UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA EQUINOCCIAL FACULTAD DE CIENCIAS DE LA INGENIERÍA CARRERA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS EFECTO DE LA SUSTITUCIÓN PARCIAL DE GRASA ANIMAL (GRASA DORSAL DE CERDO) POR ACEITE VEGETAL (ACEITE DE AGUACATE) EN LA CALIDAD DE SALCHICHAS DE POLLO TIPO SUIZA TRABAJO PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE INGENIERO EN ALIMENTOS RAÚL ADRIÁN MORENO VACA DIRECTORA: ING. PRISCILA MALDONADO Quito, Diciembre 2014 © Universidad Tecnológica Equinoccial. 2014 Reservados todos los derechos de reproducción DECLARACIÓN Yo RAÚL ADRIÁN MORENO VACA, declaro que el trabajo aquí descrito es de mi autoría; que no ha sido previamente presentado para ningún grado o calificación profesional; y, que he consultado las referencias bibliográficas que se incluyen en este documento. La Universidad Tecnológica Equinoccial puede hacer uso de los derechos correspondientes a este trabajo, según lo establecido por la Ley de Propiedad Intelectual, por su Reglamento y por la normativa institucional vigente. _________________________ Raúl Adrián Moreno Vaca C.I. 1716583685 CERTIFICACIÓN Certifico que el presente trabajo que lleva por título “Efecto de la sustitución parcial de grasa animal (grasa dorsal de cerdo) por aceite vegetal (aceite de aguacate) en la calidad de salchichas de pollo tipo suiza”, que, para aspirar al título de Ingeniero en Alimentos fue desarrollado por RAÚL ADRIÁN MORENO VACA, bajo mi dirección y supervisión, en la Facultad de Ciencias de la Ingeniería; y cumple con las condiciones requeridas por el reglamento de Trabajos de Titulación artículos 18 y 25. ___________________ Ing. Blanca Priscila Maldonado Pacheco DIRECTOR DEL TRABAJO C.I. 1707906267 DEDICATORIA Con un “LAS AMO”, dedico este trabajo a mi mamasota bella y a mi abuelita, quienes con su amor, cariño y paciencia supieron siempre brindarme lo mejor de su vida para que mi futuro sea lo que ellas siempre anhelaron para mí. AGRADECIMIENTO A Dios quien con su infinita sabiduría supo guiar mi camino. A mi mamasota y a mi abuelita, quienes siempre me apoyaron incondicionalmente, únicamente esperando a cambio mi felicidad. A la Ing. Priscila Maldonado, quien tuvo la amabilidad de aceptarme como su tesista, tuvo la dedicación, preocupación y profesionalismo necesarios para trabajar en el desarrollo de mi tesis. A los ingenieros Rubén Amagua y Manuel Coronel, quienes supieron cumplir a cabalidad su papel de asesores en mi tesis. A la Ing. Nubia Grijalva por brindarme su tiempo y sus explicaciones para realizar mis análisis microbiológicos. Al Lic. Fernando Minda, quién tuvo la gentileza de revisar y corregir mi resumen en inglés. A Andre, Carlos, Diana, Estefy, Geovis, Judy, Karito, Margarita, Moni por su ayuda en las diferentes fases del desarrollo de mi tesis y por la entrañable amistad que me han sabido brindar. A mi gran amigo Lucky, que siempre me acompañó pacientemente durante todos estos años de carrera universitaria. A todas las personas que siempre preguntaban cómo vas con tu tesis, quienes con su curiosidad lograron apremiar la culminación de la misma. ÍNDICE DE CONTENIDOS PÁGINA RESUMEN ............................................................................................. xi ABSTRACT ........................................................................................... xii 1. INTRODUCCIÓN .............................................................................. 1 2. MARCO TEÓRICO ........................................................................... 4 2.1. CARNE DE POLLO .................................................................... 4 2.1.1. CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS .......................... 4 2.1.1.1. Color............................................................................... 4 2.1.1.2. Olor y Sabor ................................................................... 5 2.1.1.3. Textura ........................................................................... 6 2.1.2. VALOR NUTRICIONAL DE LA CARNE DE POLLO ............. 6 2.1.2.1. Humedad........................................................................ 6 2.1.2.2. Calorías .......................................................................... 6 2.1.2.3. Proteína.......................................................................... 6 2.1.2.4. Grasa ............................................................................. 8 2.1.2.5. Ácidos grasos ................................................................. 8 2.1.2.6. Colesterol ....................................................................... 9 2.1.2.7. Vitaminas y minerales .................................................... 10 2.1.3. MICROBIOLOGÍA DE LA CARNE DE POLLO ..................... 11 2.2. GRASA DORSAL DE CERDO .................................................... 13 2.2.1. COMPOSICIÓN FISICO QUÍMICA DE LA GRASA DORSAL DE CERDO ........................................................... 13 2.2.2. PERFÍL LIPÍDICO DE LA GRASA DORSAL DE CERDO ..... 14 i PÁGINA 2.3. ACEITE VEGETAL ..................................................................... 16 2.3.1. ACEITE DE AGUACATE ...................................................... 16 2.3.2. COMPOSICIÓN FISICO QUÍMICA DEL ACEITE AGUACATE .......................................................................... 16 2.3.3. PROPIEDADES FUNCIONALES DEL ACEITE DE AGUACATE .......................................................................... 18 2.3.4. ACEITE VEGETAL COMO SUSTITUTO DE GRASA ANIMAL EN EMBUTIDOS .................................................... 20 2.4. EMBUTIDOS EMULSIONADOS COCIDOS ............................... 21 2.4.1. MATERIA PRIMA EN EMBUTIDOS EMULSIONADOS COCIDOS ............................................................................. 23 2.4.1.1. Carne ............................................................................. 23 2.4.1.2. Grasa dorsal de cerdo .................................................... 24 2.4.2. MATERIA PRIMA COMPLEMENTARIA ............................... 24 2.4.2.1. Tripas ............................................................................. 24 2.4.2.2. Hielo ............................................................................... 25 2.4.2.3. Sustancias Curantes ...................................................... 25 2.4.3. ELABORACIÓN DE SALCHICHA ......................................... 25 2.4.3.1. Congelación antes del picado ........................................ 26 2.4.3.2. Troceado ........................................................................ 26 2.4.3.3. Molido............................................................................. 26 2.4.3.4. Picado y amasado (cutter) ............................................. 26 2.4.3.5. Proceso de embutido ..................................................... 26 2.4.3.6. Escaldado ...................................................................... 27 2.4.4. DEFECTOS EN EL PRODUCTO .......................................... 27 2.5. EVALUACIÓN DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL .................... 28 2.5.1. PRUEBAS SENSORIALES ................................................... 28 2.5.1.1. Pruebas analíticas .......................................................... 28 2.5.1.2. Pruebas afectivas ........................................................... 28 2.5.1.3. Características organolépticas ....................................... 28 ii PÁGINA 2.5.2. TEST SENSORIAL ............................................................... 29 2.5.3. LOCAL DE EVALUACIÓN .................................................... 29 2.5.4. SELECCIÓN DE PANELISTAS ............................................ 29 2.5.5. PREPARACIÓN DE LA MUESTRAS .................................... 29 2.5.6. CODIFICACIÓN .................................................................... 30 2.5.7. DESARROLLO DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD ......... 30 2.5.8. ANÁLISIS DE DATOS........................................................... 31 3. METODOLOGÍA ............................................................................... 32 3.1. DISEÑO EXPERIMENTAL.......................................................... 32 3.2. FORMULACIÓN ......................................................................... 32 3.3. OBTENCIÓN DE LA MATERIA PRIMA ...................................... 33 3.4. PROCEDIMIENTO DE ELABORACIÓN ..................................... 33 3.4.1. DESCRIPCIÓN DEL PROCESO DE ELABORACIÓN.......... 35 3.4.1.1. Recepción de materia prima .......................................... 35 3.4.1.2. Congelación ................................................................... 35 3.4.1.3. Picado ............................................................................ 35 3.4.1.4. Molido............................................................................. 35 3.4.1.5. Cutteado......................................................................... 35 3.4.1.6. Mezclado ........................................................................ 36 3.4.1.7. Adición de grasa y aceite ............................................... 36 3.4.1.8. Reposo ........................................................................... 36 3.4.1.9. Embutido ........................................................................ 36 3.4.1.10. Escaldado ..................................................................... 36 3.4.1.11. Enfriado ........................................................................ 37 3.4.1.12. Empacado .................................................................... 37 3.4.1.13. Refrigeración ................................................................ 37 3.5. ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL ........................... 37 3.6. ANÁLISIS FISICO-QUÍMICOS.................................................... 38 3.7. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS ................................................ 38 iii PÁGINA 3.7.1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA E INOCULACIÓN ......... 39 3.7.2. DETERMINACIÓN Aerobios mesófilos ................................. 39 3.7.3. DETERMINACIÓN DE E.coli ................................................ 39 3.7.4. DETERMINACIÓN DE Staphylococcus aureus .................... 40 3.7.5. DETERMINACIÓN DE Salmonella ....................................... 40 3.8. ANÁLISIS DE DATOS ................................................................ 41 4. ANÁLISIS DE RESULTADOS ......................................................... 43 4.1. RECEPCIÓN DE MATERIA PRIMA ........................................... 43 4.1.1. CARNE DE POLLO............................................................... 43 4.1.1.1. Determinación de pH...................................................... 43 4.2. DETERMINACIÓN DE PERFIL LIPÍDICO .................................. 43 4.2.1. GRASA DORSAL DE CERDO .............................................. 43 4.2.2. ACEITE DE AGUACATE ...................................................... 45 4.3. RESULTADOS DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL ............................................................................... 46 4.3.1. COLOR ................................................................................. 46 4.3.2. OLOR .................................................................................... 48 4.3.3. SABOR ................................................................................. 51 4.3.4. TEXTURA ............................................................................. 52 4.3.5. SELECCIÓN DEL MEJOR TRATAMIENTO ......................... 54 4.4. ANÁLISIS FÍSICO - QUÍMICO .................................................... 56 4.4.1. PROTEÍNA ............................................................................ 56 4.4.2. GRASA TOTAL ..................................................................... 58 4.4.3. PERFIL LIPÍDICO ................................................................. 60 4.5. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO ................................................... 63 4.5.1. Aerobios mesófilos ................................................................ 64 iv PÁGINA 4.5.2. Escherichia coli ..................................................................... 65 4.5.3. Staphylococcus aureus ......................................................... 65 4.5.4. Salmonella ............................................................................ 66 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ................................... 68 5.1. CONCLUSIONES ....................................................................... 68 5.2. RECOMENDACIONES ............................................................... 69 BIBLIOGRAFÍA ..................................................................................... 70 ANEXOS ................................................................................................ 77 v ÍNDICE DE TABLAS PÁGINA Tabla 2.1. Comparación de la composición en aminoácidos de diferentes alimentos de origen animal (porcentaje de proteína) .......................................................................... 7 Tabla 2.2. Composición de la carne de pollo ................................... 8 Tabla 2.3. Composición de ácidos grasos de la carne de pollo ....... 9 Tabla 2.4. Nutrientes en 100g de carne de pollo ............................. 11 Tabla 2.5. Clasificación mundial de microorganismos patógenos procedentes de carne y carne aves de acuerdo con los modos de transmisión. .................................................... 12 Tabla 2.6. Composición nutricional de la grasa dorsal de cerdo ...... 14 Tabla 2.7. Perfil de ácidos grasos mayoritarios del tocino (expresado en %) según la dieta del cerdo. .................... 15 Tabla 2.8. Composición del aceite de aguacate .............................. 17 Tabla 2.9. Perfil de ácidos grasos mayoritarios del aceite de aguacate. ........................................................................ Tabla 2.10. Requisitos bromatológicos para productos cárnicos cocidos según noma INEN 1338:12 ................................ Tabla 2.11. Tabla 2.12. 18 22 Requisitos microbiológicos para productos cárnicos cocidos ............................................................................ 