Bioseguridad en el Laboratorio

Bioseguridad básica en el
laboratorio.
(febrero 2014)
Antonio López Román ( [email protected] )
Bioseguridad en el Laboratorio
Objetivos
- Conceptos básicos de bioseguridad.
- Normativa aplicable.
- Identificación de las fuentes principales de riesgo.
(foco, medio ambiente, trabajador)
- Manejo seguro de agentes biológicos.
(Procedimientos, comunicaciones y planes, EPI’s, organización y normas básicas
de higiene personal, vacunas, campanas de seguridad biológica)
- Procedimientos de descontaminación.
- Gestión de residuos.
- Comportamiento ante una emergencia.
(derrames, cortes y/o pinchazos, contacto con SEPRUS)
- Resolución de dudas.
Bioseguridad en el Laboratorio
El 20 % de las infecciones que se producen en el
laboratorio se identifican como procedentes de
incidentes específicos.
El 70 % de las infecciones ocurridas en los
laboratorios las sufren personal científico.
El 98% de las infecciones adquiridas en el
laboratorio se localizan en instituciones de
investigación y diagnóstico
Bioseguridad en el Laboratorio
Peligro
Riesgo
Bioseguridad en el Laboratorio
Trabajo
Riesgos
Accidentes
Consecuencias
Bioseguridad en el Laboratorio
Trabajo
Prevención
Riesgos
Protección
Accidentes
Reparación
Consecuencias
Bioseguridad en el Laboratorio
Procedimientos de Control del Riesgo
Bioseguridad en el Laboratorio
X Exposición = Efectos adversos
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997 sobre la protección de los
trabajadores contra los riesgos relacionados
con la exposición a agentes biológicos
durante el trabajo
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Definiciones
Agentes biológicos
microorganismos con inclusión de los genéticamente modificados,
cultivos celulares y endoparásitos humanos susceptibles de originar
cualquier infección, alergia o toxicidad.
Microorganismo
toda entidad microbiológica celular o no capaz de reproducirse o
transferir material genético.
Cultivo celular
resultado del crecimiento ‘in vitro’ de células obtenidas de
organismos multicelulaes.
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Ejemplos
Ejemplos de Agentes biológicos
bacterias hongos, virus, rickettsias, clamidias, endoparásitos
humanos, productos de recombinación, cultivos celulares humanos o de animales, especialmente de primates, priones..
Ejemplos de toxinas
micotoxinas, endotoxinas, ergosterol, 1,3-glucanos
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Clasificación
Grupo 1 : poco probable que cause enfermedad en en hombre.
Grupo 2 : agente que puede causar enfermedad en el hombre y
suponer un peligro para los trabajadores. Poco probable que se
propague y existe profilaxis.
Grupo 3 : enfermedad grave hombre, serio peligro
trabajajdores. Riesgo de propagación y existe profilaxis.
Grupo 4 : enfermedad grave hombre, serio peligro
trabajajdores. Riesgo de propagación y no existe profilaxis.
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Ejemplos
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997.Niveles de contención
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Identificación y Evaluación de los
riesgos
- proceso destinado a identificar y estimar los riesgos con objeto de
adoptar medidas para su eliminación o minimización.
- La evaluación es un medio y no un fin en sí misma.
- proceso dinámico.
- existen diferentes metodologías.
- debe ser periódica.
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Evaluación inicial. Preguntas (agente).
- ¿Cual es el agente biológico?
- ¿Se encuentra clasificado según la normativa?
- ¿Cual es el nivel de seguridad que debemos adoptar?
- ¿Cual es el modo de transmisión?
- ¿Cual es la dosis de infección?
- ¿Es un agente infeccioso o produce toxinas?
- ¿Puede afectar a los animales o plantas?
- ¿trabajamos con vectores o con muestras ‘in vitro’?
- ¿Se puede transmitir a través el aire?
...
Bioseguridad en el Laboratorio
Evaluación inicial. Preguntas (proceso).
- ¿Tenemos protocolos de actuación?
- ¿Está preparado el laboratorio?
- ¿Las muestras se procesan continuamente o por
temporadas?
- ¿Qué volumen de muestra se procesará?
