instrucciones

CLORUROS
BIOLABO
www.biolabo.fr
Método colorimétrico
FABRICANTE:
BIOLABO SAS,
Les Hautes Rives
02160, Maizy, France
Reactivo para la determinación cuantitativa de los iones cloruros
en plasma, suero, líquido céfalo-raquídeo humano (LCR), o en orina.
REF 80005 R1
2 x 125 mL
R2 1 x 5 mL
CODIGO CNQ : E3
|
SOPORTE TECNICO Y PEDIDOS
Tel: (33) 03 23 25 15 50
IVD USO IN VITRO
Fax: (33) 03 23 256 256
SIGNIFICACION CLINICA (1)
PREPARACION DE LOS REACTIVOS
Los iones Cl- son los más representados en el medio extracelular. Al
igual que el sodio, los iones Cl- están implicados en el mantenimiento
de la distribución del agua, la presión osmótica y el equilibrio ácidobase de los líquidos extracelulares.
Una disminución de la concentración plasmática en Cl- acompañada
de una hiponatremia se observa en los casos de nefritis con pérdida
de sales (Ej. píelonefritis crónica). Las secreciones gástricas
persistentes y los vómitos prolongados, sea cual sea la causa,
conducen a una perdida significativa en Cl- y finalmente a una
hipocloremia y una depleción del Cl- total del organismo.
Concentraciones plasmáticas elevadas en Cl- aparecen en caso de
deshidratación, acidosis renal tubular proximal (ART), enfermedad
renal aguda, acidosis metabólica con diarrea prolongada y pérdida de
bicarbonato sódico…
Los reactivos están listos para el uso.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Almacenar a 18-25°C, en el vial de origen bien cerrado y
protegido de la luz.
• Standard (vial R2): transvasar la cantidad necesaria, tapar bien de
nuevo el vial y almacenar a 18-25°C.
• Utilizados y almacenados en las condiciones adecuadas, los
reactivos (viales R1 y R2) son estables, en ausencia de
contaminación, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta
de la caja.
No utilizar el reactivo (vial R1) si hay turbidez o si su absorbencia
es > 0.100 a 500 nm.
No utilizar el reactivo de trabajo después de la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta de la caja.
PRINCIPIO (1) (4) (5)
Hg(SCN)2 + 2Cl-
HgCl2 + 2SCN-
3(SCN)- + Fe3+
Fe(SCN)3
Los iones Cl- reaccionan con el tiocianato mercúrico no disociado para
formar cloruro mercúrico no disociado e iones tíocianatos libres. Los
iones tíocianatos reaccionan con el hierro férrico para formar un
compuesto coloreado en rojo, el tíocianato férrico en el cual la
absorbencia es proporcional a la cantidad de Cl- en la muestra y es
medida a 500 nm (450-500).
REACTIVOS
Vial R1
REACTIVO TIOCIANATO
Nitrato férrico
Cloruro mercúrico
Tíocianato mercúrico
Acido nítrico
Tensio-activo
22,2
0,55
1,33
30
1
mmol/L
mmol/L
mmol/L
mmol/L
mL/L
R33 : Peligro de efectos acumulativos
Vial R2
STANDARD
Cloruros 100 mmol/L
Suero o plasma heparinizado, no hemolizados.
Orina o LCR.
Los iones cloruros son estables en la muestra:
1 semana a temperatura ambiente o a 2-8°C.
INTERFERENCIAS (3)
Bilirrubina:
No hay interferencia significativa hasta 100 µmol/L
(6.0 mg/dL). Más allá, ligera sobrestimación de los
resultados no excediéndose de 2 mmol/L entre
100 y 375 µmol/L de bilirrubina.
Turbidez:
Si
hay
opalescencia,
sobrestimación
de
aproximadamente 4 a 8 mmol/L. Si hay
lactescencia, hay resultados muy sobrestimados
para que sean apropiados. Para reducir la
interferencia, hacer una muestra blanca o trabajar
en dicromatismo (§ modo de empleo).
