina y el castaño (Quercus el Department for National and International Plant ilex y Castanea sativa respectivamente) las lesiones Health de Alemania; el USDA Forest Research and se circunscriben a las hojas. También se han Development de los Estados Unidos y el IMEDEA, a detectado síntomas de infección foliar en ejemplares través del Laboratorio de Micología. de tejo (Taxus baccata) y sauce (Salix spp.) criados en viveros. Tal como afirma Eduardo Moralejo, "pronosticar el establecimiento de un patógeno en un área geográfica El proyecto europeo RAPRA tiene como principales no es una tarea sencilla. Para que un patógeno pueda objetivos determinar la distribución actual del patógeno establecerse es necesario que se den tres factores: en EE.UU; establecer el nivel de susceptibilidad de que el organismo, en este caso el hongo, esté especies arbóreas y no arbóreas de todos los presente en el área geográfica considerada; en continentes; analizar los efectos ambientales y segundo lugar, que existan especies vegetales socioeconómicos de una posible expansión del susceptibles de ser infectadas y, finalmente, que el patógeno; desarrollar estrategias para gestionar el proceso sea favorecido por las condiciones climáticas". riesgo y futuros planes de contingencia; cuantificar la En efecto, estos tres factores son los que han esporulación, germinación, infección, periodo de contribuido a la expansión de Phytophthora ramorum incubación y latencia del hongo; establecer el potencial en California. Pero no es el único caso: Phytophtora de acoplamiento de las dos cepas del hongo, la cinnamomi, otra especie del mismo género, ocasionó americana y la europea (A1 y A2); y evaluar nuevos graves daños ecológicos en Australia. Esta especie compuestos químicos activos en la lucha contra el está relacionada con la mortalidad de robles detectada hongo en plantas ornamentales. en sudoeste de la Península Ibérica, entre otras áreas. En el proyecto participan distintos equipos europeos: El investigador Eduardo Moralejo afirma que "de la Forest Research, una agencia de la Comisión manera coincidente, estas enfermedades son Aspecto de un chancro en un tronco provocado por la inoculación del hongo. hongo en España, concretamente en centros de jardinería ubicados en Mallorca. Eduardo Moralejo pudo aislar el hongo en plantas de viveros, surtidos desde Holanda y Alemania. Una vez confirmada la presencia del hongo, Moralejo afirma que "la posible entrada en contacto del oomicete con la vegetación natural de la Isla podría darse tanto por trasmisión directa como a través de plantas infectadas que crezcan en jardines privados. Aunque los rododendros no son especies extendidas en España por su inadaptación a los suelos calcáreos y a las condiciones excesivamente secas del verano, otras especies comunes sí son susceptibles de ser infectadas. Es el caso del madroño (Arbutus unedo) o las especies de Viburnum, tanto las cultivadas en jardinería como las autóctonas de Mallorca, en especial Viburnum tinus, el durillo (marfull en Mallorca)". En el Laboratorio de Micología del Instituto Mediterráneo de Estudios Avanzados se ha ensayado la inoculación del patógeno en diversas plantas autóctonas de gran importancia en los ecosistemas naturales isleños. El madroño (Arbutus unedo), el lentisco (Pistacia lentiscus), el algarrobo (Ceratonia Evolución (de arriba a abajo) de la infección por Phytophthora ramorum en las hojas de madreselva (Viburnum tinus). El último estadio (hoja inferior) corresponde a los diez días después de la inoculación del hongo. siliqua), la ladierna o aladierno (Rhamnus alaternus), y la madreselva (Lonicera implexa), se han mostrado susceptibles al ataque del hongo. Las hojas de estas especies pueden quedar destruidas completamente siete días después de la inoculación del patógeno. Tampoco los frutos, excepto la algarroba, escapan a la enfermedad. Por si estos resultados no fueran ya de por si provocadas por oomicetes del genero Phytophtora, todas