- ¿Se producen aerosoles durante la manipulación de
las muestras?
- ¿Qué tipo de agentes desinfectantes debemos usar?
...
Bioseguridad en el Laboratorio
Evaluación inicial. Preguntas (medio ambiente).
- ¿Cuales son las condiciones microclimáticas?
- ¿La liberación de las muestras al ambiente pueden
generar un problema en el entorno?
- ¿Cómo se gestionan los residuos procedentes del
proceso?
- ¿cómo se puede desinfectar el entorno?
...
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Medidas de higiene personal
-No comer, beber o fumar.
- Prendas de protección adecuadas.
- Antisépticos y limpieza ocular.
- Espacio destinado guardar EPI’s.
- Lavado cuidadoso de la ropa.
- Definir procedimientos de obtención
y manipulación de muestras.
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Buenas prácticas laboratorio (1)
- No pipeterar con la boca.
- Pelo recogido.
- Las manos deben lavarse después de quitarse los
guantes.
- Las superficies de trabajo deben descontaminarse al
finalizar la jornada de trabajo.
- todos los procedimientos de trabajo deberán
orientarse hacia la minimización de la producción de
aerosoles.
- todas los líquidos o sólidos deben esterilizarse antes
de su eliminación como residuo mediante autoclavado.
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Buenas prácticas laboratorio (2)
- el uso de objetos cortantes o punzantes debe limitarse
al mínimo y lo estrictamente imprescindible. las jeringas
y agujas pueden producir una autoinoculación de
agentes y además son una fuente de generación de
aerosoles muy grande.
- los accidentes deben documentarse.
- los trabajadores deben inmunizarse si es posible.
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Buenas prácticas laboratorio. Resumen
EL DESORDEN Y LA
FALTA DE LIMPIEZA ES
INCOMPATIBLE CON LA
BIOSEGURIDAD
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Reducción de los riesgos
- sustitución de agentes biológicos.
- establecimiento de procedimientos de trabajo adecuados.
- reducción de trabajadores expuestos.
- medidas seguras para manipulación y transporte de agentes
biológicos
- protección colectiva y/o EPI’s
- gestión de residuos.
- adopción de medidas higienicas que eviten su dispersión
- utilización de señal de peligro biológico
- establecimiento de planes de emergencia
- verificación de la presencia del agente fuera del foco primario
- evaluación del riesgo de los trabajadores expuestos.
Bioseguridad en el Laboratorio
RD 664/1997. Plan de seguridad frente a la
exposición a agentes biológicos
- Evaluación de riesgos biológicos.
- Medidas aplicables en caso de exposición accidental y
descontaminación.
- Tratamiento médico de emergencia para las personas expuestas y
lesionadas.
- Vigilancia médica de las personas expuestas.
- Identificación precisa de agentes biológicos ya sean tóxicos o
infecciosos.
- Localización de zonas de riesgo elevado.
- Identificación del personal con riesgo.
- Identificación de recursos humanos y de sus responsabilidades
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Tipos de contaminantes
- Físicos: ruido, radiaciones electromagnéticas ionizantes y
no ionizantes...
- Químicos: ácidos fuertes, disolventes orgánicos...
- Biológicos: microorganismos infecciosos o que producen
toxinas, endoparásitos...
Bioseguridad en el Laboratorio
Tamaños referencia
óvulo humano: 150 micras.
límite visión humana 50 micras
globulo rojo: 7 micras
bacteria: E. coli 0.5 x 2 micras
virus hepatitis C: 50 nm, 0.05 micras
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Aerosoles
- Los aerosoles son partículas sólidas o liquidas
dispersas en un medio gaseoso.
- No forman una mezcla perfecta con el gas, se
mantienen en suspensión durante un tiempo
determinado y luego se depositan en la superficie.
Bioseguridad en el Laboratorio
Vías de entrada. Producción de aerosoles
Procedimientos que producen aerosoles en el
laboratorio.
centrifugado, agitación, pulverización, pipetaedo,
molienda, homogeneizado de materiales, manejo de
jeringas...
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Vías de entrada de los agentes biológicos
- Ingestión: alimentos, mala higiene personal, malas
prácticas en el laboratorio...