22 Defectos de coloración y aspecto en productos cárnicos 27 vi PÁGINA Tabla 3.1. Esquema del experimento en la elaboración de salchicha con sustitución parcial de la grasa animal de cerdo por aceite de aguacate .......................................... Tabla 3.2. 32 Formulación de salchicha de pollo tipo suiza con sustitución parcial de la grasa a dorsal de cerdo por de aceite de aguacate .......................................................... 33 Tabla 3.3. Análisis Físico- químicos realizados ............................... 38 Tabla 4.1. Valor de pH obtenido para carne de pollo ....................... 43 Tabla 4.2. Perfil Lipídico de grasa dorsal de cerdo .......................... 44 Tabla 4.3. Perfil lipídico de aceite de aguacate ................................ 45 Tabla 4.4. Resumen de medias por atributos .................................. 46 Tabla 4.5. Resumen de medias por tratamientos ............................ 54 Tabla 4.6. Composición proximal de los tratamientos analizados .... 56 Tabla 4.7. Resultados de análisis microbiológicos y requisitos según norma INEN 1338:12 para productos cárnicos cocidos ............................................................................ 63 vii ÍNDICE DE FIGURAS PÁGINA Figura 2.1. Coloración de la carne de pollo ....................................... Figura 2.2. Valores de colesterol para carne de pollo con piel y sin piel .................................................................................. Figura 2.3. 10 Composición de ácidos grasos en aceites de consumo habitual ........................................................................... Figura 3.1. 5 19 Elaboración de salchicha de pollo tipo suiza con sustitución parcial de la grasa a dorsal de cerdo por de aceite de aguacate. ......................................................... Figura 4.1. 34 Calificación promedio obtenida para el atributo color en los tratamientos T1, T2, T3 ............................................. 47 Figura 4.2. Salchicha tratamiento T3 y salchicha comercial de pollo 48 Figura 4.3. Calificación promedio obtenida para el atributo color en los tratamientos T1, T2, T3 ............................................. Figura 4.4. Calificación promedio obtenida para el atributo sabor en los tratamientos T1, T2, T3 ............................................. Figura 4.5. 51 Calificación promedio obtenida para el atributo sabor en los tratamientos T1, T2, T3 ............................................. Figura 4.6. 49 53 Perfil descriptivo de los tratamientos en función a su contenido de aceite ......................................................... 55 viii PÁGINA Figura 4.7. Contenido de proteína de los tratamientos analizados ... 57 Figura 4.8. Contenido de proteína de los tratamientos analizados ... 59 Figura 4.9. Perfil lipídico de los tratamientos evaluados ................... 61 ix ÍNDICE DE ANEXOS PÁGINA ANEXO I PROCESO DE ELABORACIÓN ............................................................ 77 ANEXO II TRATAMIENTOS ELABORADOS DE SALCHICHA DE POLLO TIPO SUIZA EN SUSTITUCIÓN PARCIAL Y TOTAL DE LA GRASA DE CERDO EN SALCHICHAS TIPO SUIZA ............................................... 82 ANEXO III TEST SENSORIAL ................................................................................ 83 ANEXO IV DESARROLLO DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL ..... 84 ANEXO V RESULTADOS ANÁLISIS FISICO-QUIMICOS ..................................... 86 ANEXO VI RESULTADOS ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS .................................. 90 x RESUMEN Se determinó el perfil lipídico de la grasa dorsal de cerdo y del aceite de aguacate. Se determinó el contenido de ácidos grasos saturados (AGS), ácidos grasos monoinsaturados (AGMI) y ácidos grasos poliinsaturados (AGPI). Para la grasa dorsal de cerdo se reportó 35.45 % de AGS; 41.95 % de AGMI; 20.71 % de AGPI. Para el aceite de aguacate se reportó 18.66 % de AGS; 68.37 % de AGMI; 12.19 % de AGPI. Para la elaboración de las salchichas con aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo se utilizaron tres tratamientos correspondientes a los porcentajes de contenido de aceite de aguacate en su formulación; T 1= 50 %, T2= 75 % y T3=100 %. Se determinó la aceptabilidad sensorial evaluando los atributos de color, olor, sabor y textura. No existieron diferencias estadísticamente significativas. Se escogió el tratamiento con mejor puntuación que fue el tratamiento T3 con un promedio de 5.82 / 9. Se realizó la caracterización físico-química en el tratamiento T3 y adicionalmente a un tratamiento que se tomó como muestra patrón el cual no tuvo en su formulación aceite de aguacate, este tratamiento se denominó T 0. Se determinó el contenido de proteína conforme los requisitos de la NTE INEN 1338:12. Además se realizaron análisis de grasa total y perfil lipídico. El porcentaje de proteína para T0 fue de 13.23 ± 0.77 %, mientras en T3 fue de 12.56 ± 0.15 %. El contenido de grasa total en T3 se redujo en un 3.7 % en relación a T 0; de igual manera se redujo en un 5.24 % el contenido de AGS. El tratamiento T 3 presentó un incremento del 3.51 % en el contenido de AGMI en relación a T0. En el análisis de AGPI, T3 obtuvo un 2.53 % menos que T0. El contenido de ácidos trans fue 0 % para ambos tratamientos. Se efectuó la caracterización microbiológica realizando el conteo total de Aerobios mesófilos, Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Salmonella en los tratamientos T0 y T3. Los resultados obtenidos se encontraron dentro de los requerimientos establecidos en la NTE INEN 1338:12. xi ABSTRACT The lipid profile of the fat from pork loin and avocado oil was performed. The percentage of saturated fatty acids (SFA), monounsaturated fatty acids (MUFA) and polyunsaturated fatty acids (PUFAs) was determined. The lipid profile analysis of the fat from pork loin reported 35.45 % SFA; 41.95 % MUFA; 20.71 % of PUFA. Whereas, the lipid profile analysis for avocado oil reported 18.66 % SFA; 68.37 % MUFA; and 12.19 % PUFA. A kind of chicken sausage “Swiss type” was developed with different percentages of avocado oil content to replace fat from pork loin in its formulation. For the elaboration of sausages with avocado oil to replace fat from pork loin, three treatments were used matching the percentages of oil content of avocado in its formulation; T1 = 50 %, T2 = 75 % and T3 = 100 %. The Sensory acceptability was performed, where attributes such as color, smell, taste and texture were assessed. The statistical analysis found no statistically significant differences among the three treatments. The "T 3" treatment was chosen as the best because it scored an overall average of 5.82 / 9. The physic-chemical characterization was performed for T3 and for treatment which was taken as pattern sample didn’t have avocado oil in its formulation; such treatment was named T0. The protein content was determined according to the requirements of NTE (INEN) 1338:12. Additionally, analyses of total fat content and lipid profile were performed. The percentage of protein for T0 was 13.23 ± 0.77 % and in T3 was 12.56 ± 0.15 %. The total fat content in T3 was reduced by 3.7 % in comparison to T0; similarly, the content of SFAs decreased by 5.24 %. The T3 treatment showed an increase of 3.51 % in the content of MUFAs in comparison to T0. In the content of PUFAs, T3 obtained a 2.53 % less than T0. The fatty acids trans content was 0 % for both treatments. The microbiological characterization was done for both T0 and T3 treatments. The total count of mesophilic aerobes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Salmonella was conducted. The results obtained were located within the acceptable range established in the NTE (INEN) 1338:12. xii 1. INTRODUCCIÓN 1. INTRODUCCIÓN El consumo de grasas saturadas en exceso constituye un factor de riesgo para la salud humana favoreciendo el desarrollo de patologías como obesidad, enfermedades cardiovasculares, hipertensión, diabetes y alteraciones del colesterol, las cuales se encuentran entre las principales causas de mortalidad en el país (INEC, 2011). Torrejón & Uauy (2011), en un artículo de revisión sobre la calidad de grasa, arterioesclerosis y enfermedades coronarias, indican que el reemplazo de 5 % de la energía proveniente de grasas saturadas por grasa insaturada podría reducir el riesgo de enfermedades cardiovasculares en 42 %. El Ministerio de Salud Pública del Ecuador a través de un comunicado de prensa (LA HORA, 2013. 22 de noviembre), dio a conocer que 82 % de alimentos procesados ofertados en Ecuador contienen grasa, sal y azúcar en niveles altos y por el contrario solamente un 2 % tienen niveles bajos. En un artículo publicado por el diario hoy, (HOY, 2007. 27 de octubre), se expone que existe un alto consumo de alimentos procesados en Ecuador, además señala que anualmente una persona consume alrededor de 3 kilos de embutidos, y esta demanda se proyectaba a una tasa de crecimiento del 5 %. Actualmente, en la elaboración de salchicha, existe una tendencia dirigida a la disminución del contenido de grasa saturada del producto por razones de salud, así como la incorporación de grasa vegetal en la formulación (García, Palo & Salas. 2008). En Turquía, en la Universidad de Ege, Yildiz & Serdaroglu (2012), desarrollaron embutidos en los cuales se reemplazó parcialmente la grasa animal por aceite de avellana de 60 al 90 %, conservando la estabilidad en el embutido. El estudio expone que el reemplazo con aceite de avellana 1 mejoró la calidad nutricional, bajando el colesterol e incrementando el contenido de ácidos grasos monoinsaturados y poliinsaturados sin que esto provocara un efecto adverso en la emulsificación o en los atributos sensoriales. En la Universidad de Santa Mariá, en Perú, García, Palo & Salas. (2008), realizaron una estudio para determinar el porcentaje de sustitución de grasa de cerdo por grasa de palma (50%, 75% o 100%) que permita obtener un producto con bajo contenido de colesterol sin alterar las cualidades físicas, reológicas y sensoriales de la salchicha. Se encontró que se puede sustituir hasta el 100% de la grasa de cerdo por grasa vegetal sin alterar la estructura física de la salchicha, ni su dureza, ni la aceptabilidad sensorial. En el Ecuador, en la Universidad Técnica de Ambato, Banda (2010), realizó un estudio donde sustituyó en 25, 50 y 75 % la grasa animal de la formulación por un tipo de grasa vegetal obtenida de aceites vegetales extrafinos de palma llamada Danfat FRI-1333. Al finalizar el estudio se indica que es posible conservar las características propias de un producto emulsionado además de brindar un producto funcional, ya que el embutido no va a poseer enlaces saturados precursores del colesterol. El interés de realizar la presente investigación es elaborar un producto cárnico emulsionado escaldado utilizando un aceite con el cual no se haya trabajado anteriormente, mismo que contenga un alto contenido de ácidos grasos insaturados y poliinsaturados, con el fin de obtener un embutido con bajo contenido de grasa saturada, con características de aceptabilidad similares a las propias de un producto comercial, pero de mejor calidad nutricional, apto para un modelo de alimentación más saludable. En base a lo expuesto anteriormente se ha planteado como objetivo general de la presente investigación: Estudiar los efectos de la sustitución de grasa 2 animal (grasa dorsal de cerdo) por grasa vegetal (aceite de aguacate) en la elaboración de salchichas de pollo tipo suiza. Dentro de los objetivos específicos se encuentran: Determinar el perfil lipídico de la grasa dorsal y del aceite de aguacate. Determinar la aceptabilidad del producto obtenido a través de un análisis sensorial. Realizar análisis físico químicos y microbiológicos de la salchicha de pollo tipo suiza. 3 2. MARCO TEÓRICO 2. MARCO TEÓRICO 2.1. CARNE DE POLLO La carne de pollo posee ciertos atributos los cuales la hacen muy atractiva para el consumidor, como su precio, su rendimiento, u otras características particulares como las organolépticas, que son muy bien recibidas en la elaboración de productos cárnicos, ya que pueden combinarse de una manera muy buena con diferentes tipos de ingredientes o sabores. Adicionalmente el contenido nutricional de la carne de pollo es notable (Carvajal, 2001). 2.1.1. CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS 2.1.1.1. Color La carne de pollo normalmente presenta un color blanco-rojizo como se muestra Figura 2.1. Según un estudio realizado por Barro & González (1979), la carne de pollo puede presentar una tonalidad ligeramente amarillenta debido una concentración de carotenoides que constituyen un pigmento natural. Esta característica de color es muy apreciado por los consumidores, ya que se asocia a una alimentación a base de leguminosas o granos, siendo uno de los más importantes el maíz. Según Pérez, (citado en Cossio, 2008), la grasa en la carne de pollo debe presentar una coloración blanca, ya que en la dieta del pollo se incluyen usualmente cereales “blancos” como el arroz blanco o trigo los cuales no contienen carotenoides y específicamente xantofilas responsables de un tono amarrillo. Los pigmentos de los cereales blancos se sitúan en los depósitos grasos del animal motivo por el cual su coloración resulta en un tono blanco, Se señala de forma adicional que si los pollos son alimentados 4 con maíz, es normal que los depósitos grasos presenten una coloración amarilla, ya que el maíz contiene xantofilas. Figura 2.1. Coloración de la carne de pollo (Gaytán, 2006) Existen algunas características que pueden presentarse en la coloración de la carne de pollo que se deben considerar como indicios de falta de frescura, como puede ser la presencia de reflejos violetas o verdosos, coloración verdosa alrededor del cuello o el oscurecimiento del extremo de las alas (López, 2009). 2.1.1.2. Olor y Sabor El sabor y el olor llegan a variar en las distintas piezas musculares del pollo, así la pechuga se puede describir como suave pero ácida y astringente mientras que el músculo de la pata presenta características más fuertes y azufradas. Tanto el color como el flavor son mayores para animales de más edad. (Fernández & Marsó, 2003). 5 2.1.1.3. Textura Las fibras cárnicas que forman la carne de pollo son suaves a la mordida y fáciles de digerir que las presentes en carnes como la de res o cerdo, logrando por esta razón un uso preferencial en dietas especiales (Carvajal, 2001). 