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CAPÍTULO 6
RESULTADOS
6.1 Caracterización del suelo
En el siguiente cuadro se presenta la caracterización del suelo, mostrando un
suelo pobre en nutrientes con textura franco arenosa, un pH ligeramente ácido y
medianamente rico en materia orgánica.
Tabla 6.1 Resultados de la caracterización fisicoquímica del suelo
Propiedades
fisicoquímicas
Características
Textura
Arena Francosa
Resultado
Arena
71.28%
Limo
20%
Arcilla
8.72%
pH
6.31
Ligeramente ácido
Materia Orgánica
6.64%
Medianamente rico
Nitrógeno total
10.7 ppm
Pobre
0.00107%
< 0.032% Pobre
> 0.222% Rico
Fósforo asimilable
0.212 ppm
Bajo
< 5.5 ppm Bajo
> 11 ppm Alto
Humedad
5.01%
37
6.2 Concentración mínima inhibitoria
En este experimento se hicieron soluciones de fenol al 10, 20, 30, 40 y 50% en
tubos Falcon de 15 ml y se aforaron con medio caldo nutritivo hasta 10 ml. Ya que se
tenían estas soluciones se procedió a poner en cada tubo 250 µl de cultivo de cada cepa.
Después de 24 hrs de incubación se procedió a sembrar en medio sólido 2XYT
para comprobar su crecimiento. Así solamente pudimos observar crecimiento en la
solución de fenol al 10% (por lo que se tomó como base para proponer la degradación
de la solución de fenol al 2%) y es por eso que trabajamos con esa concentración en esta
tesis.
6.3 Cuenta viable en placa
Uno de los objetivos específicos de esta tesis era obtener resultados de viabilidad
de las células las bacterias encapsuladas a 4° C, se tomaron muestras cada semana y a
los 30 días las células murieron.
Por otra parte al final del experimento de degradación de fenol se tomó una muestra
de suelo para determinar la viabilidad de las células a las 96 horas a temperatura
ambiente y se vieron resultados satisfactorios para:
•
K. pn. pneumoniae encapsulado se encontró una viabilidad de 6X108 UFC
•
K. pn. pneumoniae no encapsulado se encontró una viabilidad de 1X108 UFC
•
Cultivo mixto encapsulado se encontró una viabilidad de 6X108 UFC
•
Cultivo mixto no encapsulado se encontró una viabilidad de 6X108 UFC
38
6.4 Generación de inóculos líquidos y sólidos
Para generar los inóculos líquidos se obtuvieron los valores del número de
UFC/ml (tomando en cuenta que a una absorbancia de 2.0 hay 109 células/ml) y la
absorbancia a una longitud de onda 600 nm en el espectrofotómetro.
Como siguiente paso utilizando la fórmula C1 V1 =C2 V2 se obtienen los valores de
mililitros que se van a utilizar para ajustar la concentración de células a del valor más
grande obtenido en un volumen final de 40 ml.
Posteriormente para la producción de los inóculos sólidos (generación de
perlas de carraginato de calcio), en la solución de carragenina se agregan 20 ml de la
suspensión de células (20 ml de la suspensión de K. pneumoniae pneumoniae, o en el
caso del inoculante mixto 10 ml de la suspensión K. pneumoniae pneumoniae + 5 ml de
la suspensión de P. aeruginosa + 5 ml de la suspensión de S. paucimobilis).
Así se obtuvieron 76.09 g de perlas de K. pneumoniae pneumoniae y 89.59 g de
perlas del cultivo mixto. Ya que se tienen estos valores se hacen los cálculos necesarios
para poner los mililitros necesarios para el inóculo líquido ya que se agrega 50 g de
perlas (de cada tipo) para comenzar a montar el sistema de degradación.
6.5 Determinación de fenol en la solución de suelo
En esta parte se obtienen los valores de absorbancia con el espectrofotómetro
UV-Vis a 269 nm después de que las muestras son procesadas. Así, después se
obtuvieron los valores de la concentración con la Ley de Lambert-Beer, A=εbc (para el
fenol el coeficiente de extinción molar ε es de 1579 cm-1 M-1 con una longitud de onda
λ=269 nm), siendo A la absorbancia a la longitud de onda establecida, ε el coeficiente
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de extinción molar del compuesto (en este caso fenol), b es el grosor de la celda de
cuarzo (1 cm), y c es la concentración molar del compuesto en solución. Y se
obtuvieron los siguientes resultados.
Concentración (ppm)
Control del microsistema
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
Control
0
20
40
60
80
100
Tiempo (hrs)
Figura 6.1 Degradación de fenol con respecto al control
Concentración (ppm)
Degradación de fenol
2400
2000
Cultivo mixto no
encapsulado
Cultivo mixto
encapsulado
1600
1200
800
400
0
0
20
40
60
80
100
Tiempo (hrs)
Figura 6.2 Comparación de la degradación de fenol con respecto al cultivo mixto
encapsulado y el cultivo mixto no encapsulado
40
Degradación de fenol
1800
Concentración (ppm)
1600
1400
Cultivo de K. pn.
pneumoniae
encapsulado
1200
1000
Cultivo de K. pn.
pneumoniae sin
encapsular
800
600
400
200
0
0
20
40
60
80
100
Tiempo (hrs)
Figura 6.3 Comparación de la degradación de fenol con respecto al cultivo de K. pn.
pneumoniae encapsulado y el cultivo de K. pn. pneumoniae no encapsulado
Degradación de fenol
Concentración (ppm)
2400
2100
1800
Cultivo de K. pn.
pneumoniae
encapsulado
Cultivo mixto
encapsulado
1500
1200
900
600
300
0
0
20
40
60
80
100
Tiempo (hrs)
Figura 6.4 Comparación de la degradación de fenol con respecto al cultivo mixto
encapsulado y el cultivo de K. pn. pneumoniae encapsulado
41
Concentración en ppm
Degradación de fenol
2400
2000
Cultivo mixto no
encapsulado
1600
1200
Cultivo de K. pn.
pneumoniae no
encapsulado
800
400
0
0
20
40
60
80
100
Tiempo (hrs)
Figura 6.5 Comparación de la degradación de fenol con respecto al cultivo mixto no
encapsulado y el cultivo de K. pn. pneumoniae no encapsulado
Degradación de fenol
Cultivo mixto no
encapsulado
2400
Concentración (ppm)
2100
Cultivo mixto
encapsulado
1800
1500
Cultivo de K. pn.
pneumoniae
encapsulado
1200
900
600
Cultivo de K. pn.
pneumoniae no
encapsulado
300
0
0
20
40
60
80
100
Control
Tiempo (hrs)
Figura 6.6 Comparación de la degradación de fenol entre los cuatro tipos de diferentes
de inóculos
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