- Dérmica: contacto con la piel desprotegida con
microlesiones.
- Parenteral: cortes, pinchazos.
- Conjuntiva: proyección aerosoles y gotas.
- Inhalación:
- particulas > 5 micras
- particulas < 5 micras
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Vías de transmisión
- materiales y productos contaminados.
- animales (zoonosis).
- aire.
- hombre.
- agua.
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Trabajo con animales
Se llama zoonosis a la transmisión de
enfermedades de origen biológico mediado por
animales, por ejemplo la brucelosis o fiebre de
Malta
Bioseguridad en el Laboratorio
Trabajo con líneas celulares
En principio son poco peligrosas, pero pueden ser
un fuente de incubación de enfermedades si las
líneas son de humanos o primates.
Si los cultivos están infectados con algún agente
biológico deberá adoptarse el nivel de contención
adecuado al agente.
Bioseguridad en el Laboratorio
Trabajo con líneas celulares
Bioseguridad en el Laboratorio
Agentes biológicos.
cabinas de seguridad biológica
Clase I
Clase II
Clase III
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Agentes biológicos.
cabinas de seguridad biológica
Bioseguridad en el Laboratorio
Agentes biológicos.
Equipos de protección personal
-Un Epi (Equipo de protección personal) es una
barrera física o fisico-química que protege al
trabajador de la exposición a los agentes biológicos.
- debe poder proteger cualquier parte del cuerpo
potencialmente expuesta.
- debe usarse conjuntamente con otras medidas
preventivas.
Bioseguridad en el Laboratorio
Agentes biológicos. Epi’s
- los agentes biológicos se comportan como una
partícula.
- Los equipos de protección deben ser desechables.
- Se deben proteger todas las vías potenciales de
entrada al organismo.
- piel: guantes.
- ojos: gafas u otra protección facial.
- cuerpo: bata.
Bioseguridad en el Laboratorio
Agentes biológicos. Epi’s
- se suele confundir los equipos destinados a
proteger al paciente (ej. mascarillas quirúrgicas)
frente a los EPI’s destinados a proteger al trabajador.
- No existen EPI’s específicamente diseñados para
agentes biológicos, sino que son adecuados para su
uso.
- Se considera que un buen EPI respiratorio una
mascarilla autofiltrante para partículas tipo P3.
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Agentes biológicos. Epi’s
- un buen guante contra productos químicos se
considera que es bueno contra agentes biológicos.
- cualquier equipo utilizado incorrectamente altera su
valor de protección.
Bioseguridad en el Laboratorio
Protección contra agentes biológicos.
Clasificación en función de su uso
- Desechables: Guantes de un solo uso.
- Reutilizables de asignación personal: Gafas,
mascarillas autofiltrantes y batas.
- Reutilizables e intercambiables con control
general: Equipos de uso específico y esporádico. Su
intercambio no representa un riesgo
para la salud: delantales, mandiles, pantallas faciales.
- Reutilizables e intercambiables con control
específico: Equipos de uso específico y esporádico. Su
intercambio puede representar un riesgo para la salud:
máscaras, equipos autónomos y semiautónomos.
Bioseguridad en el Laboratorio
Esterilización.
El mejor sistema para eliminar el peligro
biológico es usar la esterilización en húmedo
bajo presión, autoclave.
Los procedimientos químicos con más
complicados de ejecutar y es más dificil de
comprobar su eficacia. Hay que usarlos
cuando no se puede autoclavar.
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Agentes desinfectantes
Desinfectante
Indicaciones
Ventajas
Inconvenientes
Alcohol
isopropílico 70 %
Limpieza piel
limpieza instrumental
Fácil de conseguir
Se evapora facilmente
Por debajo de 50 % no es
efectivo
Hipoclorito sódico
Bueno para derrames de
Barato
líquidos contaminados.
Fácil de conseguir.
Bueno contra bacterias, virus Penetra bien.
y hongos.
Corrosivo para materiales.
Menos efectivo si hay
materia orgánica.
Vapores irritantes.
Peróxido de
hidrógeno
Destruye bacterias, hongos y Fácil de conseguir.
virus, pero no esporas. 3-6
No deja residuo.
