Artículo - Revista Chilena de Historia Natural

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5cala.-DOBLES
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COLORACION~S DIFERENCIALES
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161
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Segunda contribución al
diferenciales.
las dobles coloraci·o nes
obtenidas con un solo colorante
estudio
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POR
AUGUSTO C. SCALA -
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Profesor de Botánica de las Universi<!a.des Nacionales de Buenos Aires y La Plata
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El .22 de Febrero de 1911 apa1·eci6 en los Anales del
Museo Nacional de Buenos Aires (*), mi primera contribución al estudio de las dobles coloraciones, que utilizando
soluciones muy diluidas de di"\rersos colorantes de anilina,
producen, en los cortes po1· ellas tratados, dos tonos de color perfectamente distintos y nítidos, que ademá-s ~e colorearles con. claridad sorprendente, permiten localizar y
distinguir las · zonas lignificadas y las celuló$~cas, p .e rmitiendo en · tal forma. ejecu.ta1· un gran. n~mero de - obser~a­
ciones en un límite de tiempo . mínimo.
En. aquella fecha hice . exte.n sivo· el estudio a diez
colot·antes anilf.nicos .ocho de los cuales: safranina; azul de
metileno; cristal violeta; verde de iodo; rosanilina; verde metilo; violeta de genciana y fuchsina, usando soluciones . de
0,20 a 0_,50 °/0 acuosas, diluyendo a su vez dos gotas de
éstas en. 15 gotas de agua, coloreaban muy bien los cortes
y con carácter diferencial; al pa~o que . dos de ellos: Coralina y Orange G, no tenían sino superficialmente, pues un
lavado rápido en agua destilada, arrastraba en absoluto
todo el ·c olo1·.
P1·ometía al propio ·tiempo (p. 157 in fine) hacer extensivo dicho estudio a otra serie fle uno·s veinte colorantes, cuyod ensayos habfa comenzado, pero que debí · interrumpil.- por múltiples motivos y que tan sólo hoy, después
ele cato1~ce anos he ·podido continuar, y · ofrecer . al Dt....
Porter quien, desde entonces, no dejó de 1·ecordarme el
compromiso contraído y que cumplo con ·verdadero placet·.
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(*). Torno XXII (Serie B_a. t. XV) pp. 147 a · 157 ..
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REVLSTA
CHILENA
DE
HISTORIA NATURAL
Esta nueva serie consta de doce colorantes, de las
mejores ma1-cas, utilizados diariamente en la técnica y son
los ·s iguientes: ,
Pironina; Eritrosina; Metil violeta B; Verde brillante;
Verde malaq·uita; Rojo Conqo; ·violeta de· metileno; Rosazurina... G; Deltapurpurina; Azul de algodón; Orisoidina y Purpurina.
,
De todos ellos, la Eritrosina no toma en a ·b s{)luto en
los cortes, actuando como la Coralina y el Oranqe G del
primer grupo estudiado y la Purpurina. q?rle tan sólo to1na
en la cuticula y capa·s cuticulares de · la epidermis, po1· cuya
1.. azón la considei..o de precioso recu1·so en la determinación
y l.~econocimiento de estas capas, cuyas coloraciones se
ase mejan a las de las demás partes y no . son. por tanto netamente dife1·enciables .
.
Técnica: Tod.os los colo1~antes no m b1.·ados se han usados en la misma propoi.~ción de dilución_, haciendo soluciones de 0,~0 gramos (\reinte centígramos) en cien centímeti.·os cúbicos de agua destilada f~.--ía_, y filtrando la solución
por p ·a pel de filtro mojado.
·
Estas di versas soluciones madres si1·ven para p1.. epa1·a1.
la solución diluida segunda, tomando en un vid.t·io de 1·eloj
dos gotas de las mismas y diluyénd.olas por el agregado
de quince gotas de agua destilada fría .