2.1.2. VALOR NUTRICIONAL DE LA CARNE DE POLLO 2.1.2.1. Humedad La carne de pollo contiene de 66,5 a 71,6 % de humedad. Mientras mayor sea el contenido de grasa en un corte o canal, menor será el contenido de agua por lo cual la carne proveniente de animales jóvenes tiene una mayor proporción de humedad en los tejidos que los animales adultos (Carvajal, 2001). Los animales que tienen una edad más avanzada, presentan en su cuerpo un contenido mayor de grasa la cual está distribuida en todas las partes del pollo, como es en los muslos o la pechuga (López, 2009). 2.1.2.2. Calorías Por su bajo contenido calórico, la carne de pollo es recomendable para personas que realicen dietas destinadas al control de peso, así como personas que se encuentren en estado de recuperación causada por alguna afección a su salud, o adultos mayores que tengan poca actividad física. Los pollos de la variedad broiler contienen 151 calorías por cada 100 gramos de carne, en pollos para asar se reportan 200 calorías y en gallinas 302 calorías (Mountney & Parkhurst, 2001). 2.1.2.3. Proteína A nivel general la carne de pollo reporta un contenido del 18-20 % de proteína (López, 2009). 6 Arenas de Moreno, Vidal, Huerta-Sánchez, Navas, Uzcátegui & HuertaLeidenz (2000), reportan que en cortes de la pechuga y los muslos sin piel, el contenido de proteína es de 19.7±0.36 %. La carne de pollo es una fuente muy importante de proteínas esenciales de alta calidad, principalmente constituidas por actina y miosina, las cuales son responsables de las propiedades funcionales de la carne, además de constituir los componentes más importantes en la función biológica, aportando calidad a la dieta humana (Gil, 2010; Molina, 2001). Como se observa en la Tabla 2.1, la carne de pollo contiene todos los aminoácidos esenciales que deben ser incluidos en la dieta humana, además su contenido tanto de proteína como de aminoácidos es mayor que la carne proveniente de otras especies (Mountney & Parkhurst, 2001). Tabla 2.1. Comparación de la composición en aminoácidos de diferentes alimentos de origen animal (porcentaje de proteína) Aminoácido Pavo Pollo Carne Vacuna Arginina Cistina Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Treonina Triptófano Tirosidina Valina 6.5 1.0 3.0 5.0 7.6 9.0 2.6 3.7 4.0 0.9 1.5 5.1 6.7 1.8 2.0 4.1 6.6 7.5 1.8 4.0 4.0 0.8 2.5 6.7 6.4 1.3 3.3 5.2 7.8 8.6 2.7 3.9 4.5 1.0 3.0 5.1 Carne de cerdo 6.7 0.9 2.6 3.8 6.8 8.0 1.7 3.6 3.6 0.7 2.5 5.5 Leche Huevos 4.3 1.0 2.6 8.5 11.3 7.5 3.4 5.7 4.5 1.6 5.3 8.4 6.4 2.4 2.1 8.0 9.2 7.2 4.1 6.3 4.9 1.5 4.5 7.3 (Mountney & Parkhurst, 2001) La cantidad de proteína tiene relación directa con la capacidad de retención de agua (CRA) de la carne, este factor es muy importante en el procesamiento de productos cárnicos, ya que por procesos como picado o 7 molido se pierde la integridad de la fibra muscular y, por lo tanto, no existe una retención física del agua libre (Jiménez & Carballo, 2002). 2.1.2.4. Grasa Factores como la edad, sexo y la especie del ave pueden influir directamente en el contenido de grasa en aves. En la carne de pollo la grasa se localiza en su mayor parte debajo de la piel a diferencia de otros animales como el cerdo o la res, donde la grasa se encuentra distribuida en los tejidos (López, 2009; Mountney & Parkhurst, 2001). En la tabla 2.2 se muestra que la pechuga de pollo contiene aproximadamente 1.6 % de grasa, sin embargo se debe considerar además que la cantidad y tipo de grasa en la dieta puede afectar el porcentaje de esta en la canal (Mountney & Parkhurst, 2001). Tabla 2.2. Composición de la carne de pollo Variables Porcentaje Humedad* 74.84 ± 0.94 Materia Seca* 25.05 ± 1.02 Ceniza* 1.20 ± 0.089 Proteína* 23.68 ± 1.10 Lípidos Totales* Colesterol** 1.59 ± 0.25 72.71 ± 2.52 *= Valores expresados en g/100 g de tejido muscular fresco **= Colesterol expresado en mg/100g de tejido muscular fresco (Uzcátegui, 2001) 2.1.2.5. Ácidos grasos La grasa de ave aporta un menor contenido de ácidos grasos saturados y una mayor proporción de ácidos grasos insaturados que la grasa proveniente de carnes rojas, sin embargo el aporte de ácidos grasos 8 insaturados de la grasa de ave es menor que el aporte proveniente de los aceites de origen vegetal. (Mountney & Parkhurst 2001). La composición de ácidos grasos de la carne de pollo se muestra en la traba Tabla 2.3. Tabla 2.3. Composición de ácidos grasos de la carne de pollo Ácidos grasos Porcentaje Total ácidos grasos 28-31 Ácido Aranquidónico 0.3-0.5 Ácido Esteárico 7.2 Ácido Linoleico 14-18 Ácido Linolenico 0.7-1.0 Ácido Mirístico 1.4 Ácido Oleíco 47-51 Ácido Palmítico 23.1 ÁcidoPalmitolénico 6.2 (Carvajal, 2001; Mountney & Parkhurst, 2001) Carvajal (2001), señala que la edad del ave afecta la composición de los ácidos grasos en los tejidos. El contenido de ácido esteárico es inversamente proporcional con la edad, reduciendo su presencia en animales viejos, pero por el contrario, el porcentaje de ácido oleico como de ácido palmitoleíco aumenta. El estado fisiológico del animal también tiene influencia sobre el estado de su grasa, así, mientras más gordo este un animal más insaturada será su grasa. La composición de ácidos grasos, y en especial un alto contenido de ácidos grasos saturados se encuentran relacionados al aumento del nivel de colesterol en la sangre humana (Molina et al., 2001). 2.1.2.6. Colesterol El pollo tiene una menor cantidad de colesterol que otros alimentos de origen animal (Mountney & Parkhurst, 2001). 9 La carne de pollo contiene aproximadamente 109 mg/100 g de colesterol cuando se encuentra sin piel y 142 mg/100 g con piel (Carvajal, 2001). El contenido de colesterol de la carne de pollo se muestra en la Figura 2.2. Colesterol (mg/100g) 160 140 120 100 80 Sin piel 60 Con Piel 40 20 0 Colesterol (mg/100g) Presentaciones de carne de pollo evaluadas Figura 2.2. Valores de colesterol para carne de pollo con piel y sin piel (Carvajal, 2001) 2.1.2.7. Vitaminas y minerales La carne de pollo es fuente de vitamina B3, vitamina B6, ácido fólico, niacina, riboflavina, tiamina, ácido ascórbico o vitamina C (Mateo, Llano, & Ochoa, 2006; Mountney, 2001). Carvajal (2011), indica que la carne de pollo aporta cantidades de potasio, fósforo, hierro como se muestra en la Tabla 2.4. 10 Tabla 2.4. Nutrientes en 100g de carne de pollo Nutriente Ca P Fe Na K Tiamina Ribofavina Niacina Vitamina B6 Pollo crudo 9 220 1.5 70 300 0.8 0.15 6 0.15 Pollo Asado 15 250 1.5 80 350 0.5 0.15 7 0.15 Valores expresados en mg/100g de tejido muscular. (Carvajal, 2001) Mountney & Parkhurst, (2001), señala que la carne de pollo adicionalmente contiene otros minerales como el calcio, sodio, azufre, yodo y cloro. 2.1.3. MICROBIOLOGÍA DE LA CARNE DE POLLO Los microorganismos presentes en la carne pueden clasificarse en dos grupos, los microorganismos patógenos los cuales producen enfermedades humanas, y los no patógenos, mismos que no se asocian con enfermedades conocidas (Mountney & Parkhurst, 2001). En carne de aves se pueden encontrar microorganismos como Campilobacter, E. coli, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus (Fernández & Marsó, 2003). Como se puede observar en la Tabla 2.5, en la carne de aves existen varios grupos de bacterias, pero el principal grupo presente está constituido por Salmonella, la cual puede causar enfermedades gastrointestinales en los seres humanos (Mountney & Parkhurst, 2001). 11 Tabla 2.5. Clasificación mundial de microorganismos patógenos procedentes de carne y carne aves de acuerdo con los modos de transmisión. Microorganismos patógenos transmisibles por ingestión de carne de aves en estado crudo o insuficientemente cocinadas Baccilus anthracis Sarococystis Balantidium coli Taenia saginata Campylobacter fetussusp. Fetus Taenia solium Campylobacter jejuni Tosoplasma gondii Escherichia coli Trichinella spiralis Fransicsella tularensis Yersinia enterocolitica Salmonella Yersenia pseudotuberculosis Microorganismos patógenos transmisibles a humanos por ingestión de carne de aves cocinada o procesada tras el procesado térmico o deficientemente almacenada tras el procesado Cualquiera de los ya citados Shigella Bacillus cereus Staphylococcus aureus Clostridium botulinum Streptococcus pyogenes Clostridium perfingens (Mountney & Parkhurst, 2001) Según Mountney & Parkhurst (2001), las aves pueden transmitir enfermedades como la conjuntivitis o infecciones de psitacosis-ornitosis causadas por organismos víricos. Elliot y Michener (citado en Mountney & Parkhurst, 2001), señalan que cuando el log del número de bacterias era de 6,5 a 8,0 por centímetro cuadrado, se podía notar un mal olor en las canales de aves. La formación de limo bacteriano se presentaba cuando el log de la población microbiana llegaba a valores desde 7,5 a 9,0 por centímetro cuadrado. 12 2.2. GRASA DORSAL DE CERDO De la canal de cerdo se puede obtener la grasa que se encuentra distribuida los tejidos, como la grasa dorsal, la de la pierna, o la grasa de la papada, las cuales se considera como productos comerciales. La grasa dorsal de cerdo es destinada a la elaboración de productos cárnicos como mortadela, salchicha, salami, etc. Además esta grasa permite combinarse con la proteína de la carne o carbohidratos como el almidón de papa, o de yuca originando de esta manera productos alimenticios Banda (2010). 2.2.1. COMPOSICIÓN FISICO QUÍMICA DE LA GRASA DORSAL DE CERDO Silva, Campagna, Maiztegui, Somenzini, García, Font & Di Masso (2006), indican que en el cerdo, la alimentación proporcionada por el productor es uno de los factores más importantes en la composición de la grasa, ya que a través de la alimentación el animal consigue incorporar los ácidos grasos de los alimentos en su tejido adiposo influyendo directamente en la calidad del producto final obtenido de las canales del animal. La grasa dorsal de cerdo contiene entre 2.7 y 8.9 % de proteína. La proteína encontrada en el tejido adiposo proviene del tejido conectivo donde los animales bien alimentados almacenan grasa (FAO, 2007; Mataix, 2009). Este tejido conectivo forma la fascia que se encuentra en la capa adiposa. La fascia una membrana conjuntiva que limita el músculo de la grasa y de otros músculos formando grupos funcionales. Proporciona una matriz de sostén además de permitir a la grasa adherirse extensamente a los músculos. Las proteínas que componen este tejido conectivo son el colágeno y elastina (Chaitow & Walker, 2006; Grüner, Metz, & Gíl, 2005). La composición nutricional de la grasa de cerdo se describe en la Tabla 2.6. 13 Tabla 2.6. Composición nutricional de la grasa dorsal de cerdo Nutriente Agua Proteína Grasa Carbohidratos Cenizas Contenido (%) 7.7 - 9 2.9 - 8.4 80.5 - 88.7 0 0.7 (FAO, 2007; Mataix, 2009) 2.2.2. PERFÍL LIPÍDICO DE LA GRASA DORSAL DE CERDO En Mataix (2009), indica que la grasa dorsal de un cerdo blanco típico contiene aproximadamente 29.38 % de ácidos grasos saturados, 37.94 % de ácidos grasos monoinsaturados y 9.4 % de ácidos grasos poliinsaturados. Los ácidos grasos se distribuyen de diferente manera en la grasa dorsal, en donde se puede observar una presencia considerable de ácidos grasos insaturados en la capa externa y una mayor cantidad de ácidos grasos saturados en la capa interna del tocino dorsal del cerdo (Silva et al., 2006). Según lo señalado por Bañón, Granados, Cayuela, Gil, Costa y Garrido (2000), el perfil lipídico de la grasa dorsal de cerdo puede ser afectado por la dieta del cerdo, además de otros factores como sexo, edad y peso del animal que influirán directamente en el engrasamiento del cerdo, así como también en las propiedades organolépticas y de conservación. Bañon et al., (2000), indica que el alto porcentaje de insaturación de la grasa dorsal puede ocasionarse debido al uso de alimentos balanceados ricos en ácido linoleico como son el maíz o la soja, por el contrario el uso de alimentos enriquecidos con manteca podría ocasionar una grasa dorsal rica en ácidos grasos saturados como se muestra en la Tabla 2.7 14 Tabla 2.7. Perfil de ácidos grasos mayoritarios del tocino (expresado en %) según la dieta del cerdo. Dieta enriquecida con aceite de soya* Dieta enriquecida con manteca* C14:0 Mirístico 1.05 ± 0.08 1.20 ± 0.11 C16:0 Palmítico 19.99 ± 1.00 20.98 ± 1.42 C18:0 Esteárico 11.34 ± 0.77 11.44 ± 1.44 Ácidos grasos saturados 32,37 ± 1.62 33.62 ± 2.76 1.46 ± 0.24 1.95 ± 0.19 C18:1 Oleico 31.73 ± 2.04 38.17 ± 1.45 C18:2 Linoleico 31.40 ± 3.20 23.01 ± 3.17 C18:3 Linolénico 3.04 ± 0.15 3.06 ± 0.22 Ácidos grasos monoinsaturados 33.19 ± 2.21 40.12 ± 1.46 Ácidos grasos poliinsaturados 34.44 ± 3.11 26.26 ± 3.16 Ácidos grasos insaturados 67.63 ± 1.62 66.38 ± 2.76 0.36 ± 0.05 0.50 ± 0.14 C16:1 Palmitoleico C18:0 / C18:2 *= Media ± desviación estándar (n=50) (Bañon, 2000) Bañon et al., (2000), señala que un alto contenido de ácidos grasos insaturados, provoca que la grasa dorsal sea blanda, ocasionado por el bajo punto de fusión de los ácidos grasos insaturados, además esta insaturación permite que se pierda características de firmeza y color, pudiendo provocar una pérdida de calidad de los productos cárnicos en los cuales esta grasa es utilizada. Sin embargo si la grasa presenta un elevado contenido de ácidos grasos saturados, y particularmente de ácido esteárico, se puede acordar que la grasa es firme, blanca y de calidad. Si se desea es trabajar con grasa dorsal insaturada, se debe observar que el contenido de ácido linoleico sea mayor al 15 % o que la relación C18:0/C18:2 sea menor de 1,5, pero es recomendable seleccionar animales muy magros y precoces si se desea asegurar un alto grado de insaturación sin tomar en cuenta la dieta de los cerdos (Bañon et al., 2000). 15 Existe la posibilidad de encontrar adicionalmente contenido de grasas trans, ya que la hidrogenación biológica o bio-hidrogenación ocurre de manera natural en animales como consecuencia de la degradación bacteriana de ácidos grasos, por lo cual los ácidos trans pasan ulteriormente a la grasa, la carne y la leche del animal. Sin embargo es más común que este proceso ocurra por el resultado de la fermentación bacteriana intestinal en animales rumiantes que en animales monogástricos (Panisello, 2004 ; Ruiz, 2009). 2.3. ACEITE VEGETAL 2.3.1. ACEITE DE AGUACATE La norma NMX F-052, establece que un aceite de aguacate refinado es “El producto obtenido del aceite crudo de aguacate cuando éste es sometido a un proceso de refinación que puede ser por vía de refinación física o refinación química”. De igual manera la norma técnica mexicana indica que el aceite comestible puro de aguacate debe ser un producto que contenga como mínimo el 98.5 % de aceite de aguacate refinado. En el aspecto microbiológico, Pascual & Calderón (2000), indican que el crecimiento bacteriano en aceite y grasas, a excepción de margarinas, es muy limitado y en la mayoría de casos llega a ser nulo, ya que las baterías no pueden multiplicarse en un producto si este no contiene agua, razón por la cual los aceites generalmente no suponen un problema de carácter sanitario. 