Hemoglobina:
Sobrestimación de 5 mmol/L a partir de 205
µmol/L (330 mg/dL) de hemoglobina en la
muestra.
Acido ascórbico: No hay interferencia de la vitamina C hasta
10 mg/dL en la muestra.
Young D.S. ha publicado una lista de las sustancias que interfieren con
la prueba.
REACTIVOS Y MATERIAL COMPLEMENTARIO
PRECAUCIONES
Los reactivos BIOLABO están destinados únicamente a profesionales,
para uso in vitro.
• Verificar la integridad de los reactivos antes de su utilización.
• Utilizar equipamientos de protección (bata, guantes, gafas).
• No pipetear con la boca.
• En caso de contacto con la piel o los ojos, enjuagar
abundantemente y consultar al médico.
• La ficha de datos de seguridad puede obtenerse por petición.
• Eliminación de los deshechos: respetar la legislación en vigor.
• Por medida de seguridad, tratar toda muestra como potencialmente
infecciosa. Respetar la legislación en vigor.
Made in France
TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA (2) (6)
1. Equipamiento de base del laboratorio de análisis médico.
2. Sueros de controles normales y patológicos.
CALIBRACION (7)
• Standard de la caja (vial R2) o BIOLABO Multicalibrator REF 95015
trazable sobre srm909b.
• O cualquier otro calibrador trazable sobre un método o un material
de referencia.
La frecuencia de calibración depende de las prestaciones del
analizador y de las condiciones de conservación del reactivo.
Se recomienda calibrar en los siguientes casos:
1. Cambio de lote del reactivo.
2. Después de operación de mantenimiento sobre el analizador.
3. Los valores de control obtenidos salen de los límites de confianza,
incluso después de la utilización de un segundo vial de suero de
control recién reconstituido.
Ultima Versión: www.biolabo.fr
Versión: 26/07/2011
CONTROL DE CALIDAD
CODIGO CNQ: E3
LIMITE DE LINEALIDAD
• BIOLABO EXATROL-N Tasa I REF 95010.
• BIOLABO EXATROL-P Tasa II REF 95011.
• Cualquier otro suero de control titulado para este método.
• Programa externo de control de calidad.
Es recomendado controlar en los siguientes casos:
• Al menos un control por rutina.
• Al menos un control cada 24 horas.
• Cambio de vial del reactivo.
• Después de operación de mantenimiento sobre el analizador.
Cuando un valor de control se encuentra fuera de los límites de
confianza recomendados, aplicar las siguientes acciones correctivas:
1. Repetir el test utilizando el mismo control.
2. Si el valor obtenido queda fuera de los límites, preparar un suero de
control recién reconstituido y repetir el test.
3. Si el valor obtenido queda fuera de los límites, utilizar otro calibrador
o un calibrador recién reconstituido y repetir el test.
4. Si el valor obtenido queda fuera de los límites, calibrar nuevamente
utilizando otro vial de reactivo y repetir el test.
5. Si el valor obtenido queda fuera de los límites, contactar el servicio
técnico BIOLABO o el distribuidor local.
La reacción es lineal entre 70 y 140 mmol/L. La diferencia máxima es
de + 3% en relación al valor teórico. Para valores inferiores a 70
mEq/L, establecer una curva de calibración (a partir de soluciones a
20, 40, 60 mEq/L) o aumentar el volumen de la muestra. Más allá de
140 mmol/L, diluir la muestra con agua desmineralizada exenta de
iones cloruros o disminuir el volumen de la muestra y hacer de nuevo
la prueba teniendo en cuenta la dilución en el cálculo del resultado. El
límite de linealidad depende de la relación de dilución
muestra/reactivo.
MODO DE EMPLEO (TECNICA MANUAL)
Poner el reactivo y las muestras a temperatura ambiente.
