EFICIENCIA DE PRODUCTOS ORGÁNICOS EN LA REDUCCIÓN DE LA POBLACIÓN DE Meloidogyne sp. EN ROSAS (Rosae sp). Ing. Agr. JOSÉ LUIS LÓPEZ MORETA INVESTIGADOR I. ÍNTRODUCCION El surgimiento de la floricultura en el Ecuador se inició a partir de 1985, con inversiones de seis empresas que en conjunto disponían de un área no mayor a las 30 hectáreas, que para entonces produjeron un ingreso de 530 000 dólares (27). En 1990 el Ecuador exportó 7 682 037 kilogramos de flores naturales, obteniendo ventas por US Dólares 18 790 299 FOB. En 1992, estas fueron de aproximadamente 8 762 559 kilogramos y los ingresos de las mismas fueron de US Dólares 19 406 517 FOB. Las cifras fueron ascendentes para los años de 1993 y 1994; así, mientras en 1993 se exportaron flores naturales por una cantidad de 15 845 217 kilogramos, con los que se obtuvo US Dólares 37 964 260 FOB, en 1994 las cifras aumentaron reveladoramente a 35 352 413 kilogramos en exportaciones e ingresos por US Dólares 54 776 956 FOB (27). La superficie dedicada al cultivo de rosas en el país se ha incrementado de 131. 40 hectáreas que se contabilizaban en 1990, a más de 1000 hectáreas en el 2002, de las cuales a la provincia de Pichincha le corresponde el 69 % y a Cotopaxi el 31 %. La diversificación del cultivo de flores, fue posible gracias a la situación geográfica del Ecuador, ya que tiene condiciones climáticas y de luminosidad, para ofrecer flores de calidad (23). Las flores ecuatorianas son actualmente las más apreciadas en el ámbito mundial, por su gran variedad, magnífica belleza y calidad insuperable, que pueden atribuirse a sus ventajas naturales (26). Uno de los principales obstáculos para la obtención de flores de alta calidad son los problemas fitosanitarios; los cuales, hacen que las plantas no respondan a la fertilización, riego y podas, presentando una clara clorosis, raquitismo, falta de vigor y una baja productividad. Además, incide en estas limitaciones el ataque del "Nemátodo del nudo de la raíz" (Meloidogyne spp) (26), aunque existen otros agentes patógenos que afectan al sistema radicular en especies florícolas que se cultivan en la sierra ecuatoriana, como: Fusarium, Pythium, Rhizoctonia, etc. (50). El difícil control del "Nemátodo del nudo de la raíz", Meloidogyne spp. mediante el uso de productos químicos, muchos de ellos sumamente tóxicos y de alta peligrosidad tanto para la salud humana como para la actividad biológica del suelo y del medio ambiente en general, está motivando a los floricultores a buscar alternativas tecnológicas de control, que al mismo tiempo que reduzcan los niveles de daño de esta enfermedad, no sean agentes contaminantes y tiendan a rebajar los costos de control (27). La legislación de todos los países especialmente a los que se exportan productos agrícolas ecuatorianos, es cada vez más exigente en cuestión de daños al medio ambiente y de toxicidad de los insumos fitosanitarios que se utilizan. El ataque de nemátodos en el cultivo de rosa, es capaz de bajar su productividad hasta en un 70%, disminuyendo además la calidad de la flor, tanto en el largo del tallo, como en el tamaño del botón (26). Además al utilizar productos de origen químico sean estos fumigantes o no fumigantes, el tiempo de reingreso a los invernaderos es demasiado prolongado, lo que lleva a un alargue en los procesos del cultivo, tanto para la cosecha normal, como para las labores culturales. Por el contrario, al utilizar productos de origen orgánico, con estos no se tiene un período de reingreso alto, no emanan un olor peligroso para las personas de campo y no se necesita normas de prevención muy exigentes. Por las razones antes expuestas, se propuso la siguiente investigación para obtener nuevas alternativas tecnológicas que permitan reducir las poblaciones de Meloidogyne sp. y cuyos objetivos fueron los siguientes: A. General. Determinar la dosis de aplicación más adecuada para los distintos productos de origen orgánico en la reducción de la población de nemátodos Meloidogyne sp. 2 B. Específicos. 1. Evaluar la eficiencia de productos orgánicos, en el control de Meloidogyne sp. en el cultivo de rosa (Rosae sp.). 2. Evaluar la reducción de la población de los "Nemátodos del nudo de la raíz" Meloidogyne sp. en el cultivo de rosas, frente a la aplicación de tres productos de origen orgánico. 3. Realizar el análisis económico de los tratamientos en estudio. II. REVISIÓN DE LITERATURA En nuestro país es muy escasa la información disponible sobre el ataque de nemátodos a los cultivos florícolas. Apenas se tiene datos de algunos géneros y poblaciones que se hallan presentes en algunas zonas productoras. Por esto, es necesario investigar más al respecto; ya que, constituyen un problema de evidentes consecuencias, (15). A pesar de contar con tan poca información en el país, se sabe que los nemátodos constituyen un problema que no se puede obviar, sobre todo porque ya se han hecho evidentes sus consecuencias, atacando seriamente varios cultivos de flores, aunque podrían ser todos los cultivos florícolas existentes pero no se puede contar con toda la información, (16). Los nemátodos son organismos multicelulares, casi todos microscópicos, clasificados dentro del reino animal, que puede ser parásitos de plantas, de animales y del hombre, aunque la mayoría son de vida libre; es decir, que no causan daño ni a las plantas ni a los animales. En general, tienen la forma de un gusano delgado, de sección circular y varían de tamaño según su hábitat alimenticio, (6). El "Nemátodo del nudo de la raíz" (Meloidogyne spp.), debido a su distribución mundial, y al extenso grupo de hospederos, su interacción con otros agentes como hongos y bacterias, hacen que sea considerado entre los agentes causales de las mayores pérdidas económicas en el mundo (40). A. CICLO DE VIDA. El ciclo biológico de los nemátodos así como de la mayor parte de parásitos de las plantas, son simples y directos (10). En las especies bisexuales, el macho fecunda a la hembra y está produce huevos que deposita en el suelo. El huevo unicelular sufre una serie de divisiones que dan lugar a la formación de una larva en su primera fase. En las especies que se han estudiado detenidamente, la primera muda tiene lugar en el huevo y la larva de la segunda fase emerge del huevo. El nemátodo frecuentemente permanece en la segunda fase hasta que encuentra una fuente de alimento, por lo general la raíz de una planta viva. Después de iniciada su actividad atraviesa por otras tres mudas, entre la tercera y cuarta muda empiezan a desarrollarse los órganos sexuales y a la cuarta muda el nemátodo se convierte en adulto maduro. Aunque las hembras siguen alimentándose después de la cuarta muda, existen pruebas que los machos de ciertas especies no se alimentan una vez que han llegado a la fase adulta, (43). Los huevos del género Meloidogyne sp se depositan en ootecas y se desarrollan desde la fase monocelular a la fase postlarvaria. Las larvas permanecen en esta segunda fase hasta que penetran en una raíz, situándose por encima de su extremidad. Permanecen de un modo sedentario en la raíz, crecen y mudan dos veces más, convirtiéndose en larvas de la cuarta fase. Antes de la cuarta muda, el macho se hace más alargado y delgado, después de esta muda abandona la raíz a través del suelo. Las hembras permanecen en la raíz y si están del todo implantadas en está, depositan los huevos en una ooteca en la raíz. Sin embargo, con mucha frecuencia la vulva de la hembra de Meloidogyne sp. queda expuesta en la superficie de la raíz y la masa de huevos se forma fuera. En condiciones óptimas, el tiempo que transcurre desde la formación del huevo hasta la conversión en hembra productora de huevos puede ser tres o cuatro semanas. Si las condiciones no son óptimas es posible que este período sea más del doble, (43). El desarrollo del huevo comienza breves horas después de la oviposición, resultando en 2, 4, 8, ó más células hasta que se ve una larva completamente formada, con un estilete enrollado en la membrana del huevo (44). Durante el proceso embriogénico, se produce dentro del huevo un estado inicial de larva, que es el primer estadío larval. Poco después, ocurre la primera muda y produce un estado de larva secundario, la cual corta con su estilete la cáscara del huevo, para migrar e invadir las células epidérmicas de las raíces, (6). 3 Las larvas (J2) recién incubadas, que se encuentran libres en los suelos, son pequeños gusanos delgados, de 0.4 a 0.5 mm de longitud, que se hallan en el segundo estado larvario, habiendo mudado una vez mientras estaban aún dentro del huevo. Estas larvas (J2), pueden entrar a casi cualquier parte de un vegetal que se encuentre en contacto con el suelo húmedo, una vez dentro, se mueven hacia el periciclo, (10). Las larvas (J2), se mueven principalmente entre las células no diferenciadas de la raíz y finalmente, se colocan con sus cabezas en el cilindro central en desarrollo, cerca de la región de elongación celular y con sus cuerpos en la corteza. Con sus estiletes, perforan las paredes de las células e inyectan secreciones de sus glándulas esofágicas; estas secreciones causan un agrandamiento de las células en el cilindro vascular y aumentan la proporción de la división celular en el periciclo, (44). Durante su período de alimentación, inducen a la formación de tres a seis células gigantes (Síncitos), formadas por un agrandamiento de las células (hipertrofia), a la posible disolución de paredes celulares, a un agrandamiento de núcleo y a cambios en la composición de los contenidos celulares; al mismo tiempo, hay una intensa multiplicación de células vegetales (hiperplasia) alrededor de la cabeza de la larva, (3). Estas larvas (J2), son parásitos sedentarios y una vez que se alojan dentro de los tejidos de la planta, no se mueven ni cambian de posición. A medida que la larva se alimenta, comienza a engrosarse y a perder su apariencia vermiforme, adoptando la forma ovalada, con un grosor aproximadamente de la mitad de su longitud, (29). Al completar la segunda y tercera muda en la hembra, demostradas por las dos cutículas desprendidas, el estilete y el bulbo medio son regenerados, se forman el útero, la vagina y el patrón perineal se hace visible; en cambio en los machos después de la segunda y tercera muda el estilete no es visible, el bulbo esofágico medio se ha degenerado y sólo la gónada se ha alargado, luego ocurre una rápida metamorfosis, (44). Las hembras sufren las mismas mudas que el macho y casi al mismo tiempo, presentando un cambio abrupto en su forma puesto que la hembra continúa su desarrollo y adopta la forma de una pera o algunas veces de una esfera, aunque siempre conserva sobresaliente la región del cuello. Si la planta es un huésped adecuado y si el clima es favorable, las hembras comienzan a depositar huevos después de 20 a 30 días de haber penetrado como larvas (J2). Las hembras secretan a través de su vulva una sustancia gelatinosa y enseguida depositan los huevos sobre la misma, manteniéndolos unidos y formando una cubierta protectora (10). Al incubar la larva puede: • escapar hacia tierra en busca de nuevas raíces. • permanecer y desarrollarse en la misma raíz o en otra estructura donde se hayan producido, (10). La velocidad de desarrollo de los nemátodos, se ve influida por diferentes factores como: la temperatura, la aptitud de las plantas que sirven como huéspedes a una especie determinada de nemátodo y así mismo, al vigor de la planta que se refleja en los nutrimentos disponibles (10). Se encontró que el período necesario para que las hembras alcancen su madurez y depositen huevos, aumenta en forma substancial cuando las plantas se desarrollan en un medio deficiente en potasio (10). En general, el ciclo de vida de Meloidogyne spp. va de 30 a 50 días, dependiendo la duración de la humedad y del huésped, (6). B. ECOLOGÍA. EISENBACK (14), señala que Meloidogyne spp. , está presente donde el promedio anual de temperatura es del rango de 18 a 30°C, con el mayor número de poblaciones. Se observa que a temperaturas que fluctúan entre 27.5 a 30°C las hembras se desarrollan de la etapa de larva a la etapa de deposición de huevos en unos 17 días, a 24°C en 21 a 30 días, a 20°C en 31 días y a 15.4°C en 57 días. A temperaturas inferiores a 15.4 °C o superiores a 33.5 °C las hembras no llegan a alcanzar su madurez (10). Casi todos los nemátodos parásitos de plantas se tornan inactivos a una gama de temperaturas bajas entre 5 a 15°C. La gama óptima es de 15 a 30°C y de nuevo se vuelven inactivos a una gama de alta temperatura como de 30 a 40°C. Las temperaturas fuera de estos límites pueden ser fatales, existiendo poca información sobre temperaturas constantes o alternadas, (29). 4 Con respecto a la influencia de la temperatura en las distintas especies de Meloidogyne WALLACE (52), halló que Meloidogyne hapla y otras especies de climas fríos tienen necesidades mínimas, óptimas y máximas para incubación , movilidad, invasión de raíces, crecimiento, reproducción y supervivencia más bajos que Meloidogyne incógnita, Meloidogyne javanica y Meloidogyne arenaría las cuales ocurren en climas más cálidos (44). Cuando se trata de suelos ligeros o muy porosos, los nemátodos penetran hasta 20 cm de profundidad, el desarrollo de las larvas (J2) depende mucho de la temperatura. Se necesita para el desarrollo de una generación entre 25 días a 27°C y de 87 días a una temperatura de 16.5°C, (33). La temperatura, humedad y aireación del suelo afectan a la supervivencia y al movimiento de los nemátodos en el suelo. Estos se encuentran con mayor abundancia en la capa del suelo comprendida entre 0 y 15 cm. de profundidad, aunque cabe mencionar que su distribución en los suelos cultivados es irregular y es mayor en torno a las raíces de las plantas susceptibles, a las que en ocasiones siguen hasta profundidades considerables de 30 a 150 cm o más. Los nemátodos, se mueven con mayor rapidez en el suelo, cuando los poros de esté están llenos de una película delgada de agua y además de su movimiento propio, se distribuyen con gran facilidad a través de todo lo que se mueve y pueda llevar partículas de suelo, (1). Si los suelos se vuelven muy secos, las larvas (J2) mueren, pero si sobreviven hasta comienzos de la temporada lluviosa, las larvas (J2) pueden emerger e infectar las plantas, (12). En general, se cree que los nemátodos siempre están activos en los suelos que tienen un contenido de humedad de 40 a 60% de capacidad de campo, (29). Las larvas(J2) emergen rápidamente y se mueven con libertad a través de los poros del suelo, cuando hay suficiente agua para formar películas delgadas de agua sobre las partículas del suelo, (52). El movimiento es imposible si los espacios porosos son tan pequeños que les impidan a los nemátodos deslizarse a través de ellos y la movilidad es aparentemente máxima cuando la proporción entre el diámetro de la partícula sobre la longitud del nemátodo es alrededor de 1: 3, (52). C. SINTOMATOLOGÍA. Los nemátodos que atacan a los rosales lo hacen solo en la raíz, no habiéndose encontrado ningún nemátodo hasta el momento en hojas o tallos. En el sistema radicular pueden observarse abultamientos en las raíces y en las raicillas jóvenes causadas por Meloidogyne sp. afectando la parte aérea de forma indirecta causando clorosis y falta de productividad, (26). EINSENBACK (14), menciona que los síntomas en la parte aérea de las plantas infectadas con nemátodos agalladores, son similares a aquellos causados por otros patógenos de la raíz y/o por condiciones ambientales que restringen el flujo de agua o de nutrientes. Síntomas tales como reducción de crecimiento, clorosis del follaje, susceptibilidad al marchitamiento y producción reducida de frutos, son los más comunes, sin embargo los síntomas más característicos de la infección por nemátodos agalladores se presentan en las raíces, las cuales presentan en nudos, agallas y ramificación excesiva de la raíz, (1). Además de la formación de nódulos y células gigantes, las especies de Meloidogyne spp. tienen otros efectos importantes en las raíces de las plantas, tales como el acortamiento de las mismos en comparación con raíces sanas, así como la reducción de raíces laterales y menos pelos radiculares; lo cual acarrea una disminución de la eficiencia radicular debido a la deformación en las raíces y su ineficiencia causa paralización del crecimiento, marchitez en climas secos y otros síntomas propios de la deficiencia de agua y nutrientes, aún cuando éstas abunden en el suelo, (44). El ataque del nemátodo Meloidogyne sp. en el cultivo de rosa presenta los siguientes síntomas, (30). 