ellas especies exóticas, que se han instaurado preocupantes, ensayos realizados con cepas americanas y europeas de Phytophthora ramorum en áreas de clima mediterráneo". sobre encina (Quercus ilex) han dado positivo, siendo El primer requisito para que también en Europa pueda más susceptibles de ser infectadas. considerada ésta especie en la actualidad una de las desarrollarse una afectación masiva de los bosques por parte de Phytophthora ramorum se ha cumplido. El hongo ha sido localizado en especies utilizadas corrientemente en ornamentación y jardinería, sobretodo especies de los géneros Viburnum y Rhododendro. En el año 2002 el Laboratorio de Micología del IMEDEA detectó por primera vez el Trabajar con un oomicete Tal como ya se ha mencionado más arriba, Phytophthora ramorum es un oomicete que normalmente se presenta en forma de micelio, es decir una red de células alineadas en forma de filamentos: las hifas. Los oomicetes son comunes en aguas IMEDEA, ubicado en Esporles (Mallorca), donde el continentales y también en el suelo, donde muchas hongo es inoculado a distintas especies vegetales especies son saprófitas, es decir se nutren de la para comprobar la evolución de la infección y así materia orgánica en descomposición. En los géneros tipificar los síntomas que se derivan. Esta labor es Pythium y Phytophthora se encuentran la mayoría de fundamental para poder identificar en la naturaleza especies patógenas. posibles plantas huéspedes del hongo. Sin esta información previa, relativa al tipo de lesiones que Presentan un ciclo de reproducción asexual en la que cabe buscar en cada caso, seria imposible detectar el el micelio se diferencia en zooporas biflageladas. La patógeno. producción de zoosporas depende de las condiciones del medio (y de cada especie). Estas zoosporas, si las Así pues, el trabajo desarrollado por el Laboratorio de condiciones son favorables, pueden dar lugar a un Micología en el marco del proyecto RAPRA es el de nuevo micelio o a una zoospora secundaria, que se llevar a cabo ensayos in vitro de patogenicidad del enquista y, sólo cuando las condiciones lo permitan, hongo sobre especies características de los encinares dará lugar a un nuevo micelio. mediterráneos, de los bosques de laurisilva canaria que forman parte de las colecciones de planta viva del En la mayoría de las especies el micelio también se Jardín Botánico de Sóller, y en todas aquellas puede diferenciar en estructuras reproductivas especies que le son enviadas desde distintos puntos masculinas y femeninas, éstas últimas provistas de un tubo germinativo. El zigoto se desarrolla en numerosas esporas de gran tamaño, con forma parecida a la de los huevos (de ahí el nombre de oomicetes). Algunas especies presentan clamidosporas, estructuras que se rodean de una pared gruesa y se separan del micelio comportándose como una espora de resistencia. Según Eduardo Moralejo, "confirmada la presencia de Phytophthora ramorum en España, su posible desarrollo en robledades y encinares dependerá en primer lugar de la capacidad que presente el hongo de sobrevivir a una sequia estival prolongada, tanto en forma de clamidospora como en forma de micelio en la tierra. Dependerá, en segundo lugar, del grado de susceptibilidad a ser infectadas que presenten las especies arbustivas del sotobosque y, a partir de aquí, de la capacidad del hongo para producir esporangios en las lesiones aéreas que haya provocado en estas plantas anfitrionas". Un aspecto fundamental del trabajo del equipo del Laboratorio de Micología del IMEDEA es, en el marco del proyecto europeo RAPRA, establecer las diferentes tipologías de los síntomas que sobrevienen tras la infección de cada especie por el hongo, tanto en especies arbóreas como no arbóreas. Dicho de otra manera, es en el Laboratorio de Micología del Troncos de diversas especies arbóreas europeas recibidas en el laboratorio para la inoculación del patógeno. del continente europeo. Los ensayos de inoculación in que un alto