Medir en tubos de ensayo bien
identificados:
Blanco
Standard
Prueba
Reactivo
1 mL
1 mL
1 mL
Agua desmineralizada
10 µL
Standard
INTERVALOS DE REFERENCIA (2)
Muestra
En el suero o en el plasma
Cloruros
mEq/L
[mmol/L]
En el cordón
96-104
[96-104]
Prematuro
95-110
[95-110]
de 0 a 30 días
98-113
[98-113]
98-107(108)
[98-107(108)]
> a 90 años
98-111
[98-111]
Notas:
Procedimientos específicos están disponibles para los analizadores
automáticos. Contactar el servicio técnico BIOLABO.
Una muestra blanca puede entonces ser realizada reemplazando el
reactivo tíocianato por una solución de NaCl 9 g/L. La muestra
blanca medida a 500 nm contra NaCl 9 g/L es deducida de la
medida de absorbencia sin muestra blanca.
Una lectura en dicromatismo entre 500 y 600 nm permite reducir al
50% la interferencia de la turbidez de la muestra, no obstante una
perdida de sensibilidad de aproximadamente 10%.
La sensibilidad es mejor a 450-460 nm, pero la reacción está menos
sujeta a las interferencias entre 480 y 500 nm.
En orinas de 24 horas
mEq/L
[mmol/L]
Recién nacido
2-10
[2-10]
Niño < 6 años
15-40
[15-40]
6-10 años, Niño
36-110
[36-110]
6-10 años, Niña
18-74
[18-74]
[64-176]
10 µL
Mezclar bien. Incubar 5 minutos a temperatura ambiente.
Inscribir las absorbencias a 500 nm (450-500) contra el blanco reactivo.
La reacción es estable 30 minutos protegida de la luz.
hasta 90 años
Cloruros
10 µL
CALCULO
El resultado está determinado según la fórmula:
10-14 años, Niño
64-176
10-14 años, Niña
36-173
[36-173]
Adulto
110-250
[110-250]
> 60 años
95-195
[95-195]
Resultado =
Abs (Prueba)
Abs (Standard)
x concentración del Standard
BIBLIOGRAFIA
En el LCR
Cloruros
mEq/L
[mmol/L]
Niño
110-130
[110-130]
Adulto
118-132
[118-132]
(1)
(2)
(3)
Se recomienda a cada laboratorio definir sus propios intervalos de
referencia para la población estimada.
(4)
(5)
(6)
PRESTACIONES
(7)
Intra-serie Tasa débil
N = 20
Tasa
elevada
Inter-serie
N = 20
Tasa débil
Tasa
elevada
Media
mmol/L
85,1
136,3
Media
mmol/L
84,6
133,4
S.D. mmol/L
0,51
0,94
S.D. mmol/L
0,67
1,95
C.V. %
0,60
0,69
C.V. %
0,79
1,5
Límite de detección:
rd
TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3 Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 1063—1064, p.1104.
Clinical Guide to Laboratory Test, 4th Ed., N.W. TIETZ (2006) p. 234-239.
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995) p.
3-137 à 3-141
ZALL D.M., FISHER D., GARNER D.O., ANAL. CHEM. 28, 1665 (1956).
FLORENCE T.M. AND Y.J. FARRAR : SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF
CHLORIDE AT THE PARTSPER-BILLION LEVEL BY THE MERCURY (II) THIOCYANATE
METHOD, ANAL. CHIM. ACTA., 54 : 373-377 (1971).
HENRY R. J.(ED), CLINICAL CHEMISTRY: Principles and technics(2nd éd.),
Harper and Row, p.718-719 (1974).
SRM: Standard Reference Material
®
aproximadamente 1,4 mmol/L
Sensibilidad para 100 mmol/L: aproximadamente 0,350 Abs a 500 nm.
Estudio de comparación con un reactivo comercial:
y = 1,0391 x – 2,9153
r = 0.9944
IVD
Fabricante
REF
Fecha de caducidad Uso in vitro Temperatura de conservación
Made in France
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LOT
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Versión: 26/07/2011