1. Síntomas Aéreos: • Raquitismo de las plantas. • Clorosis parecida a deficiencia de nutrientes. • Distorsión, clorosis y/o necrosis de las hojas. 5 • • • • • 2. • • • Tallos débiles que no soportan su propio peso. Hojas pequeñas. Caída de hojas. Falta de brotación (yemas duras). Yemas arrosetadas. Síntomas en las raíces. Presencia de nudos. Raicillas con puntos ensanchados. Proliferación de raicillas en corona amanera de escobilla. Según GONZÁLEZ (20), la mayoría de los nemátodos fitoparásitos atacan la raíz u otros órganos subterráneos. Pocas enfermedades causadas por nemátodos pueden identificarse en base a los síntomas subterráneos únicamente. Los siguientes síntomas pueden presentarse ya sea solos o en combinación, (33). a. Agallas o nódulos radicales. Estas malformaciones que varían desde leves ensanchamientos hasta nudos de varios centímetros de diámetro, se deben a hipertrofias e hiperplasias, causadas principalmente por Meloidogyne sp, (33). b. Ramificación excesiva de las raíces. Estos síntomas pueden ser ocasionados por la muerte de la parte terminal de las raíces o por desbalances hormonales. El tamaño y forma de las nudosidades dependen del número de nemátodos atacantes, del lugar de su crecimiento y de la especie de planta. Sobre las raíces, su tamaño varía entre el de un grano de cáñamo y el tamaño de una nuez. En especies de rosa estas son muy pequeñas. Algunas son fusiformes y delgadas, habiendo otras mas tuberosas, cortas y rechonchas. La porción de raíz que se halla por debajo de las agallas y las agallas mismas, terminan por morir y podrirse, las plantas se vuelven enfermizas y seguidamente mueren mostrando con frecuencia síntomas de falta de nutrientes, (33). Parece ser que la mayoría de los daños son ocasionados por una secreción de saliva que el nemátodo inyecta en la planta mientras se alimenta de ella. Algunas especies de nemátodos se alimentan con gran rapidez, perforan la pared celular, inyectan saliva en la célula, succionan parte de los contenidos celulares y se mueven en el interior de ella al cabo de unos cuantos segundos. Sin embargo, otras especies se alimentan con menos rapidez y pueden permanecer en el mismo punto de entrada a la célula durante varias horas o días, (33). c. Inhibición del crecimiento. Los nemátodos que parásitan las raíces provocan una inhibición inespecífica del crecimiento de las partes aéreas de la planta, (9). El daño de Meloidogyne sp. , consiste en desintegrar las paredes de las células gigantes, cada agalla contiene de 3 a 6 células gigantes. Estas células presionan los tejidos conductores impidiendo el transporte de substancias. La hinchazón también se debe al aumento de la cantidad y volumen de las células cercanas a las gigantes, (43). Las hembras de las especies de Meloidogyne spp. , se alimentan del citoplasma de las células gigantes, este tiene una textura granular que va aumentando en densidad a medida que la célula madura y contiene muchas mitocondrias y componentes celulares comunes como; cuerpos de golgi, proplástidos y una gran cantidad de retículo endoplasmático. El citoplasma de la célula gigante, tiene diez veces más proteína que el citoplasma de una célula normal y también trazas de carbohidratos y grasas, (44). El mantenimiento de las células gigantes parece depender de un continuo estímulo generado por el nemátodo, (44). 6 d. Formación anormal de raíces laterales. Los nemátodos pueden estimular a las raíces jóvenes a la formación reforzada de ramificaciones laterales. Puesto que éstas por su parte vuelven a ser atacadas, por ello todo el sistema radicular se expande de una forma reticular, (9). D. MÉTODOS PARA EL CONTROL DE NEMÁTODOS. En la actualidad se dispone de varios métodos eficaces para controlar a los nemátodos aunque ciertos factores, tales como los costos y los tipos de cultivo, limitan su aplicabilidad en determinados casos. Se emplea cuatro tipos generales de métodos de control. El control con compuestos químicos, control biológico, control mediante métodos de cultivo y control mediante la incorporación de materia orgánica, cultivos trampa y productos orgánicos, (4). 1. Control Químico. El control químico es preferible dejarlo como última alternativa y siempre en forma integral. Los nemátodos son sorprendentemente resistentes a muchas substancias químicas y esta resistencia obedece, cuando menos en parte, a la impermeabilidad de la cutícula y a la cubierta protectora del huevo (10). Los productos químicos, son particularmente eficaces contra los nemátodos del tallo y de las hojas, más vulnerables y también se emplean ampliamente contra los que invaden cultivos costosos en los invernaderos, donde el valor de este cultivo es suficientemente alto para justificar el costo de dosis masivas de nematicidas, que frecuentemente se requieren para un control eficaz de la enfermedad, (10). Los nemátodos están cubiertos de una cutícula impermeable, que los protege, por tal razón los nematicidas eficaces deben penetrar la cutícula lipofílica, (43). La cutícula se compone de un complejo de varias proteínas que incluyen colágenos, fibroides, elastoides, queratoides y cuando menos en algunos casos, lípidos. El cascarón mismo del huevo es quitinoide y se dice que es relativamente permeable. La membrana vitelina se compone de una cera relacionada químicamente con las de las abejas, siendo la barrera principal para que la substancia química penetre en el huevo, (10). Las propiedades que permiten a una substancia química penetrar a través de la cutícula deben tender a aumentar su eficacia nematicida, tales propiedades pueden no ser necesarias. Las substancias químicas pueden entrar a través de las aberturas naturales del cuerpo, de las cuales la penetración por la boca puede ser la más mortal. El huevo no tiene aberturas naturales, lo cual puede justificar que esta etapa del ciclo de vida sea resistente a las substancias químicas, (10). Poco después de la aplicación de un fitotóxico, la substancia química debe eliminarse rápidamente de las tierras una vez cumplido su papel o debe perder su fitotoxicidad mediante una descomposición química. Por lo tanto, es relativamente corto el intervalo durante el cual la substancia química mata los nemátodos. Una vez que ha terminado este período, la población residual de los nemátodos se encuentra en libertad de propagarse de nuevo, lo que a veces sucede con una rapidez desconcertante. Un material que se retiene en el suelo y que continúa su acción nematicida puede retardar o prevenir la propagación después de la aplicación, (10). Con el empleo de los nematicidas se trata de proteger a las plantas de los ataques de nemátodos y de mejorar su crecimiento y rendimiento. Esto presupone la destrucción de suficientes nemátodos para que sus ataques no constituyan un importante factor limitador en el crecimiento o rendimiento. Las dosis mínimas de aplicación son las cantidades de ingrediente activo que se usan comercialmente para luchar contra los nemátodos para suelos franco arenosos, los suelos arcillosos exigen a menudo un aumento del 50%, aproximadamente el doble de la dosis mínima. Al calcular la dosis de aplicación se debe tener en cuenta que casi todos los preparados contienen diluyentes, (43). Para poder lograr un control eficaz de nemátodos, el producto químico se deberá distribuir bien en el suelo y tener una razonable permanencia por su acción nematicida, los productos químicos tales como el dicloropropeno o dibromuro de etileno, que liberan gases tóxicos lentamente son por tanto particularmente eficaces, (8). 7 El control químico puede lograrse por medio del tratamiento del suelo mediante el empleo de fumigantes, que son compuestos con suficientemente volatilidad como para penetrar a través de las capas superiores del suelo, donde se encuentran la mayoría de los insectos y de los nemátodos, (8). El bromuro de metilo, que es altamente volátil, para la esterilización del suelo en los invernaderos, es demasiado volátil para el tratamiento general del suelo. La eficacia de la fumigación del suelo contra los nemátodos depende de diversos factores, siendo los más importantes el tipo de suelo, las condiciones de humedad y de temperatura. Es necesario un suelo caliente para que el tóxico volátil pueda dispersarse eficazmente a través de la capa del suelo. Aun puede ayudar a la dispersión un suelo fino, bien trabajado, con razonable humedad. Diferentes tipos de suelo pueden variar considerablemente en su capacidad de absorber los fumigantes, por lo que los suelos ricos en materia orgánica desactivan una proporción muy alta del tóxico, de manera que el control de nemátodos no es satisfactorio, mientras que en suelos arenosos se dan mejores resultados, el D-D aplicado en dosis de 60 gal/acre controla nemátodos de los cítricos, pero en suelos arcillosos se requieren 250 gal/acre para obtener un efecto comparable, (8). La fumigación del suelo es una operación costosa, con materiales volátiles como los mencionados, el producto químico es inyectado en el suelo siguiendo un diseño en forma de rejilla con espacios de 30 cm y después el suelo casi siempre necesita ser sellado para evitar la fuga del material, (8). Las capas más bajas del suelo no son alcanzadas por el fumigante, por lo que estas áreas que no se han tratado ocasionan eventualmente una recolonización del suelo esterilizado, tanto por organismos dañinos como benéficos. Esta situación pudiera resultar en un incremento transitorio de algunas especies de plagas, pero afortunadamente los hongos benéficos saprofíticos son las especies presentes más resistentes y de esta forma generalmente reinfestan primero al suelo tratado y ocasionan posteriormente cierto retraso en la dispersión de este parásito, (8). El Basamid puede aplicarse al suelo como granulado en proporciones de 40-50 gramos por metro cuadrado para el control de nemátodos del suelo. El Fenamifós o Nemacur, es activo contra los nemátodos cuando se hace aplicación total al suelo, a proporciones de 5-20 kg/ha, con o sin incorporación al suelo, tiene la desventaja de tener un alto grado de toxicidad para mamíferos, DL 50(oral) para ratas de 17 mg/kg, (8). Los nematicidas comerciales volátiles son haluros saturados o insaturados, como el bromuro de metilo, el dibromuro de etileno, la cloropicrina, el Nemagón y su actividad depende probablemente de la reacción con un sitio nucleofilico, como grupos OH, SH o Nh2 en un sistema enzimático vital del nemátodo, (8). Los organofosforados y los carbamatos son incorporados en el suelo en proporciones de 2-10 kg/ha en comparación con los 150-1150 kg/ha que se requiere para el control de nemátodos con los haluros alifáticos volátiles. El carbamato de N-metilo carbofurán es un nematicida del suelo eficaz en tratamientos totales a dosis de 6-10 kg/ha, tiene una vida residual muy corta, los carbamatos de oxima, aldicarb y de oximilo tienen una alta toxicidad para mamíferos. los nematicidas organofosforados y carbamatos, penetran directamente la cutícula e inhiben la (acetil) colinesterasa y producen efectos narcóticos y cambios en el movimiento, desorientación o parálisis, otros efectos como detención o reducción de la eclosión de huevos, reducción del movimiento, retardo en procesos de muda de la cutícula y cambios en la alimentación y reproducción, son atributos a estos dos de nematicidas, (8). También existen nematicidas no fumigantes y que se presentan en nuevas formulaciones como: gránulos, polvos y líquidos y que han desplazado a los fumigantes, en el mercado existe variedad de compuestos organofosforados y carbamatos, como mocap, oxamil, aldicarb, carbofurán y fenamifos, entre otros; existen de contacto y sistémicos, (3). ROBALINO y JIJÓN (37), utilizaron Vapam 400 litros/ha, Vydate líquido 4.5 litros/ha, Furadan 10 kg/ha, Terracur 10 kg/ha y Vydate L granular 10 kg/ha y se obtuvo una alta mortalidad del segundo estado larvario de Meloidogyne sp. en tomate en el suelo, siendo estas las siguientes: 81.71%, 78.03%, 75.17% y 65.60% respectivamente. Comparando el efecto de los cinco nematicidas en el control de Meloidogyne sp. se encontraró una disminución en su nivel poblacional (segundo estado larvario) hasta los 180 días, posiblemente esto se debe a la acción tóxica de los nematicidas, demostrando además que existen diferencias en el modo de actuar de cada nematicida. El Vydate L, reprime en menor forma la formación de hembras en el sistema radicular, además solo hasta los 180 días existe un control efectivo en todos los productos, luego su eficacia es negativa a los 240 días. 8 Furadan (Carbofuran) en la dosis de 200 kg/ha, como producto comercial obtuvo una represión de hembras del 52.10% , (37). Según ROBALINO y JIJON (37), el nivel poblacional de tolerancia es de 40 larvas por 100 cm3 de suelo para tomate, puesto que el índice de incremento de población es de 1.5 veces su población inicial. TAYLOR (43), indica que la multiplicación de los nemátodos en el sistema radícular después de emplear nematicidas, ofrece condiciones ideales para la multiplicación de los nemátodos que sobrevivan en el suelo, a causa de esto cuando suba la temporada vegetativa, la población de nemátodos puede ser suficiente para constituir un factor limitante en el próximo cultivo. Los productos químicos, cuya desventaja radican en su toxicidad para los animales y el hombre, deben ser usados selectivamente para que el daño a organismos benéficos del suelo, como las bacterias nitrificadoras y las micorrizas, sea mínimo, (3). 