Los linfocitos B no sólo producen anticuerpos – Dra. Adriana Gruppi

Los linfocitos B no solo producen anticuerpos
CENTRO DE INVESTIGACIONES EN BIOQUÍMICA CLÍNICA E INMUNOLOGÍA (CONICET) - DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA, - FACULTAD DE CIENCIAS
QUÍMICAS – UNIVERSIDAD NACIONAL DE CORDOBA.
Los linfocitos B: UNICA CELULA productora de inmunoglobulinas
IgM
IgD
Linfocitos B
Secretante de Acs
Subpoblaciones de Linfocitos B
Marcadores de
superficie
celular.
FENOTIPO
Frecuencia en
la población
total de células
de bazo
Los linfocitos B pueden actuar como células presentadoras de antígeno
o como regulatorias
IgM
IgD
Linfocitos B
Secretantes de Acs
Células presentadoras de
antígeno
Células regulatorias
La eliminación de los linfocitos B modifica el perfil o respuesta de los
linfocitos T
Células T
Rol de los linfocitos B en la infección con Trypanosoma cruzi
ENFERMEDAD DE CHAGAS
Trypanosomiasis americana, trypanosomiasis de Sud-América
Enfermedad parasitaria descubierta por Carlos Chagas (1909)
Agente causal: Trypanosoma cruzi
Source: CDC (Center for disease control
and prevention)
Ciclo biológico de Trypanosoma cruzi
Extracted from Expert Reviews in Molecular medicine. 2002
Patología en la infección con T. cruzi.
La patología humana es diversa
y depende tanto de la biología
del parásito como de la
respuesta del hospedador.
La fase crónica de la infección
frecuentemente involucra
lesiones inflamatorias de ¨largo
tiempo¨ y desórdenes en el
sistema inmune, con una
patología progresiva de corazón,
esófago y colon.
La infección no resuelta y la
inflamación exhacerbada
contribuyen a la enfermedad
crónica
Interleuquina 17 y su participación en la patología chagásica
IL-17
La infección con T. cruzi genera linfocitos CD19+ B220lo IL-17+
C57BL6
Tinción de superficie e intracelular
B220
Bazo
CD3
CD19
IL-17
Células CD19+B220+ de ratones infectados con T. cruzi producen IL-17+
Infección
intraperitoneal con
10.000 tripomastigotes
cepa “Y”
CD11b
B220
CD3
CD19
PURIFICACION POR CELL SORTING
9-10 días
post-infección
Bazo
Cultivo
5hs 37ºC
PMA – Ionomicina
Obtención de leucocitos
Purificación de células por ¨cell sorting¨
Tubo Fotomultiplicador
Verde
Detectores de
Fluorescencia
Tubo Fotomultiplicador Rojo
Dispersador del rayo
Compl. citoplasm.
(SSC)
Tamaño celular
(FSC)
Los linfocitos B activados y las células plasmáticas, pero no las células
B de centros germinales, producen IL-17
El desarrollo de células B220+ IL-17+ fue restaurado en ratones uMT
que recibieron linfocitos B de ratones WT.
Ratones uMT
B220
B220
CD19
CD19
B220
CD19
Los resultados aportan la primera información de que los Linfocitos B
son capaces de secretar IL-17.
Además tenemos datos, que durante la infección con T. cruzi, los
linfocitos B son la principal fuente de IL-17, superando a las Th17.
IL-17
¿Cuales son las señales que conducen a la producción de
IL-17 por parte de los linfocitos B?
¿Cual es la función de las células IL-17+B 220+ en la infección con
T. cruzi?
La generación de Linfocitos B IL-17+ no requiere de señales dadas por
IL-6, IL-23, CD40.
IL-23 R nock out – No hay
señales vía IL-23
Idem IL-6 y CD40 nock out
Los linfocitos B productores de IL-17 se generan en respuesta a la
exposición con el T cruzi.
+
IL-17 A and F by ELISA
La enzima trans-sialidasa (activa) del T. cruzi dispara la producción de
IL-17 en linfocitos B.
El T. cruzi dispara la
producción de IL-17
en linfocitos B de
origen humano vía
CD45 y Btk/tec
¿Cual es el rol de los linfocitos B productores de IL-17 en la
infección con T. cruzi?
Los ratones deficientes en linfocitos B, infectados con T. cruzi, tienen
menor sobrevida y pérdida de peso que los WT.
µMT
B6.129S2-Ighmtm1Cgn /J
% sobrevida
v
% pérdida de peso
v
Días post-infección
Los ratones deficientes en linfocitos B infectados con T. cruzi tienen un
alto porcentage de células IFNg+
v
v
Los ratones deficientes en linfocitos B infectados con T. tienen un alto
porcentage de células productoras de TNF
Linfocitos B maduros de ratones WT or IL-17KO
µMT
B6.129S2-Ighmtm1Cgn /J
Los linfocitos B productores de IL-17 controlan la infección con T. cruzi
Los linfocitos B productores de IL-17 controlan la inflamación de
ratones infectados con T. cruzi
Conclusiones
Gruppi´s lab:
Daniela Bermejo, M Carolina Amezcua Vesely, Melisa
Gorosito Serrán and Eva Acosta Rodriguez
Este trabajo fue realizado en colaboración con:
David J Rawlings and Mohamed Oukka – SCRI
(Seattle – USA) Shaun W Jackson, Akhilesh K. Singh,
Socheath Khim, Blythe D Sather.
Oscar Campetella and Juan Mucci – UNSAM
Financiamiento:
MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION
La producción de IL-17 no es afectada si los linfocitos B tienen una
especificidad restringida a un antígeno no parasitario
La producción de IL-17 es afectada en ausencia de Btk