2.3.2. COMPOSICIÓN FISICO QUÍMICA DEL ACEITE AGUACATE Los análisis químicos realizados al aceite de aguacate demuestran que contiene compuestos beneficiosos para la salud. Químicamente el aceite de aguacate guarda similitudes con el aceite de oliva, pero lo supera en niveles 16 de vitamina C, luteína, carnitina, β-sistosterol, clorofila y ácido oleico (Olaeta, 2003). El aceite de aguacate presenta en su composición clorofila, ácido oleico, βSitoesterol, vitamina E, α-Tocoferol, β/ɣ-Tocoferol, δ-Tocoferol (Acosta, 2011) La composición del aceite de aguacate se muestra en la Tabla 2.8. Tabla 2.8. Composición del aceite de aguacate Compuesto Clorofila (ppm) Contenido 40-60 Ácido Oleico (%) 0.08-0.17 β-Sitoesterol (%) 0.45-1.0 Vitamina E (mg/kg) 130-200 α-Tocoferol (mg/kg) 130 β/ɣ-Tocoferol 15 δ-Tocoferol 5 Cobre (ppm) <0,05 (Acosta, 2011) Los altos niveles de clorofila en el aceite de aguacate originan su color verde esmeralda, sin embargo estos niveles pueden afectar la estabilidad oxidativa del aceite si se lo almacena bajo la luz, ya que se puede desencadenar una rápida formación de productos de oxidación a través del proceso de fotosíntesis en contacto con el oxígeno. El aceite de aguacate debe ser almacenado en envases de vidrio obscuro (ANIAME, 2002). Un aceite puede contener cierta cantidad de humedad, sin embargo este contenido es muy bajo. La norma CODEX STAN 19-1981 para grasas y aceites comestibles no regulados por normas individuales, establece un contenido máximo de humedad del 0.2 %, mientras que la norma NMX F052 para Aceite de Aguacate establece un contenido de humedad máximo 17 de 0.5 % para aceite de aguacate y un 0.1 % de humedad para aceite puro de aguacate (IMNC, 2007). En el perfil lipídico del aceite de aguacate lo hace un producto saludable ya que contiene un alto nivel de ácidos insaturados como se observa en la Tabla 2.9 (Olaeta, 2003). Tabla 2.9. Perfil de ácidos grasos mayoritarios del aceite de aguacate. Ácido graso Porcentaje Palmítico 16.49 Palmitoleico 11.51 Esteárico 0.40 Oleico 58.17 Linoleico 11.13 Octadecadienoico 1.03 Linolénico 0.93 Aranquídico 0.10 Eicosanoico 0.21 Ácidos grasos poliinsaturados 13.09 Ácidos grasos monoinsaturados 69.89 Ácidos grasos saturados 16.99 (Acosta, 2011) 2.3.3. PROPIEDADES FUNCIONALES DEL ACEITE DE AGUACATE El aguacate es conocido por su textura lisa y su sabor delicioso, además de su aroma que es considerado parte de lo que se percibe como sabor. Los aguacates Hass contienen por lo menos 25 compuestos de aroma, llamados 'volátiles de aroma' sustancias que hacen de este fruto sea delicioso y hasta exótico (Obenland, Collin, Sievert, Negm, & Arpaia, 2012). El aceite de aguacate se utiliza mucho en campo culinario, porque posee características bastante interesantes como un alto punto de humo, excelente sabor y un color verde que resulta ser muy atractivo (Olaeta, 2003). 18 En el proceso de obtención del aceite se logra mantener todas las propiedades originales de la fruta, lo cual hace que el aceite sea beneficioso para la salud humana. El aceite de aguacate al no contener colesterol consigue prevenir enfermedades cardiacas, reduciendo incluso problemas de próstata (Olaeta, 2003). El aceite de aguacate contiene un compuesto llamado α-tocoferol, el mismo que contribuye a la disminución de enfermedades de carácter cardiovascular. Compuestos encontrados en el aceite de aguacate como el β-Sitoesterol que junto con otros fitoesteroles, consiguen inhibir la absorción intestinal de colesterol, logrando de esta manera disminuir los niveles plasmáticos de colesterol total y de LDL (Acosta 2011). Como se muestra en la Figura 2.9, el aceite de aguacate presenta muy buenas características nutricionales con un bajo contenido de ácidos grasos saturados y alto porcentaje de insaturación respecto al perfil lipídico de otros aceites de consumo habitual (Olaeta 2003). Coco 92% Palma 51% Algodón 10% 27% Maní 18% Aguacate 17% Soya 15% Oliva 14% Maíz 13% Girasol Canola 2% 6% 54% 19% 34% 48% 13% 70% 61% 9% 24% 77% 62% 9% 25% 78% 6% 0% 39% 13% 36% 10% 20% 58% 30% 40% Ácidos grasos saturados 50% 60% 70% 80% 90% 100% Ácidos grasos poliinsaturados Ácidos grasos monoinsaturados Figura 2.3. Composición de ácidos grasos en aceites de consumo habitual (Valenzuela, 2002; Acosta, 2011) 19 La composición de ácidos grasos del aceite de aguacate podría cambiar y llegar a presentar ácidos grasos trans si se somete el aceite a procesos de hidrogenación para su uso en pastas para untar, grasas para pastelería, margarinas o si es sometido a calentamiento y cocción ya sea de manera industrial o casera a altas temperaturas (Serna, 2010). 2.3.4. ACEITE VEGETAL COMO SUSTITUTO DE GRASA ANIMAL EN EMBUTIDOS Bautista, Ramírez, Gaitán, Pérez, Moreno, Lucero & García (2012), realizaron una investigación en la Universidad de Zacatecas, en México, donde sustituyeron la grasa animal por aceites de origen vegetal con la finalidad de evaluar el efecto de la sustitución de grasa de cerdo, con diferentes proporciones de aceite de canola y almidón de papa en la elaboración de embutidos escaldados. Bautista et al., (2012), señalan que al sustituir la grasa animal del embutido con un aceite vegetal para elaborar la emulsión cárnica, no cambiaron las características de calidad de una manera significativa en el producto obtenido, pero recalcan que la utilización de almidón contribuyó a la estabilidad de la emulsión. Pascual, Ordoñez & Olivares (2002), realizaron la sustitución parcial de grasa dorsal de cerdo utilizando aceite de oliva en salchichas tipo Frankfurt, obteniendo un embutido con características similares a las presentadas por una salchicha con 100 % de grasa de cerdo. Se indica que el uso de aceite vegetal logró prevenir la oxidación en el embutido. Los resultados de este estudio se compararon con trabajos de sustitución de grasa de cerdo por aceite de girasol, maní, oliva, maíz y soya. Rey & Gualdron (2011), elaboraron un embutido utilizando aceite de soya, canola y girasol en 5 %, 10 % y 15 % en sustitución parcial de la grasa de cerdo en la formulación de salchichón; los tratamientos fueron comparados 20 frente a un patrón en el cual se utilizó carne de vacuno y grasa animal. El estudio estableció que a ese nivel de sustitución de grasa animal por aceite vegetal no existieron diferencias significativas entre las formulaciones con soya y girasol. 2.4. EMBUTIDOS EMULSIONADOS COCIDOS Los embutidos emulsionados se preparan a partir de carne en buenas condiciones, la cual no debe encontrarse completamente madurada, esta carne se procesa con la grasa dorsal de cerdo procurando mantener una adecuada proporción de los ingredientes. Posteriormente se somete a un proceso térmico de escaldado para disminuir la población microbiana, favorecer la conservación, ablandar el alimento y coagular completamente las proteínas (Monge, 2005). En el caso de un producto cárnico como la salchicha, la norma INEN 1338:12 la define como “Producto elaborado a base de una masa emulsificada preparada con carne y grasa de animales de abasto, ingredientes y aditivos alimentarios permitidos: embutido en tripas naturales o artificiales de uso permitido, crudas, cocidas, maduradas o no.” La norma INEN 1338:12 define a los productos cárnicos cocidos como “Productos sometidos a tratamiento térmico que deben alcanzar como mínimo 70 ºC en su centro térmico o una relación tiempo temperatura equivalente que garantice la destrucción de microorganismos patógenos” Adicionalmente la legislación ecuatoriana exige que los productos cárnicos cocidos deben cumplir con el control del contenido de proteína como requisito bromatológico, y de acuerdo a este contenido la norma INEN 1338:12 clasifica al embutido como Tipo I, Tipo II o Tipo III; como se muestra en la tabla 2.10. 21 Tabla 2.10. Requisitos bromatológicos para productos cárnicos cocidos según noma INEN 1338:12 Requisito Tipo I Tipo II Tipo III Mín. Máx. Mín. Máx. Mín. Máx. 12 - 10 - 8 - Proteína total,% (% N x 6.25) La norma INEN 1338:12, dicta que los productos cárnicos cocidos deben cumplir con los requisitos microbiológicos mostrados en la Tabla 2.11, para de esta manera garantizar la calidad e inocuidad del alimento. La presencia de Aerobios mesófilos en productos cárnicos cocidos es un indicador del deterioro de los alimentos (Salgado, 2001). Identificar E. coli en un alimento implica que otros microorganismos de origen fecal, incluyendo patógenos, podrían ocasionar una enfermedad gastrointestinal a causa del consumo de ese alimento (Salgado, 2001). Tabla 2.11. Requisitos microbiológicos para productos cárnicos cocidos Requisito Número de unidades de la muestra Aerobios mesófilos ufc/g* 5 Número de unidades defectuosas que se acepta 1 Escherichia coli ufc/g* Staphilococcus aureus ufc/g* Salmonella1 /25g 5 Nivel de aceptación Nivel de rechazo 5.0x105 1.0x107 0 <10 - 5 1 1.0x103 1.0x104 10 0 Ausencia - 1 Especies cero tipificadas como peligrosas para humanos * Requisitos para determinar término de vida útil ** Requisito para determinar inocuidad del producto De acuerdo a Huss (2000), los Staphilococcus son organismos ubicuos los cuales pueden encontrarse en el agua, aire, polvo, leche, aguas residuales, 22 pavimento y todos los artículos que entran en contacto con el hombre, además de sobrevivir muy bien en el medio ambiente. Otro factor que contribuye al crecimiento de S. aureus también es indicado por Barreto, Sedrés, Rodríguez, & Guevara (2010), quienes señalan a la naturaleza intrínseca del alimento, destacando como más susceptibles a los ricos en proteínas como cárnicos, carne de aves, pescados y sus derivados, leche y productos lácteos. La Salmonella se transmite a través de alimentos que son contaminados bajo ciertas circunstancias como no lavarse las manos adecuadamente, conservar ciertos alimentos a temperatura ambiente o no manipular alimentos con las debidas normas de higiene (Grüner et al., 2005). 2.4.1. MATERIA PRIMA EN EMBUTIDOS EMULSIONADOS COCIDOS 2.4.1.1. Carne Jiménez & Carballo (2002), señalan que se debe revisar el pH de la carne destinada a la elaboración de productos cárnicos, mismo que va a depender de factores, tales como especie del animal, o tratamientos antemortem. En productos cárnicos, la carne a utilizarse debe poseer valores de pH de 5.45.8 los cuales resultan adecuados. Si la carne presenta valores de pH mayores a 6.2, no se recomienda que sea destinada a la elaboración de embutidos, ya que valores altos de pH hacen que la carne y en sí el embutido sea más fácilmente atacable por microorganismos, además el producto puede llegar a tener una consistencia poco apreciable. En el caso de la carne de pollo para la elaboración de embutidos, es necesario que se encuentre exenta de tejido conectivo, ya que este tipo de tejido está compuesto de colágeno. El colágeno a pesar de contribuir a ligar agua, su presencia no es recomendable en la elaboración de emulsiones cárnicas, porque durante el tratamiento térmico, puede llegar a gelatinizarse parcialmente (Jiménez & Carballo, 2002; Ranken, 2003). 23 El colágeno gelatinizado tiene buena capacidad para ligar agua, pero le falta poder para emulsificar grasas, logrando mermar la capacidad emulsificante de cualquier tipo de carne, además el colágeno forma un gel de tipo reversible con el calor, produciendo defectos, además de bajos rendimientos en productos cocidos y emulsificados (Molina et al., 2001). 2.4.1.2. Grasa dorsal de cerdo La grasa dorsal de cerdo se utiliza generalmente para la elaboración de embutidos crudos, cocidos o escaldados, además confiere a los productos cárnicos características organolépticas como sabor, textura, aroma y sensación de jugosidad (Paltriniri, 2007; Villalobos, Vásquez, & Soto, 2009). La grasa debe ser blanca, sin olores extraños y debe almacenarse en refrigeración, para evitar la oxidación y acidificación. Debe evitarse utilizar grasa dorsal proveniente de cerdos muy magros ya que tiene una mayor tendencia a la oxidación y puede ocasionar problemas de aceptabilidad sensorial, así como problemas en el procesamiento de productos cárnicos (Bañon et al., 2000). 2.4.2. MATERIA PRIMA COMPLEMENTARIA 2.4.2.1. Tripas La tripa constituye aproximadamente el 1 % del peso total del embutido, y es la materia prima encargada de mantener la forma del producto cárnico obtenido (Ranken, 2003). Las tripas de celulosa se emplean clásicamente para salchichas así como para embutidos sin piel. La tripa de celulosa por su resistencia al calor permite que el embutido pueda someterse a tratamientos térmicos a través de agua caliente o aire húmedo a 55-70 ºC con lo cual se logra coagular la superficie cárnica y se obtiene una cocción uniforme. Esta clase de envoltura puede usarse para toda clase de embutidos Ranken (2003). 24 2.4.2.2. Hielo La utilización de hielo en el proceso de elaboración de embutidos tiene como objetivo evitar un aumento drástico en la temperatura durante el picadoamasado realizado en el cutter (Ranken 2003). 2.4.2.3. Sustancias Curantes Las sustancias curantes afectan de manera positiva a la carne, pudiendo observar efectos beneficiosos en el aroma, color, sabor y consistencia. Adicionalmente estas sustancias logran una capacidad de retención de agua mayor, lo cual es beneficioso para el rendimiento del producto (Paltrinieri, 2007). Sal: La función principal de la sal es permitir la solubilización de las proteínas miofibrilares como son la actina y miosina. Sin embargo la sal tiene otras funciones en los productos cárnicos como permitir el aumento del poder de conservación, mejora el sabor así como la coloración y aumenta el poder de fijación de agua (Ranken, 2003; Paltrinieri, 2007). Fosfatos: El uso de fosfatos permiten emulsificar la grasa, mejorar la absorción de agua, permite que el embutido gane peso, evita que las pérdidas de proteína durante la cocción sean elevadas (Paltrinieri, 2007). Nitritos y Nitratos: Los nitritos favorecen el enrojecimiento y la conservación ya que promueven un efecto bactericida. Las sales curantes utilizadas son nitrito potásico y el nitrato sódico (Paltrinieri, 2007). 2.4.3. ELABORACIÓN DE SALCHICHA El proceso de elaboración de salchicha debe ser controlado permanentemente para obtener un producto que cumpla las características 25 propias de un producto emulsionado escaldado, ya sea en variables de tiempo y temperatura (Ranken, 2003). 