2. Control Biológico. Los enemigos naturales de los nemátodos que existen en todos los suelos agrícolas destruyen una gran parte de tales nemátodos fitoparásitos. Al parecer, si las condiciones ecológicas del suelo son favorables, los enemigos de los nemátodos por lo general surgen naturalmente; si las condiciones son desfavorables los organismos incorporados no prosperan, (43). LABAN y PANIZO (25), señalan que el hongo Paecilomyces lilacinus parásita principalmente en huevos y hembras adultas de Meloidogyne spp. , reduciendo de 80 a 90 % la población, pero que tiene inconvenientes de su producción, costos y aplicación. EGUIGUREN (13), en un experimento sobre control biológico de Meloidogyne incognita con el hongo Paecilomyces lilacinus, indica que el índice de nodulación varió de acuerdo al nivel poblacional del nemátodo y densidad de Paecilomyces lilacinus, observándose menores índices a mayor cantidad del hongo. El resultado para población final dió una alta significación para dosis y niveles poblacionales, y significación para la interacción, observándose claramente que a mayor densidad de Paecilomyces lilacinus existe menos población del nemátodo. Paecilomyces lilacinus es un parásito de los huevos de Meloidogyne incognita y Nacobbus. Los mejores resultados se lograron con poblaciones nematológicas altas, lo que sugiere que el hongo necesita suficientes huevos de los nemátodos para su mantención. El hongo, Paecilomyces lilacinus Thom. Samsom. penetra los huevos del nemátodo destruyendo el embrión y también ataca a las hembras en desarrollo y se multiplica dentro de ellos, produciéndoles la muerte. Hasta ahora, el hongo ha sido muy efectivo en el control de Meloidogyne incognita, (el nemátodo del nudo de la raíz), pero se están realizando pruebas para determinar su posible uso en el control de otros nemátodos (24). GUEVARA et al (21), al realizar una investigación en tomate de árbol encontró que a los seis meses del transplante, se presentaron diferencias altamente significativas para altura de planta, destacándose los tratamientos en los que se utilizó Paecilomyces lilacinus. El hongo Paecilomyces lilacinus sobrevive por lo menos un año en el suelo. Realizando una investigación adicional se podrá obtener más información sobre los efectos prolongados del tratamiento con el hongo y sobre la supervivencia del mismo en el suelo. Este hongo se desarrolla a temperaturas altas de 20 a 30°C y en una amplia gama de niveles de acidez del suelo, de modo que pudiera ser un factor importante bajo condiciones de climas tropicales, donde los nemátodos del nudo de la raíz son comunes, (24). SAYRE (41), indica que hay dos tipos de hongos que matan nemátodos: los hongos atrapadores que capturan nemátodos por medio de redes y nudos adhesivos, adheridos a las redes de sus hifas por ramas laterales cortas y anillos hifales, algunos de los que se contraen para capturar a los nemátodos que tratan de pasar a través de ellos, algunos de los más conocidos son Arthobrotys, con anillos contráctiles y redes adhesivas, Dactylella con nudos y argollas adhesivas. Por otra parte, hay hongos parásitos endozoicos que infectan las especies de Meloidogyne sp. y a otros nemátodos fitoparásitos; además se afirma que un "tubellarion" (pequeño gusano plano) se alimenta de nemátodos y otros animales microscópicos. (41). 9 MANKAU (28), indica que las esporas del hongo Bacillus penetrans, parásitan las larvas de Meloidogyne sp y también a veces son encontradas hembras que contienen grandes números de esporas. TRIVIÑO (47), indica que otra forma de control del nemátodo del nódulo de la raíz Meloidogyne sp, es la utilización de la bacteria Pausteria penetrans thorne, Sayre y Starr, puesto que para su reproducción es necesario un temperatura alta y la presencia del nemátodo, ya que necesita de siete esporas adheridas a la cutícula del nemátodo (segundo estado larval) previo al ingreso de éste a las raíces de la planta que ataca, posteriormente se produce la germinación de la espora sobre la cutícula del nemátodo formando micro-colonias que proliferan en el interior de las hembras, produciéndose de uno a dos millones de esporas, lo que impide que el nemátodo produzca huevos, dando como resultado reducción de las poblaciones. Si por el contrario, se adhieren más de 15 esporas por nemátodo, esté se inmoviliza y muere antes de ingresar a la planta. En Ecuador, en forma natural, la densidad poblacional de Pausteria en los campos donde se ha encontrado es muy baja. Comúnmente se ha observado una espora por nemátodo y con menor frecuencia tres o cuatro, solamente en la provincia de Esmeraldas se ha cuantificado hasta 10 esporas por nemátodo. La baja población de la bacteria en forma natural ha hecho que el control no sea evidente, por lo que es necesario el manejo de los cultivos favorables para el incremento de las esporas y la incorporación artificial de éstas. Estos cultivos pueden ser: tomate, berenjena, pimiento, fríjol y soya. (47). 3. Incorporación de Materia Orgánica. La materia orgánica puede cambiar al ambiente del suelo, en tal forma que estimule a los hongos y organismos predatores de nemátodos, además la materia orgánica en descomposición puede producir sustancias directamente tóxicas a los nemátodos, o la abundancia de materia orgánica puede causar un gran incremento en la población de nemátodos de vida libre que están alimentando de bacterias, seguido por un incremento de enemigos de nemátodos que atacan tanto a los de vida libre como a las especies parásitas, (18). PEET (34), indica que un alto contenido de materia orgánica protege a las plantas contra los nemátodos, por que el suelo aumenta su capacidad de retener humedad o incrementa la actividad natural de microorganismos biológicos y la competencia con nemátodos presentes en el suelo. a. Humus de Lombriz. La capacidad que tiene el humus es aumentar la disponibilidad de nutrientes como calcio, potasio, magnesio, siendo esta una característica del humus. El humus tal como una arcilla, actúa como un ácido y puede reaccionar frente a los minerales del suelo para extraer sus bases. La capacidad que tiene el humus ácido para efectuar esta transferencia es por el intercambio de las bases que son retenidas en forma débil y pueden ser absorbidas por las plantas, esta capacidad de movilizar nutrientes es una de las propiedades más relevantes de los coloides húmicos. Por otra parte, la micela orgánica es amorfa y es susceptible al ataque de los microorganismos, (11). El humus de lombriz posee un pH neutro, por lo cual crea un medio desfavorable para la proliferación de ciertos parásitos en los cultivos. Es inodoro y aunque se dosifique en exceso, no perjudica a las plantas más jóvenes y delicadas. Al ser un producto estable puede permanecer almacenado mucho tiempo sin sufrir alteraciones (9). Según TOCAIN (45), el humus desempeña tres importantes papeles en el suelo: • Biológico: La materia orgánica es ante todo el soporte alimenticio de la fauna y microflora del suelo, cuya actividad es indispensable para mejorar o mantener la fertilidad. • Químico - Nutricional: La descomposición total de la materia orgánica libera elementos minerales presentes en los residuos vegetales o animales (N - P - K - Mg - S). • Físico: La presencia de un complejo arcillo - húmico estable, permite mantener una buena estructura, principalmente en suelos arcillosos. En suelos limosos y arenosos el humus hasta cierto punto puede reemplazar a la arcilla. 10 La materia orgánica actúa sobre los microorganismos saprófitos y sobre los nemátodos fitopatógenos de la siguiente manera: 1. Efectos sobre los Microorganismos Saprófitos. En general el número de bacterias aumenta en las primeras etapas de la descomposición. Los hongos predominan en las etapas posteriores o durante la descomposición de los materiales orgánicos resistentes, (5,32). 2. Efecto sobre los Nemátodos Fitopatógenos. En cierto número de casos, se han asociado las enmiendas orgánicas con la disminución de la población de nemátodos. Los estudios realizados con este fin establecen que podría deberse a los efectos directos de los productos de descomposición, tales como los alcaloides y los ácidos grasos volátiles y efectos indirectos, donde los nemátodos que se alimentan de microbios que descomponen la materia orgánica aumentan en número y lo mismo sucede con sus enemigos, estos últimos son hongos parásitos, (5,32). Según REVELO (36), mediante la incorporación de materia orgánica al suelo, se logra disminuir poblaciones de Meloidogyne sp., debido especialmente a que éstas permiten la multiplicación de enemigos naturales del nemátodo como: hongos, nemátodos predatores, nemátodos saprófitos y parásitos internos; ya que, en su proceso de descomposición se producen substancias letales como: gas sulfídrico, ácidos volátiles (butírico, propiónico), etc. TORRES (46), señala que gracias a los oligomentos que contiene los estiércoles como cobre, boro, manganeso, hierro, zinc, etc. pueden favorecer el crecimiento y como consecuencia la resistencia de la planta. Meloidogyne incógnita, se controló parcialmente incorporando al suelo 2.5 toneladas por hectárea de estiércol de vacuno. Se reporta además que tanto en semilleros como en la plantación definitiva de tomate, el estiércol de vacuno redujo en un 32% la infestación de Meloidogyne incógnita, el de equino en un 50% y mantillo vegetal en un 52%, (36). No hay indicaciones de que los huevos de nemátodos puedan mantenerse viables después de pasar por el sistema digestivo de los animales, (3). b. Gallinaza. Este abono orgánico está formado por las deyecciones de las excreciones avícolas, su principal aporte es fósforo. Al igual que ocurre con la paja, si no se aplica con cierto grado de descomposición, el proceso se lleva a cabo a expensas del nitrógeno del suelo. Se utiliza en la preparación de compost especial para horticultura y floricultura, (3). Para un posible control de nemátodos con gallinaza se requiere un proceso de descomposición mayor para facilitar que en la materia orgánica se produzcan substancias letales como gas sulfídrico y ácidos volátiles, (16). c. Melaza. La melaza queda como residuo de la cristalización del azúcar, es un jarabe denso, viscoso, de color amarillo obscuro, marrón claro o marrón obscuro, casi negro según donde provenga. Contiene un 85% de materias secas, un 40 a 60% de los cuales es azúcar. La melaza se utiliza para la producción de alcohol, de levaduras y para la preparación de forrajes mezclados añadiéndose a los alimentos secos tales como el salvado o la pulpa seca y también como "fertilizante", (31). La melaza constituye una de las fuentes de carbohidratos más utilizados por su contenido de azúcares solubles que promueven un rápido desarrollo de las bacterias. La acción principal es como adherente, pero también tiene carácter neutralizador, (46). La melaza de caña de azúcar contiene 50 a 58% de azúcares digestibles, constituidos principalmente por 37% de sacarosa, 14% de glucosa y 7% de levulosa, que le da un sabor dulce. En la melaza, el potasio representa el 50% del contenido mineral; en cuanto a otros nutrientes, la melaza de la caña de azúcar contiene niveles muy bajos de 11 proteína bruta de 2% a 3.4%, cenizas del 6 a 12%, azúcares totales 47% y energía metabolizable de 1.83 a 2.00 Mcal/kg (49). YÉPEZ (54), indica que el aumento de la presión osmótica mediante el añadido al suelo de ciertas substancias como la sacarosa ha sido comprobada como bastante efectiva para disminuir poblaciones de nemátodos del suelo. 4. Productos Orgánicos. a. Compuestos a Base de Neem. WENDT (53), manifiesta que el Neem (Azadirachta indica) pertenece a la familia de las meliáceas, es un árbol siempre verde y con un crecimiento rápido, la planta madura alcanza de 7-20 m de altura y posee una atrayente copa globosa de 5 a 10 m de diámetro que produce frutos del tamaño del café. En la semilla, se encuentra la "azadiractina" y otras sustancias químicas que actúan como repelentes, alterando la metamorfosis, inhibiendo el crecimiento y reduciendo la fecundidad. Estas sustancias no tienen ninguna toxicidad contra el ser humano o animales de sangre caliente. Ya en 1927 se descubrió que el Neem no fue atacado durante una invasión de langostas en la India. Desde ese tiempo se realizaron muchas investigaciones, resultando que el Neem tiene la capacidad de controlar más de 100 insectos plagas, ácaros y nemátodos. El Neem no tiene efecto de contacto, por eso, ni mata directamente a las plagas ni a los insectos benéficos. Las semillas contienen un promedio de 2 a 4 mg de azadirachtina por gramo de semilla fresca. En el Ecuador el promedio es de 3.2 mg / gramo, además contienen: Meliantrol, Salanina, Nimbidin, Nimbin. Las substancias insecticidas se les obtiene haciendo varios extractos de las semillas en torta de Neem, y con menor frecuencia, en el aceite. Los ingredientes activos son poco solubles en agua, pero con una buena solubilidad en solventes orgánicos como alcoholes. La torta de Neem, residuo de la producción del aceite, se puede incorporar al suelo o hacer un extracto acuoso de ella, ya que contiene las substancias activas casi completas. Además contiene N. P. Ca y Mg como los estiércoles, mejora los suelos, protege los cultivos contra nemátodos y termitas e inhibe la nitrificación, (7). El producto biológico Neem-X cuyo ingrediente activo es la Azadiractina extraída del árbol de Neem, es un producto que funciona como insecticida a 1ml/litro y como nematicida a 2-4 ml/litro con intervalos de 1 a 3 meses, tiene una acción translaminar no es tóxico o biotóxico atacando al estado de muda del nemátodo, no es ovicida, el Neem-X mata un 70% de la población mientras que un nematicida químico un 80%, (21). b. Compuestos a base de Extractos Vegetales. El producto biológico Nemastroy cuyo ingrediente activo es la combinación de los extractos del ají en un 0.42 % y del aceite esencial de mostaza 3.70 %, forman un pesticida repelente, teniendo características de matar al contacto y mantiene una acción repelente con la mayoría de los nemátodos e insectos. Es un insecticida a dosis de 0.8 ml/litro y actúa como nematicida a dosis de 1.5 a 2.5 ml/litro con intervalos de 21 días a 3 meses, (39). c. Compuestos a base de Pseudomona cepacia. El producto biológico Intercept cuyo ingrediente activo es la bacteria Pseudomonas cepacia (type wisconsin), es un biofungicida a dosis menores de 0.4 ml/litro y nematicida a dosis de 0.5 a 1.2 ml/litro con intervalos de 1 a 3 meses, es un concentrado microbiológico natural que mejora la salud y el vigor de las plantas a través de la simbiosis de sus rizobacterias con las raíces, las razas de bacterias contenidas en Intercept crecen naturalmente en las raíces de las plantas tratadas aumentando su vigor y resistencia al daño creado por los nemátodos en su sistema radicular, no es tóxico para las personas, plantas ni animales, no es contaminante y es totalmente seguro para el medio ambiente, (42). Utilizando Intercept en dosis de 1.0 ml/ litro ayuda a mantener bajas las poblaciones de nemátodos, SANCHEZ (39), en un experimento en la respuesta del banano a la aplicación de nematicidas naturales, sugiere una aplicación de Intercept a dosis altas de 1.00 cc / litro, por que aumento su rendimiento, por el vigor encontrado en sus raíces. 5. Cultivos Trampa. AGRIOS (1), afirma que se ha logrado el control experimental de los nemátodos entresembrando en los cultivos trampa como caléndula (Calendula officinales L.), que son tóxicas a esos patógenos o plantas atrapadoras de nemátodos tales como Hesperis en el caso de la remolacha azucarera y crotalaria para el nemátodo del nudo de la 12 raíz. Los cultivos trampa atraen a los nemátodos y los alejan de las plantas de cultivo susceptible y aunque los nemátodos penetran en dichos cultivos no pueden desarrollarse en ellos. La resistencia que tienen las plantas al ataque de nemátodos se los identifica como una reacción hipersensible que se refleja en una rápida necrosis de los tejidos de la planta que rodea al nemátodo o sintetizando substancias fenólicas en altas concentraciones que matan nemátodos como lo hacen los espárragos, al emitir glucosa nematicida o como también se ha identificado en Marigold con su Alpha terthiely, (51). Algunos tipos de plantas, como es el caso del espárrago y la flor de muerto Marigold o Tágetes, son antagónicos a los nemátodos, debido a que liberan ciertas substancias en el suelo, las cuales son tóxicas para varios nemátodos fitoparásitos y cuando se intercalan con cultivos susceptibles a estos patógenos, reducen el número de nemátodos del suelo y de las raíces de las plantas de esos cultivos, desafortunadamente ningún tipo de planta antagónica o cultivo trampa ha dado un grado de control suficiente sobre las enfermedades de las plantas para compensar los gastos que se han hecho, (1). 