DR FUNDACIÓN PRODUCE MICHOACÁN A. C. INFORME TÉCNICO TITULO PROYECTO: MANEJO AGROECOLÓGICO DE LA MOSCA DEL VINAGRE (DROSOPHILA SUZUKI) DE LAS FRUTILLAS EN LAS ZONAS RESPONSABLE: DR. ANGEL REBOLLAR ALVITER INSTITUCIÓN EJECUTORA: UNIVERSIDAD AUTONOMA CHAPINGO PERIODO DE INFORME: ENERO-MARZO DEL 2014 FECHA DE ENVÍO: septiembre del 2014 “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. RESUMEN DE LO REALIZADO: Evaluación de modelos de trampas para captura de D. suzukii en parcelas experimentales Se montó un experimentos para evaluar 7 tipos de trampas para la captura de Drosophila suzukii en 2 parcelas en producción de zarzamora en Ziracuaretiro y frambuesa en los Reyes, Michoacán. Utilizando trampas de color rojo, morado, amarillo, transparente, y combinación de rojo y negro, todas conteniendo vinagre de manzana. Las mejores trampas se usarán para su validación en parcelas experimentales con enfoque biontensivo. Evaluación de incidencia de Drosophila suzukii en parcelas piloto Para determinar la relación entre número de adultos de Drosophila suzukii con el número de frutos infestados se realizaron colectas de frutos de zarzamora cada semana colectando 4 muestras de 30 frutos al azar en diferentes áreas de la parcela, para posteriormente lavar con alcohol al 70% e incubar por 10 a 15 días para poder evaluar la ausencia o presencia e identificar las especies emergidas. Detección e identificación de las especies de enemigos naturales asociados a larvas y pupas de D. suzukii. Se han establecido trampas para la captura de posibles parasitoides a pupas de D. suzukii en parcelas de zarzamora con manejo convencional y orgánico, y zonas boscosas, cada trampa contenía cierto número de pupas en frutos de zarzamora y dieta artificial, las cuales se exponían por un periodo de 2 a 4 días para su posterior revisión, las trampas consistieron en un envase de 200 ml sin tapa que se cubrió con una malla de 3 mm de calibre para evitar daño por aves u otros organismos. Posteriormente se colocaron frutos infestados en el las áreas boscosas como trampas centinelas para detectar posibles enemigos naturales de D. suzukii. Agentes causales de las enfermedades radicales y cánceres de tallos en zarzamora “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. y arándano. En relación a las actividades realizadas en el cultivo de arándano se han obtenido aislamientos (Neofusicocum parvum, Pestalotiopsis microspora y Phytophthora cinnamomi) a partir de los cuales se encuentran en proceso las pruebas de patogenicidad en plantas de arándano, logrando hasta la fecha concluir las pruebas en dos de los aislamientos. Para el cultivo de zarzamora a fin de conocer la etiología del marchitamiento se tomaron muestras de plantas sintomáticas se llevaron al laboratorio para su análisis. Se tomo tejido enfermo de raíz, corona y tallo. Se realizaron cortes de 0.5 cm aproximadamente, los cuales fueron sumergidos en una solución de hipoclorito de sodio al 1% durante un minuto y enjuagados 3 veces con agua destilada estéril. Posteriormente se pasaron a la campana de flujo laminar para su secado. Los pequeños trozos de tejido sintomático se sembraron en cajas Petri con medio PDA, para su posterior identificación morfológica y molecular. DESVIACIONES EN EL PERIODO: RESULTADOS ALCANZADOS EN EL PERIODO: Metas y Objetivos Alcanzados: Monitoreo la dinámica poblacional de D. suzukii en 3 ambientes de las principales zonas productoras de frutillas Captura en trampas de D. suzukii con la incidencia en frutos de zarzamora y frambuesa Dinámicas poblacionales en dos sistemas de manejo y conocer los factores que favorecen las diferencias en las mismas. “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. Contribución Técnica del Proyecto: El proyecto contribuye a la generación básica y aplicada para el establecimiento de estrategias de manejo integrado de la plaga. Entre estas, trampas para captura, enemigos naturales, esquemas de muestreo “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. Resultados/Productos del proyecto: Dinámica poblacional de Drosophila suzukii El monitoreo de la dinámica poblacional de D. suzukii se presenta por tipo de ambiente y monitoreo y por ruta (Los Reyes, Tacámbaro y Ziracuaretiro) como se observa en la figura 1. Parcelas comerciales de zarzamora. Los datos obtenidos indican que el número de capturas de D. suzukii en parcelas comerciales de zarzamora aumentó