060. DEL GIÚDICE,A. Respuesta Th1

XVI Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas 2015 – III Jornada Latinoamericana
Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional de Rosario
Respuesta Th1/Th2 en animales
adenocarcinoma de mama murino
1
1
1,3
portadores
de
un
1,2
Del Giúdice, Antonela; Pagura, Lucas; Rico, María José; Scharovsky,
1,2
1
O. Graciela; Di Masso, Ricardo José; Rozados, Viviana Rosa
1
2
Instituto de Genética Experimental. Facultad de Ciencias Médicas. Carrera
de Investigador Científico (CIC), Universidad Nacional de Rosario (UNR).
3
CONICET [email protected]
Un tumor se considera maligno cuando ha adquirido la capacidad de invadir
y desarrollar metástasis. La mayoría de las células del tumor primario
poseen fenotipo metastásico. Para que una célula tumoral se trasforme en
metastásica debe transitar una serie de eventos conocidos como cascada
metastásica. A pesar de la prevalencia de metástasis en los pacientes en el
momento del diagnóstico, su desarrollo es un proceso altamente ineficiente
dado que para que una célula tumoral genere finalmente una metástasis
debe completar todos los eventos de la cascada metastásica. Las
interleuquinas
(IL)
comprenden
una
familia
de
proteínas
inmunomoduladoras que participan en el crecimiento, diferenciación y
activación de la respuesta inmune. Las citoquinas de tipo Th1, como IL-2 e
interferón gama (IFN-γ), están involucradas en las reacciones inmunes
mediadas por células, las citoquinas de tipo Th2, como IL-4 e IL-10, se
encuentran comúnmente asociadas con fuertes respuestas humorales.
Existen múltiples evidencias que permiten demostrar la participación de la
respuesta inmune en el rechazo a tumores a través del concepto de
1
inmunovigilancia e inmunoedición . Aun así, los tumores pueden escapar a
2
la respuesta inmune, crecer y generar metástasis . El objetivo de este
trabajo fue evaluar la concentración de citoquinas séricas Th1 (IL-2, IFN-γ) y
Th2 (IL-4 e IL-10) en animales portadores de un tumor de mama en franco
crecimiento, con y sin metástasis. Para ello, 50 ratones hembras de la línea
CBi/L fueron desafiados en forma sub-cutánea con el adenocarcinoma de
mama M-406. Durante el experimento se controló la evolución del volumen
tumoral y cuando los tumores alcanzaron el tamaño máximo permitido por
las normas éticas, se les extrajo sangre y se obtuvo el suero para
determinar las diferentes interleuquinas por ELISA. Acto seguido los
animales se sacrificaron por sobre-exposición a CO2. Se extirparon
quirúrgicamente ambos pulmones, principal sitio de desarrollo metastásico,
los que se fijaron en solución de Bouin. Se realizó el control de la presencia
o ausencia de metástasis macroscópicas y se llevó a cabo el recuento de
las mismas. Se observaron metástasis pulmonares en el 58% (29/50) de los
animales con tumores en franco crecimiento. Se determinó la concentración
de IL séricas de 28 individuos: 11 con metástasis (CM) y 17 sin metástasis
(SM). Se observaron diferencias estadísticamente significativas (prueba t de
Student para datos independientes) en todos los casos. Los individuos CM
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pulmonares presentaron menor nivel sérico (promedio ± error estándar) de
IL-2 (SM: 2,264±0,3959; CM: 1,364±0,0990) y de IL-10 (SM: 29,97±2,913;
CM: 12,42±0,963) y mayores niveles de IL-4 (SM: 42,97±6,023; CM:
167,11±1,083) e IFN-γ (SM: 104,6±27,1; CM: 187,5±5,28). El análisis
conjunto de las cuatro IL con la técnica multivariada de componentes
principales permitió generar cuatro componentes, la primera de las cuales
(PC1) explicó prácticamente la totalidad de la variancia observada (96,64%)
y presentó una correlación positiva con los valores de IFN-γ (r=0,999;
P<0,0001) e IL-4 (r=0,831; P<0,0001), en menor medida con IL-2 (r=0,478:
P=0,01) y no estuvo asociada con los niveles de IL-10 (r=-0,001; P = 0,996).
La segunda componente (PC2) explicó el 2,34% de la variancia y se asoció
en forma significativa principalmente con el nivel sérico de IL-10 (r=0,838;
P<0,0001), en menor medida con IL-2 (asociación positiva: r=0,553;
P=0,002) e IL-4 (asociación negativa: r= -0,463; P=0,013) y no mostró
asociación con IFN-γ (r=0,022; P=0,914). La representación conjunta de los
valores de ambas componentes en un sistema cartesiano ortogonal permitió
ubicar en promedio a los individuos con metástasis en el Cuadrante IV
correspondiente a valores positivos de PC1 y negativos de PC2 y a aquellos
sin metástasis en el Cuadrante II (valores negativos de PC1 y positivos de
PC2) poniendo en evidencia un comportamiento antagónico de ambos
grupos respecto del perfil de estas cuatro citoquinas. Se observó además,
una muy baja dispersión de los valores en los individuos con metástasis que
aparecieron fuertemente agrupados en el Cuadrante IV, mientras que los de
aquellos sin metástasis, si bien se ubicaron en promedio en el Cuadrante II,
se encontraron repartidos en los Cuadrantes I, II y III. Se concluye que la
presencia de metástasis estaría asociada básicamente a mayores valores
de IFN-γ y menores valores de IL-10. Este resultado concuerda con
resultados previos obtenidos en este modelo experimental en donde se vio
que IFN-γ favorecería el crecimiento tumoral y que, por otro lado, IL-10
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participaría en la respuesta inmune antitumoral . Por lo tanto, el desarrollo
de metástasis del adenocarcinoma de mama M-406 no estaría asociado con
una respuesta típica Th1/Th2.
BIBLIOGRAFÍA
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