6. Variedades Resistentes. CHRISTIE (10), señala que en muchas variedades de rosas se observan, con frecuencia, las vesículas de los nódulos radiculares cuando han crecido sobre sus propias raíces. Los pies de injerto que se utilizan con mayor frecuencia en la producción de arbustos comerciales de rosales son: Rosa multiflora y Rosa manetti. Estas variedades mostraron más resistencia al nódulo radicular. La especie Rosa blanda utilizada en crías para mejorar los pies de injerto, presentaron un alto grado de resistencia. Ciertos clones de Rosa indica major y Rosa manetti resultan menos infectadas por Pratylenchus vulnus y por ciertas poblaciones de Meloidogyne hapla, (17). III. A. MATERIALES Y MÉTODOS. CARACTERÍSTICAS DEL ÁREA EXPERIMENTAL. 1. Ubicación Provincia: Cantón: Ciudad: Sector: Sitio: Altitud: Longitud Oeste: Longitud Sur: 2. Pichincha Mejía Machachi La Avanzada Empresa Panorama Roses S.A. 2895 m.s.n.m 78º 34’ 11” 0º 21’ 41” Características climáticas de la zona. ∗∗ Topografía: Pendiente: Profundidad de la capa arable: Textura: pH del suelo: Contenido de materia orgánica: Temperatura ambiental máxima: Temperatura ambiental mínima: Humedad ambiental relativa máxima: Humedad ambiental relativa mínima: Clima: ∗ plana 3% >1m Franco - Arenoso 7.0 2–4% 24°C 2°C 100% 30% Templado – Frío Estación Meteorológica de la empresa Panorama Roses S. A. 13 3. Características climáticas de los invernaderos. Característica Temperatura promedio día Temperatura promedio noche Temperatura promedio Humedad relativa promedio día Humedad relativa promedio noche Humedad relativa promedio 4. Características del suelo. a. Características del suelo. Textura: Franco arenoso pH: 5.9 Conductividad eléctrica: 2.4 mmhos/c b. Análisis de suelo.∗∗ Este se presenta en el cuadro 1. Cuadro 1 Análisis de suelo, tomado al inicio del ensayo, Machachi - Pichincha 2002. pH NH4 NO3 P Zn Cu Fe Mn B b= m= s= a= e= 5. Español 17.4 ºC 12.9 ºC 15.1 ºC 73 % 86 % 79 % 7.80 la 0.01 ppm b 0.60 ppm b 0.01 ppm b 2.60 ppm b 0.02 ppm b 3.20 ppm e 1.20 ppm e Cl K Ca Mg Na CO3 HCO3 C.E 0.38 ppm b S bajo medio suficiente alto exceso 0.20 0.18 0.33 1.26 1.20 0.01 1.58 0.28 meq/l meq/l meq/l meq/l meq/l meq/l meq/l mmho 37.30 ppm ac= lac= pn= lai= al= b b b m m b m b e ácido ligeramente ácido prácticamente neutro ligeramente alcalino alcalino Análisis nemátologico. Para éste análisis las muestras fueron tomadas en cinco sitios en donde se ubicó el ensayo. Los datos están expresados en número de larvas en 100 g de suelo. Cuadro 2 Género Meloidogyne Pratylenchus Saprofitos ∗ Análisis nematológico de la población inicial de nemátodos Machachi - Pichincha 2002. Sitios de ubicación dentro del ensayo 1/5 2/5 3/5 4/5 140 40 360 160 40 60 80 320 260 Laboratorio de Investigaciones Agrícolas Agrobiolab. en rosa (Rosae sp.) 5/5 240 220 180 14 B. MATERIALES USADOS EN EL EXPERIMENTO. 1. Invernadero -1467 plantas de rosa, variedad Tropical amazone cuyo patrón es Natal Brier. -Invernadero Español con cortinas abatibles (automático – semicontrolado). -Tijeras. -Guantes de cuero. -Barreno. -Líneas de goteo. -Rótulos de identificación. -Productos biológicos. -Ají más mostaza (Nemastroy). -Extracto del árbol de neem (Neem-x). -Bacterias Pseudomona cepacia (Intercep). -Piolas, estacas. -Libro de campo. 2. Laboratorio. -Balanza de precisión de 0.01 gramos y una capacidad de 2 610 gramos. -Probeta de capacidad de 1000 ml -Tamices de 38 y 25 micras. -Servilletas. -Etiquetas adhesivas. -Microscopio de disección. -Hipoclorito de sodio al 5%. -Plato cuenta larvas. -Escalas para cuantificar el número de nemátodos. -Fundas para recolectar muestras. -Libro de campo. 3. Oficina. -Cámara fotográfica. -Rótulos. -Materiales de gabinete. -Análisis nemátologico del suelo. C. FACTORES EN ESTUDIO. Reducir la población de Meloidogyne sp. en el cultivo de rosas con la aplicación de tres productos de origen orgánico. f1= 30 días FRECUENCIA f2= 60 días f3= 90 días PRODUCTOS DOSIS∗∗ ∗ p1= Pseudomona cepacia (Intercept) p2= Extracto del árbol de neem (Neem-X) p3= Extracto de ají más mostaza (Nemastroy) d1= Mínima recomendada (-25%) d2= Comercial d3= Máxima recomendada (+25%) El detalle de estas se especifica en las páginas 36 y 37 de este documento. 15 D. INTERACCIONES. A continuación se detalla las interacciones que resultan de combinar todos y cada uno de los niveles de los tres factores motivo de estudio, para la reducción de la población de Meloidogyne sp. Cuadro 3 t1 t2 t3 t4 t5 t6 t7 t8 t9 t10 t11 t12 t13 t14 t15 t16 t17 t18 t19 t20 t21 t22 t23 t24 t25 t26 t27 t28 t29 t30 E. f1p1d1 f1p1d2 f1p1d3 f1p2d1 f1p2d2 f1p2d3 f1p3d1 f1p3d2 f1p3d3 Testigo f2p1d1 f2p1d2 f2p1d3 f2p2d1 f2p2d2 f2p2d3 f2p3d1 f2p3d2 f2p3d3 Testigo f3p1d1 f3p1d2 f3p1d3 f3p2d1 f3p2d2 f3p2d3 f3p3d1 f3p3d2 f3p3d3 Testigo Interacciones usadas en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para el control de nemátodos en el cultivo de rosas (Rosae sp). Machachi - Pichincha 2002. 30 días (f1)Pseudomona cepacia (p1) Mínima recomendada (d1) 30 días (f1)Pseudomona cepacia (p1) Comercial (d2) 30 días (f1)Pseudomona cepacia (p1) Máxima recomendada (d3) 30 días (f1)Extracto del árbol de neem (p2) Mínima recomendada (d1) 30 días (f1)Extracto del árbol de neem (p2) Comercial (d2) 30 días (f1)Extracto del árbol de neem (p2) Máxima recomendada (d3) 30 días (f1)Extracto de ají más mostaza (p3) Mínima recomendada (d1) 30 días (f1)Extracto de ají más mostaza(p3) Comercial (d2) 30 días (f1)Extracto de ají más mostaza (p3) Máxima recomendada (d3) 45 días, Mocap gel ( producto organófosforado), dosis comercial 60 días (f2)Pseudomona cepacia (p1) Mínima recomendada (d1) 60 días (f2)Pseudomona cepacia (p1) Comercial (d2) 60 días (f2)Pseudomona cepacia (p1) Máxima recomendada (d3) 60 días (f2)Extracto del árbol de neem (p2) Mínima recomendada (d1) 60 días (f2)Extracto del árbol de neem (p2) Comercial (d2) 60 días (f2)Extracto del árbol de neem (p2) Máxima recomendada (d3) 60 días (f2)Extracto de ají más mostaza (p3) Mínima recomendada (d1) 60 días (f2)Extracto de ají más mostaza (p3) Comercial (d2) 60 días (f2)Extracto de ají más mostaza (p3) Máxima recomendada (d3) 45 días, Mocap gel ( producto organófosforado), dosis comercial 90 días (f3)Pseudomona cepacia (p1) Mínima recomendada (d1) 90 días (f3)Pseudomona cepacia (p1) Comercial (d2) 90 días (f3)Pseudomona cepacia (p1) Máxima recomendada (d3) 90 días (f3)Extracto del árbol de neem (p2) Mínima recomendada (d1) 90 días (f3)Extracto del árbol de neem (p2) Comercial (d2) 90 días (f3)Extracto del árbol de neem (p2) Máxima recomendada (d3) 90 días (f3)Extracto de ají más mostaza (p3) Mínima recomendada (d1) 90 días (f3)Extracto de ají más mostaza (p3) Comercial (d2) 90 días (f3)Extracto de ají más mostaza (p3) Máxima recomendada (d3) 45 días, Mocap gel ( producto organófosforado), dosis comercial UNIDAD EXPERIMENTAL. La unidad experimental estuvo constituida de la siguiente manera: 1. 2. • • • • • • Forma rectangular, 12.75 m x 15.20 m. Tamaño, 194 m2 Superficie parcela grande, 19 m2 Superficie subparcela, 1.69 x 1.25 m = 2.11 m2 Superficie subparcela neta, 0.46 x 1.25 m = 0.58 m2 Número total de plantas del ensayo 1564 Número de plantas por subparcela, 18. Número de plantas por subparcela neta, 4 16 F. MÉTODOS Y VARIABLES EN ESTUDIO. 1. Porcentaje de reducción de la población. Se evaluará sobre la base de la siguiente fórmula (14): p= p= pf= pi= (1-pf/pi) x 100 porcentaje de reducción de la población. Población final. Población inicial. Los datos de está variable se obtendrán analizando muestras de suelo del ensayo. La población inicial se determinó después de 28 días de haberlo infestado. Para procesar las muestras de suelo, se utilizó el método de Cobb (44), anexo 1, realizando las lecturas correspondientes en 10 ml de solución agua nemátodos. 2. Parámetros de calidad. Se establecerán como parámetros de calidad: largo del tallo, diámetro del botón, ancho del botón, los cuales son considerados para la clasificación de un tallo de exportación y estos serán expresados en centímetros, con la ayuda de un calibrador y flexómetro. Se cosecharon los tallos de acuerdo al punto de corte establecido para la variedad Tropical amazone. Para obtener una alta uniformidad en la cosecha, se efectúo un “pinch” o poda de producción, cortando a partir de la segunda yema en tallos delgados y a partir de la tercera o cuarta yema en tallos gruesos; en los básales, el "pinch" se realizó a 30-40 cm de altura. a. Largo del tallo. Los tallos se midieron desde el tallo del piso anterior (que corresponde al inicio de la nueva brotación) hasta el inicio del botón. Se clasificaron los tallos en delgados y torcidos, tanto para mercado nacional como para el de exportación. b. Diámetro del botón. Para obtener los datos de esta variable se midió el largo del botón, utilizando un calibrador para obtener mayor exactitud. Se midió solo las rosas que estaban de acuerdo al punto de corte establecido para la variedad por la finca, el mismo que debe tener una apertura de 2 a 3 mm. c. Ancho del botón. Se utilizó un calibrador y se midió el ancho del botón, midiendo únicamente las rosas que estaban de acuerdo al punto de corte establecido para la variedad por la finca, el mismo que debe tener una apertura de 2 a 3 mm. 3. Número de larvas en 100 gramos de suelo. Los datos de está variable se obtuvieron a los 30, 60, y 90 días después de haber realizado la infestación. La evaluación se realizó en el Laboratorio Agrobiolab, utilizando el método de Cobb (44), que se detalla en el Anexo (1). 4. Índice de agallamiento. Al final del experimento se extrajeron las plantas y en cada planta se observó las nudosidades o agallas producidas por el nemátodo, se calificó según la escala establecida por TAYLOR (43), que se detalla en el Anexo (9). 17 5. Análisis económico. Se realizó un análisis de costos de aplicación por hectárea de cada tratamiento, usando el método de la Tasa Beneficio Costo, (35). G. DISEÑO EXPERIMENTAL. a. Tipo de diseño. Diseño de parcela dividida con un arreglo factorial en la subparcela de (3 x 3 +1). b. Número de repeticiones. Se utilizaron tres repeticiones. c. Número de interacciones. Se emplearon treinta interacciones. d. Unidad experimental. La unidad experimental neta estuvo conformada por dos plantas de rosa de la variedad Tropical amazone la cual tuvo las siguientes dimensiones. • Cuadro 4 Superficie subparcela neta, 0.46 x 1.25 m = 0.58 m2 Esquema del análisis de la varianza para evaluar productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en Rosas (Rosae sp.) Machachi - Pichincha. 2002. Fuentes de variación Total Repeticiones Días de aplicación Lineal Cuadrática Error (a) Plaguicidas Productos p1 vs p2p3 p2 vs p3 Dosis Lineal Cuadrática PxD Factorial vs Adicional A x Pl Error (b) e. (A) (Pl) (P) (D) Grados de libertad 89 2 2 1 1 4 9 2 1 1 2 1 1 4 1 18 54 Análisis Funcional. Se determinó mediante la prueba de Tukey al 5% para los factores en estudio y sus interacciones y para comparaciones ortogonales se utilizó la prueba DMS al 5%. H. MÉTODOS DE MANEJO DEL EXPERIMENTO. 18 1. Plantación. Se utilizaron 324 plantas de dos años de edad en producción, de la variedad Tropical amazone sobre el patrón Natal Brier. 2. Aplicación de productos orgánicos. a. Neem - X Estos productos se aplicaron cuando el nemátodo se encontró establecido, a la base de la planta y en forma de "drench", con riego profundo, realizando cuatro aplicaciones, la primera al obtener la población inicial y las otras tres aplicaciones a los 30, 60 y 90 días. Se aplicó a razón de 1 litro por planta a las siguientes dosis: - Dosis mínima = 2.00 ml/ litro. Dosis comercial = 3.00 ml/litro. Dosis máxima = 4.00 ml/litro. b. Intercept. Estos productos se aplicaron cuando el nemátodo se encontró establecido, a la base de la planta y en forma de "drench", con riego profundo, realizando cuatro aplicaciones, la primera al obtener la población inicial y las otras tres aplicaciones a los 30, 60 y 90 días. Se aplicó a razón de 1 litro por planta a las siguientes dosis: - Dosis mínima = 0.50 ml/ litro. Dosis comercial = 0.75 ml/litro. Dosis máxima = 1.20 ml/litro. c. Nemastroy. Estos productos se aplicaron cuando el nemátodo se encontró establecido, a la base de la planta y en forma de "drench", con riego profundo, realizando cuatro aplicaciones, la primera al obtener la población inicial y las otras tres aplicaciones a los 30, 60 y 90 días. Se aplicó a razón de 1 litro por planta a las siguientes dosis: - Dosis mínima = 1.50 ml/ litro. Dosis comercial = 2.00 ml/litro. Dosis máxima = 2.50 ml/litro. 3. Aplicación de productos químicos. El Mocap gel se aplicó cuando el nemátodo se encontró establecido en la planta, es decir cuando existió una población de 100 larvas por 100 gramos de suelo, y se aplicó en forma de "drench", con riego profundo, realizando cuatro aplicaciones, la primera al obtener la población inicial y las otras tres aplicaciones cada 45 días. Se aplicó a razón de 1 litro por planta a la siguiente dosis: - Dosis utilizada por la finca = 4. Infestación del sustrato. 0.80 ml/ litro. Se efectúo colocándose 150 gramos de raíces atacadas por Meloidogyne sp. , a la base de la planta. El suelo se humedeció previamente para una mejor distribución de los nemátodos. Se mantuvo la humedad a capacidad de campo para garantizar la infestación. 5. Número de plantas escogidas para análisis de los resultados. Del número de plantas de la parcela neta solo se extrajeron dos plantas para la recolección de los datos. 19 6. Fuentes de inóculo. El inóculo se obtuvo de plantas de rosa atacadas por Meloidogyne sp. , debidamente identificadas, en las cuales no se realizó ningún control por un período de cinco meses. 7. Toma de muestras de suelo y frecuencia de muestreo. Para realizar el contaje de larvas se obtuvo muestras de cada interacción, para lo cual se efectuaron cuatro punciones al azar con un barreno, a una profundidad de 20 a 25 cm y a un ángulo de 45 grados; se utilizó el método de Coob (44), (Anexo 1). Las muestras de suelo se realizaron en cada una de las unidades experimentales, la primera después de 28 días de realizada la infestación y las siguientes a los 30, 60 y 90 días. Se homogenizó perfectamente las submuestras (muestras de cada punción) para obtener una muestra de 500 gramos de suelo. 8. Fertilización y riego. Estas labores se efectuaron mediante el procedimiento normal de la finca, atendiendo los requerimientos del cultivo para todas las áreas y que fueron las siguientes dosis: Cuadro 5 1189.00 170.00 202.05 LITROS DE SOLUCIÓN MADRE POR DIA RELACIÓN DE INYECCIÓN LITROS DE RIEGO POR DIA ELEMENTO N K/N P/K Ca Mg Fe Mo Mn Cu Zn B 9. Niveles de fertilización usada en la finca Panorama Roses en el cultivo de rosas (Rosae sp.). Machachi - Pichincha 2002. Fuente/Concentración/Origen FUENTE % I.A. P.