2.4.3.1. Congelación antes del picado Según Ranken (2003), cuando se procede al picado o troceado de carne congelada y luego se descongela, no se producen pérdidas por cocción, o pueden llegar a ser mínimas. 2.4.3.2. Troceado El proceso de picado o troceado permite obtener tamaños y formas más manejables de las piezas de carne y grasa permitiendo incorporarlas de forma adecuada en los procesos de elaboración de salchicha. El picado permite romper tejidos conectivos permitiendo obtener una mejor textura y calidad del producto final (Ranken, 2003). 2.4.3.3. Molido En el proceso de molido se producen desgarros de la carne y la grasa ya que son sometidas a acción de presión y corte. El tejido conectivo presente en la carne se logra dividir adecuadamente (Ranken, 2003). 2.4.3.4. Picado y amasado (cutter) El objetivo principal de cutter es formar la emulsión. Al realizar el picado y amasado en un cutter se produce cortes limpios en la materia prima, además brinda agitación en el proceso. (Ranken, 2003). 2.4.3.5. Proceso de embutido Se procede a introducir la mezcla en la tripa utilizando una embutidora. Los embutidos de grueso calibre como la mortadela, deben ser atados de un extremo de la tripa antes de conectar la boquilla de la embutidora (Paltrinieri, 2007). 26 2.4.3.6. Escaldado El proceso de escaldado se realiza sumergiendo el embutido en agua a una temperatura acorde al tipo de embutido. El tiempo de escaldado varía de acuerdo al calibre del embutido (Paltrinieri, 2007). 2.4.4. DEFECTOS EN EL PRODUCTO En la Tabla 2.12 se destacan los principales defectos que pueden presentarse en la elaboración de embutidos, su origen puede atribuirse a varios factores; un mezclado inadecuado, errores en el escaldado o una masa mal triturada (Paltrinieri, 2007). Tabla 2.12. Defectos de coloración y aspecto en productos cárnicos Defecto Coloración verde Coloración gris de la masa Embutido roto Separación de agua o presencia de gelatina en los extremos Costra en la envoltura Embutido demasiado duro y seco Exudado de grasa Causa Presencia de Lactobacilos por temperaturas y tiempos insuficientes de escaldado o ahumado. Cantidades insuficientes de sustancias de curación, temperatura muy baja durante la curación de la masa mezclada. Tiempo de ahumado, escaldado excesivos. temperatura de Exceso de agua, procesos de ahumado o escaldado muy intensos Almacenamiento inadecuado calientes y demasiado húmedos en lugares Ambiente de almacenamiento muy seco, cantidad de grasa presente en la formulación es insuficiente. Temperaturas de ahumado y secado muy elevadas, exceso de picado en la grasa utilizada. (Paltrinieri, 2007) 27 2.5. EVALUACIÓN DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL 2.5.1. PRUEBAS SENSORIALES 2.5.1.1. Pruebas analíticas Las pruebas analíticas evalúan de manera comparativa o descriptiva la calidad de un producto a través de un grupo reducido de catadores experimentados o adiestrados (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). 2.5.1.2. Pruebas afectivas A través de pruebas afectivas se logra obtener información acerca de la preferencia o aceptación que tienen los consumidores por un producto, sin embargo se debe trabajar con un gran número de panelistas no adiestrados (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). 2.5.1.3. Características organolépticas Se especifican las 3, 4 ó 5 características organolépticas a evaluar de acuerdo con las propiedades del producto (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). La industria cárnica está buscando ingredientes que reemplacen la grasa manteniendo siempre el color, olor, sabor y textura de los productos, por lo cual es aconsejable evaluar estos atributos al realizar pruebas de aceptabilidad sensorial en embutidos escaldados como salchichas (Banda, 2010; García et al., 2010; Jaramillo, 2009). El color, la forma, el aspecto de la superficie son características de apariencia que se detectan mediante los receptores de la vista; las características de olor se perciben mediante el olfato, aspirando la muestra, sin probarla; las propiedades de sabor se evalúan en la boca al degustar el producto; las propiedades de estructura que se perciben por los receptores 28 mecánicos de la boca, auditivos, visuales y táctiles corresponden al atributo textura (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). 2.5.2. TEST SENSORIAL En la evaluación sensorial de salchicha, al elaborar una hoja de respuesta o test sensorial, Watts (citado en Salgado, 2001), recomienda utilizar una escala semi estructurada de nueve puntos para realizar la calificación de los atributos evaluados, donde 9 indica la máxima puntuación de aceptabilidad. Es necesario que el test cuente con instrucciones claras sobre la manera correcta de realizar la evaluación sensorial (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). 2.5.3. LOCAL DE EVALUACIÓN El lugar donde se realice la evaluación sensorial debe ubicarse en una zona apartada de ruidos, olores fuertes o circulación de público. Las distracciones del medio externo influyen sobre el grado de atención de los panelistas afectando los resultados de la evaluación (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). 2.5.4. SELECCIÓN DE PANELISTAS Se sugiere elegir un panel de evaluadores que muestre interés en el gusto y sabor del producto a ser evaluado, además es indispensable que comprendan el procedimiento de evaluación en el test sensorial (Yildiz & Serdaroglu, 2012). 2.5.5. PREPARACIÓN DE LA MUESTRAS Se deben tener en cuenta documentos normativos para cada tipo de producto a evaluarse, en caso de no existir documentos para evaluación 29 sensorial, se deben preparar las muestras según la forma en que el producto se consume habitualmente (Torricella, Zamora & Pulido, 2007) Las muestras deben guardar uniformidad en características como temperatura tamaño y presentación. En embutidos se recomienda entregar porciones de la parte central, evitando en lo posible entregar las puntas. Para muestras de salchichas es adecuado cortar el embutido en porciones de 2,5 cm y hervirlas por 5 minutos. Se considera adecuado entregar muestras de alimentos calientes a una temperatura de 55 - 75 °C. La porción que se entrega al panelista debe colocarse en un recipiente adecuado. (Torricella, Zamora & Pulido, 2007; Yildiz & Serdaroglu, 2012). 2.5.6. CODIFICACIÓN Es necesario evitar “informar” a los catadores sobre la naturaleza de las muestras, codificándolas adecuadamente y evitando utilizar códigos de origen alfabético (A, B, C) o numérico de un dígito (1, 2, 3), estos códigos pueden ser interpretados por los panelistas como un tipo de ordenamiento, pudiendo mermar imparcialidad en la evaluación (Torricella, Zamora & Pulido, 2007). Al codificar muestras de salchicha para ser evaluadas sensorialmente, Izquierdo et al., (2007), recomienda identificar cada formulación con un código de 3 dígitos obtenido de una tabla de números aleatorios. 2.5.7. DESARROLLO DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD Proporcionar a cada panelista una porción de cada formulación que requiera ser evaluada, además de agua y galletas de soda, explicar que al pasar de una formulación a otra, debe comer galleta de soda y un sorbo de agua a manera de vehículo y borrador respectivamente (Izquierdo et al., 2007). 30 2.5.8. ANÁLISIS DE DATOS Mackey (citado en Izquierdo et al., 2007), sugiere que para el estudio estadístico de los resultados de la evaluación sensorial se utilice un diseño de bloques completos al azar (DBCA). En el análisis de aceptabilidad en embutidos se debe procesar los datos mediante un análisis de varianza (ANOVA) y se recomienda comparar las medias obtenidas de cada atributo mediante la prueba de Tukey (Banda, 2010; García et al., 2008; Pascual et al., 2002). 31 3. METODOLOGÍA 3. METODOLOGÍA 3.1. DISEÑO EXPERIMENTAL Se aplicó un diseño unifactorial completamente al azar. La salchicha que se tomó como muestra patrón o de control, no tuvo en su formulación aceite de aguacate, este tratamiento se denominó T 0. Se elaboraron 3 tratamientos con diferentes porcentajes de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo; T1= 50 %, T2= 75 % y T3=100 %, como se indica en la Tabla 3.1. En los tratamientos T1 y T2 se utilizó grasa dorsal de cerdo para completar 100 %. Tabla 3.1. Esquema del experimento en la elaboración de salchicha con sustitución parcial de la grasa animal de cerdo por aceite de aguacate Código Tratamiento T0 T1 T2 T3 Control 50 % de aceite de aguacate 75 % de aceite de aguacate 100 % de aceite de aguacate La variable independiente fue el contenido de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo dentro la formulación del embutido. Las variables dependientes fueron el contenido de grasa, proteína y ácidos grasos del embutido, además de su aceptabilidad sensorial para los atributos de color, olor, sabor, textura al masticar. 3.2. FORMULACIÓN Para llevar a cabo el proceso de elaboración de la salchicha de pollo tipo suiza con sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo por aceite de aguacate se utilizó la formulación citada en la Tabla 3.2. 32 Tabla 3.2. Formulación de salchicha de pollo tipo suiza con sustitución parcial de la grasa a dorsal de cerdo por de aceite de aguacate Materia prima Contenido Carne de pollo Grasa dorsal de cerdo + aceite de aguacate Hielo 60 % 20 % 20 % Sal 22 g/kg Sal nitral 6 % 0.2 g/kg Fosfatos 3 g/kg Ácido ascórbico 0.2 g/kg INBAC 2 g/kg Pimienta blanca 2 g/kg Ajo en polvo 3 g/kg Cebolla en polvo 3 g/kg Comino 1 g/kg Colorante* 0.62 g/Kg * Colorante rojo A líquido. 3.3. OBTENCIÓN DE LA MATERIA PRIMA Para la elaboración de la salchicha de pollo tipo suiza con sustitución parcial de la grasa animal de cerdo por aceite de aguacate se utilizó: carne de pollo, grasa dorsal de cerdo, aceite de aguacate y tripa sintética. La materia prima de se obtuvo de un único proveedor. 3.4. PROCEDIMIENTO DE ELABORACIÓN El proceso de elaboración del producto se realizó como se describe en el diagrama de flujo de la Figura 3.1. 33 Carne magra de pollo y grasa dorsal de cerdo RECEPCIÓN CONGELAR Cubos de 5-10 cm Disco de 5 mm Carne Grasa PICAR PICAR Cubos de 2-3 cm MOLER MOLER Disco de 9 mm Sal, nitritos, especias, fosfatos, ác. Ascórbico, hielo CUTEAR Tº < 12 ºC MEZCLAR Grasa + Aceite vegetal (T0, T1, T2, T3)* Emulsión ADICIONAR Aceite Tº < 5 ºC Emulsión Tº < 15 ºC REPOSAR t= 1 EMBUTIR ESCALDAR ENFRIAR Tº interna 68 - 72 ºC Tº interna 22 ºC EMPACAR REFRIGERAR *= Porcentajes de contenido de aceite de aguacate en sustitución de la grasa animal: T0= 0 % de aceite (muestra patrón), T1= 50 % de aceite, T2= 75 % de aceite, T3=100 % de aceite. Figura 3.1. Elaboración de salchicha de pollo tipo suiza con sustitución Figura 3.1. Elaboración de salchicha de pollo tipo suiza con sustitución parcial parcial la grasa a dorsal cerdo aceite aguacate. de de la grasa a dorsal de de cerdo porpor de de aceite de de aguacate. 34 3.4.1. DESCRIPCIÓN DEL PROCESO DE ELABORACIÓN 3.4.1.1. Recepción de materia prima Se procedió a realizar un control de la aptitud de la materia prima, donde se revisó que la grasa dorsal no presente un color u olor extraño, así también se revisó que no exista contaminación por algún tipo de agente extraño. Se realizó la limpieza de la carne de pollo, donde se retiró las venas, exceso de grasa, tendones, huesos y otras partes que no se utilizan en el proceso. Se realizó adicionalmente un análisis de pH de la carne de pollo con el fin de comprobar su aptitud para la elaboración del embutido. 3.4.1.2. Congelación La materia prima se congeló a temperatura de -8 °C antes del proceso de picado. 3.4.1.3. Picado La grasa dorsal de cerdo se cortó en porciones de 2 a 3 cm y la carne en porciones de 5 a 10 cm. 3.4.1.4. Molido En un molino industrial HOBBART modelo 4B12 se molió la carne de pollo utilizando un disco de 5 mm, de igual manera se molió la grasa dorsal de cerdo utilizando un disco de 9 mm. 3.4.1.5. Cutteado Se colocó la carne de pollo en un cutter marca TALSA modelo T-3394 a velocidad constante, hasta obtener un granulo fino, controlando que la temperatura del proceso se encuentre entre 10-12 ºC. 35 3.4.1.6. Mezclado Se adicionó sal, nitritos, fosfatos y gradualmente la tercera parte del hielo previamente picado en un triturador de hielo marca GOLDMEDAL modelo 1006, se añadió el hielo en función de la temperatura que mostró el cutter y al observar que se inició la solubilización de las proteínas con un incremento incontrolable de la temperatura se añadió poco a poco el hielo restante de la formulación. Posteriormente se adicionó el conservante INBAC junto con las especias. 3.4.1.7. Adición de grasa y aceite Se agregó la grasa dorsal de cerdo previamente picada junto con el aceite de aguacate de la formulación para que se forme la emulsión. 3.4.1.8. Reposo La emulsión cárnica obtenida fue retirada del cutter. Posteriormente se procedió a dejarla en reposo por 1 hora a una temperatura de 5 ºC, con lo cual se aseguró que la emulsión al terminar este periodo de reposo no tuviera aire en su interior. 3.4.1.9. Embutido En una embutidora manual marca SIRMAN serie 03LOO898S se colocó la emulsión que permaneció en reposo. Seguidamente se embutió en tripas artificiales de calibre 18 y se amarró con una piola de algodón trenzado. Se procedió a limpiar los embutidos para eliminar cualquier resto de pasta que pueda estar en la superficie. 3.4.1.10. Escaldado El producto embutido se escaldó en agua, la temperatura inicial del agua fue 40 ºC para posteriormente controlar que se mantenga entre los 76 – 80 ºC. El escaldado se realizó por aproximadamente 60 minutos hasta que la temperatura interna del producto llegó a los 68 – 72 ºC. 36 3.4.1.11. Enfriado Una vez alcanzada la temperatura interna requerida, los embutidos fueron sometidos a un choque térmico en agua hasta que la temperatura interna del embutido alcanzó 22 ºC. 3.4.1.12. Empacado Se eliminó el exceso de agua de la superficie de los embutidos para ser empacados al vacío posteriormente en la empacadora marca CITALSA modelo KOMET VACUBOY. 3.4.1.13. Refrigeración Las salchichas empacadas se llevaron a refrigeración a una temperatura de 0 - 4 ºC por 24 horas. 3.5. ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL Se evaluó la aceptabilidad sensorial de los atributos de color, olor, sabor, textura al masticar (homogeneidad y dureza). Se elaboró un test sensorial con preguntas acerca de los atributos color, olor, sabor y textura al masticar; se utilizó una escala semi estructurada de nueve puntos, donde 9 fue la máxima puntuación de aceptabilidad. Cada muestra se identificó con un código de 3 dígitos obtenido de una tabla de números aleatorios. Se eligió un panel de evaluadores los cuales analizaron los productos elaborados con aceite de aguacate en su formulación y evaluaron según el test proporcionado. 