considerablemente de diciembre a febrero en Tacámbaro (Ruta 3) y de febrero a marzo 2014 en Ziracuaretiro (Hasta 7.9) y Los Reyes (Hasta 30.9) (Ruta 1 y 2 respectivamente) (Fig. 1A). Estos meses de MTS más altos también coinciden con el tiempo en que los productores dejaban de realizar labores de control en sus parcelas, ya sea porque tengan pocos frutos al final de la cosecha y la poca fruta cosechable no cubra el costo de una aplicación. Áreas marginales de cultivos de zarzamora. Por otro lado, se observa que la presencia de Drosophila suzukii es mayor en áreas marginales de las rutas 1 y 2 de Los Reyes y Ziracuaretiro (Fig. 1B), en comparación con los adultos de D. suzukii capturados en parcelas de zarzamora. Esto podría deberse a que en esta zonas normalmente no se realiza algún tipo de aplicación de productos para el control de la mosca suzukii y esta plaga puede encontrarse resguardada en estas zonas de reserva reproduciéndose en frutos como guayaba, ciruelos, nanches, etc. mientras se realizan aplicaciones de insecticidas en las parcelas comerciales o mientras no haya producción en las parcelas comerciales. Por tal motivo es recomendable instalar trampas en los bordos de las parcelas y realizar aplicaciones en los bordes de los cultivos con una mezcla de insecticida y atrayente a D. suzukii. Zonas boscosas. La Figura 1C corresponde a las zona boscosas. En esta zona se observa que el número de adultos de D. suzukii fue menor en comparación al de los sitios de zarzamora cultivada y áreas marginales. “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. Figura 1. Medias de moscas por trampa por semana (MTS) de Drosophila suzukii en 3 ambientes. A) parcelas de zarzamora tupi, B) áreas marginales del cultivo y C) bosque (3). En 3 rutas de monitoreo donde: Ruta 1= Los Reyes; Ruta 2= Ziracuaretiro; Ruta 3= Tacámbaro. Evaluación de modelos de trampas en parcelas experimentales Se han montado 2 experimentos para la validación de trampas en parcelas comerciales de zarzamoras del municipio de Ziracuaretiro y en frambuesa en el municipio de Los Reyes. Se tienen datos de la primera evaluación de capturas, sin embargo se realizaran hasta 5 evaluaciones en diferentes fechas. Evaluación de incidencia de Drosophila suzukii en parcelas experimentales Los resultados preliminares indican una incidencia del 13% D. suzukii en la parcela de frambuesa en Los Reyes, mientras que para la parcela de zarzamora en Caracha no se observó algún fruto dañado en el periodo reportado. Detección e identificación de las especies de enemigos naturales asociados a “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. larvas y pupas de D. suzukii En la primera fase de evaluación en trampas que se colocaron en el municipio de Ziracuaretiro no se logró encontrar algún parasitoide, mientras que en una segunda etapa con trampas que se colocaron en el mismo municipio con algunas adecuaciones se está en proceso de incubación para detectar algún parasitoide. Agentes causales de las enfermedades radicales y cánceres de tallos en zarzamora y arándano. Los síntomas observados para Pestalotiopsis microspora en plantas de arándano que se podaron en la punta, presentaron manchas que van desde un color marrón claro tornándose a un marrón más obscuro, que iba desde la parte podada hacia abajo y de las otras 10 plantas con heridas en el tallo presentaba una mancha color marrón creciendo en ambos lados de la herida estos síntomas son ocasionados por Pestalotiopsis microspora. Mientras que Neofusicocum parvum presentó manchas color marrón mientras que para los tallos con herida se formaron manchas café presentado una invaginación y los testigos no presentaron ningún síntoma por lo que con esto se cumplió con los postulados Koch. Para la técnica que no funcionó, se inició con una cepa de 7 días de crecimiento de la que se obtuvo una muestra de micelio y se colocó en V8 dejándola por 3 días en obscuridad, posteriormente se lavó 3 veces el micelio con agua destilada estéril y se agregaron 10 ml de suelo dejándolo por 2 días en la incubadora a 27°C con luz continua, al pasar los 2 días se lavó 3 veces con agua desionizada y se le agregaron 5 ml de agua desionizada para finalizar el proceso se metió al refrigerador por 30 min y posteriormente se sacó por 30 min a temperatura ambiente. De las 10 muestras colectadas de diferentes puntos en el cultivo de zaramora se obtuvieron 43 aislamientos de