∗∗ S. p.p.m. g/l RIEG O 130.00 33.5 0.1995 100.00 41.0 13 0.2195 kg/Prod. DÍA Nitrato de Amonio 33.5% HydroAgri NH4NO3 40.00 Nitrato de Potasio 46% K2O + 13%N KNO3 44.00 Kemira Fosfato Monopotasico 52%P2o5 + KH2PO4 15.00 51.0 34 0.0294 6.00 35%P205 Nitrato de Calcio HYDRO granulado CaNO3 60.00 26.0 15 0.2308 47.00 Sulfato de Magnesio Técnico KS MgSO4 20.00 16.0 0.1250 25.3 16% MgO Quelato DTPA Dissolvene Fe(Quelato) 0.50 11.0 0.0045 0.92 Molibdato de Amonio 51% Mo MoNH4 0.13 51.0 0.0002 0.05 Sulfato de Manganeso Chino 27% MnSO4 5.00 27.0 0.0185 3.74 MnO Sulfato de Cobre 25% Cu CuSO4 0.10 25.0 0.0004 0.08 Sulfato de Zinc 23% Zn ZnSO4 0.50 23.0 0.0022 0.44 Acido Bórico 19% H4BO3 0.50 19.0 0.0026 0.53 TOTAL kg / día 168.26 TOTAL kg / ha / mes 1364.00 SOLUCION MADRE 2000.00 Litros de agua / kg soluto 11.90 UNIDA D 0.18 0.54 kg 1.15 kg kg 0.42 0.32 kg kg kg 8.00 35.00 0.80 kg kg kg 1.50 0.60 0.81 Se utilizó una bomba estacionaria y las aplicaciones se realizaban basándose en los monitoreos semanales, de acuerdo a las plagas y enfermedades presentes no solo en el ensayo sino en todo el bloque Español II. ∗ P. Corresponde al ingrediente activo principal del producto. S. Corresponde al ingrediente activo secundario del producto. UNIDAD kg kg Controles fitosanitarios. Basándose en los monitoreos las aplicaciones fueron las siguientes: USD 20 Cuadro 6 PRODUCTO COMERCIAL Tilt 250 EC Nimrod Meltatox Captan 80% Merpan Bayleton Mertect Phyton 27 Rovral Nissorum Floramite Miteclean Milbeknock Basudin Tracer 120 SC Regent Evisect S Productos químicos usados en el control de plagas en la florícola Panorama Roses en el cultivo de rosas (Rosae sp.), Machachi - Pichincha 2002. 1. POLVOSO: Mildiu polvoso INGREDIENTE MODO DE GRUPO ACTIVO ACCIÓN Propiconazol Inhibe la síntesis de Triazole ergosterol Bupimirato Inhibe la síntesis de Aminopirimidina ergosterol Dodemorph Inhibe la síntesis de Morfolinas ergosterol Captan Multisitio Ptalamidas 2. BOTRYTIS: Botrytis cinerea Triadimefon Inhibe biosíntesis Triazole ergosterol Tiobendazole Inhibe la biosíntesis a Benzimidazole nivel del núcleo, bloquea mitosis Sulfato de Cobre Multi sitio Cúprico Iprodione Multi sitio Dicarboxamida 3. ACAROS: Tetranychus urticae Hexythrazox Inhibidor del Carboxamidas crecimiento Bifenazate Actúa sobre el Carbazate sistema nervioso central Pyremidifen Regulación de Ca Pyrimidinas Milbemectin Presinapsis Fermentación streptomyces 4. TRIPS: Frankiniela occidentales Diazinon Sinapsis Organofosforados Spinosad Sistema nervioso Naturalyte Fipronil Presinapsis Fenilpirazoles Thiocyclam Postsinapsis Nereistoxinas IV. A. CT* DOSIS IV 0.50cc IV 1.00cc IV 2.00cc IV 1.00g III 0.80cc III 1.00cc II III 0.80cc 1.00g IV 0.50cc IV 1.00cc II III 0.30cc 0.80cc II III II III 0.80cc 0.15cc 0.06cc 1.00cc RESULTADOS Y DISCUSIÓN. INFESTACIÓN INICIAL DE NEMÁTODOS. A los 28 días de efectuada la infestación con Meloidogyne sp., la población tuvo, lo que con frecuencia pasa en muchas especies de nemátodos fitoparásitos, una distribución espacial que se describe adecuadamente por el modelo probabilístico de la binomial negativa (FERRIS 1984), (38,55), además las poblaciones ocurren en agregados y como característica de este tipo de distribución, la varianza estimada es mayor que el promedio. Los datos de las poblaciones se agruparon en frecuencias para obtener la curva de distribución normal, cabe destacar que en todo el ensayo se incorporó 180 larvas por cada interacción del ensayo. * CT Categoría toxicologíca del producto químico. 21 En el cuadro 7 se aprecia que todas las poblaciones de nemátodos que se inocularon fueron agrupadas, para así obtener una distribución normal en todo el ensayo. En el gráfico 1 se observa que la mayoría de las interacciones tuvieron una población de hasta 400 larvas por 100 gramos de suelo, considerando que éstas entran en la distribución normal, no así el resto de interacciones, las cuales tuvieron una población mucho más alta. Cuadro 7 Distribución de larvas de nemátodos en todas las interacciones de la evaluación, de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Población (larvas/100 ml) 150 - 200 201 - 250 251 - 300 301 - 350 351 - 400 401 - 450 451 - 500 501 - 550 551 - 600 601 - 650 TOTAL frecuencias (#) 12 13 23 15 14 1 4 2 5 1 90 No Frecuencias 25 20 15 10 5 0 150 200 201 250 251 300 301 350 351 400 401 450 451 500 501 550 551 600 601 650 Población de nemátodos Gráfico 1 Distribución de los nemátodos en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de Meloidogyne sp en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. En el gráfico 2 se observa que la infestación inicial fue suficiente para obtener un suelo altamente infestado de larvas de Meloidogyne sp. , como para iniciar el experimento, tomando en cuenta que la empresa Florícola 22 Panorama Roses S. A., considera que sobre las 100 larvas de nemátodos por cada 100 gramos de suelo, constituye un nivel crítico de infestación para el caso de un cultivo de rosas. En cada interacción se aprecia que la población de los nemátodos está por sobre el nivel crítico de la finca, por tal razón se pudo empezar con normalidad el control, para la reducción de la población de nemátodos en rosas, con la aplicación de los productos orgánicos. Probablemente por la forma en que se inoculó el ensayo para efectuar el control con productos orgánicos, se requiere mayor tiempo para el establecimiento uniforme de larvas en el suelo, puesto que la mayoría de ellas infectaron rápidamente las raíces de las rosas para obtener así su alimento, ya que la planta es un huésped adecuado para su ciclo de vida (10). No larvas por 100 g de suelo 600.00 500.00 400.00 300.00 200.00 100.00 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f3 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f2 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f1 0.00 INTERACCIONES Gráfico 2 Número de larvas por 100 gramos de suelo en las interacciones de la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas Machachi - Pichincha. 2002. La variación que se observa en la población inicial, gráfico 2, de número de larvas en las diferentes interacciones, se puede deber a que las larvas de Meloidogyne sp. , no permanecen en el suelo, sino que inmediatamente entran en contacto con la raíz, ya que es allí donde obtienen su alimento y pueden realizar su ciclo biológico. Puesto que el nemátodo al permanecer de un modo sedentario en la raíz, no se lo encuentra presente con frecuencia en el suelo, por esta razón se observan las diferentes distribuciones de larvas para cada interacción del ensayo tal cual lo manifiesta ESPINOZA (16), teniendo suficiente número de larvas para realizar la evaluación con productos orgánicos. los 23 B. Número de larvas de Meloidogyne sp. , en 100 gramos de suelo. 1. Número de larvas de Meloidogyne sp. , a los 30 días. En el gráfico 3 se aprecia que el mejor resultado lo obtuvo el producto Neem-X a la dosis comercial (p2d2) con 13.33 larvas / 100 g de suelo teniendo un mejor control por sobre el testigo el cual alcanzó una población de 106.67 larvas / 100 g de suelo, no obstante que el menor control lo realizó el producto Nemastroy a la dosis comercial (p3d2) teniendo 300 larvas / 100 g de suelo. Esto es ocasionado por la acción translaminar del Neem-X ya que ataca al estado de muda del nemátodo (20), además se lo asocia a la simbiosis que presentan los productos orgánicos en la fauna benéfica del suelo para el fortalecimiento del sistema radicular (11) y por la acción probable de la fertirrigación en la disminución de la población, especialmente las en base de nitrógeno y fósforo, p3d3 TESTIG O p3d1 p3d2 p2d2 p2d3 p1d3 p2d1 350.00 300.00 250.00 200.00 150.00 100.00 50.00 0.00 p1d1 p1d2 No Larvas / 100 g de suelo puesto que estas inhiben ligeramente el incremento de las poblaciones de Meloidogyne spp. (47). Interacciones Gráfico 3 2. Población de nemátodos en la frecuencia de 30 días en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Número de larvas de Meloidogyne sp., a los 60 días. En el gráfico 4 se observa que la mejor respuesta se alcanza con Mocap gel, el cual corresponde al testigo de la investigación con 73.33 larvas/100 g de suelo; lo cual se debe a la acción nematicida que presentan este producto químico, ya que penetran directamente la cutícula del nemátodo (13). En cambio el menor control lo realizó Intercept a la dosis máxima (p1d3) teniendo 271 larvas/100 g de suelo, esto puede deberse a que sus rizobacterias no mantienen la simbiosis normal y adecuada con las raíces de las rosas por el mayor intervalo existente en la aplicación del producto(2); también puede haber influido el ciclo de reproducción de Meloidogyne sp, ya que se incrementó la población existente en el suelo; puesto que CRHISTIE (10), afirma que las hembras de 24 Meloidogyne sp., comienzan a depositar huevos después de 20 a 30 días de haber penetrado a la raíz. El resto de tratamientos orgánicos tienen un control parecido a la primera frecuencia (30 días), ya que mantienen la TESTIGO p3d3 p3d2 p3d1 p2d3 p2d2 p2d1 p1d3 p1d2 300.00 240.00 180.00 120.00 60.00 0.00 p1d1 No larvas / 100 g de suelo residualidad en el suelo y la población de los nemátodos no tienen libertad de propagarse rápidamente (15). Interacciones Gráfico 4 3. Población de nemátodos en la frecuencia de 60 días en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Número de larvas de Meloidogyne sp., a los 90 días. En el gráfico 5 se aprecia que las mejores respuestas se obtuvieron en el testigo Mocap gel, el Intercept a la dosis comercial (p1d2), el Nemastroy a las dosis mínima (p3d1) y comercial (p3d2) con 13.33 larvas/100 gramos de suelo cada una; lo que se puede atribuirse a dos factores para el producto químico; el primero por la acción nematicida y el segundo por la residualidad que presenta el producto, ya que penetra directamente por la cutícula del nemátodo actuando sobre la acetilcolinesterasa, debido a su contacto sobre las larvas en el suelo y por su acción sistémica disminuyendo la población de nemátodos presentes en las raicillas, especialmente sobre hembras que se encuentran en el interior de las raíces (13); mientras que el resultado de los productos orgánicos se atribuye a la continua proliferación de la fauna benéfica del suelo así como el vigor y resistencia al sistema radicular (42); no obstante el menor control lo realizo el producto Nemastroy a la dosis máxima (p3d3) obteniendo 66.67 larvas/100 g de suelo, esto puede atribuirse a que en el suelo existió una mayor concentración del producto por lo cuál este no tuvo la misma eficiencia como en dosis menores (42); con los valores expuestos en está frecuencia se puede decir que todos los tratamientos presentan una eficiencia aceptable en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas, ya que todos presentan valores de larvas menores al nivel crítico de infestación que estima la plantación Panorama Roses S.A. 80.00 60.00 40.00 TESTIGO p3d3 p3d2 p3d1 p2d3 p2d2 p2d1 p1d3 0.00 p1d2 20.00 p1d1 No larvas /100 g de suelo 25 Interacciones Gráfico 5 4. Población de nemátodos en la frecuencia de 90 días en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Población final de nemátodos. En el análisis de la varianza, cuadro 8, se encuentran diferencias altamente significativas para frecuencias, significancia estadística para los efectos lineales y cuadráticos de las frecuencias y no significativa para plaguicidas, productos, dosis y factorial vs. adicional. El promedio general transformado log nat. (x+1) fue de 1.54 larvas/100 gramos de suelo y el promedio general real del experimento fue de 105.31 larvas/100 g de suelo, el coeficiente de variación (a) fue de 39.97% y el coeficiente de variación (b) fue de 49.69%, siendo altos pero aceptables para el tipo de investigación realizada, puesto que al tratarse de organismos que se encuentran en constante reproducción es muy complicado tener una base estable del número de larvas por 100 g de suelo para realizar el ensayo, además los nemátodos no presentan una distribución normal y no permanecen en el suelo, sino que inmediatamente entran en contacto con la raíz ya que es allí donde obtienen su alimento, tal cual lo manifiesta ESPINOZA (16). Cuadro 8 Análisis de la varianza para la población final de nemátodos, en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp., en rosas Machachi - Pichincha. 2002. FUENTES DE VARIACIÓN TOTAL REPETICIONES FRECUENCIAS (F) LINEAL CUADRÁTICO ERROR (a) PLAGUICIDAS (Pl) PRODUCTOS p1 vs p2p3 p2 vs p3 DOSIS GL 89 2 2 CUADRADOS MEDIOS 1 1 4 9 2 1 1 2 0.68 7.44 5.23 9.64 0.38 0.16 0.11 0.17 0.05 0.02 ns. ** * * ns. ns. ns. ns. ns. 26 LINEAL CUADRÁTICA INTERACCIÓN P x D 4 FACTORIAL VS ADICIONAL 1 INTERACCIÓN F x P 18 ERROR (b) 54 1 0.00 1 0.04 0.25 0.16 0.82 0.59 ns. ns. ns. ns. ns. PROMEDIO log nat (x+1) 1.54 larvas/100 gramos de suelo PROMEDIO real 105.31 larvas/100 gramos de suelo CV(A) % 39.97 CV(B) % 49.69 En la prueba de Tukey y DMS, cuadro 9, se aprecian los datos reales y transformados en donde existen dos rangos en los que las frecuencias f1 (30 días) con 1.56larvas / 100 g de suelo y f2 (60 días) con 2.08 larvas / 100 g de suelo se encuentran en el primer rango y la frecuencia f3 (90 días) con 1.03 larvas / 100 g de suelo, ocupa el segundo rango con una mejor respuesta. Al no existir diferencias significativas para el resto de tratamientos de la subparcela, se puede apreciar las diferencias en los promedios así: para productos el de mejor respuesta es el Neem-X con un promedio de 4.49 larvas / 100 gramos de suelo y el producto de menor eficiencia es el Nemastroy con 4.67 larvas / 100 gramos de suelo, con datos reales de 240.00 y 376.00 larvas / 100 gramos de suelo respectivamente, puesto que los productos usados son a partir de extractos naturales de plantas y bacterias que activan los microorganismos presentes en el suelo (2). Se encontró diferencias no significativas entre las comparaciones de: Intercept vs. Neem-X y Nemastroy; Neem-X vs. Nemastroy, posiblemente por ser de origen orgánico y por que estos tienen la característica de repoblar el suelo con la ayuda de la fauna benéfica del suelo además aumenta su vigor y resistencia al daño creado por los nemátodos en su sistema radicular (42). Aunque se encontró diferencias no significativas para dosis, la mínima y máxima presentan una similitud en el número de larvas siendo esta de 1.58 y de 1.57 larvas / 100 gramos de suelo respectivamente, dando un control bastante efectivo en las poblaciones de Meloidogyne sp., en tanto que la dosis comercial obtuvo un valor de 1.53 larvas / 100 gramos de suelo, siendo sus valores reales de 92.59, 96.22 y 140.74 larvas / 100 gramos de suelo respectivamente, ya que se mantiene la residualidad en el suelo al finalizar las frecuencias de aplicación (15). Si, bien no existió diferencias significativas para productos por dosis, la mejor respuesta se alcanzo con el NeemX a la dosis comercial con 1.27 larvas / 100 gramos de suelo (80.00 larvas/ 100 g de suelo como dato real) y la menor respuesta presenta el Nemastroy a la dosis comercial con 1.71 larvas / 100 gramos de suelo (175.56 larvas/ 100 g de suelo como dato real). Las demás interacciones se mantienen en un rango aceptable para la reducción de nemátodos, esto se debe a que al no tener estos productos una acción de control sistémica (2), la población de los nemátodos va incrementándose poco al existir una continua repoblación de la fauna benéfica del suelo ocupando los espacios que podrían ser utilizados por los nemátodos para su repoblación inmediata y ataque a las raíces de las rosas (42). Al comparar el factorial vs. el adicional, se obtuvo diferencias no significativas teniendo el mejor resultado el adicional (Mocap gel) con 1.42 larvas / 100 gramos de suelo (64.44 larvas/ 100 g de suelo como dato real), al ser un producto de contacto que actúa sobre la cutícula de los nemátodos y realiza un control de las hembras que están en el interior de las raíces tal cual lo manifiesta EGUIGUREN (13). 