37 3.6. ANÁLISIS FISICO-QUÍMICOS La caracterización físico-química de la salchicha de pollo tipo suiza con aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo, se realizó determinando el porcentaje de proteína de acuerdo a los requisitos para productos cárnicos cocidos establecidos en la norma INEN 1338:12. Adicionalmente se determinó el contenido de grasa total, perfil lipídico y grasas trans. Se realizó el análisis del perfil lipídico de la grasa dorsal de cerdo y del aceite de aguacate conforme a lo establecido en los objetivos de la presente investigación. Los métodos utilizados en los análisis físico-químicos realizados se muestran en la Tabla 3.3. Tabla 3.3. Análisis Físico- químicos realizados Análisis Método Proteína AOAC 928,08 Grasa AOAC 920,39 Perfil lipídico y grasas trans AOAC 991,39 3.7. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS Para para determinar la inocuidad de la salchicha se realizó un conteo total de Aerobios mesófilos, Staphylococcus aureus, E.coli y Salmonella, de acuerdo a los requisitos establecidos en la norma INEN 1338:12. Para el recuento de Aerobios mesófilos, Staphylococcus aureus, E.coli se utilizaron placas petrifilm 3M™ correspondientes a cada microorganismo a identificar. 38 3.7.1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA E INOCULACIÓN Se preparó la muestra según la norma INEN 1529-2:99. Se homogenizó 10 g de salchicha con 90 ml de agua peptonada bufferada, correspondiente a la dilución 10-1, a partir de esta se realizaron diluciones sucesivas hasta 10-3. De cada dilución se tomó 1 ml de la muestra y se inoculó en placas PetrifilmTM para recuento de Aerobios mesófilos, Staphylococcus aureus, E.coli y Salmonella. La incubación se realizó siguiendo los métodos establecidos por la AOAC que se encuentra en la guía de interpretación de las PetrifilmTM. 3.7.2. DETERMINACIÓN Aerobios mesófilos Se determinó la presencia de microorganismos Aerobios mesófilos, según el método oficial de la AOAC 990,12. En cada placa petrifilm se inoculó 1 ml de cada dilución decimal de la suspensión inicial de la muestra. Para cada depósito se usó una Micropipeta 10-1000 μL marca GLASSCO utilizando una punta distinta y esterilizada para cada dilución. Se incubó el inóculo a 35 ± 1 ºC durante 48 ± 3 horas y luego se contó el número de colonias formadas. El conteo sirvió para calcular la cantidad de microorganismos por gramo o por centímetro cúbico de alimento. 3.7.3. DETERMINACIÓN DE E.coli Se determinó la presencia de E.coli, según el método oficial de la AOAC 991,14. En cada placa petrifilm para recuento de E.coli/Coliformes se inoculó 1 ml de cada dilución decimal de la suspensión inicial de la muestra. Para cada depósito se usó una Micropipeta 10-1000 μL marca GLASSCO utilizando 39 una punta distinta y esterilizada para cada dilución. Se incubó por 48 ± 2 horas a 35 ± 1 ºC. Se contaron las colonias de color azul a rojo azulado asociados con formación de burbujas de gas sin tomar en cuenta la intensidad de color y el tamaño de la colonia de E. coli. 3.7.4. DETERMINACIÓN DE Staphylococcus aureus Se determinó la presencia de Staphylococcus aureus según el método oficial de AOAC 2003.07. En cada placa petrifilm del sistema Staph Express se inoculó 1 ml de cada dilución decimal de la suspensión inicial de la muestra. Para cada depósito se usó una Micropipeta 10-1000 μL marca GLASSCO utilizando una punta distinta y esterilizada para cada dilución. Se incubó a 37 ± 1 ºC por 24 ± 2 horas. Luego de la incubación, se contaron las colonias rojo-violeta. Al obtener placas con colonias de color diferente a rojo-violeta, se procedió a realizar una prueba confirmativa incubando estás placas con el disco Petrifilm Staph Express durante 3 horas a 37 ± 1 ºC, posteriormente se contó todas las zonas de color rosa haya o no presencia de colonia, interpretándolas de esta manera como S. aureus. 3.7.5. DETERMINACIÓN DE Salmonella Se determinó la presencia de Salmonella, según el método oficial de la AOAC 967 25.26.27. Se realizó un pre enriquecimiento donde se pesó 25 g de muestra en 225 ml de agua peptona bufferada tamponada y se homogenizó, luego se tapó el frasco y se dejó a temperatura ambiente por 60 ± 5 minutos, después de este tiempo se ajustó el pH a 6.8 ± 0,2 con NaOH 1N ó HCl 1N y se incubó a 35ºC de 24 ± 4 horas a fin de lograr la revitalización de las Salmonellas lesionadas. 40 En la fase de enriquecimiento selectivo se tomó se tomó una alícuota de 10 ml de muestra y se colocó en 100 ml de caldo tetrationato, de igual manera se tomaron 10 ml de la misma muestra y se colocaron en 100 ml de caldo selenito cistina; los tubos de ensayo se incubaron a 42,5 ºC y a 35 ºC por 24-48 horas para inhibir o restringir el crecimiento de la flora competitiva y favorecer la multiplicación de las Salmonellas. Posteriormente se sembró por separado los caldos tetrationato y selenito cistina sembrados en estría sobre la superficie seca de placas de medios selectivos sólidos agar XLD (Xilosa, Lisina, Desoxicolato), agar HE (Hektoen Entérico) y agar SB (Sulfato Bismuto); luego se invirtieron las cajas petri y se incubaron a 35 ºC por 24 horas. De cada cultivo en agar nutritivo se tomaron las colonias de Salmonella presuntiva y con una aguja se inoculó por picadura la columna del agar y por estría la superficie inclinada de los tubos con agar TSI (tres azúcares hierro) mientras que en los tubos con agar LIA (agar lisina hierro) se sembró con un asa por estría únicamente en la superficie inclinada del medio. Los tubos se incubaron a 35ºC por 24 horas. A partir de los tubos con TSI y LIA se inocularon en tubos con agar nutritivo para posteriormente ser llevados a incubación por 24 horas a 35ºC Luego del tiempo de incubación se procedió a confirmar la presencia o ausencia de Salmonella, para ello se realizaron las pruebas bioquímicas de la ureasa, lisina-descarboxilasa, indol, voges Proskauer. 3.8. ANÁLISIS DE DATOS En el análisis de aceptabilidad sensorial se empleó un diseño de bloques completos al azar (DBCA). Para los análisis físico-químicos se empleó un diseño completamente al azar (DCA). Los resultados en ambos casos fueron 41 procesados mediante un análisis de varianza (ANOVA) y las medias comparadas con una significancia de 0,05 usando el software estadístico STATGRAPHICS CENTURION XVI. 42 4. ANÁLISIS DE RESULTADOS 4. ANÁLISIS DE RESULTADOS 4.1. RECEPCIÓN DE MATERIA PRIMA 4.1.1. CARNE DE POLLO 4.1.1.1. Determinación de pH El resultado obtenido en la determinación de pH para la carne de pollo utilizada en la elaboración de salchichas tipo suiza se muestra en la Tabla 4.1. Tabla 4.1. Valor de pH obtenido para carne de pollo Materia Prima Valor de pH* Carne de Pollo 5.86 ± 0.24 * Valor promedio ± Desviación Standard de los resultados obtenidos. n=14 El resultado obtenido de pH para carne de pollo son similares a lo señalado por Jiménez & Carballo (2002), que indica que la carne a utilizarse para la elaboración de embutidos debe poseer valores de pH que oscilen entre 5.4 5.8, ya que valores de pH mayores a 6.2 hacen que la carne y en sí el embutido sea más fácilmente atacable por microorganismos, además el producto puede llegar a presentar una consistencia poco apreciable. 4.2. DETERMINACIÓN DE PERFIL LIPÍDICO 4.2.1. GRASA DORSAL DE CERDO En la Tabla 4.1, se muestran los resultados obtenidos en el análisis de cromatografía de gases para la grasa dorsal de cerdo. 43 Tabla 4.2. Perfil Lipídico de grasa dorsal de cerdo Mirístico Número lipídico C14:0 1.45 Palmítico C16:0 23.09 Palmitoleico C16:1 1.71 Esteárico C18:0 10.91 Oleico C18:1 40.24 Linoleico C18:2 20.11 Linolénico C18:3 0.60 Ácido Graso %* Ácidos Grasos Saturados 35.45 Ácidos Grasos Monoinsaturados 41.95 Ácidos Grasos Poliinsaturados 20.71 * Determinaciones realizadas en el laboratorio de DANEC El análisis de perfil lipídico en la grasa dorsal de cerdo reportó un contenido de 35.45 % de AGS, proveniente de los ácidos grasos mirístico, palmítico y esteárico; se obtuvo un 41.95 % de AGMI proveniente de los ácidos grasos palmitoleico y oleico; se cuantificó un 20.71 % de AGPI proveniente de los ácidos linoleico y linolénico. Los resultados obtenidos son similares a los reportados por Bañon et al., (2000), para el perfil lipídico de grasa dorsal de cerdo, quien describe que estos valores refieren a una grasa de buena calidad, sin embargo la grasa utilizada en el presente estudio puede considerarse como una grasa blanda, ya que el porcentaje de ácido linoleico es mayor al 15 %, por lo cual podría repercutir en la aceptabilidad de textura del embutido volviéndolo muy suave. 44 4.2.2. ACEITE DE AGUACATE En la Tabla 4.2, se muestran los resultados obtenidos en el análisis de cromatografía de gases para el aceite de aguacate. Tabla 4.3. Perfil lipídico de aceite de aguacate Número lipídico C16:0 18.00 Palmitoleico C16:1 9.42 Esteárico C18:0 0.61 Oleico C18:1 58.95 Linoleico C18:2 11.50 Linolénico C18:3 0.69 Ácido Graso Palmítico % Ácidos Grasos Saturados 18.61 Ácidos Grasos Monoinsaturados 68.37 Ácidos Grasos Poliinsaturados 12.19 * Determinaciones realizadas en el laboratorio DANEC El análisis de perfil lipídico en el aceite de aguacate reportó un contenido de 18.66 % de AGS, proveniente de los ácidos grasos palmítico y esteárico; se obtuvo un 68.37 % de AGMI proveniente de los ácidos grasos palmitoleico y oleico; se determinó un 12.19 % de AGPI proveniente de los ácidos linolénico y linoleico. Los resultados obtenidos para el perfil lipídico del aceite de aguacate están de acuerdo a los valores presentados por Acosta, (2011), quien reporta 16.99 % de AGS, 69. 89 % de AGMI, 13.09 % de AGPI. El contenido de ácidos grasos insaturados del aceite de aguacate es mayor que el contenido de estos mismos ácidos en aceites de maní, algodón, palma y coco, esto favorece al aceite de aguacate en características nutraceúticas cumpliendo 45 además con las exigencias de la OMS referentes a la diminución en el consumo de grasas saturadas (Valenzuela, 2002; Acosta, 2011). 4.3. RESULTADOS DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL Los resultados por atributos evaluados en el análisis de aceptabilidad sensorial se describen a continuación en la Tabla 4.3. Tabla 4.4. Resumen de medias por atributos Atributos2 Tratamientos1 Color Olor a 5.67±2.16 Sabor a 5.93±2.47 Textura al masticar a 6.22±2.39 a T1 5.00±2.63 T2 5.13±2.72 a 5.61±2.03 a 5.32±2.50 a 5.68±2.58 a T3 5.86±2.59 a 6.04±2.29 a 5.52±2.78 a 5.88±2.50 a Valor promedio ± Desviación Standard de los resultados obtenidos. n=100 1 Tratamientos con contenido de aceite de aguacate en sustitución de la grasa animal: T 1= 50 % de aceite, T2= 75 % de aceite, T3=100 % de aceite. 2 Letras diferentes en una misma columna indica diferencia significativa (P<0.05). 4.3.1. COLOR Como se muestra en la Figura 4.1, en el análisis d aceptabilidad se determinó una puntuación de 5.86 para el embutido con 100 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo, seguido del tratamiento con 75 % de aceite de aguacate con 5.13, y por último el tratamiento con 50 % de aceite de aguacate en su formulación que alcanzó una puntuación de 5.00. 46 6,00 Valoración promedio 5,80 5,60 5,40 5,20 Series1 5,00 4,80 4,60 4,40 T1 T2 T3 Tratamientos Figura 4.1. Calificación promedio obtenida para el atributo color en los tratamientos T1, T2, T3 Mediante el análisis de varianza realizado a los resultados obtenidos en el análisis de aceptabilidad sensorial para el atributo color, no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos. Por lo cual se rechazó la hipótesis nula y se pasó a comprobar la hipótesis alternativa. Se procedió a realizar la prueba de Tukey en la cual se determinó que no existían diferencias entre ningún par de medias a un nivel de confianza del 95,0 %. Pascual et al., (2002), reportan resultados similares al evaluar el atributo color, señalan que en las pruebas estadísticas realizadas no existían diferencias significativas entre las formulaciones donde se utilizaba aceite de oliva en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo en salchichas tipo Frankfurt. Banda (2010), señala que mediante la prueba de Tukey no se encontraron diferencias significativas para el atributo color y se estableció que el mejor tratamiento fue aquel que contenía el porcentaje más alto de grasa vegetal en sustitución de la grasa de cerdo, que en este caso fue 75 %. 47 Los resultados obtenidos por Banda (2010), coinciden en que el mejor tratamiento para el atributo color es aquel con mayor contenido de grasa de origen vegetal en la formulación de la salchicha. El color del aceite de aguacate y su cantidad presente en T 3, logró en el producto final un color mucho más parecido al presentado en una salchicha de pollo comercial como se muestra en la Figura 4.2. Figura 4.2. Salchicha tratamiento T3 y salchicha comercial de pollo Carrasco & López (2012), reportan que existe una mayor aceptación del color de una salchicha que se aproxime a la coloración encontrada en su equivalente comercial, ya que la gente está acostumbrada al color artificial que se le adiciona en el proceso de elaboración. 4.3.2. OLOR Como indican los datos de la Figura 4.3, se determinó una puntuación de 6.04 para el embutido con 100 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo, seguido del tratamiento con 50 % de aceite de 48 aguacate con 5.67, y por último el tratamiento con 75 % de aceite de aguacate en su formulación que alcanzó una puntuación de 5.61. 6,10 Valoración promedio 6,00 5,90 5,80 5,70 Series1 5,60 5,50 5,40 5,30 T1 T2 T3 Tratamientos Figura 4.3. Calificación promedio obtenida para el atributo olor en los tratamientos T1, T2, T3 Estadísticamente se estableció que el olor percibido por los panelistas para los tratamientos evaluados en el análisis de aceptabilidad sensorial, no presentaba diferencias significativas. Los panelistas evaluaron al tratamiento con 100 % de aceite de aguacate en su formulación como el que presentaba mejor olor. Selgas, Cáceres & García (2005), reportan que al disminuir el contenido de grasa de una salchicha cocida, la percepción del olor puede mejorar. Estos resultados van de acuerdo a lo descrito en el estudio de Pascual et al., (2002), donde no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los ensayos realizados con aceite de oliva en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo un la elaboración de salchicha tipo Frankfurt. 