Los cortes,· despué s de tt·atado·s por el hipoclo1·ito sódico (Agua de Javell e ) y lavados en al-:> undante agua d e stilada, para evitar la decolo1~ación p1.. ovocada . por el hipoclorita resid-...!.al, se sumergen en la dilución segunda, de
donde después de tres minutos puede n ser 1·etirados, lavados en agua destilada, y montados en la misma agua paT·a
las o bse1.. \taciones inmediatas .
Res·z -tltados: Para evita1· inú-tiles 1·epeticiones tlispongo los resultados en cuadro sinóptico, apuntando los negati,.,..os po1· O, y las observaciones que haya motivado cada
uuo en la última columna:
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Colorante
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LEÑO
Membranas lignificadas.
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Pironina .
Erit l'osf na
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LIBER
~iembranas
celulósicas
Verde bl'illante
,
Cambium
CU'fiCULA
Esh·ias cuticnlares
Fibras pericíclicas
OBSERVACIONES
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Rosado pálido
Rosado pálido
o
o
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Violeta pálido
Azulado violáceo
Azul violeta
etil violeta B. Púrpura violeta Violeta típico
intenso
Verde azulado
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Rojizo-rosado Rojo carmín claro
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Verde azulado
Vel'de ntalaqnita Verde azulado Incoloro a celeste Incoloro. a celeste Azulado VArdoso
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muy pálido
muy pálido
·Rosado pálido Rosado pálido
incoloro
Rubí claro
Rojo Congo
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Rosazn1•ina G
Deltll put'purina
Casi incoloro
Rosado rubí
Heliotropo
Rosado pálido
Rosado pt\lido
Incoloro e helio·
tropo pálido
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Rosado
Violeta típico
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Purp orina
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Más
lento
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Verde azulado
pero color nítida.
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Verde azt1lado Más J!ápido que V. brillante; co· .·. : ~-.'g
lores menos intensos que aquel. . -·. :.;- .->.-'¿,:·;:~)~)
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Rubi claró Mul colorante en sol. acuosa, .. .. ......, .
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lento e inseguro.
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·Violeta claro Inferior al azul de ntetileno. ·
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Rosado _pálido
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A~ción
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Rosado algo ru bi
Rojo. anaranjado Anaranjado claro Anaranjado amari· Anaranjado . rojizo Anaranjado rojizo
llento
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-0rios rijeram~nte
claro. Especifico
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rosado amarillento
_pues tonta exnlu·
sivamente en la.
cuttcla y estratOs
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Celeste típico - Celeste pálido
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164:
R.EV.lSTA
CHILENA DE HISTORIA NATURAL
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Como podrá comprobarse obse·r vando el cuadro sinóptico, ciertos colorantes tinen t:odos los tejidos con tonalidades dife1'entes, poi' ejemplo, el · metilvioleta B, verde brillante, verde rnalaquita, etc . ; otros corno la Rosazurina. G,
el azul de algodón, toman en ciertos tejidos dejando a otros
incoloros (Oambium cutícula) .
Por último la eritrosina no toma en ninguno de_ los
tejidos y la purpurina limita su acción a teffir pi..ecisamente la cutina que incrusta la cutícula y estratos cuticul~1.·es,
constituyéndose por tal ci1.. cunstancia en. J.~eactivo esp~cffico de la misma. ·
·
Se dedu.ce de todo ello q ·u e el empleo apropiado y
oportuno de estos di v .e rsos colo~·an tes en las proporci-o nes
indicadas y con la técnica establecida, permite ·e l estudio
detallado, nítido y I"'ápido _ de los cortes, por cuya razón
'ruelvo a - insistir en las ventajas de su aplicación., siempre
que se trate de coloraciones de estudio Iugaces, para observaciones directas num'e1·osas o confección de prepara
dos pa1.. a ser proyectados o mici. . ofotog¡·afiados.
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Buenos Ait·es, Ju11io 7 de 1925 .
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