27 Cuadro 9 Promedios y Tukey al 5%, para población final en la evaluación de la eficiencia de productos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas. Machachi – Pichincha. 2002. Población Final (larvas/100g suelo) Factor Significado Datos Datos transforma Reales dos Frecuencias f1= 30 días 1.56 a 127.41 f2= 60 días 2.08 a 164.37 f3= 90 días 1.03 ab 37.78 Productos p1= Intercept 4.87 372.67 p2= Neem x 4.49 240.00 p3= Nemastroy 4.67 376.00 Comparaciones CO1 p1 4.87 372.67 ortogonales p2, p3 4.58 308.00 CO2 p2 4.49 240.00 p3 4.67 376.00 Dosis d1= Mínima 1.58 92.59 d2= Comercial 1.53 140.74 d3= Máxima 1.57 96.22 P x D p1d1 1.62 64.44 p1d2 1.60 466.67 p1d3 1.65 141.56 p2d1 1.61 88.89 p2d2 1.27 80.00 p2d3 1.61 71.11 p3d1 1.53 124.44 p3d2 1.71 175.56 p3d3 1.43 76.00 F x ( P x D) f1p1d1 1.57 40.00 f1p1d2 1.99 273.33 f1p1d3 1.99 133.33 f1p2d1 1.27 106.67 f1p2d2 0.54 13.33 f1p2d3 1.21 73.33 f1p3d1 1.93 126.67 f1p3d2 2.36 300.00 f1p3d3 1.22 80.00 testigo 2.01 106.67 f2p1d1 1.97 93.33 f2p1d2 2.27 213.33 f2p1d3 2.38 271.33 f2p2d1 1.94 120.00 f2p2d2 2.12 173.33 f2p2d3 1.87 80.00 f2p3d1 2.12 233.33 f2p3d2 2.23 213.33 f2p3d3 1.81 81.33 testigo 1.36 73.33 f3p1d1 1.30 60.00 f3p1d2 0.54 13.33 f3p1d3 0.60 20.00 f3p2d1 1.61 40.00 f3p2d2 1.16 53.33 f3p2d3 1.74 60.00 f3p3d1 0.54 13.33 f3p3d2 0.54 13.33 f3p3d3 1.27 66.67 testigo 0.88 13.33 Fac. vs Adic. Factorial 1.56 109.85 Adicional 1.42 64.44 28 Mientras que para la interacción Frecuencias por Productos, el valor obtenido es de 1.56 larvas/ 100 gramos de suelo (109.85 larvas/ 100 g de suelo como dato real), ya que al tratarse de productos de origen orgánico estos presentaron una respuesta aceptable en la reducción de la población final de Meloidogyne sp. en rosas. C. Porcentaje de reducción de la población de larvas de Meloidogyne sp. 1. Porcentaje de reducción de la población a los 30 días. El porcentaje de reducción de la población, sé lo cálculo comparando la población inicial obtenida a los 28 días con la población final obtenida 30 días después y aplicando la formula de porcentaje de reducción de la población para nemátodos propuesta por EINSENBACK (14). En el gráfico 6 se puede apreciar que la mejor respuesta se alcanza con el producto Neem-X a la dosis comercial (p2d2) con un 94.07%, en está frecuencia de aplicación el control con Neem-X es superior al obtenido por el testigo Mocap gel que obtuvo un 64.40%, esto se puede atribuir a que el Neem-X ataca al nemátodo en su estado de muda, con lo que las larvas fueron controladas eficazmente antes que ingresen a las raíces (20). En cambio que el producto orgánico de menor respuesta fue Nemastroy a la dosis comercial (p3d2) con 45.17% debido posiblemente a que la población de nemátodos se incremento más en una de sus interacciones y no existió el control adecuado del producto, esto puede atribuirse a que en esa interacción existió mayor número de hembras en capacidad de reproducción con lo que aumento considerablemente la población y consecuentemente el menor control, tal cuál lo manifiesta CHRISTIE (10). En el anexo (8), se presentan los resultados del porcentaje de reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas, en el cual se han asignado valores de cero a aquellos tratamientos donde no ha existido control, si no que la población de nemátodos ha ido aumentado. 29 100.00 80.00 60.00 Porcentaje 40.00 20.00 TESTIGO p3d3 p3d2 p3d1 p2d3 p2d2 p2d1 p1d3 p1d2 p1d1 0.00 Interacciones Gráfico 6 2. Reducción de la población de nemátodos a los 30 días en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Porcentaje de reducción de la población a los 60 días. Los porcentajes de reducción de población a los 60 días se obtienen comparando la población inicial a los 28 días de la inoculación con la población final a los 60 días y aplicando la formula de porcentaje de reducción de la población para nemátodos propuesta por EINSENBACK (14). En el anexo (8), se observan los resultados del porcentaje de reducción, en el cual se han asignado valores de cero a aquellos tratamientos donde no ha existido control, si no que la población de nemátodos ha aumentado. En el gráfico 7, la mejor respuesta la tiene el producto Neem-X a la dosis máxima (p2d3) con un 85.99% superior al testigo Mocap gel que obtuvo un porcentaje de 82.66% siendo este superior al control de la frecuencia 1 (30 días), posiblemente está respuesta se debe a la acción sistémica del producto químico. En está frecuencia se encuentran valores de cero, posiblemente se debe a varios factores como: que la repoblación de la fauna benéfica del suelo no es tan eficiente como a los 30 días; a que la residualidad de los productos orgánicos se disminuye a los 60 días debido a la humedad del suelo, pH y temperatura lo que permite aumentar la población de los nemátodos en algunas interacciones y por que las hembras de Meloidogyne sp. empiezan a ovipositar después de 30 días de haber penetrado a la raíz tal cual lo manifiesta CHRISTIE (10), siendo este el principal motivo para que la eficiencia en el porcentaje de reducción de la población de nemátodos no haya sido favorable para los productos orgánicos. 30 100.00 80.00 60.00 Porcentaje 40.00 G 3. p3d3 p3d2 p3d1 p2d3 p2d2 p2d1 p1d3 p1d2 p1d1 0.00 TESTIGO 20.00 Interacciones r á Grafico 7 Reducción de la población de nemátodos a los 60 días en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Porcentaje de reducción de la población a los 90 días. Los porcentajes de reducción de población a los 90 días se obtienen comparando la población inicial a los 28 días de la inoculación con la población final a los 90 días y aplicando la formula de porcentaje de reducción de la población para nemátodos propuesta por EINSENBACK (14). En el gráfico 8, para 90 días la mejor respuesta es para el testigo Mocap gel que tiene un porcentaje de 96.23%, posiblemente es por la acción sistémica del producto, por que logro controlar eficientemente las poblaciones de nemátodos tanto en el suelo como en las raíces, controlando hembras y evitando la oviposición de las mismas con lo que aumento su eficiencia disminuyendo la población de los nemátodos en el suelo (13). Entre los productos orgánicos el de mejor respuesta es Nemastroy a su dosis comercial (p3d2) con un porcentaje de 95.83% y el producto orgánico de menor control fue el producto Neem-X a la dosis máxima (p2d3) con un porcentaje de 62.36%, manteniéndose en un nivel parecido al de la frecuencia 1 de 30 días, ya que no pudo controlar eficientemente la oviposición y se produjo una baja en su residualidad, consecuentemente en su control a la muda del nemátodo, tal cual lo manifiesta GONZÁLEZ (20). 31 100.00 80.00 60.00 Porcentaje 40.00 20.00 TESTIGO p3d3 p3d2 p3d1 p2d3 p2d2 p2d1 p1d3 p1d2 p1d1 0.00 Interacciones G G r Gráfico 8 Reducción de la población de nemátodos a los 90 días en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. . D. Parámetros de calidad. 1. Largo del tallo. En el análisis de la varianza, cuadro 10, se encuentran diferencias no significativas para frecuencias, plaguicidas, productos, dosis y para el factorial. El coeficiente de variación (a) fue de 7.22% y el coeficiente de variación (b) fue de 7.91%, siendo aceptables para el tipo de investigación realizada y avalizan los datos obtenidos en la investigación, además el promedio general del experimento fue de 55.72 cm. Cuadro 10 Análisis de la varianza para largo de tallo, en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp., en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. FUENTES DE VARIACIÓN TOTAL REPETICIONES FRECUENCIAS (F) LINEAL CUADRÁTICO ERROR (a) PLAGUICIDAS (Pl) PRODUCTOS p1 vs p2p3 p2 vs p3 GL 89 2 2 CUADRADOS MEDIOS 1 1 4 9 2 1 1 30.06 12.23 22.66 1.80 16.20 28.06 11.27 22.18 0.36 ns. ns. ns. ns. ns. ns. ns. ns. 32 DOSIS 2 LINEAL CUADRÁTICA INTERACCIÓN P x D FACTORIAL VS ADICIONAL INTERACCIÓN F x P ERROR (b) PROMEDIO CV(A)% CV(B)% 4 1 18 54 15.11 1 2.16 1 28.06 49.79 0.57 21.78 19.40 ns. ns. ns. ns. ns. ns. 55.72 cm 7.22 7.91 En el cuadro 11, para frecuencias se observa que la mejor respuesta la alcanzó la frecuencia f1 (30 días) con un largo de tallo de 56.38 cm. y la menor respuesta fue para la frecuencia f3 (90 días) con un largo del tallo de 54.92 cm. Si bien existieron diferencias no significativas en productos, se puede apreciar que el producto de mejor respuesta en largo del tallo es Intercept con 56.43 cm., esto puede deberse a que este producto activa la microfauna del suelo y estimula el desarrollo radicular de la planta lo que ayuda a aprovechar todos los nutrientes del suelo y así disimular el ataque de nemátodos presente en su sistema radicular, lo que concuerda con lo manifestado por SÁNCHEZ (39), este valor es superior al del testigo Mocap gel que obtuvo un largo de tallo de 55.96 cm resultando comprensible, ya que la acción del producto químico se basa principalmente en atacar al nemátodo ingresando por su cutícula y más no en favorecer una proliferación de raicillas o de activar los microorganismos benéficos del suelo (13). Para dosis cuadro 11, la mejor respuesta se alcanzó con la dosis máxima con 56.31 cm y el menor resultado lo obtuvo la dosis comercial con 54.86 cm. Para el factorial productos por dosis, la mejor respuesta fue para el producto Intercept a su dosis máxima (p1d3) con una respuesta de 59.79 cm y el producto de menor respuesta es Neem-X a su dosis máxima (p2d3) con una respuesta de 53.49 cm. Los resultados encontrados no tienen mayor diferencia entre cada tratamiento posiblemente a varios factores; entre ellos se puede deber a los productos usados como: Intercept (Pseudomona cepacia), Neem-X (Extracto del árbol de neem), Nemastroy (Extracto de ají más mostaza) y Mocap gel; por la fertilización efectuada en todo el ensayo y por el tipo de patrón, Natal Brier sobre el cual estaba injertado la variedad de rosa (Tropical amazone) utilizada en el experimento, además los nemátodos que atacan a los rosales lo hacen exclusivamente a la raíz, formando nódulos, células gigantes y escobillas, no habiéndose encontrado hasta el momento ningún nemátodo en hojas y tallos (24). En el gráfico 9 se puede apreciar la distribución de los largos de tallos en todas las interacciones teniendo como la mejor respuesta al producto Intercept (Pseudomona cepacia) en la frecuencia 1 (30días) a la dosis máxima (f1p1d3) con un largo de tallo de 63.58 cm. , mucho más que los testigos (Mocap gel) para cada frecuencia, el producto de menor respuesta es Nemastroy (Extracto de ají más mostaza) en la frecuencia 3 (90 días) a la dosis mínima (f3p3d1) con un largo de tallo de 49.93 cm. , además se puede distinguir que los mejores resultados fueron obtenidos en la frecuencia 1 de 30 días, lo que resulta comprensible ya que al ser productos de origen orgánico y al ayudar a repoblar la fauna benéfica del suelo estos estimulan el sistema radicular de la planta brindándole mayor energía para que produzca tallos de mejor calidad y largo (grado) expresado en centímetros (2). 33 Cuadro 11 Promedios para largo de tallo en la evaluación de la eficiencia de productos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. El rosas. Machachi – Pichincha. 2002. Factor Frecuencias Productos Comparaciones ortogonales Dosis P x D F x (P x D) Fac. vs Adic. Largo del Tallo (cm) Significado f1= 30 días f2= 60 días f3= 90 días p1= Intercept p2= Neem x p3= Nemastroy CO1 p1 p2, p3 CO2 p2 p3 d1= Mínima d2= Comercial d3= Máxima p1d1 p1d2 p1d3 p2d1 p2d2 p2d3 p3d1 p3d2 p3d3 f1p1d1 f1p1d2 f1p1d3 f1p2d1 f1p2d2 f1p2d3 f1p3d1 f1p3d2 f1p3d3 testigo f2p1d1 f2p1d2 f2p1d3 f2p2d1 f2p2d2 f2p2d3 f2p3d1 f2p3d2 f2p3d3 testigo f3p1d1 f3p1d2 f3p1d3 f3p2d1 f3p2d2 f3p2d3 f3p3d1 f3p3d2 f3p3d3 testigo Factorial Adicional 56.38 55.77 54.92 56.43 55.24 55.40 56.43 55.32 55.24 55.40 55.91 54.86 56.31 55.67 53.83 59.79 57.10 55.13 53.49 54.95 55.61 55.64 56.39 50.97 63.58 58.80 56.96 51.01 59.64 54.62 55.50 54.85 55.48 55.23 59.59 55.70 51.78 57.22 55.27 55.14 56.49 57.27 55.16 55.29 56.20 56.80 56.66 52.22 49.93 57.08 54.94 55.75 55.69 55.96 34 70 cm de tallos en rosa 60 50 40 30 20 10 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f3 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f2 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f1 0 INTERACCIONES Gráfico 9 2. Largo de tallos en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Diámetro del botón. En el análisis de la varianza, cuadro 12, se encontró diferencias no significativas para las frecuencias, plaguicidas, productos, dosis, para interacciones productos x dosis y frecuencias x plaguicidas. Solo se encontró diferencias significativas para el polinomio ortogonal lineal de las frecuencias y para el factorial (productos x dosis vs. el adicional). El coeficiente de variación (a) fue de 4.88 % y el coeficiente de variación (b) fue de 2.38 %, siendo aceptables para el tipo de investigación realizada y avalizan los datos obtenidos en la investigación, además el promedio general del experimento fue de 5.52 cm. 35 Cuadro 12 Análisis de la varianza para el diámetro del botón, en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. , en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. FUENTES DE VARIACIÓN TOTAL REPETICIONES FRECUENCIAS (F) LINEAL CUADRÁTICO ERROR (a) PLAGUICIDAS (Pl) PRODUCTOS p1 vs p2p3 p2 vs p3 DOSIS LINEAL CUADRÁTICA INTERACCIÓN P x D FACTORIAL VS ADICIONAL INTERACCIÓN F x P ERROR (b) PROMEDIO CV(A) % CV(B) % GL 89 2 2 CUADRADOS MEDIOS 1 1 4 9 2 1 1 2 1 1 4 1 18 54 0.00 0.18 0.33 0.03 0.07 0.03 0.04 0.02 0.06 0.02 0.03 0.00 0.02 0.07 0.02 0.02 ns. ns. * ns. ns. ns. ns. ns. ns. ns. ns. ns. * ns. 5.52 cm 4.88 2.38 En el cuadro 13, se observa que en frecuencias, el mejor resultado fue para f1 (30 días) con un diámetro para el botón de 5.58 cm. , en tanto qué la f3 (90 días) obtuvo un valor de 5.42 cm para diámetro del botón. Entre los productos el de mejor respuesta fue para Nemastroy con 5.54 cm y el de menor respuesta es para el producto Neem-X con 5.47 cm para diámetro del botón. Para la interacción, productos x dosis, la mejor respuesta fue para el producto Nemastroy a la dosis máxima (p3d3) con 5.60 cm y el de menor resultado para Neem-X a la dosis mínima (p2d1) con 5.44 cm, siendo estos dos valores inferiores al testigo Mocap gel que obtuvo 5.61 cm, valores que no tienen mayor diferencia y que se puede considerar que los productos de origen orgánico están al mismo nivel que un producto químico y en algunos casos ser superior, además que estos ayudan a la proliferación de la fauna benéfica en el suelo y aumentan el vigor en las plantas (42); los datos obtenidos responden al tipo de patrón en el que está injertada la variedad utilizada en el experimento, no existiendo una marcada diferencia entre cada tratamiento. 36 Cuadro 13 Promedios y DMS 5% para diámetro del botón en la evaluación de la eficiencia de productos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas. Machachi – Pichincha. 