49 Banda (2010), reportan resultados similares, ya que en la evaluación estadística de los datos de aceptabilidad del atributo olor, no se encontraron diferencias importantes, sin embargo al realizar la prueba de Tukey se observó que el tratamiento con mejor aceptabilidad era aquel en el que se utilizaba el porcentaje más alto de grasa vegetal en sustitución de la grasa dorsal de cerdo. García et al., (2008), indican de igual manera que al evaluar el atributo olor en embutidos donde se utilizó un tipo de grasa vegetal derivada de la palma africana en sustitución parcial de la grasa de cerdo, no se encontraron diferencias significativas, no obstante los panelistas prefirieron los tratamientos con menor cantidad de grasa vegetal en su formulación. Los resultados obtenidos en el presente estudio y los presentados por Banda (2010) y García et al., (2008), sugieren que se puede mejorar considerablemente la apreciación del aroma del embutido si se utiliza aceite de aguacate en lugar de grasa vegetal derivada de la palma africana para sustituir en hasta un 100 % la grasa dorsal de cedo presente en salchichas. El mejoramiento de la percepción en el aroma del embutido al utilizar aceite de aguacate puede deberse a que el aguacate contiene 25 compuestos de aroma conocidos como “volátiles de aroma”, entre los cuales se encuentra el pentanal; este compuesto parecería ser responsable del olor y un ligero sabor a nueces del aguacate maduro Haas (Obenland, 2012). La variedad de aguacate Haas es utilizada en la elaboración del aceite usado para la presente investigación. Olaeta (2003), indica que en el proceso de obtención del aceite de aguacate se logra mantener todas las propiedades originales de la fruta. 50 4.3.3. SABOR En el análisis estadístico de los datos obtenidos para el atributo sabor, no se obtuvo diferencias estadísticamente significativas en los tratamientos evaluados. Como se muestra en la Figura 4.4, se determinó una puntuación de 5.93 para el embutido con 50 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo, seguido del tratamiento con 100 % de aceite de aguacate con 5.52, y por último el tratamiento con 75 % de aceite de aguacate en su formulación que alcanzó una puntuación de 5.32. Los resultados obtenidos son similares los presentados en el estudio realizado por Yildiz & Serdaroglu (2012), donde no se encontraron diferencias significativas al evaluar el atributo sabor al sustituir la grasa de cerdo por aceite de avellana en la elaboración de salchichas tipo Frankfurt. Sin embargo se presenta una puntuación más alta de aceptabilidad en los tratamientos elaborados con menor cantidad de aceite de avellana como sustituto parcial de la grasa dorsal de cerdo. 6,0 Valoración promedio 5,9 5,8 5,7 5,6 5,5 Series1 5,4 5,3 5,2 5,1 5,0 T1 T2 T3 Tratamientos Figura 4.4. Calificación promedio obtenida para el atributo sabor en los tratamientos T1, T2, T3 51 En el estudio realizado por Pascual et al., (2002), reportan de igual manera que no se encontró diferencias significativas para el atributo sabor entre los ensayos realizados, adicionalmente señalan que en trabajos similares en los que se utilizó aceite de oliva, girasol, maíz y soya tampoco se encontraron diferencias significativas respecto al sabor. Pascual et al., (2002), indican adicionalmente que a pesar de no encontrar diferencias significativas en el sabor de las salchichas elaboradas, al realizar la prueba de Tukey, se determinó que se otorgaba cierta preferencia al tratamiento donde se utilizó mayor cantidad de grasa animal en la formulación de salchichas. Los autores sugieren que este resultado se debe a la percepción de la grasa animal en la formulación, la cual otorgó un mejor gusto al producto; esta premisa concuerda con Selgas et al., (2005), quien indica que en su estudio, la grasa animal contribuyó al sabor de los productos cárnicos, logrando de esta manera mejorar la percepción de los consumidores hacia los mismos. 4.3.4. TEXTURA De acuerdo al análisis estadístico realizado a los resultados para el atributo textura, no se encontró diferencias estadísticamente significativas en los tratamientos evaluados. Como se muestra en la Figura 4.5, se determinó una puntuación de 6.22 para el embutido con 50 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo, seguido del tratamiento con 100 % de aceite de aguacate con 5.88, y por último el tratamiento con 75 % de aceite de aguacate en su formulación que alcanzó una puntuación de 5.68. De igual manera García et al., (2008), exponen que en la prueba sensorial, los resultados para el atributo textura no presentan diferencias altamente significativas, por lo cual se escogió el tratamiento que presentó la mejor media. 52 Pascual et al., (2002), reporta resultados similares al no haber encontrado diferencias importantes en la evaluación sensorial para el atributo textura, sin embargo explica que se encontró una mayor preferencia para el tratamiento en el cual utilizó un menor porcentaje de aceite de oliva en sustitución parcial de la grasa de cerdo en salchichas Frankfurt. 6,3 Valoración promedio 6,2 6,1 6,0 5,9 5,8 Series1 5,7 5,6 5,5 5,4 T1 T2 T3 Tratamientos Figura 4.5. Calificación promedio obtenida para el atributo textura en los tratamientos T1, T2, T3 Pascual et al., (2002), adicionalmente señalan que el empleo de grasa animal logra ablandar el producto incrementando de esta manera la terneza. También aclaran que esta variabilidad en la aceptabilidad se puede regular controlando los niveles de grasa y humedad sin evadir los límites establecidos para el producto. Villalobos et al., (2009), señalan que la grasa contribuye al sabor, textura y sensación de jugosidad en la elaboración de salchichas, de esta manera corrobora lo señalado por Pascual et al., (2002), acerca de las propiedades que otorga el uso de grasa animal en la elaboración de embutidos. 53 4.3.5. SELECCIÓN DEL MEJOR TRATAMIENTO En la tabla 4.4, se exponen los resultados de aceptabilidad sensorial por tratamientos. Los resultados presentados son una media de las valoraciones obtenidas de todos los atributos evaluados por cada tratamiento. No se encontraron diferencias significativas entre cada tratamiento, por lo cual utilizando una separación múltiple de medias por la prueba de Tukey se eligió el mejor tratamiento. Tabla 4.5. Resumen de medias por tratamientos Tratamientos1 Media2 T1 5.71±0.52 a T2 5.44±0.26 a T3 5.82±0.22 a 1 Porcentajes de contenido de aceite de aguacate en sustitución de la grasa animal: T 1= 50 % de aceite, T2= 75 % de aceite, T3=100 % de aceite. 2 Letras diferentes en una misma columna indica diferencia significativa (P<0.05). El tratamiento que presentó mejores características de aceptabilidad fue el tratamiento T3 que contenía 100 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo con una calificación promedio de 5.82, seguido del tratamiento con 50 % de aceite de aguacate con 5.71, y por último el tratamiento con 75 % de aceite de aguacate en su formulación que alcanzó una puntuación de 5.44. En la figura 4.6 se aprecia la calificación promedio de los atributos evaluados por cada tratamiento. 54 Color 7,0 6,0 5,0 4,0 3,0 2,0 1,0 Textura al masticar 0,0 Olor Sabor T1 (50% aceite aguacate) T2 (75% aceite aguacate) T3 (100% aceite aguacate) Figura 4.6. Perfil descriptivo de los tratamientos en función a su contenido de aceite García et al., (2008), reportan resultados similares, ya que al no encontrar diferencias significativas para las pruebas sensoriales de color, olor y textura se eligió la muestra con el mejor puntaje promedio; sin embargo en la prueba sensorial de sabor, se encontró diferencia significativa, por este motivo realizó la prueba de Tukey que confirmó la diferencia entre los tratamientos. Esta diferencia en el atributo sabor no afectó la selección del mejor tratamiento, ya que de igual manera se eligió la muestra que presentó el mayor valor promedio en relación al puntaje de todos los atributos evaluados. Adicionalmente indica que luego del análisis estadístico de los resultados, se pudo concluir que el tratamiento con mejores cualidades fue el que contenía 100 % de sustitución de grasa animal por grasa vegetal. 55 4.4. ANÁLISIS FÍSICO - QUÍMICO Se sometieron a análisis dos tratamientos, el tratamiento T3, mismo que obtuvo la mejor calificación en la prueba de aceptabilidad sensorial y el tratamiento control en el cual se utilizó 100 % de grasa dorsal de cerdo en su formulación. Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 4.5, donde se muestran las medias y desviación estándar de cada análisis realizado con el objetivo de realizar una comparación entre los mismos. Tabla 4.6. Composición proximal de los tratamientos analizados Tratamiento Salchicha 100% grasa dorsal de cerdo Salchicha 100% aceite de aguacate Proteína* (%) Grasa* (%) AGS* (%) AGMI* (%) AGPI* (%) AGT* (%) 13.23±0.77 a 16.93±1.06 a 8.46±0.28 a 2.99±0.10 a 4.56±0.15 a 0 12.56±0.15 a 13.26±1.39 b 3.19±0.37 b 6.50±0.75 b 2.03±0.23 b 0 * Cada valor es el promedio ± la Desviación Standardde los resultados obtenidos. n=3 * Letras diferentes en una misma columna indica diferencia significativa (P<0.05). 4.4.1. PROTEÍNA Los resultados obtenidos en la determinación de proteína para el tratamiento T3, y el tratamiento control se muestra en la Figura 4.7. Se determinó un contenido de proteína de 13.23 ± 0.77 para el embutido con 100 % de grasa dorsal de cerdo, mientras tanto el tratamiento con 100 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo reportó un contenido de proteína de 12.56 ± 0.15. De acuerdo a la norma INEN 1338:12, el producto elaborado es un embutido Tipo I, ya que contiene como mínimo 12 % de proteína. 56 14,00 13,00 12,00 % Proteína 11,00 10,00 Salchicha 100% grasa dorsal de cerdo Salchicha 100% aceite de aguacate Figura 4.7. Contenido de proteína de los tratamientos analizados Mediante el análisis de varianza realizado se determinó que no existían diferencias entre las medias de los tratamientos a un nivel de confianza del 95,0%. En el tratamiento que contenía 100 % de aceite de aguacate, se observa una reducción en el contenido de proteína en un 0.67 % en relación al tratamiento con 100 % de grasa dorsal en su formulación. La variación en el contenido de proteína entre los tratamientos evaluados pudo ser ocasionada por la cantidad de proteína presente en grasa dorsal de cerdo. La grasa dorsal de cerdo contiene entre 2.7 y 8.9 % de proteína (FAO, 2007; Mataix, 2009). La proteína encontrada en el tejido adiposo proviene del tejido conectivo donde los animales bien alimentados almacenan grasa. Este tejido conectivo forma la fascia que se encuentra en la capa adiposa. La fascia es una membrana conjuntiva que limita el músculo de la grasa y de otros músculos formando grupos funcionales; proporciona una matriz de sostén además de permitir a la grasa adherirse extensamente a los músculos. Las proteínas que componen este tejido conectivo son el colágeno y elastina (Chaitow & Walker, 2006; Grüner, et al., 2005). 57 Adicionalmente la variación del contenido de proteína entre los tratamientos también pudo ser ocasionada por cantidad de proteína presente en la canal de pollo utilizada en la elaboración del embutido. López (2009), indica que la carne de pollo tiene 18 - 20 % de proteína, pero estos valores dependen del método de cocción, la parte de la canal tomada o la alimentación del ave. Arenas de Moreno et al., (2000), reportan que en los cortes de pechuga y muslos sin piel, el contenido de proteína es de 19.7 ± 0.36 %. Yildiz & Serdaroglu (2012), reportan de igual manera que al remplazar la grasa dorsal de cerdo por aceite de avellana en un 60 – 90 % en la elaboración de salchichas, existió una variación en el contenido de proteína de los tratamientos evaluados, sin embargo no representó una diferencia estadísticamente significativa. 4.4.2. GRASA TOTAL Los resultados obtenidos en la determinación de grasa total para el tratamiento T3, y el tratamiento control se muestra en la Figura 4.8. Se analizaron los resultados obtenidos en la determinación del contenido de grasa mediante un análisis de varianza. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos. Se determinó un contenido de grasa de 16.93 ± 1.06 para el embutido con 100 % de grasa dorsal de cerdo, mientras que el tratamiento con 100 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo reportó un contenido de proteína de 13.26 ± 1.39. 58 18,00 17,00 16,00 15,00 14,00 % Grasa 13,00 12,00 11,00 10,00 Salchicha 100% grasa dorsal de cerdo Salchicha 100% aceite de aguacate Figura 4.8. Contenido de proteína de los tratamientos analizados Pascual et al., (2002), de igual manera indica una reducción en el contenido de grasa total en salchichas tipo Frankfurt con aceite de oliva en su formulación en comparación al contenido encontrado en el tratamiento control el cual contenía 100 % de grasa dorsal. No obstante a diferencia de los resultados obtenidos en el presente estudio, Pascual et al., (2002), reportan una reducción del 50 - 65 % en el contenido de grasa total en sus ensayos con aceite de oliva en comparación con la prueba testigo. Los autores señalan que para conseguir este porcentaje de reducción de grasa total, no utilizaron únicamente aceite de vegetal. En el estudio se reemplazó el 25 % de grasa dorsal inicial en la formulación utilizando un porcentaje menor al 8 % de aceite de oliva y el 17 % restante fue sustituido con un porcentaje de hielo y carne, de esta manera se redujo drásticamente todo el contenido de grasa sin depender únicamente de la composición del aceite de oliva. Pascual et al., (2002), indica que es importante incrementar el contenido de carne al trabajar con una mayor cantidad de agua y con una reducida cantidad de grasa, ya que la carne actúa como emulsionante y ligante, 59 igualmente evita la pérdida de humedad por evaporación. Adicionalmente los autores indican que es necesario conseguir una proporción adecuada de la relación proteína/agua y proteína/grasa para alcanzar los resultados deseados. Yildiz & Serdaroglu (2012), reportan resultados similares a los presentados en esta investigación, ya que al sustituir la grasa dorsal de cerdo únicamente con aceite de avellana, se alcanzó una reducción del 0.05 - 0.13 % en el contenido de grasa total de los ensayos experimentales contrastando con el contenido del tratamiento testigo, al tener este porcentaje bajo de reducción de grasa total los autores declaran que no existieron diferencias significativas en el contenido de grasa total al utilizar aceite de avellana. 