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2013-2014
BACTOFUS
ENSAYO TAVAN
PRUEBA DE EFICACIA DEL PRODUCTO BACTOFUS EN EL CONTROL DE
Botryosphaeria sp., Pseudomona syringae pv. syringae Y Botrytis cinerea
EN ARÁNDANOS (Vaccinium corymbosum) cv O’NEAL.
ÍNDICE
PRUEBA DE EFICACIA DEL PRODUCTO BACTOFUS EN EL CONTROL DE BOTRYOSPHAERIA SP.,
PSEUDOMONA SYRINGAE PV. SYRINGAE Y BOTRYTIS CINEREA EN ARÁNDANOS (VACCINIUM
CORYMBOSUM) CV O’NEAL. ........................................................................................................................ 3
RESUMEN ....................................................................................................................................................... 3
OBJETIVO ....................................................................................................................................................... 4
ANTECEDENTES GENERALES .......................................................................................................................... 5
Lugar ......................................................................................................................................................... 5
Datos del cultivo ....................................................................................................................................... 5
Datos meteorológicos .............................................................................................................................. 7
Datos meteorológicos .............................................................................................................................. 7
MATERIALES Y MÉTODOS .............................................................................................................................. 9
Evaluaciones ........................................................................................................................................... 11
Pinta ..................................................................................................................................................................... 11
Cosecha ................................................................................................................................................................ 11
Calidad de la fruta .............................................................................................................................................. 11
POSCOSECHA .................................................................................................................................................. 11
Diseño experimental y análisis estadístico .......................................................................................... 12
RESULTADOS ................................................................................................................................................ 13
Pinta ..................................................................................................................................................................... 13
Cosecha ................................................................................................................................................................ 14
Poscosecha .......................................................................................................................................................... 16
CONCLUSIONES ........................................................................................................................................ 19
BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................................................................... 20
ANEXO ........................................................................................................................................................ 21
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2
PRUEBA DE EFICACIA DEL PRODUCTO BACTOFUS EN EL CONTROL DE
Botryosphaeria sp., Pseudomona syringae pv. syringae y Botrytis cinerea
EN ARÁNDANOS (Vaccinium corymbosum) cv O’NEAL.
RESUMEN
A fin de evaluar la eficacia del producto Bactofus sobre el control del hongo de la madera
Botrysphaeria sp. y cáncer bacterial causado por la bacteria Pseudomona syringae pv.
syringae, se emplazó un estudio en un huerto de arándanos con sintomatología de cáncer
bacterial ubicado en la comuna de Chimbarongo (71°0'46.61"O– 34°43'23.27"S), VI Región,
Chile.
Se utilizaron plantas de arándanos (Vaccinium corymbosum) cv. O’Neal, plantadas el año
2006 en un marco de plantación de 2,0 x 0,7 m y conducidos bajo el sistema arbustivo. Este
ensayo se llevó a cabo desde el día 07 de Noviembre de 2013 hasta el día 06 de Diciembre de
2013.
A fin de cumplir con el objetivo planteado, se establecieron 3 tratamientos, constituidos por
cuatro repeticiones: (T0) control sin aplicación; (T1) tres aplicaciones de Bactofus a razón de
416 cc/hl; y (T2) una aplicación DM-31, a razón de 500 cc/hl y dos aplicaciones de Teldor 50%
WP, a razón de 100 cc/hl. Las variables evaluadas por tratamiento fueron: (a) identificación
de la presencia de patógenos en el sector del ensayo previo al inicio de las aplicaciones de
precosecha contempladas en el ensayo, mediante análisis fitopatológico in vitro; (b)
identificación in vitro, de la presencia de fitopatógenos tales como Pseudomona syringae pv.
syringae y Botryophaeria sp., en plantas completas previo a la cosecha; (c) parámetros de
calidad de la fruta al momento de cosecha como firmeza, concentración de sólidos solubles y
calibre; y, (d) porcentaje de frutos dañados por los diferentes patógenos evaluados a los 15 y
30 días de almacenamiento en atmosfera regular (± 0 °C) y mantenido unos días a
temperatura ambiente.
