Aislamiento de Influenza porcino a partir de pulmones de cerdos

XIV Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas 2013. Jornada Latinoamericana
Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional de Rosario
Aislamiento de Influenza porcino a partir de pulmones de
cerdos enviados a faena
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Lotto, B. ; García Langhi, P. ; Favaro, P. ; Agosto, M. ; Canal, A.M. ; Russi,
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N. ; Mosso, P. ; Blainq L. ; Occhi, H.
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Laboratorio de Virología. Producción de Cerdos. Laboratorio de
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Histopatología. Laboratorio de Bacteriología HSA. Facultad de Ciencias
Veterinarias, Universidad Nacional del Litoral
[email protected]
La enfermedad respiratoria porcina es un proceso multietiológicomultifactorial en el que intervienen diferentes agentes que interactúan entre
sí para favorecer el desarrollo y establecimiento de la misma en las distintas
poblaciones porcinas. Dentro de tales agentes podemos nombrar al Virus de
la Influenza Porcina. Este virus, perteneciente a la familia Orthomyxoviridae,
contiene un genoma ARN de cadena simple, y presenta en su superficie dos
tipos de glicoproteínas que lo caracterizan: Hemoaglutininas y
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neuraminidasas, en base a las cuales se clasifican los distintos subtipos .
Las lesiones pulmonares que aparecen como secuelas de este agente viral
incluyen degeneración y necrosis del epitelio bronquial y bronquiolar,
presencia de exudados, células descamadas neutrófilos y monocitos en la
luz de bronquios, bronquíolos y alvéolos, e infiltración de septos alveolares
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con células inflamatorias, enfisema, neumonía intersticial . Los animales
afectados, en su mayoría jóvenes, cursan con fiebre, pérdida en la ganancia
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de peso, tos, disnea, secreciones nasales, debilidad, entre otros signos . En
este trabajo se trata de ver la presencia del virus Influenza Porcina en
pulmones de cerdos enviado a faena. Para ello se procesaron 17 muestras
provenientes de distintos pulmones de cerdos, de 5 meses de vida que no
presentaban sintomatología respiratoria, aunque en tales órganos se
observaban distintas alteraciones macroscópicas. Dichas muestras
provenían de un frigorífico de Concepción del Uruguay, Provincia de Entre
Ríos. Los órganos fueron triturados con homogeneizador de tejidos en
solución fisiológica en una proporción 1:3 para luego ser centrifugados a
5.000rpm. Los sobrenadantes obtenidos se sometieron a controles
bacteriológicos por 48 horas, para luego ser inoculados en huevos
embrionados de pollo de 9 a 11 días de vida con 0.2ml, vía cavidad
alantoidea. Éstos, fueron incubados por 72 horas a 37°C y 60% de
humedad. Se realizaron entre 1 y 2 pasajes con cada material de trabajo.
Con el líquido alantoideo obtenido de las cosechas de los diferentes pasajes
se procedió a la realización de la técnica de microhemoaglutinación en
placa con glóbulos rojos de aves al 0,02%. Para ello, colocamos 25 ul de
solución fisiológica en todos los pocillos de la placa más 25 ul del líquido
alantoideo sólo en la primera fila de la misma. Luego se procedió a la
microdilución y al agregado de 25 ul de suspensión de glóbulos rojos,
utilizando controles de los mismos. A los 40 minutos se procedió a la lectura
XIV Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas 2013. Jornada Latinoamericana
Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional de Rosario
de los resultados. A su vez, se enviaron muestras de todos los pulmones al
laboratorio de histopatología para su procesamiento por técnicas clásicas.
Los resultados de las hemoaglutinaciones mostraron título hemoaglutinante
entre 2 y 32 en dieciséis de la totalidad de los pulmones procesados. Los
resultados histopatológicos arrojaron diversas lesiones tales como lobulillos
con marcada congestión, focos de hemorragia y enfisema; bronquiolos
dilatados con necrosis del epitelio; neumonía intersticial con infiltrado
mononuclear y algunos neutrófilos, edema alveolar y sectores con enfisema;
congestión intersticial; desprendimiento de epitelios bronquiolares;
neumonía bronco-intersticial con marcada hiperemia, bronquios con
hiperplasia epitelial y exudado serofibrinoso, compatibles con la
participación del agente viral. A partir de los pulmones de cerdos enviados a
faena, que no presentaban sintomatología respiratoria pero sí alteraciones
macroscópicas, se logró el aislamiento del Virus Influenza Porcina por
inoculación en huevos embrionados, en el 94% de los materiales
inoculados, lo que fue relacionado con las lesiones microscópicas halladas.
Lo que no queda claro es la razón por la que los animales afectados no
manifestaron sintomatología respiratoria al presentar dichas alteraciones
pulmonares, lo que nos lleva a sospechar de una participación subclínica
del agente viral dentro del grupo de animales enviados a faena.
BIBLIOGRAFÍA
1. Bruner, D.W.; Hagan, W.A. Enfermedades Infecciosas de los Animales
Domésticos. Cuarta edición. 1983.
2. Daffner, A. Virología de los Porcinos; Colección de Virología Clínica.
2008.
3. Dunne, H.W. Enfermedades del Cerdo. Segunda edición. 1967.
4. Fenner, F.; Gibbs, E.P.J.P.; Murphy, F.A. Veterinary Virology. Segunda
Edición. 1993.