porcentaje de variables climáticas vitro permiten seguir el proceso de invasión de los coincida con las que presenta el clima mediterráneo tejidos vegetales por parte del hongo en las distintas americano, sobre todo en términos de condiciones de especies. temperatura y humedad". Cabe destacar que el Laboratorio de Micología del En el marco del propio proyecto europeo RAPRA se IMEDEA es uno de los pocos en el mundo que no han detectado las áreas del continente que presentan aborda el estudio de este tipo de hongos patógenos a priori un mayor riesgo de desarrollo del hongo con técnicas moleculares. La morfología y las distintas debido al clima. Corresponden a zonas de Galicia y fases del ciclo vital, como por ejemplo la esporulación, algunos territorios de Portugal. En cuanto a Baleares son los principales objetivos del estudio de los sólo algunos encinares especialmente húmedos de la investigadores. Sierra de Tramontana, en los que crece la madreselva (Viburnum tinus), presentan cierto riesgo. En cualquier caso, el hongo no ha sido detectado hasta el El caso de las Islas Baleares momento. Las diferencias entre el clima mediterráneo Sistemáticamente el Laboratorio de Micología californiano y el clima de la cuenca del Mediterráneo inspecciona todos los casos de muerte extraña de son significativas según Eduardo Moralejo y deben especies arbóreas en el territorio balear, a petición de tenerse en cuenta a la hora de analizar el posible éxito la Conselleria de Medio Ambiente. Hasta hoy no ha de Phytophthora ramorum en los encinares sido localizado Phytophthora ramorum en estos mallorquines y baleares. Aunque en términos especimenes muertos, pero sí ha sido detectado generales la pluviosidad de ambas áreas geográficas Phytophtohra cinnamomi, especie que, como ya se ha son comparables, mientras en las Baleares la lluvia se mencionado, se relaciona con la elevada mortalidad de distribuye entre los meses de octubre y marzo, en la robles en el suroeste peninsular.. costa californiana se presenta mucho más concentrada en el tiempo, de diciembre a marzo. De hecho, según Eduardo Moralejo, hay pocos lugares en Europa en los Tres de los miembros del Laboratorio de Micología del IMEDEA. De izquierda a derecha: el investigador Eduardo Moralejo; José Andrés García Muñoz, becario del proyecto RAPRA, y el doctor Enric Descals, director del laboratorio. Proyectos financiados Título: Prospección de hongos fitopatógenos de los géneros Pythium y Phytophthora en cultivos de las Baleares. Entidad financiadora: Conselleria d'Agricultura i Pesca, Govern Balear. Investigador responsable: doctor Enric Descals Investigador realizador del proyecto: Eduardo Moralejo. Periodo: 2000-2001. Título: Prospección de Phytophthora ramorum en viveros y centros de jardinería de las Baleares. Referencia: 2002930 Entidad financiadora: Conselleria de Medi Ambient, Govern Balear. Investigador responsable: doctor Enric Descals Investigador realizador del proyecto: Eduardo Moralejo. Periodo: 2002-2003. Título: Estudio de los hongos fitopatógenos asociados al declive del encinar de Menorca Referencia: 2002890. Entidad financiadora: Conselleria de Medi Ambient. Govern Balear. Investigador responsable: doctor Enric Descals Investigador realizador del proyecto: Eduardo Moralejo. Periodo: 2002-2003. Título: Risk analysis for Phytophthora ramorum, a recently recognised pathogen threat to Europe and the cause of Sudden Oak Death in the USA Acrónimo: RAPRA Entidad financiadora: Unión Europea Investigador responsable: doctor Enric Descals Investigador contratado Eduardo Moralejo; becario José Andrés García Muñoz. Periodo: 2004-2007 Investigador responsable del Laboratorio de Micología del IMEDEA Doctor Enric Descals Callisen, director del Laboratorio de Micología. Departamento de Recursos Naturales. Instituto Mediterráneo de Estudios Avanzados Edificio: Escoles Velles. C/ Miguel Marqués, 21 Esporles (Mallorca). Islas Baleares. Tel.: 971 611 728 E-mail: [email protected] Otros