El sector del huerto seleccionado para el ensayo fue homogéneo y al analizar las muestras, in
vitro, no presentó desarrollo de Pseudomona syringae pv. syringae y Botryophaeria sp. En las
evaluaciones realizadas previo a cosecha se identificó a nivel in vitro la presencia de
Botryosphaeria sp. A cosecha, no se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas
entre los tratamientos para los parámetros de calidad evaluados. Sin embargo, durante
poscosecha los programas fúngicos correspondientes al tratamiento 1 (Bactofus) y al
tratamiento 2 (campo: una aplicaciones de DM-31 y dos aplicaciones de Teldor 50% WP)
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tuvieron un control efectivo sobre Botrytis cinerea, que les permitió diferenciarse
estadísticamente al tratamiento 0 correspondiente al testigo absoluto del ensayo.
OBJETIVO
Evaluar el efecto del productos Bactofus representados por la empresa Tavan ® en el control
de Botryosphaeria sp., Pseudomona syringae pv. syringae y Botrytis cinerea en arándanos
(Vaccinium corymbosum) cv O’Neal.
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ANTECEDENTES GENERALES
Lugar
El ensayo se realizó en un huerto ubicado en la comuna de Chimbarongo (71°0'46.61"O–
34°43'23.27"S), VI Región, Chile.
Datos del cultivo
Nombre científico
Variedad utilizada
Año de plantación
Distancia de plantación
Sistema de conducción
Duración del ensayo
Vaccinium corymbosum L.
O´Neal
2006
2,0 m x 0,7 m
Arbustivo
07 de Noviembre 2013 – 06 de Diciembre 2013
Figura 1. Fotografía representativa del sector del ensayo en precosecha.
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Figura 2. Fotografía representativa de plantas con muertas y sintomatología de Pseudomona syringae pv.
syringae en plantas de arándanos del ensayo.
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Datos meteorológicos
Todos los datos climáticos fueron obtenidos de una estación meteorológica ubicada en el Liceo
Agrícola El Carmen en la comuna de San Fernando, cercana al lugar donde el ensayo fue
emplazado. El Cuadro 1 y las Figuras 3-4 muestran el registro de las temperaturas mínimas y
máximas y las precipitaciones durante el periodo de duración del ensayo.
Cuadro 1. Media aritmética mensual de temperatura mínima, temperatura máxima y oscilación térmica y
precipitación acumulada mensual durante el periodo de ensayo.
Temperatura
Mes
Máxima
Mínima
Precipitación
Oscilación
--------------------------------------°C-----------------------------------------------
Septiembre
Octubre
Noviembre
Diciembre
18,84
24,09
28,72
31,60
1,82
7,13
7,94
8,32
mm
9,85
14,96
17,80
19,51
1,30
1,90
0,50
0,20
Cuadro 2. Registro de eventos de helada previo al periodo de ensayo: fecha de ocurrencia; temperatura
mínima, y; duración.
T°
Duración
------------------------°C-------------------
Horas
17-09-2013
-2,14
23-09-2013
-0,19
28-09-2013
-0,48
29-09-2013
-1,36
-
Fecha
Cuadro 3. Registro de las temperaturas máximas, mínimas y la oscilación de éstas, durante los días en que se
efectuaron las aplicaciones del ensayo.
Mes
Temperaturas en el día de las Aplicaciones
Máxima
Mínima Oscilación
--------------------------------------°C-----------------------------------------------
08-11-2013
28,25
7,173
16,58
21-11-2013
11-12-2013
34,75
9,38
21,77
27,79
7,421
17,89
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Cosecha
Figura 3. Media mensual de temperatura máxima, mínima y oscilación térmica para el periodo de estudio.
Figura 4. Precipitación acumulada mensual para el periodo de estudio.
