XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
INESTABILIDAD DE MICROSATÉLITES EN PACIENTES CON CÁNCER
COLORRECTAL
María Reyna Huerta Sánchez, Centro Universitario de los Altos, [email protected] Asesora
Melva Gutiérrez Angulo, Centro Universitario de los Altos, [email protected]
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
A nivel mundial, el cáncer colorrectal (CCR) ocupa el 3° lugar en incidencia mientras
que en México se ubica en el 4° lugar. La etiología del CCR es multifactorial y se han
descrito al menos tres vías moleculares que conducen al desarrollo de este tipo de
cáncer (vía de inestabilidad cromosómica, inestabilidad de microsatélites y fenotipo
metilador de islas CpG). La vía de inestabilidad de microsatélites (MSI) representa el
15% de todos los casos y puede ser producida por hipermetilación del promotor del gen
MLH1 o por mutaciones en línea germinal en cualquiera de los genes de reparación del
DNA MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2. La caracterización de esta vía se realiza con el panel
de 5 marcadores NR-24, NR-21, NR-27, BAT-25 y BAT26. En este trabajo se realizó la
detección de la MSI del marcador NR-24, éste es un repetido de 24 nucleótidos de
Timina en la región 3’ no traducida del gen ZNF2.
METODOLOGÍA
La identificación de la MSI para NR-24 se realizó en el DNA de tejido tumoral de 35
pacientes con CCR. Primero se extrajo el DNA con el kit High Pure PCR Template
Preparation de Roche. La cuantificación del DNA se realizó por espectrofotometría a 260
nm. La región que contiene el repetido se amplificó por PCR y los productos se
observaron en un gel de poliacrilamida teñido con nitrato de plata. El tamaño del
producto de PCR para el alelo normal fue de 128 pb. Si el paciente con CCR era positivo
el marcador NR-24 se podían observar los alelos de 152 pb (ganancia del repetido) o de
104 pb (deleción del repetido).
CONCLUSIONES
Este trabajo es parte de un proyecto de identificación de MSI en pacientes con CCR por
lo que aún no concluye, sin embargo, en las 35 muestras analizadas se pudo establecer
que el marcador NR-24 no presentó inestabilidad. La identificación de la MSI con los
cinco marcadores en pacientes con CCR es importante como diagnóstico inicial en el
laboratorio de Genética. El diagnóstico positivo de inestabilidad permite distinguir CCR
de tipo esporádico y CCR de tipo hereditario autosómico dominante (síndrome Lynch).
En el primer caso se procede con análisis de hipermetilación del gen MLH1 y en el
segundo se debe buscar mutaciones de línea germinal de los genes MLH1, MSH2,
MSH6 y PMS2. Con esta información el médico especialista hará una mejor elección del
tratamiento quirúrgico. En cambio, los individuos negativos para inestabilidad tienen peor
pronóstico y en algunas etapas del desarrollo del cáncer no responden al tratamiento
que habitualmente reciben.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico
Agosto 2014