LABORATORIOS CONDA, S

INSTRUCCIONES DE USO
Revisión 0 Mayo 2010
BASE DE CALDO TETRATIONATO SEGÚN MUELLER-KAUFFMANN
Base de Caldo Tetrationato según Mueller-Kaufman presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1130
USO PREVISTO
Base de Caldo Tetrationato es un medio de enriquecimiento selectivo para las especies de Salmonella a partir de
muestras fecales humanas.
FORMULA EN g/l
Tiosulfato Sódico
40.70
Peptona de Carne
4.50
Carbonato Cálcico
25.00
Extracto Levadura
1.80
Bilis de Buey
4.75
Extracto Carne
0.90
Cloruro Sódico
4.50
Final pH 7.6 ± 0.2 a 25ºC
PREPARACION
Base de Caldo Tetrationato según Mueller-Kauffmann presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1130
(Medio deshidratado)
Disolver 82 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar brevemente y enfriar rápidamente.
EVITAR SOBRECALENTAMIENTO. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Queda un sedimento de carbonato cálcico. Añadir
asépticamente 20 ml/litro de solución de yodo y yoduro potásico, 10 ml/litro de solución al 0.1% de verde brillante.
Distribuir en tubos o frascos repartiendo previamente de forma homogénea el precipitado que eventualmente hubiera
podido formarse. Una vez añadidas éstas sustancias no volver a calentar. Utilizar el medio el mismo día de la preparación.
Los tubos o frascos preparados deben almacenarse entre 2-8°C. El color del medio preparado es blanco leche.
El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar
el medio.
Solución Yodada
Yoduro potásico……………………………
25 g
Yodo……………………………………………
20 g
Agua destilada ……………………………….. 100 ml
Disolver el yoduro potasico en 5 ml de agua destilada , añadir el yodo y calentar cuidadosamente la solución hasta que
se disuelva completamente. Llevar a un volume final de 100 ml
Solución Verde brillante
Verde brillante ……………………………
0.1 g
Agua destilada ……………………………….. 100 ml
Añadir el verde brillante al agua destilada, agitar y calentar a 100ºC durante 30 minutos asegurando que se ha disuelto,
conserva en frascos topacio
PRINCIPIO Y APLICACION
BASE DE CALDO TETRATIONATO SEGÚN MUELLER-KAUFFMANN se utiliza para el aislamiento selectivo de Salmonella a
partir de muestras clínicas (heces)
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Kauffmann modifico la formula para incluir las sales de bilis y el verde brillante como agentes inhibidores de
microorganismos Gram-positivos. El tiosulfato sódico con el yodo forma tetrationato, inhibiendo coliformes y bacterias
intestinales. La descomposición acida del tetrationato produce acido sulfúrico que es neutralizado por el carbonato cálcico
y actua como buffer. Salmonella y Proteus no son inhibidas, reducen el tetrationato. La Peptona de carne y los extractos
de carne y levadura aportan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El Cloruro
sódico mantiene el balance osmótico.
TIPO DE MUESTRAS
Heces
La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en
Microbiología Clínica.
PROCEDIMIENTO
1.
2.
3.
4.
Inocular 10 gramos de muestra en 100 ml de medio. Agitar con fuerza e inmediatamente poner en un baño de
agua a 15°C durante 15 minutos.
Incubar a 42-43°C durante 6-24 hours
Subcultivar en el Agar SS (Cat.1064) o Agar Cromogenico Salmonella (Cat.1122)
Incubar a 35° ± 2°C durante 18-24 horas
5.
Lectura e interpretación de los resultados
CONTROL MICROBIOLOGICO
Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo, después de incubación a
temperatura de 42-43°C y observados después de 6-24 horas.
Microorganismos
Inoculo
Desarrollo (Recuperación)
6 horas
24 horas
Escherichia coli ATCC 25922
≈ 99%
< 30%
< 5%
Salmonella typhimurium ATCC 14028
≈ 1%
> 70%
> 95%
BIBLIOGRAFIA
Kauffmann, F. 1935. Weitere erfahrungen mit dem kombininierten anreicherungsverfahren fur Salmonella bazillen. Ztschr. F. Hyg. 117:
26-32.
A manual for recommended methods for the microbiological examination of poultry and poultry products. 1982.
Diagnostico in vitro
Solo para uso profesional
Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad
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ALMACENAMIENTO
Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación.
Utilizable hasta la fecha de caducidad.
25ºC
2ºC
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C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz
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