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MATERIALES Y MÉTODOS
El ensayo estuvo constituido por tres tratamientos compuestos por cuatro repeticiones cada uno,
estableciéndose todas las repeticiones dentro de dos hileras del huerto. Cada repetición constó de
25 plantas, las cuales fueron aplicadas en su totalidad, pero evaluadas solo las 5 centrales, dejando
cinco plantas de borde (aplicadas) entre repeticiones. El detalle de cada uno de los tratamientos se
presenta en el Cuadro 4.
Cuadro 4. Descripción de los tratamientos realizados.
Tratamiento
T0
T1
T2
Producto
-
Bactofus
DM-31
Teldor 50% WP
A definir
(Testigo campo)
Dosis
Dosis
Mojamiento
-cc o
g/hl-
log
/ha
----l/ha----
416
500
100
-
2,5
0,5
0,5
-
500
500
N° de
aplicaciones
Momento de
aplicación
Fecha de
aplicación
-
-
-
30 DAC
08 nov 20013
21 DAC
21 nov 2013
Poscosecha
11 dic 2013
Crecimiento
de Brotes
septiembre
2014
20 DDA crec.
brotes
33 DAC
octubre 2014
5
1
+
2
+
-
21 DAC
Poscosecha
08 nov 20013
21 nov 2013
11 dic 2013
Crecimiento
de Brotes
20 DDA crec.
brotes
septiembre
2014
octubre 2014
Las aplicaciones fueron realizadas mediante el empleo de una motobomba conectada a un pitón
con boquilla que, a la presión utilizada, permitía un caudal de 1,6 litros por minuto. Las
dosificaciones fueron llevadas a litros a aplicar por planta, en base al marco de plantación dado, y
fueron realizadas buscando un mojamiento equivalente a 500 l/ha.
El ensayo utilizó una superficie total de 420 m2 en los cuales se sortearon los tratamientos en un
diseño completamente aleatorizado.
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Cuadro 5. Descripción de unidades experimentales evaluadas.
Número de tratamientos
3
Repeticiones
4
Número de árboles por repetición
25
Figura 3. Arándanos con desarrollo miceliar de Botrytis cinerea, observados durante las evaluaciones realizadas
en poscosecha.
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Evaluaciones
Pinta
Identificación e incidencia: 30 días previos a cosecha
PREVIO A LAS APLICACIONES
Previo a las aplicaciones correspondientes a precosecha, se tomaron muestras de 4 ramillas por
repetición, cada ramilla tenía al menos 10 frutos. Estas ramillas con frutos fueron enviados a
laboratorio para evaluar la incidencia in vitro de Botryosphaeria sp. y Pseudomona syringae pv.
syringae.
Cosecha
Previo a comenzar la cosecha, se tomó una muestra correspondiente a una planta completa de
arándanos por tratamiento, con sintomatología de muerte parcial aérea, la cual fue llevada a
laboratorio para la identificación del patógeno o agente causal que estaba provocando la muerte
progresivas de las plantas.
La cosecha se realizó el día 06 de noviembre del 2013, oportunidad en la cual se cosecharon 2
cajas o clamshell (510 gramos) por repetición, eligiéndose frutos sanos y con criterio de cosecha
de mercado, que fueron embalados y almacenados en atmosfera regular a 0°C, embalándose 8
cajas por tratamiento.
Calidad de la fruta
En una muestra de 40 frutos de las plantas centrales de cada unidad experimental se medió: Peso
de fruto, mediante una balanza digital, expresando el resultado en gramos; calibre, según el
diámetro ecuatorial de cada fruto con un calibrador metálico, expresando el resultado en mm;
firmeza expresado en unidades de firmtech y la concentración de sólidos solubles expresado como
°Brix.
Poscosecha
Transcurrido 15 y 30 días de almacenamiento de la fruta del ensayo en atmosfera regular, se
procedió a dejarla a temperatura ambiente.