miembros del Laboratorio de Micología Eduard Moralejo, investigador contratado en el marco del proyecto José Andrés García Muñoz, becario del proyecto. Concepció Duch Reneses, técnica. Publicaciones Descals, E & Moralejo E. (2001) Water and asexual reproduction in the Ingoldian fungi. Botanica Complutensis 25: 13-71 Moralejo, E & Werres, S. (2002) First report of Phytophthora ramorum on Rhododendron sp. in Spain. Plant Disease 86, 1052 Moralejo, E. & Descals, E. (2003) Risk analysis of Phytophthora ramorum establishment in the Mediterranean area. Sudden Oak Death Online Symposium. www.apsnet.org/SOD (website of The American Phytopathological Society). doi: 10.1094/SOD-2003-EM. Moralejo, E., Puig M. & Man in't Veld, W. (2005) First Report of Phytophthora tentaculata on Verbena sp. in Spain. Plant Pathology 53, 806. http://www.bspp.org.uk/ndr/july2004/2004-43.asp Moralejo, E., Puig, M., García J. A. & Descals E. (2006) Sporangiomata produced by Phytophthora ramorum on leaves and fruits of Mediterranean woody species. Mycological Research (submitted). Moralejo, E., Belbahri, L., Calmin, G., Lefort, L., García, J. A., & Descals, E. (2006) First report of Phytophthora hedraiandra on Viburnum tinus in Spain. Plant Pathology (accepted). http://www.bspp.org.uk/ndr/jan2006/200590.asp Moralejo, E., García J. A. & Descals, E. Insights into Phytophthora ramorum sporulation: epidemiological and evolutionary implications. EPPO Bulletin (submitted) Belbahri, L., Moralejo, E., Calmin G., Oszako T., García J. A., Descals E., and Lefort F. (2006) Phytophthora polonica, a new species isolated from declining Alnus glutinosa stands in Poland. FEMS Microbiology Letters (accepted) Comunicaciones a congresos Moralejo, E. & Hernández, L. (2002) Inoculation Trials of Phytophthora ramorum on Detached Mediterranean Sclerophyll Leaves. (Abstract) Sudden Oak Death Science Symposium, The State of our Knowledge. Monterey, CA, December 15-18. Moralejo, E. & Núñez, L. (2003) Presencia de Phytophthora ramorum en centros de jardinería de las Baleares. Actas de la XX Reunión Anual del Grupo de Trabajo Fitosanitario de Forestales Parques y Jardines. La LagunaTenerife, 25-29 de Noviembre de 2003. Moralejo, E., Puig, M. & Descals, E. (2004) Susceptibility of leaves and fruits of mediterranean shrubs to Phytophthora ramorum in vitro. 3rd international iufro meeting phytophthoras in forests. Freising 14-17 September. Moralejo, E., García Muñoz, J. A. & Descals, E. (2004) Susceptibilidad de especies vegetales del encinar mediterráneo al hongo patógeno Phytophthora ramorum. Jornades de Medi Ambient, Noviembre de 2004, Palma. Moralejo, E. & Descals E. (2005) Progress report on the evaluation of the susceptibility of the holm oak (Quercus ilex) forest ecosystem to P. ramorum. II Sudden Oak Death Science Symposium, The State of our Knowledge. Monterey, CA, January 18-21. Moralejo, E., García J. A. & Descals, E. (2005) Insights into Phytophthora sporulation: epidemiological and evolutionary implications. EPPO conference on Phytophthora ramorum, Falmouth, UK, 5-7 October Denman, S. Moralejo, E. Kirk, S.A., Orton, E. & Webber J.F. (2006) Sporulation of Phytophthora ramorum and P. kernoviae on asymptomatic foliage. APS annual Meeting (ABSTRACT submitted) Moralejo, E., Puig, M. & Descals, E. (2005) Multihyphal Structures Formed by Phytophthora ramorum on Inoculated Leaves of Mediterranean Shrubs. II Sudden Oak Death Science Symposium, The State of our Knowledge. Monterey, CA, January 18-21. Comunicación en cartel. Bonants, P., van de Boogert, P., Brasier, C. M., Denman, S., Descals, Elcock, S., Goheen, H., de Gruyter, H., Husson, C., Inman, A., Kaminski, K., Kehlebeck, H., Kessel, G., van Leeuwen, G., Moralejo, E., Sansfors, C., Shaw, C., Steeghs, M., Turner, J., Wagner, S. & Webber, J. (2004) Risk analysis for Phytophthora ramorum a pathogen threat to Europe. 3rd international iufro meeting phytophthoras in forests. Freising 14-17 September. Comunicación en cartel.