%.
En presencia de materia
orgánica pierde efecto. Es
muy oxidante.
Glutaraldehído
Buen bactericida, fungicida y
esporicida.
Elimina virus.
Mecanismo de acción
muy potente
Sustancia tóxica.
La materia orgánica baja
su efecto.
Formaldehído
Buen bactericida, fungicida y
esporicida.
Elimina virus.
Es un gas, se puede
vaporizar.
Mecanismo de acción
muy potente
Sustancia tóxica.
La materia orgánica baja
su efecto.
Bioseguridad en el Laboratorio
Fichas seguridad agentes infecciosos
Public Health Agency of Canada
http://www.phac-aspc.gc.ca/lab-bio/res/psds-ftss/index-eng.php
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames
- Planificación de la actuación ante una
emergencia con procedimientos concretos.
- Debe actuarse lo antes posible.
- Debe señalizarse la zona de emergencia.
- Los miembros del laboratorio deben
contribuir.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames dentro de una campana.
- Encender la campana.
- Ponerse guantes y bata.
- Preparar una disolución fresca de lejía 1:10.
- Cubrir toda la zona con papel absorbente y
pulverizar esta disolución en la zona afectada
dejando actuar 10-15 minutos.
- Recoger todo el líquido con papel absorbente.
- Limpiar bien todo con agua y jabón.
- Esterilizar en autoclave todo el material
desechado.
- Documentar el incidente.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames dentro de una centrífuga.
- esperar al menos 30 minutos antes de actuar para dejar que
los aerosoles se depositen en la superficie interior.
- abrir cuidadosamente con protección facial, ocular y nasal.
Guantes dobles porque es posible que haya tubos rotos.
- pulverizar con desinfectante la centrífuga (dependiendo del
tipo de agente liberado) y esperar un tiempo prudencial para
que actúe.
- recoger el líquido y desechar para autoclavar.
- limpiar todo con agua y jabón perfectamente.
- documentar el incidente.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Salpicadura de líquido contaminado.
- Eliminar la ropa contaminada y colocarla en
bolsa para esterilizar en autoclave.
- Lavar con agua y jabón la zona durante al menos
10-15 minutos para arrastrar los restos de material
infeccioso.
- Avisar al responsable del laboratorio.
- Acudir al médico por si hubiese algún tratamiento
para combatir la posible contaminación.
- Documentar el incidente.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrame en una zona abierta del laboratorio
- Si el agente se transmite por el aire aguante la
respiración y evacue el laboratorio.
- Espere a que se depositen los aerosoles
formados (20-30 minutos)
- Protéjase con EPI adecuado al agente.
- Descontamine la zona (nunca en solitario).
- Esterilice los residuos generados.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames en zona abierta del laboratorio.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames en zona abierta del laboratorio.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames en zona abierta del laboratorio.
Bioseguridad en el Laboratorio
Comportamiento ante una emergencia:
Derrames. Propuesta.
Una vez que se ha abordado el derrame:
- La actuación ante el derrame debe analizarse
para aprender de la experiencia.
¿qué fallos ha habido?
¿qué se puede mejorar?
- La comprobación de la eficacia de la
descontaminación se puede hacer tomando una
muestra de alguna zona afetada y haciendo un
cultivo, si se estima oportuno.
Bioseguridad en el Laboratorio
Residuos biológicos
Residuos urbanos sanitarios:
restos de orina, de pequeñas intervenciones quirúrgicas, bolsas
de orina vacías y empapaderas, recipientes desechables de
aspiración vacías, gasas, sondas, pañales y, en general, todos
aquellos residuos cuya recogida y eliminación no ha de ser
objeto de requisitos especiales para prevenir infecciones.
Bioseguridad en el Laboratorio
Residuos biológicos
Residuos sanitarios peligrosos:
Residuos infecciosos.
Agujas y cualquier otro material punzante y/o cortante.
Cultivos y reservas de agentes infecciosos.
Residuos infecciosos de animales de experimentación.
Restos de vacunas.
Sangre y hemoderivados en forma líquida.
Residuos anatómicos no identificables.