Inmediatamente después de retirar la fruta de la cámara de frío, se evaluó la condición en que se
encontraba, determinando si presentaban o no algún grado de pudriciones causada por algún
hongo. Los frutos que presentaron pudriciones, se clasificaron de acuerdo al agente causal
(Botrytis cinerea, Botryosphaeria sp., Mucor sp. y Penicillium sp.) y fueron pesados de acuerdo a
estas clasificaciones, sacando una relación entre el peso total de la caja y el peso de la fruta
clasificada con pudriciones para obtener el porcentaje de infección en poscosecha.
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Después de esta evaluación, la fruta se dejó a temperatura ambiente ± 20°C y se evaluó al 7°, y 9°
día, con los mismos parámetros anteriormente descritos.
Diseño experimental y análisis estadístico
Se utilizó un diseño completamente aleatorizado con 3 tratamientos y 4 repeticiones de 25 plantas
cada una, montado sobre dos hileras.
Para comparar los tratamientos, los resultados de las evaluaciones tanto de aquellos obtenidos
desde laboratorio como de terreno (evaluación in vitro, cosecha y poscosecha) fueron analizados
mediante análisis de la varianza (ANOVA) a un nivel de significancia del 95%. Cuando los supuestos
de homocedasticidad y normalidad de residuos estuvieron comprometidos para alguna variable,
transformaciones estadísticas fueron realizadas sobre los datos, sin embargo, si estos aún no
cumplían con los supuestos necesarios para el ANOVA, fue utilizado el análisis de la varianza no
paramétrico de Kruskal-Wallis.
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RESULTADOS
Pinta
Identificación e incidencia: 30 días previos a cosecha
En la carga inicial del predio antes de iniciar las aplicaciones correspondientes a precosecha, no se
detectó la presencia in vitro de Botryosphaeria sp. (Anexo 1) ni de Pseudomona syringae pv.
syringae (Cáncer bacterial; Anexo 2), en las muestras enviadas a laboratorio, para ninguno de los
tratamientos, aunque en evaluaciones realizadas in situ en el huerto, se pudo observar
sintomatología de cáncer bacterial (Guerrero y Lobos, 1989; Kałużna et al., 2013; Anexo 4 y 5) en
hojas (Figura 2 y 3).
Figura 4. Hojas de arándanos con sintomatología de Pseudomona syringae pv. syringae previo al inicio del
ensayo.
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Cosecha
En la muestra correspondiente a una planta completa de arándanos por tratamiento, se identificó
la presencia de Phytophthora sp. y Botryosphaeria sp. como patógeno causante de la muerte
progresiva de las plantas (Anexo 3), patógenos que anteriormente no pudieron ser identificados a
nivel in vitro.
La cosecha se realizó el día 06 de diciembre del 2013, momento en el cual se realizaron
evaluaciones de calidad de la fruta, con el fin de verificar si existía alguna diferencia en la fruta
entre los tratamientos, posterior a las aplicaciones.
Los parámetros de calidad, correspondiente a firmeza (Figura 5) y concentración de sólidos
solubles (Figura 6), no presentaron diferencias estadísticamente entre los tratamientos (pvalor>0,05), tal como se observa en el Cuadro 6.
Cuadro 6. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones
de los parámetros de calidad correspondientes a firmeza y concentración de sólidos solubles al momento
de cosechar.
TRATAMIENTO
0 Testigo Absoluto
1 Programa Tavan
2 Programa Campo
p-valor
Firmeza
lbs/pulg2
MEDIA
D.E
249,64
15,77
249,60
8,60
274,96
20,91
0,0804
Concentración de Sólidos Solubles
° Brix
MEDIA
D.E
8,72
1,51
8,49
2,81
8,93
0,86
0,9490
Figura 5. Gráfica que presenta la firmeza de la fruta al momento de cosecha, evaluada por
tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre tratamientos.