2002. Factor Frecuencias Productos Comparaciones ortogonales Dosis P x D F x (P x D) Fac. vs Adic. Significado f1= 30 días f2= 60 días f3= 90 días p1= Intercept p2= Neem x p3= Nemastroy CO1 p1 p2, p3 CO2 p2 p3 d1= Mínima d2= Comercial d3= Máxima p1d1 p1d2 p1d3 p2d1 p2d2 p2d3 p3d1 p3d2 p3d3 f1p1d1 f1p1d2 f1p1d3 f1p2d1 f1p2d2 f1p2d3 f1p3d1 f1p3d2 f1p3d3 testigo f2p1d1 f2p1d2 f2p1d3 f2p2d1 f2p2d2 f2p2d3 f2p3d1 f2p3d2 f2p3d3 testigo f3p1d1 f3p1d2 f3p1d3 f3p2d1 f3p2d2 f3p2d3 f3p3d1 f3p3d2 f3p3d3 testigo Factorial Adicional Diámetro del Botón (cm) 5.58 5.53 5.42 5.53 5.47 5.54 5.53 5.50 5.47 5.54 5.48 5.52 5.53 5.54 5.54 5.51 5.44 5.48 5.48 5.47 5.54 5.60 5.61 5.66 5.46 5.51 5.61 5.55 5.58 5.59 5.68 5.59 5.51 5.50 5.67 5.58 5.45 5.56 5.43 5.51 5.61 5.68 5.51 5.46 5.41 5.24 5.39 5.35 5.39 5.52 5.51 5.56 5.51 a 5.61 a 37 3. Ancho del botón. En el análisis de la varianza, cuadro 14, se encuentran diferencias altamente significativas; para plaguicidas, para la interacción productos x dosis y diferencias no significativas para las frecuencias, productos, dosis y las interacciones frecuencias x plaguicidas. El coeficiente de variación (a) fue de 4.15 % y el coeficiente de variación (b) fue de 3.68 %, siendo aceptables para el tipo de investigación realizada y que avalizan los datos obtenidos en la investigación, además el promedio general del experimento fue de 2.83 cm. Cuadro 14 Análisis de la varianza para el ancho del botón, en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp., en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. FUENTES DE VARIACIÓN TOTAL REPETICIONES FRECUENCIAS (F) LINEAL CUADRÁTICO ERROR (a) PLAGUICIDAS (Pl) PRODUCTOS p1 vs p2p3 p2 vs p3 DOSIS LINEAL CUADRÁTICA INTERACCIÓN P x D FACTORIAL VS ADICIONAL INTERACCIÓN F x P ERROR (b) PROMEDIO CV(A)% CV(B)% GL 89 2 2 CUADRADOS MEDIOS 1 1 4 9 2 1 1 2 1 1 4 1 18 54 0.00 0.00 0.00 0.01 0.01 0.02 0.02 0.03 0.01 0.00 0.01 0.00 0.02 0.01 0.00 0.01 ns. ns. ns. ns. ** ns. ns. ns. ns. ns. ns. ** ns. ns. 2.83 cm 4.15 3.68 En el cuadro 15, para frecuencias y productos, se observa que la mejor respuesta en frecuencias es para f2 (60 días) con un promedio de 2.85 cm. y la frecuencia de menor respuesta es f1 (30 días) con un promedio de 2.82 cm. ; entre los productos el de mejor resultado para el ancho del botón es para el producto Intercept (Pseudomona cepacia) con 2.86 cm. , mientras que compartiendo la menor respuesta están los productos Neem-X (Extracto del árbol de neem) y Mocap gel con 2.81 cm., datos que aseguran que la población de Meloidogyne sp. no influyen sobre el ancho del botón, posiblemente a que los productos orgánicos dieron vigor a la planta para que exista un mejor comportamiento varietal, demostrándose en los promedios obtenidos en cada tratamiento. Al encontrarse alta significación estadística para el factorial productos x dosis, se obtuvieron dos rangos de significación, ubicándose en el primer rango a ocho interacciones así: p3d1, p1d1, p1d2, p1d3, p2d2, p2d3, p3d2, 38 p3d3 con los siguientes promedios respectivamente, 2.90, 2.87, 2.86, 2.86, 2.85, 2.81, 2.81, 2.80 cm. y ubicándose en el otro rango a p2d1 con un promedio de 2.76 cm. ,teniendo como mejor producto a Nemastroy a su dosis mínima (p3d1). La no significancia estadística encontrada en el factorial frecuencias x productos x dosis se debe principalmente según ESPINOZA (16), a que los productos orgánicos ayudan a dar vigor a la planta y a repoblar la fauna del suelo, mientras que los productos químicos mantienen a la población por debajo de los niveles críticos para el cultivo, razón por la cual la población de Meloidogyne sp. , no influyo sobre el ancho del botón, demostrándose en los promedios del cuadro 15, teniendo que el mejor resultado es para el producto Neem-X a la dosis comercial en la frecuencia de 60 días (f2p2d2) con un promedio de 2.94 cm, superior al testigo de la finca (Mocap gel), el cuál obtuvo un promedio de 2.81 cm. En el gráfico 10, para ancho de los botones de rosa se puede apreciar el comportamiento de todas las interacciones, evidenciándose la buena respuesta de los productos llamados alternativos de origen orgánico en comparación con los tratamientos tradicionales de origen químico, peligrosos para la salud humana y convirtiéndose en contaminantes de la naturaleza. 39 Cuadro 15 Promedios y Tukey al 5% para ancho del botón en la evaluación de la eficiencia de productos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas. Machachi – Pichincha. 2002. Factor Frecuencias Productos Comparaciones ortogonales Dosis P x D F x ( P x D) Fac. vs Adic. Ancho del Botón (cm) Significado f1= 30 días f2= 60 días f3= 90 días p1= Intercept p2= Neem x p3= Nemastroy CO1 p1 p2, p3 CO2 p2 p3 d1= Mínima d2= Comercial d3= Máxima p1d1 p1d2 p1d3 p2d1 p2d2 p2d3 p3d1 p3d2 p3d3 f1p1d1 f1p1d2 f1p1d3 f1p2d1 f1p2d2 f1p2d3 f1p3d1 f1p3d2 f1p3d3 testigo f2p1d1 f2p1d2 f2p1d3 f2p2d1 f2p2d2 f2p2d3 f2p3d1 f2p3d2 f2p3d3 testigo f3p1d1 f3p1d2 f3p1d3 f3p2d1 f3p2d2 f3p2d3 f3p3d1 f3p3d2 f3p3d3 testigo Factorial Adicional 2.82 2.85 2.84 2.86 2.81 2.84 2.86 2.83 2.81 2.84 2.85 2.84 2.82 2.87 2.86 2.86 2.76 2.85 2.81 2.90 2.81 2.80 2.89 2.81 2.85 2.76 2.78 2.78 2.87 2.84 2.81 2.83 2.89 2.88 2.85 2.73 2.94 2.87 2.92 2.81 2.78 2.80 2.83 2.88 2.89 2.80 2.84 2.79 2.92 2.77 2.81 2.80 2.84 2.81 a a a b a a a a a 40 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f3 p3d3 p3d1 p2d2 p1d3 p1d1 f2 p3d3 p3d1 p2d2 1 p1d3 2 p1d1 f1 ancho de los botones en rosa en cm. 3 INTERACCIONES Gráfico 10 E. Ancho de los botones en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos para la reducción de la población de nemátodos en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. Índice de agallamiento. En el análisis de la varianza, cuadro 16, se encuentran diferencias altamente significativas para plaguicidas, productos, comparaciones ortogonales de productos, dosis, su polinomio lineal, la interacción productos x dosis, la interacción factorial vs. el adicional; además se encontró diferencias no significativas para frecuencias con sus polinomios ortogonales lineal y cuadrático y para el factorial frecuencias x plaguicidas. El coeficiente de variación (a) fue de 4.84 % y el coeficiente de variación (b) fue de 7.20 %, siendo aceptables para el tipo de investigación realizada y que avalizan a los datos obtenidos en la investigación, además el promedio general transformado con arcoseno fue de 33.58 % y el promedio general real del experimento fue de 30.87 %. Cuadro 16 Análisis de la varianza para el índice de agallamiento, en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp., en rosas Machachi - Pichincha 2002. FUENTES DE VARIACIÓN TOTAL REPETICIONES FRECUENCIAS (F) LINEAL CUADRÁTICO ERROR (a) PLAGUICIDAS (Pl) PRODUCTOS p1 vs p2p3 p2 vs p3 DOSIS GL 89 2 2 CUADRADOS MEDIOS 1 1 4 9 2 1 1 2 8.94 17.52 29.62 5.42 2.64 168.77 141.67 101.44 181.90 287.22 ns. ns. ns. ns. ** ** ** ** ** 41 LINEAL CUADRÁTICA INTERACCIÓN P x D FACTORIAL VS ADICIONAL INTERACCIÓN F x P ERROR (b) PROMEDIO arcoseno PROMEDIO real CV(A) % CV(B) % 4 1 18 54 1 546.07 1 28.38 110.58 218.81 8.84 5.84 ** * ** ** ns. 33.58 % 30.87 % 4.84 7.20 En el cuadro 17, para productos se obtuvieron dos rangos de significancia, compartiendo el primer rango los productos Intercept (Pseudomona cepacia) y Neem-X (Extracto del árbol de neem) con 35.68 % y 35.14 % respectivamente, el producto Nemastroy (Extracto de ají más mostaza) se encuentra en el otro rango teniendo la mejor respuesta con un 31.47 %, mientras que el testigo Mocap gel tuvo un 28.90 % siendo este el mejor resultado, posiblemente a la acción sistémica del producto al controlar a las hembras de Meloidogyne sp., cuando estas están en el interior de las raíces (13), los datos obtenidos avalizan la información del número de larvas en la población final, puesto que se verifica el buen control para que no se incremente la población de nemátodos en el suelo y tener un menor agallamiento en las raíces. Además se encontraron diferencias altamente significativas para comparaciones ortogonales de los productos; la primera comparación obtuvo dos rangos de significación así, p1 vs. p2p3 (Intercept vs. Neem-X, Nemastroy) se ubicó en el primer rango y la comparación p2 vs. p3 (Neem-X vs. Nemastroy) ocupo el segundo rango obteniendo un 35.68 % y 33.31 % respectivamente, del mismo modo en la comparación ortogonal dos p2 vs. p3 (Neem-X vs. Nemastroy) se encontró dos rangos de significación, el producto Neem-X ocupa el primer rango con 35.14 % y el Nemastroy con un mejor control está en el otro rango con un 31.47 %. Para la interacción productos x dosis, se obtuvieron cuatro rangos de significación entre las nueve interacciones; ubicándose en el primer rango a las interacciones: p1d1, p1d2, p2d1, p2d3, p3d1, con un promedio de, 38.84%, 38.13%, 36.63%, 35.99%, 37.63% respectivamente; en el segundo rango se encuentra a p2d2 con un promedio de 32.81%; en el tercer rango se ubica la interacción p1d3 con un promedio de 30.08% y ubicándose en el último rango las interacciones p3d2 y p3d3 con 28.84% y 27.94% respectivamente, teniendo de este modo el mejor resultado al producto Nemastroy a la dosis máxima (p3d3) con 27.94% y el producto de menor resultado es para Intercept a la dosis mínima (p1d1) con 38.84 %. Para el factorial vs. adicional, cuadro 17, se puede apreciar que existen dos rangos de significación los que indican que el mejor resultado fue para el adicional el cuál corresponde al testigo Mocap gel con un 28.90 % y para el factorial se tuvo una respuesta de 34.10% para el índice de agallamiento, esto se debe principalmente a que el producto químico tiene una acción sistémica el cual ataca a las hembras en el interior de las raíces con lo que se evita un mayor daño y proliferación tanto de nemátodos como de agallas en las mismas tal cuál lo manifiesta CHRISTIE y EGUIGUREN (10,13). 42 Cuadro 17 Promedios y Tukey al 5% para índice de agallamiento en la evaluación de la eficiencia de productos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas. Machachi – Pichincha. 2002. Factor Frecuencias Productos Comparaciones ortogonales Dosis P x D F x Px D Fac. vs Adic. Significado f1= 30 días f2= 60 días f3= 90 días p1= Intercept p2= Neem x p3= Nemastroy CO1 p1 p2, p3 CO2 p2 p3 d1= Mínima d2= Comercial d3= Máxima p1d1 p1d2 p1d3 p2d1 p2d2 p2d3 p3d1 p3d2 p3d3 f1p1d1 f1p1d2 f1p1d3 f1p2d1 f1p2d2 f1p2d3 f1p3d1 f1p3d2 f1p3d3 testigo f2p1d1 f2p1d2 f2p1d3 f2p2d1 f2p2d2 f2p2d3 f2p3d1 f2p3d2 f2p3d3 testigo f3p1d1 f3p1d2 f3p1d3 f3p2d1 f3p2d2 f3p2d3 f3p3d1 f3p3d2 f3p3d3 testigo Factorial Adicional Índice de Agallamiento (%) 33.72 33.54 35.04 35.68 a 35.14 a 31.47 b 35.68 a 33.31 b 35.14 a 31.47 b 37.70 a 33.26 b 31.34 c 38.84 a 38.13 a 30.08 c 36.63 a 32.81 b 35.99 a 37.63 a 28.84 d 27.94 d 39.60 39.83 29.39 35.27 31.08 36.49 36.81 28.30 26.68 27.05 38.10 35.52 28.25 37.52 34.14 34.98 37.99 25.81 29.54 30.48 38.80 39.04 32.60 37.09 33.22 36.51 38.09 32.42 27.60 29.18 34.10 a 28.90 b 43 F. Análisis económico. El análisis económico de los tratamientos en estudio, se calculó basándose en los precios de venta de cada producto, según los valores establecidos en el mercado para el año que concluyo el ensayo (2002). De acuerdo a los volúmenes de aplicación utilizados en la empresa Panorama Roses S.A., se obtuvo el costo por hectárea de cada producto utilizado, expresados en el siguiente cuadro. Cuadro 18. Para costos fijos y variables en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas. Machachi - Pichincha. 2002. COSTOS FIJOS INSUMOS Descripción Cantidad NH4NO3 3600 KNO3 3960 KH2PO4 540 CaNO3 4230 H4BO3 48 Pesticidas 172 Mano de obra 800 Técnico 8 SUB TOTAL MAQUINARIA Y EQUIPO Motocultor 6 Bomba estacionaria 24 SUB TOTAL OTROS Invernadero 10 000 Unidad kg kg kg kg litros litros jornal mes V. unitario USD 0.18 0.54 1.15 0.42 0.80 63.00 4.00 148.00 Sub total USD 648.00 2138.40 621.00 1776.60 38.40 10836.00 3200.00 1184.00 20442.40 horas horas 10.00 7.00 60.00 168.00 228.00 m2 12.00 4286.00 Análisis suelo 1 20.00 20.00 nematológico 1 12.00 12.00 SUB TOTAL TOTAL 4318.00 24988.40 COSTOS VARIABLES Cantidad Valor unitario USD Intercept 0.50 0.043 928.68 0.75 0.042 1373.40 1.20 0.042 2197.44 Neem-X 2.00 0.036 3139.20 3.00 0.036 4708.80 4.00 0.036 6278.40 Nemastroy 1.50 0.044 2877.60 2.00 0.044 3836.80 2.50 0.043 4687.00 Mocap gel 0.80 0.045 1569.60 * Amortización de invernadero para 7 años En el cuadro 19, se aprecia los costos totales para todas las interacciones del experimento en donde el costo total Unidad litros litros litros litros litros litros litros litros litros litros más bajo es para los productos que fueron utilizados en una menor dosis, debido a la forma de aplicación. El tratamiento con el producto Intercept resulta ser el más bajo, pero su control al igual que el resto de tratamientos orgánicos presentan un resultado aceptable en los parámetros de calidad, al igual que en la reducción de la población en donde mantiene un comportamiento aceptable. Mientras resulta ser antieconómico los productos 44 Neem-X y Nemastroy a las dosis más altas, por su alto costo, como nematicida por las dosis utilizadas y su control analizado en todas las variables. Cuadro 19. Para costos totales en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas Machachi - Pichincha 2002. Interacciones Costos fijos USD Costos Variables USD Costos Totales USD p1d1 (Intercept, dosis mínima) 24988.40 928.68 25917.08 p1d2 (Intercept, dosis comercial) 24988.40 1373.40 26361.80 p1d3 (Intercept, dosis máxima) 24988.40 2197.44 27185.84 p2d1 (Neem-X, dosis mínima) 24988.40 3139.20 28127.60 p2d2 (Neem-X, dosis comercial) 24988.40 4708.80 29697.20 p2d3 (Neem-X, dosis máxima) 24988.40 6278.40 31266.80 p3d1 (Nemastroy, dosis mínima) 24988.40 2877.60 27866.00 p3d2 (Nemastroy, dosis comercial) 24988.40 3836.80 28825.20 p3d3 (Nemastroy, dosis máxima) 24988.40 4687.00 29675.40 testigo (Mocap gel) 24988.40 1569.60 26558.00 En el cuadro 20, se aprecia la tasa de beneficio/costo propuesta por REINOSO, que el tratamiento que presenta el mejor retorno marginal es Intercept a la dosis mínima ya que por cada dólar invertido hay un retorno de 1.64 dólares, superior al testigo químico Mocap gel que tiene un retorno de 1.48 dólares, el resto de tratamientos orgánicos tienen una tasa de beneficio / costo aceptable para productos alternativos, ya que ninguno presenta una perdida. Cuadro 20. Interacciones p1d1(Intercept) Para la tasa de beneficio / costo en la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosas. Machachi Pichincha. 