los cuales 34 pertenecen al género Fusarium sp. y 9 a Rhizoctonia sp. y un aislamiento del genero Botryosphaearia sp. (Cuadro 1). “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. Cuadro 1. Base de datos de 10 aislamientos Clave A-R-Z-LR-1 A-R-Z-LR-2 A-RS-Z-LR-3 A-RS-Z-LR-4 A-C-Z-LR-5 A-C-Z-LR-6 A-RP-Z-LR-7 A-RS-Z-LR-8 A-C-Z-LR-9 A-T-Z-LR-10 Genero Fusarium Fusarium Fusarium Fusarium Botryosphaearia Fusarium Rhizoctonia Fusarium Fusarium Fusarium Organo Raíz Raíz Raíz. S Raíz. S Corona Corono Raíz. P Raíz. S Corono Tallo Actividades Realizadas: Dinámica poblacional de Drosophila suzukii Continuación del monitoreo de la mosca en trampas transparentes y nuevos modelos Evaluación de modelos de trampas en parcelas experimentales Se han montado 2 experimentos para la validación de trampas en parcelas comerciales de zarzamoras del municipio de Ziracuaretiro y en frambuesa en el municipio de Los Reyes Evaluación de incidencia de Drosophila suzukii en parcelas experimentales Colecta e incubación de muestras de frutos tomadas al azar para su posterior evaluación a los 10 a 15 días de cosecha Detección e identificación de las especies de enemigos naturales asociados a larvas y pupas de D. suzukii. Preparación de dieta y frutos de zarzamora para exponerlos en condiciones naturales a posibles parasitoides con el establecimiento de trampas y su posterior incubación Agentes causales de las enfermedades radicales y cánceres de tallos en zarzamora “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. y arándano. Se han realizado inoculaciones con Neofusicocum parvum, Pestalotiopsis microspora y Phytophthora cinnamomi en plantas de arándano empleando dos métodos de inoculación. En el primero cada aislamiento fue inoculado induciendo heridas de 0.5 cm en cada tallo y colocando discos de micelio de 7 días de edad, en 10 plantas. En el segundo método se podaron las puntas de las plantas, a las cuales se les coloco un disco de 0.5 cm de micelio Para los testigos se aplicaron ambas metodologías solo que se agregó un disco de 0.5 cm de Agua Agar. Mientras que para el aislamiento Phytophthora cinnamomi se han evaluado dos técnicas para la formación de esporangios de las cuales solo una ha dado resultados positivos. El primer método que dio resultados favorables consistió en sembrar el oomycete en medio V8, durante 7 días en obscuridad, posteriormente se agregaron 10 ml de suelo no estéril y se colocaron en la incubadora a 27°C durante 5 días, posteriormente se observó en el microscopio compuesto en un cubre objetos se agregó una gota ácido láctico y se agregó la muestra de micelio y logrando con esto las observaciones los esporangios, para producción de zoosporas se metió durante 30 min en el refrigerador y posterior se sacó a temperatura ambiente por 30 min logrando observar en el estereoscopio la producción de zoosporas. Las actividades generales realizadas para la marchitez en zarzamora consistieron en el muestreo, procesamiento de las muestras, respaldos, almacenamiento y creación de la base de datos de los aislamientos. Colaboración Interinstitucional y Multidisciplinaria: El IIAFUMSNH realiza trabaja en aspectos relacionados con biología y parasitoides de la mosca. IMPACTOS EN EL PERIODO: Económicos: Sociales: “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. Ambientales: PORCENTAJE DE AVANCE TÉCNICO: 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% RESÚMENES FINANCIEROS: “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. ANEXOS (Evidencias): Síntomas de daño por Fusarium sp. en tallo de zarzamora muestreado de Los Reyes Pupa de D. suzukii sobre fruto de frambuesa de frutos del experimento Secamiento de puntas en planta de arándano a partir de la cual se obtuvieron algunos aislamientos Modelos de trampas evaluadas en frambuesa y zarzamora “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. Aislamientos obtenidos de arándano Siembra de secciones de tallo obtenidos de zarzamora Pupas de D. suzukii expuestas por medio de frutos y dieta a parasitoides Trampa utilizada para captura de parasitoides en vida libre Frutos de zarzamora incubados sin daño por D. suzukii Acercamiento del ovipositor de la hembra “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”. FIRMA DEL RESPONSABLE DEL PROYECTO “Este Programa es público, ajeno a cualquier partido político. Queda prohibido el uso para fines distintos a los establecidos en el programa”.