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Figura 6. Gráfica que presenta la concentración de sólidos solubles de la fruta al momento de cosecha,
evaluada por tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre
tratamientos.
La fruta cosechada se agrupó principalmente entre calibres menores a 15 hasta 16 (mm), no
presentándose diferencias estadísticas entre los tratamientos (p-valor >0,05) como se observa en
el cuadro 7 y figura 7.
Cuadro 7. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones
de calibre al momento de cosechar.
Tratamiento
Testigo Absoluto
Programa Tavan
Programa Campo
p-valor
< 15
15
16
Distribución de calibre
17
17,5
18
19
20
Media
D.E.
Media
D.E.
Media
D.E.
Media
D.E.
Media
D.E.
Media
D.E.
Media
D.E.
Media
D.E.
30,0
27,0
22,0
12,0
20,0
9,8
8,0
5,7
7,0
8,3
5,0
7,6
5,0
10,0
3,0
6,0
43,0
22,2
22,0
5,2
21,0
8,3
8,0
7,3
4,0
8,0
1,0
2,0
0,0
0,0
1,0
2,0
37,0
21,0
18,0
4,0
32,0
16,3
10,0
5,2
2,0
4,0
0,0
0,0
1,0
2,0
0,0
0,0
0,7446
0,7455*
0,3357
0,8688
0,6149
0,4909
0,4758
0,5217
*Prueba realizada mediante el análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis.
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Figura 7. Gráfica que presenta la concentración de sólidos solubles de la fruta al momento de cosecha,
evaluada por tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre
tratamientos.
Poscosecha
La fruta fue cosechada según los parámetros de calidad requeridos, y se mantuvo por 15 y 30 días
a 0 oC, con la finalidad de simular venta en un mercado exterior de destino y así poder evaluar el
desarrollo de los diferentes hongos.
Primera apertura: 15 días a 0 °C + días a T a ambiente
Al realizar una evaluación del daño por pudriciones acumulativas clasificadas por patógeno y a la
vez por tratamiento, se identificó la presencia solo de Botrytis cinerea, con una mayor incidencia
en el tratamiento testigo absoluto (13,35 ± 6%) y un menor porcentaje de incidencia en los
tratamientos 1 (4,72 ± 3%) y 2 (1,85 ± 1%) correspondientes al programa Tavan y al programa del
campo, respectivamente, diferenciándose éstos tratamientos del tratamiento testigo absoluto
(Cuadro 8).
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Cuadro 8. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones
de pudriciones presentes en poscosecha, luego de mantener la fruta por un periodo de 15 días a 0°C.
Poscosecha
(15 días en atmosfera regular)
Botrytis cinerea (%)
MEDIA
D.E
1
13,35 b
6,19
4,72 a
3,03
1,85 a
1,37
0,0079
TRATAMIENTO
0 Testigo Absoluto
1 Programa Tavan
2 Programa Campo
p-valor
1
Letras distintas indican que existen diferencias con significancia s estadística.
b
a
a
Figura 8. Gráfica que presenta la incidencia (%) de Botrytis cinerea, luego de haber mantenido la fruta
por 15 días en atmosfera regular (± 0°C), evaluada por tratamiento. Se encontraron diferencias de
significancia estadística entre tratamientos.
Segunda apertura: 30 días a 0 °C + días a T a ambiente
En las pudriciones acumulativas clasificadas por patógeno y a la vez por tratamiento, se identificó
la presencia de Botrytis cinerea, Botryosphaeria sp., Penicillium sp. y Mucor sp.
El principal patógeno que se desarrolló durante esta evaluación fue Penicillium sp., no
obteniéndose diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos, semejante a lo
ocurrido con Botrytis cinerea en que los tratamientos correspondientes al programa Tavan (3,6 ±
4%) y al programa del campo (2,7 ±4%) tuvieron una menor incidencia de este patógeno con
respecto al tratamiento testigo absoluto (9,7 ±5%), sin embargo estas diferencias numéricas no
fueron estadísticamente significativas entre los tratamientos (Cuadro 9, Figura 9).