2002. Costo total Rendimiento Utilidad Utilidad Tasa B/C USD/ha tallos/ha bruta USD NetaUSD/ha 25917.08 244285.71 68400 42482.92 2.64 p1d2(Intercept) p1d3(Intercept) 26361.80 27185.84 218571.43 218571.43 61200 61200 34838.20 34014.16 2.32 2.25 p2d1(Neem-X) 28127.60 226285.71 63360 35232.40 2.25 p2d2(Neem-X) p2d3(Neem-X) 29697.20 31266.80 213428.57 244285.71 59760 68400 30062.80 37133.20 2.01 2.19 p3d1(Nemastroy) 27866.00 239142.86 66960 39094.00 2.40 p3d2(Nemastroy) p3d3(Nemastroy) 28825.20 29675.40 248142.86 244285.71 69480 68400 40654.80 38724.60 2.41 2.30 testigo(Mocap gel) 26558.00 235285.71 65880 39322.00 2.48 45 El costo del tallo para la realización del análisis económico es de 0.28 centavos de dólar, en Marzo del 2002. V. CONCLUSIONES A. Los productos orgánicos tuvieron una respuesta favorable para el control de la población final; Neem-X a la dosis de 3.00 ml / litro tuvo 13.33 larvas por 100 g de suelo; Intercept a la dosis de 0.50 ml / litro tuvo una población de 40 larvas por 100 g de suelo y el Nemastroy a la dosis de 2.50 ml/litro tuvo una población de 80.00 larvas por 100 g de suelo; el testigo químico Mocap gel, mostró mayor eficiencia al final del período de aplicación, por la residualidad y acción sistémica del producto con 13.33 larvas por 100 gramos de suelo. B. La eficiencia de los productos tienen respuestas diferentes según las frecuencias de aplicación así; el Neem-X a 3.00 ml/litro; a los 30 días tiene un 94.07 % de efectividad, a los 60 días 53.86 % y a los 90 días 81.11 %; el Nemastroy a 2.50 ml/litro tiene un comportamiento contrario ya que en los 30 días tiene un control de 77.25 %, a los 60 días 85.72 % y a los 90 días 79.42 %; el Intercept a 0.50 ml/litro presenta a los 30 días un control de 83.06 % a los 60 días 64.01 % y a los 90 días 83.53 %. C. Se pudo determinar que el mejor resultado fue para Neem-X a la dosis de 3 ml/litro en la frecuencia de 30 días ya que tuvo una población de 13.33 larvas por 100 g de suelo con un porcentaje de reducción de 94.07 %, siendo mejor que el químico Mocap gel el cual tiene una población final de 106.67 larvas por 100 g de suelo y una reducción de la población del 64.40%. D. En los parámetros de calidad para la flor: largo del tallo, ancho y diámetro del botón, la población de Meloidogyne sp. no afecto; ya que todos los productos realizaron un buen control en la población. E. De acuerdo al análisis beneficio / costo la interacción que mayor retorno marginal presentó fue, Intercept a la dosis de 0.50 ml/litro a 30 días (f1p1d1), por el buen control sobre la población de Meloidogyne sp., el segundo producto de mejor retorno marginal lo presenta el producto químico Mocap gel al realizar un control mas eficiente al pasar de los días por su efecto residual y acción sistémica. VI. RECOMENDACIONES A. De acuerdo al análisis económico se recomienda aplicar el producto Intercept a la dosis mínima, 0.50 ml por litro, por ser el producto orgánico que presenta la mejor respuesta en este aspecto. B. Aplicar el producto Neem-X a la dosis de 3.00 ml por litro ya que tiene un buen control sobre la población final de nemátodos en el cultivo de rosa. C. En la determinación de las diferentes dosis de aplicación para los productos orgánicos, se recomienda las siguientes dosis para los distintos productos: - Intercept a la dosis mínima, de 0.50 ml / litro. Neem-X a la dosis comercial, de 3.00 ml / litro. Nemastroy a la dosis máxima, de 2.50 ml / litro. D. En función a los resultados obtenidos y a las diferentes dosis de los productos es recomendable establecer un programa de control para los nemátodos (Meloidogyne sp.) en el cultivo de rosas de la siguiente manera: - Empezar las aplicaciones de los productos orgánicos con el producto Intercept a la dosis de 0.50 ml / litro ya que ayuda a la repoblación de la fauna benéfica del suelo, así como la propensión del vigor a la misma. - A los 30 días realizar una aplicación con el producto Neem-X a la dosis de 3.00 ml / litro, ya que este producto ataca al estado de muda del nemátodo, con lo que evitaría que las hembras lleguen al estado adulto y ovipositen. 46 - E. A los 60 días aplicar el producto Nemastroy a la dosis de 2.50 ml / litro, puesto que es donde presenta su mayor efectividad para la reducción de la población de los nemátodos. Continuar realizando investigaciones con los productos orgánicos y alternativos, como es el caso de Paecilomyces lilacinus, Pausteria penetrans, solos y con el uso combinado de Intercept, Neem-X, Nemastroy y los demás productos orgánicos existentes en el mercado, para realizar un buen control y combatir a los nemátodos que atacan a las raíces (Meloidogyne sp.) en el cultivo de rosas, de una forma más integral. VIII. BIBLIOGRAFÍA 1. AGRIOS, G. 1989. Fitopatología. Trad. del Inglés por Manuel Guzmán Ortiz. México: Limusa. p. 147, 663673. 2. ATL INTERPRICES INC. s.f. Sincosin - AG y Agrispon - IPSM. Dallas (USA). 8 p. 3. BIBLIOTECA PRÁCTICA AGRÍCOLA Y GANADERA. 1989. Barcelona (España). : Grupo Editorial Océano. p. 159. Los fundamentos de la agricultura. 4. BIDWELL, R. Fisiología Vegetal. 1893. 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Mezclar con una espátula hasta conseguir la dispersión de las partículas de tierra y luego dejar reposar por 120 segundos. - En un litro nuevamente agitar el resto de tierra y dejar reposar por 120 segundos. - Las partículas en suspensión, pasar por un tamiz de 25 y 38 micras, recogiendo este material en un cedazo con una malla de 1 mm de diámetro, previamente preparado con una servilleta. - Colocar en un recipiente el tamiz con la suspensión agua nemátodos y dejar reposar por 24 horas. - El recipiente conteniendo la suspensión de nemátodos se pasa a un vaso de precipitación, completándose con agua hasta los 200 cm3. - Esta suspensión de 200 cm3 se somete a remoción. Se toman 5 cm3 con una pipeta y se coloca este volumen en un plato cuenta larvas. El agua del plato no debe tener más de 5mm de profundidad. - La lectura del número de larvas se realiza en el microscopio y el número de larvas leídas se multiplica por 200 para obtener la población total de la muestra de suelo procesada. 50 ANEXO 2. Población inicial de Meloidogyne sp. a los 28 días de la inoculación para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa. Machachi - Pichincha. 2002. Frecuencias (F) Productos f1 f2 f3 Σ(FxP Σ( ) I II III p1d1 250.00 280.00 187.00 717.00 239.00 p1d2 200.00 220.00 250.00 670.00 223.33 p1d3 300.00 350.00 325.00 975.00 325.00 p2d1 300.00 343.00 280.00 923.00 307.67 p2d2 198.00 200.00 225.00 623.00 207.67 p2d3 190.00 180.00 200.00 570.00 190.00 p3d1 480.00 471.00 397.00 1348.00 449.33 p3d2 520.00 640.00 500.00 1660.00 553.33 p3d3 298.00 360.00 280.00 938.00 312.67 TESTIGO 302.00 300.00 298.00 900.00 300.00 ΣPG 3038.00 3344.00 2942.00 9324.00 310.80 p1d1 250.00 278.00 250.00 778.00 259.33 p1d2 300.00 320.00 360.00 980.00 326.67 p1d3 187.00 180.00 225.00 592.00 197.33 p2d1 380.00 357.00 325.00 1062.00 354.00 p2d2 380.00 370.00 380.00 1130.00 376.67 p2d3 560.00 570.00 577.00 1707.00 569.00 p3d1 298.00 300.00 325.00 923.00 307.67 p3d2 245.00 260.00 250.00 755.00 251.67 p3d3 580.00 520.00 570.00 1670.00 556.67 TESTIGO 454.00 420.00 400.00 1274.00 424.67 ΣPG 3634.00 3575.00 3662.00 10871.00 362.37 p1d1 360.00 380.00 370.00 1110.00 370.00 p1d2 280.00 270.00 300.00 850.00 283.33 p1d3 220.00 250.00 254.00 724.00 241.33 p2d1 270.00 325.00 250.00 845.00 281.67 p2d2 300.00 280.00 298.00 878.00 292.67 p2d3 174.00 154.00 160.00 488.00 162.67 p3d1 254.00 225.00 287.00 766.00 255.33 p3d2 350.00 324.00 320.00 994.00 331.33 p3d3 320.00 325.00 365.00 1010.00 336.67 PG x(FxP) SP TESTIGO 325.00 345.00 362.00 1032.00 344.00 ΣPG 2853.00 2878.00 2966.00 8697.00 289.90 9525.00 9797.00 9570.00 28892.00 321.02 Σ larvas/100g de suelo 51 ANEXO 3. Población final de nemátodos para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa. Machachi - Pichincha. 2002. Frecuencias (F) Productos PG f1 f2 f3 I II Σ(FxP) Σ( III x(FxP) SP p1d1 20.00 60.00 p1d2 60.00 p1d3 80.00 p2d1 p2d2 40.00 120.00 40.00 740.00 20.00 820.00 273.33 40.00 280.00 400.00 133.33 20.00 0.00 300.00 320.00 106.67 0.00 0.00 40.00 40.00 13.33 p2d3 20.00 0.00 200.00 220.00 73.33 p3d1 120.00 240.00 20.00 380.00 126.67 p3d2 560.00 80.00 260.00 900.00 300.00 p3d3 0.00 220.00 20.00 240.00 80.00 TESTIGO 60.00 140.00 120.00 320.00 106.67 ΣPG 940.00 1520.00 1300.00 3760.00 125.33 p1d1 80.00 100.00 100.00 280.00 93.33 p1d2 300.00 260.00 80.00 640.00 213.33 p1d3 180.00 480.00 154.00 814.00 271.33 p2d1 40.00 60.00 260.00 360.00 120.00 p2d2 260.00 220.00 40.00 520.00 173.33 p2d3 40.00 100.00 100.00 240.00 80.00 p3d1 400.00 280.00 20.00 700.00 233.33 p3d2 420.00 140.00 80.00 640.00 213.33 p3d3 100.00 20.00 124.00 244.00 81.33 TESTIGO 100.00 0.00 120.00 220.00 73.33 ΣPG 1920.00 1660.00 1078.00 4658.00 155.27 p1d1 100.00 0.00 80.00 180.00 60.00 p1d2 0.00 0.00 40.00 40.00 13.33 p1d3 0.00 0.00 60.00 60.00 20.00 p2d1 40.00 40.00 40.00 120.00 40.00 p2d2 20.00 140.00 0.00 160.00 53.33 p2d3 40.00 100.00 40.00 180.00 60.00 p3d1 0.00 0.00 40.00 40.00 13.33 p3d2 0.00 0.00 40.00 40.00 13.33 p3d3 40.00 160.00 0.00 200.00 66.67 0.00 20.00 20.00 40.00 13.33 TESTIGO ΣPG Σ 240.00 460.00 360.00 1060.00 35.33 3100.00 3640.00 2738.00 9478.00 105.31 larvas/100g de suelo 52 ANEXO 4. Largo de tallos para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa .Machachi Pichincha. 2002. Frecuencias Productos (F) PG SP f1 f2 f3 I II Σ(FxP) Σ( III x(FxP)cm p1d1 57.99 56.73 54.43 169.16 56.39 p1d2 48.12 52.13 52.67 152.91 50.97 p1d3 70.64 63.76 56.34 190.74 63.58 p2d1 58.65 57.41 60.35 176.40 58.80 p2d2 54.11 57.11 59.65 170.87 56.96 p2d3 52.58 53.36 47.10 153.04 51.01 p3d1 62.40 57.63 58.90 178.92 59.64 p3d2 52.25 52.55 59.05 163.85 54.62 p3d3 53.51 53.64 59.36 166.50 55.50 TESTIGO 53.89 53.50 57.16 164.55 54.85 ΣPG 564.12 557.82 565.00 1686.94 56.23 p1d1 48.62 60.66 57.15 166.43 55.48 p1d2 54.18 56.65 54.85 165.68 55.23 p1d3 62.48 56.82 59.46 178.76 59.59 p2d1 59.30 57.77 50.03 167.09 55.70 p2d2 44.67 57.37 53.29 155.33 51.78 p2d3 67.11 49.13 55.43 171.67 57.22 p3d1 53.81 57.17 54.85 165.82 55.27 p3d2 56.66 51.99 56.78 165.43 55.14 p3d3 61.69 58.79 49.00 169.48 56.49 TESTIGO 56.00 55.78 60.04 171.82 57.27 ΣPG 564.52 562.13 550.87 1677.51 55.92 p1d1 55.29 53.70 56.48 165.47 55.16 p1d2 53.67 56.42 55.78 165.86 55.29 p1d3 54.61 60.33 53.66 168.61 56.20 p2d1 59.14 56.20 55.06 170.40 56.80 p2d2 60.99 54.57 54.42 169.98 56.66 p2d3 56.57 44.64 55.45 156.65 52.22 p3d1 55.74 48.89 45.16 149.79 49.93 p3d2 67.11 56.76 47.38 171.25 57.08 p3d3 55.98 54.51 54.32 164.82 54.94 TESTIGO 57.85 54.00 55.39 167.24 55.75 ΣPG Σ 576.96 540.02 533.09 1650.07 55.00 1705.60 1659.96 1648.97 5014.52 55.72cm 53 ANEXO 5. Diámetro del botón para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa. Machachi - Pichincha. 2002. Frecuencias Productos (F) PG SP f1 f2 f3 I II Σ(FxP) Σ( III x(FxP)cm p1d1 5.69 5.65 5.49 16.83 5.61 p1d2 5.67 5.71 5.61 16.99 5.66 p1d3 5.70 5.20 5.47 16.37 5.46 p2d1 5.45 5.67 5.41 16.53 5.51 p2d2 5.76 5.41 5.67 16.84 5.61 p2d3 5.71 5.54 5.39 16.64 5.55 p3d1 5.53 5.61 5.60 16.74 5.58 p3d2 5.77 5.46 5.54 16.76 5.59 p3d3 5.84 5.61 5.60 17.04 5.68 TESTIGO 5.71 5.67 5.39 16.76 5.59 ΣPG 56.81 55.52 55.16 167.49 5.58 p1d1 5.19 5.74 5.62 16.54 5.51 p1d2 5.62 5.39 5.50 16.51 5.50 p1d3 5.71 5.79 5.51 17.01 5.67 p2d1 5.66 5.60 5.48 16.74 5.58 p2d2 5.49 5.47 5.39 16.35 5.45 p2d3 5.60 5.48 5.59 16.67 5.56 p3d1 5.51 5.27 5.50 16.28 5.43 p3d2 5.44 5.49 5.61 16.54 5.51 p3d3 5.54 5.73 5.56 16.82 5.61 TESTIGO 5.71 5.70 5.65 17.05 5.68 ΣPG 55.46 55.65 55.39 166.49 5.55 p1d1 5.39 5.65 5.50 16.53 5.51 p1d2 5.20 5.53 5.66 16.39 5.46 p1d3 5.12 5.59 5.54 16.24 5.41 p2d1 5.18 5.35 5.19 15.72 5.24 p2d2 5.32 5.39 5.46 16.16 5.39 p2d3 5.35 5.24 5.45 16.04 5.35 p3d1 5.21 5.55 5.42 16.18 5.39 p3d2 5.48 5.50 5.58 16.56 5.52 p3d3 5.60 5.37 5.57 16.54 5.51 TESTIGO 5.55 5.55 5.57 16.67 5.56 ΣPG 53.39 54.71 54.94 163.03 5.43 165.65 165.88 165.49 497.01 5.52 Σ 54 ANEXO 6. Ancho del botón para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa. Machachi Pichincha. 2002. Frecuencias Productos (F) PG SP f1 f2 f3 I II Σ(FxP) Σ( III x(FxP)cm p1d1 2.82 2.80 3.07 8.68 2.89 p1d2 2.81 2.86 2.77 8.44 2.81 p1d3 2.90 2.79 2.85 8.54 2.85 p2d1 2.78 2.70 2.79 8.27 2.76 p2d2 2.74 2.67 2.92 8.33 2.78 p2d3 2.75 2.59 3.00 8.34 2.78 p3d1 2.79 2.85 2.96 8.60 2.87 p3d2 2.83 2.79 2.91 8.52 2.84 p3d3 2.87 2.87 2.69 8.42 2.81 TESTIGO 2.89 2.84 2.78 8.50 2.83 ΣPG 28.17 27.76 28.72 84.64 2.82 p1d1 2.86 2.87 2.94 8.66 2.89 p1d2 2.85 2.88 2.93 8.65 2.88 p1d3 2.90 2.80 2.87 8.56 2.85 p2d1 2.93 2.65 2.60 8.18 2.73 p2d2 2.98 2.99 2.85 8.81 2.94 p2d3 2.81 2.89 2.91 8.60 2.87 p3d1 3.09 2.82 2.86 8.77 2.92 p3d2 2.83 2.86 2.75 8.44 2.81 p3d3 2.70 2.91 2.73 8.33 2.78 TESTIGO 2.70 2.92 2.78 8.39 2.80 ΣPG 28.62 28.57 28.20 85.39 2.85 p1d1 2.81 2.95 2.73 8.48 2.83 p1d2 2.85 3.09 2.69 8.63 2.88 p1d3 2.85 2.88 2.94 8.67 2.89 p2d1 2.86 2.82 2.73 8.41 2.80 p2d2 2.78 2.78 2.95 8.51 2.84 p2d3 2.77 2.72 2.89 8.38 2.79 p3d1 2.85 2.83 3.08 8.76 2.92 p3d2 2.80 2.83 2.70 8.32 2.77 p3d3 2.91 2.72 2.79 8.42 2.81 TESTIGO 2.75 2.81 2.85 8.41 2.80 ΣPG 28.21 28.44 28.34 84.99 2.83 85.00 84.77 85.26 255.02 2.83 Σ 55 ANEXO 7. Índice de agallamiento para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa Machachi - Pichincha 2002. Productos f1 p1d1 40.00 36.00 46.00 122.00 40.67 p1d2 39.00 42.60 41.50 123.10 41.03 p1d3 18.90 28.70 25.00 72.60 24.20 p2d1 32.00 31.00 37.10 100.10 33.37 p2d2 30.50 20.00 29.90 80.40 26.80 p2d3 37.00 33.10 36.00 106.10 35.37 p3d1 36.00 36.10 35.60 107.70 35.90 p3d2 21.00 25.00 21.50 67.50 22.50 p3d3 21.00 20.00 19.50 60.50 20.17 TESTIGO 20.00 23.00 19.10 62.10 20.70 III X(FxP) 295.40 295.50 311.20 902.10 30.07 p1d1 41.80 31.60 41.00 114.40 38.13 p1d2 27.10 33.50 41.00 101.60 33.87 p1d3 22.90 22.70 21.60 67.20 22.40 p2d1 38.50 40.80 32.10 111.40 37.13 p2d2 30.00 33.60 30.90 94.50 31.50 p2d3 31.00 37.10 30.60 98.70 32.90 p3d1 37.20 40.90 35.60 113.70 37.90 p3d2 19.10 15.00 23.10 57.20 19.07 p3d3 22.80 28.80 21.50 73.10 24.37 TESTIGO 25.60 27.50 24.10 77.20 25.73 ΣPG f3 II SP ΣPG f2 I Σ(FxP) Σ( Frecuencias (F) PG 296.00 311.50 301.50 909.00 30.30 p1d1 32.50 39.50 46.00 118.00 39.33 p1d2 39.00 38.50 41.50 119.00 39.67 p1d3 28.90 28.70 29.50 87.10 29.03 p2d1 36.00 36.00 37.10 109.10 36.37 p2d2 32.00 28.20 29.90 90.10 30.03 p2d3 37.00 35.10 34.10 106.20 35.40 p3d1 37.50 36.10 40.60 114.20 38.07 p3d2 23.10 32.90 30.50 86.50 28.83 p3d3 19.10 20.00 25.50 64.60 21.53 TESTIGO 20.00 33.00 19.10 72.10 24.03 305.10 328.00 333.80 966.90 32.23 896.50 935.00 946.50 2778.00 30.87 ΣPG Σ 56 ANEXO 8. Porcentaje de reducción de la población de nemátodos para la evaluación de la eficiencia de productos orgánicos en la reducción de la población de Meloidogyne sp. en rosa Machachi - Pichincha 2002. Frecuencias (F) PG Productos f1 p1d1 92.00 p1d2 p1d3 Σ(FxP) Σ( III X(FxP) 78.57 78.61 249.18 83.06 70.00 0.00 92.00 162.00 54.00 73.33 88.57 13.85 175.75 58.58 p2d1 93.33 100.00 0.00 193.33 64.44 p2d2 100.00 100.00 82.22 282.22 94.07 p2d3 89.47 100.00 0.00 189.47 63.16 p3d1 75.00 49.04 94.96 219.01 73.00 p3d2 0.00 87.50 48.00 135.50 45.17 p3d3 100.00 38.89 92.86 231.75 77.25 80.13 53.33 59.73 193.20 64.40 ΣPG 773.27 695.91 562.23 2031.41 67.71 p1d1 68.00 64.03 60.00 192.03 64.01 p1d2 0.00 18.75 77.78 96.53 32.18 p1d3 3.74 0.00 31.56 35.30 11.77 p2d1 89.47 83.19 20.00 192.67 64.22 p2d2 31.58 40.54 89.47 161.59 53.86 p2d3 92.86 82.46 82.67 257.98 85.99 p3d1 0.00 6.67 93.85 100.51 33.50 p3d2 0.00 46.15 68.00 114.15 38.05 p3d3 82.76 96.15 78.25 257.16 85.72 TESTIGO 77.97 100.00 70.00 247.97 82.66 446.39 537.94 671.57 1655.90 55.20 p1d1 72.22 100.00 78.38 250.60 83.53 p1d2 100.00 100.00 86.67 286.67 95.56 p1d3 100.00 100.00 76.38 276.38 92.13 p2d1 85.19 87.69 84.00 256.88 85.63 p2d2 93.33 50.00 100.00 243.33 81.11 p2d3 77.01 35.06 75.00 187.08 62.36 p3d1 100.00 100.00 86.06 286.06 95.35 p3d2 100.00 100.00 87.50 287.50 95.83 p3d3 87.50 50.77 100.00 238.27 79.42 100.00 94.20 94.48 288.68 96.23 915.25 817.73 868.46 2601.44 86.71 2134.91 2051.58 2102.26 6288.75 ΣPG f3 II SP TESTIGO f2 I TESTIGO ΣPG Σ 69.87 larvas / 100g de suelo 57 ANEXO 9. Escala establecida por Taylor (43), para índice de agallamiento en raíces de rosa. INDICE DE DAÑO ESCALA % DE INFESTACION 0 0 Raíces con pocas nudosidades 1 20 Raíces con muchas nudosidades pequeñas 2 40 Raíces con pocas nudosidades grandes 3 60 Raíces con muchas nudosidades 4 80 Raíces con grandes deformaciones 5 100 Raíces sin nudosidades