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Cuadro 9. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones
de pudriciones presentes en poscosecha, luego de mantener la fruta por un periodo de 30 días a 0°C.
Poscosecha
(30 días en atmosfera regular)
Porcentaje acumulado de patógenos
TRATAMIENTO
Botrytis cinerea
Botryosphaeria sp. Penicillium sp.
MEDIA
D.E
MEDIA
D.E
MEDIA
D.E
0,62
0,86
8,84
5,73
9,67
5,41
0 Testigo Absoluto
1,30
1,89
9,32
2,89
3,64
3,57
1 Programa Tavan
0,63
0,48
7,58
6,70
2,69
3,72
2 Programa Campo
p-valor
0,6806
0,8946
0,0957
Mucor sp.
MEDIA
D.E
0,08
0,15
0,11
0,23
0,00
0,00
0,6011
*Prueba realizada mediante el análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis.
Figura 9. Gráfica que presenta la incidencia (%) de Botrytis cinerea, Penicillium sp., Botryosphaeria sp.,
y Mucor sp. luego de haber mantenido la fruta por 30 días en atmosfera regular (± 0°C), evaluada por
tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre tratamientos.
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CONCLUSIONES
Según los resultados obtenidos en las condiciones del presente ensayo se puede concluir que:
 El huerto seleccionado presentaba una condición homogénea al inicio del ensayo, analizándose
de forma in vitro, la presencia de bacterias u hongos fitopatógenos, no detectándose la
presencia de Pseudomona syringae pv. syringae ni de Botryosphaeria sp.
 Previo a cosecha, en plantas evaluadas in vitro no se detectó la presencia de la bacteria
Pseudomona syringae pv. Syringae, pero sí de los hongos Botryosphaeria sp. y Phytophthora sp.
 Los parámetros de calidad evaluados a cosecha, tales como firmeza y concentración de sólidos
solubles, junto con la evaluación de la distribución de los calibres de la fruta cosechada, no
presentaron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos.
 Durante la poscosecha, se pudo observar un efecto de control, estadísticamente significativos,
de los tratamientos 1, correspondiente al programa Tavan (Bactofus) y el tratamiento 2,
correspondiente programa del campo, en la disminución de la incidencia de Botrytis cinerea en
frutos de arándanos luego de mantener la fruta por 15 días en atmosfera regular (±0°C).
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BIBLIOGRAFÍA
Guerrero, J. y W. Lobos. 1989. Pseudomona syringae en arándanos alto en el sur de Chile.
Agricultura técnica. 49(3): 224-227.
Kałużna M., J. Puławska, B. Meszka. 2013. A new bacterial disease on bluberry (Vaccinium
corymbosum) caused by Pseudomonas spp. Journal of plant protection research. 53(1): 32-36.
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ANEXO
Anexo 1. Informe fitopatológico emitido por un Laboratorio, de muestras de hojas y frutos
obtenidas de las plantas del ensayo antes de comenzar las aplicaciones de precosecha, con el
objetivo de evaluar Botryosphaeria sp.
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Anexo 2. Informe fitopatológico emitido por un Laboratorio, de muestras de hojas y frutos
obtenidas de las plantas del ensayo antes de comenzar las aplicaciones de precosecha, con el
objetivo de evaluar Pseudomona syringae pv. syringae.
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Anexo 3. Informe fitopatológico para identificación de patógenos asociados, emitido por un
Laboratorio, de muestras de una planta completa obtenidas desde el ensayo al momento de
cosecha.
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Anexo 4. Imagen obtenida desde el artículo escrito por Guerrero y Lobos (1989) en la revista
“Agricultura técnica” (para más información ver bibliografía).
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Anexo 5. Imagen obtenida desde el artículo escrito por Kałużna et al. (1989) en la revista “Journal
of plant protection research” (para más información ver bibliografía).
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