4.4.3. PERFIL LIPÍDICO Los resultados obtenidos en la determinación de perfil lipídico para el tratamiento T3, y el tratamiento control se muestra en la Figura 4.9. A través de un análisis de varianza se determinó que la adición de aceite de aguacate alteró la composición de ácidos grasos de las salchichas elaboradas, ya que se encontraron diferencias significativas respecto a la composición de AGS, AGMI y AGPI. El tratamiento con 100 % de aceite de aguacate en sustitución de la grasa dorsal de cerdo reportó un contenido de 3.19 % de AGS, 6.5 % de AGMI y 2.03 % de AGPI. El análisis de perfil lipídico del embutido con 100 % de grasa dorsal de cerdo presentó un 8.46 % de AGS, 2.99 % de AGMI y 4.56 % de AGPI. En los dos tratamientos evaluados se obtuvo 0 % ácidos grasos trans. 60 Existe una disminución en el contenido de AGS en el tratamiento con 100% de aceite de aguacate, probablemente debido a que la grasa dorsal de cerdo contiene un 35.45 % de AGS contra el 18.61 % presente en el aceite de aguacate. Salchicha 100% grasa dorsal de cerdo 8,46 Salchicha 100% aceite de aguacate 2,99 3,19 0 1 2 6,5 3 4 AGS 5 6 AGMI 4,56 2,03 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 AGPI Figura 4.9. Perfil lipídico de los tratamientos evaluados Se determinó un aumento en el contenido de AGMI en el tratamiento con 100 % de aceite de aguacate, posiblemente a causa del contenido de este tipo de ácidos grasos en el aceite de aguacate, el cual es de 68.37 % contra un 41.95 % presente en la grasa dorsal de cerdo. A través del análisis de perfil lipídico se estableció una disminución en el contenido de AGPI en la salchicha elaborada con aceite de aguacate en relación al tratamiento control con grasa de cerdo. Esta variación pudo haber sido ocasionada por el contenido de AGPI presente en el aceite de aguacate que es de 12.19 %, mientras que en la grasa de cerdo este contenido es mayor llegando a 20.71 %. De acuerdo a Bañon et al., (2000), el alto nivel de insaturación de la grasa de cerdo pudo deberse al uso de alimentos 61 balanceados ricos en ácido linoleico como son el maíz o la soja en la dieta de los cerdos. Yildiz & Serdaroglu (2012), reportan resultados similares a los presentados en este estudio respecto al perfil lipídico de salchichas, los autores indican una disminución del contenido de AGS en la salchicha elaborada utilizado un 90 % de aceite de avellana en sustitución de la grasa dorsal de cerdo. Adicionalmente muestran un aumento del contenido de AGMI en relación a su tratamiento control. A diferencia de los resultados obtenidos en la presente investigación, Yildiz & Serdaroglu (2012), reportan un aumento del contenido de AGPI en relación a su muestra control, esta diferencia puede deberse a que de acuerdo al perfil lipídico presentado por los autores, el aceite de avellana contiene entre 8 - 15.5 % de AGPI a diferencia del aceite de aguacate utilizado, el cual de acuerdo al análisis de perfil lipídico elaborado presenta un 12.19 % de AGPI. En los dos tratamientos evaluados se obtuvo 0 % ácidos grasos trans, lo cual indica que no existió hidrogenación biológica en la grasa de cerdo como consecuencia de la degradación bacteriana de ácidos grasos por el efecto de una fermentación anaerobia; de igual manera no existió hidrogenación debida al calentamiento en el proceso de cocción en el aceite de aguacate Panisello, (2004); Ruiz, (2009) y Serna, (2010). Un alimento al que no contiene altos niveles de ácidos grasos saturados al igual que ácidos grasos trans, no se convertirá en precursor del aumento de los niveles del colesterol LDL o colesterol malo en la sangre. Además, a diferencia de las grasas saturadas, los ácidos grasos trans provocan una caída del colesterol HDL o colesterol bueno, elevando de esta manera los niveles de triglicéridos en la sangre, ambos fenómenos elevan el riesgo de sufrir enfermedades coronarias (Serna, 2010). 62 La salchicha elaborada con 100 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo ofrece excelentes características nutricionales de acuerdo a su perfil de ácidos grasos. 4.5. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO En la Tabla 4.6 se muestran los resultados del análisis microbiológico al que cada tratamiento de interés fue sometido. Al comparar los resultados obtenidos con los requisitos de la norma INEN 1338:12, los valores resultaron ser favorables, por lo cual se determina que los productos evaluados se realizaron bajo las exigencias de inocuidad necesarias para este tipo de producto cárnico. Tabla 4.7. Resultados de análisis microbiológicos y requisitos según norma INEN 1338:12 para productos cárnicos cocidos Salchicha 100% grasa dorsal de cerdo Salchicha 100% aceite de aguacate Requisito Requisitos norma INEN 1338:12 Nivel de aceptación Nivel de rechazo Aerobios mesófilos ufc/g* 5.6 x 104 4.1 x 104 5.0 x 105 1.0 x 107 Escherichia coli ufc/g* Ausencia Ausencia <10 - Staphilococcus aureus ufc/g* 1.8 x 102 1.0 x 102 1.0 x 103 1.0 x 104 Salmonella1 /25g Ausencia Ausencia Ausencia - 1 Especies cero tipificadas como peligrosas para humanos * Requisitos para determinar término de vida útil ** Requisito para determinar inocuidad del producto Se identificó la presencia de Aerobios mesófilos y Staphilococcus aureus en los tratamientos analizados, sin embargo se logró notar una menor carga microbiana en el tratamiento con 100 % de aceite de aguacate en su formulación. 63 Pascual & Calderón (2000), indican que el crecimiento bacteriano en aceites y grasas, a excepción de margarinas, es muy limitado y en la mayoría de casos llega a ser nulo, ya que las baterías no pueden multiplicarse en un producto si este no contiene agua, razón por la cual los aceites generalmente no suponen un problema de carácter sanitario. La norma CODEX STAN 19-1981 para grasas y aceites comestibles no regulados por normas individuales, establece un contenido máximo de humedad del 0.2 %, mientras que la norma NMX F-052 para aceite de aguacate, establece en sus especificaciones un contenido de humedad máximo de 0.5 % para aceite de aguacate y un 0.1 % de humedad para aceite comestible puro de aguacate. FAO (2007), establece un contenido de humedad del 7.7 % para la grasa dorsal de cerdo al ser un producto fresco. La grasa dorsal de cerdo al contener mayor porcentaje de humedad y al ser un producto fresco es más susceptible a ataques microbianos, mientras que el aceite de aguacate al contener un porcentaje de humedad relativamente bajo y ser un producto procesado, presentará una carga microbiana muy baja. 4.5.1. Aerobios mesófilos De acuerdo a Salgado (2001), la presencia de Aerobios mesófilos es un indicador del deterioro de los alimentos. La carga microbiana de Aerobios mesófilos encontrada en los tratamientos evaluados fue inferior a los niveles establecidos por la norma INEN 1338:12, por lo cual las muestras al momento de ser analizadas, a nivel microbiológico no mostraron signos de deterioro. 64 Banda (2010), reporta valores similares para el contenido de Aerobios mesófilos, exponiendo que no existe deterioro a nivel microbiológico hasta el día 20, adicionalmente se indica que al utilizar grasa de origen vegetal en sustitución de la grasa dorsal de cerdo, la salchicha puede tener una vida útil de aproximadamente 28 días, tiempo en el cual la carga microbiana excedería los valores establecidos por la norma INEN 1338:96. 4.5.2. Escherichia coli Salgado (2001), indica que al identificar E. coli en un alimento implica que otros microorganismos de origen fecal, incluyendo patógenos, podrían estar implicados en una enfermedad gastrointestinal. No se identificaron unidades formadoras de colonias (UFC) de E. coli en los tratamientos evaluados, por lo cual las salchichas elaboradas cumplen con los requisitos establecidos por la norma INEN1338:12, además de ser un alimento no precursor de enfermedades gastrointestinales. Los resultados obtenidos son similares a lo indicado por Banda (2010), quién tampoco reporta presencia de E. coli en salchichas elaboradas con grasa vegetal en sustitución de la grasa dorsal de cerdo. 4.5.3. Staphylococcus aureus Se identificó la presencia de S. aureus en los tratamientos analizados, sin embargo los valores reportados son inferiores a los requeridos por la norma INEN 1338:12, por lo cual los embutidos elaborados cumplen con los requisitos establecidos en la legislación ecuatoriana. De acuerdo a Huss (2000), los Staphilococcus son organismos ubicuos u omnipresentes, los cuales pueden encontrarse en el agua, aire, polvo, leche, 65 aguas residuales, pavimento y todos los artículos que entran en contacto con el hombre, además de sobrevivir muy bien en el medio ambiente. Barreto et al., (2010), indica que S. aureus puede llegar a los alimentos procedente de animales como sucede con algunos lácteos, sin embargo en la mayoría de los casos su presencia se debe a errores en el procesamiento o manipulación. Adicionalmente se indica que alimentos con sal o azúcar también proveen condiciones favorables para S. aureus al inhibirse el crecimiento de otros microorganismos más sensibles a las condiciones osmóticas del medio. S. aureus puede tolerar concentraciones salinas entre 10 y 20 % y de azúcar entre 50 y 60 %, también soporta los nitritos, cualidad que le permite crecer en productos conservados por esta vía como es el caso de salchichas. Otro factor que contribuye al crecimiento de S. aureus también es indicado por Barreto et al., (2010), quien señala a la naturaleza intrínseca del alimento, destacando como más susceptibles a los ricos en proteínas como cárnicos, carne de aves, pescados y sus derivados, leche y productos lácteos. 4.5.4. Salmonella Grüner et al., (2005), señala que la Salmonella se transmite a través de alimentos que son contaminados bajo ciertas circunstancias como una insuficiente higiene corporal del operario al no lavarse las manos adecuadamente, así como no conservar ciertos alimentos a temperatura ambiente o si no se los manipula con las debidas normas de higiene. No se encontró presencia de Salmonella en los tratamientos evaluados lo que indica que la elaboración del producto cárnico se realizó bajo normas de higiene adecuadas. Las salchichas elaboradas cumplen con los requisitos 66 establecidos en la norma INEN 1338:12, garantizando de esta manera el cumplimiento de los procedimientos de seguridad alimentaria. Banda (2010), de igual manera reporta que en las pruebas microbiológicas para Salmonella los resultados fueron negativos, indicando de esa manera ausencia de este microorganismo. 67 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 5.1. CONCLUSIONES La grasa dorsal de cerdo presentó un nivel de instauración bastante elevado debido a su alto porcentaje de ácido linoleico; por su parte el alto contenido de ácidos grasos insaturados encontrados en el aceite de aguacate, hace de este una excelente opción para usarse como reemplazo de la grasa dorsal de cerdo en la elaboración de salchicha tipo suiza. El 100 % de aceite de aguacate presente en la formulación permite conservar las características sensoriales y tecnológicas propias de una salchicha de pollo tipo suiza, además el uso de aceite de aguacate permitió obtener mejor aceptabilidad sensorial por sobre las salchichas con grasa animal en su composición. El tratamiento con 100 % de grasa animal presentó un mayor porcentaje de proteína ocasionado por la presencia de tejido conectivo en la grasa de cerdo, sin embargo los dos tratamientos evaluados reportaron más del 12 % de proteína, por lo cual de acuerdo a la norma INEN 1338:12, se los considera como salchichas tipo I. La adición de aceite de aguacate alteró la composición de ácidos grasos de las salchichas elaboradas, ya que se encontraron diferencias significativas para los tratamientos evaluados respecto a la composición de ácidos grasos saturados e insaturados. Se identificó la presencia de Aerobios mesófilos y Staphilococcus aureus en los tratamientos analizados, no obstante los resultados reportados en son inferiores a los valores dictados por la norma INEN 68 1338:12, por lo cual de acuerdo a la legislación normativa ecuatoriana los embutidos elaborados cumplen con los requisitos de seguridad alimentaria. Se cuantificó una carga microbiana menor en el tratamiento con 100 % de aceite de aguacate en su formulación, debido a que la grasa dorsal de cerdo al contener mayor porcentaje de humedad y al ser un producto fresco fue más susceptible a ataques microbianos, mientras que el aceite de aguacate al contener un porcentaje de humedad relativamente bajo y ser un producto procesado, presentó una carga microbiana muy baja. 5.2. RECOMENDACIONES Realizar pruebas instrumentales de color y textura, ya que el uso de aceite de aguacate como sustituto de la grasa dorsal brinda diferentes propiedades sensoriales que varían de acuerdo al porcentaje de sustitución de grasa dorsal, mismas que se podrían mejorar si se obtiene valores precisos de color y textura.. Realizar un análisis de vida útil del producto a nivel microbiológico, ya que el aceite de aguacate al no ser susceptible a ataques microbianos podría influir en el crecimiento de bacterias en el embutido. Estudiar si el contenido de clorofila en el aceite de aguacate influye en el color y en su oxidación al ser utilizado en emulsiones cárnicas. 69 BIBLIOGRAFÍA BIBLIOGRAFÍA Acosta, M. (2011). Evaluación y escalamiento del proceso de extracción de aceite de aguacate utilizando tratamiento enzimático. Tesis de Pregrado de Ingeniería Química y Ambiental. Universidad Nacional de Colombia. Bogotá, Colombia. ANIAME. (2002). El aceite de aguacate en México, Revista de Asociación Nacional de Industriales de Aceites y Mantecas Comestibles, A.C, 8(37), 1-8. AOAC. (2012). Official Methods of Analisis (19th Ed.). Association of Official Analytical Chemists. Gaithersburg, USA. Arenas de Moreno, L., Vidal, A., Huerta Sanchez, D., Navas, Y., Uzcategui, S., & Huerta Leidenz, N. (2000). Análisis comparativo proximal y de minerales entre carnes de iguana, pollo y res, , 50(4), 409-415. Banda, D. (2010). El Efecto de la sustitución de grasa animal (cerdo) por grasa vegetal (Danfat FRI – 1333) en la formulación y elaboración de salchichas Frankfurt. Tesis de Pregrado de Ingeniería de Alimentos. Universidad Técnica de Ambato. Ambato, Ecuador. Bañón, S., Granados M., Cayuela J., Gil, M., Costa E., & Garrido M. (2000). Calidad de la Grasa Obtenida a Partir de Cerdos Magros, Anales de Veterinaria de Murcia, 16, 77-88. Barreto, G., Sedrés, M., Rodríguez, H., & Guevara, G. (2010). Comportamiento de brotes debidos a enfermedades transmitidas por 70 alimentos, Revisiones de la Ciencia, Tecnología e Ingeniería de los Alimentos, 10(1), 4-12. Barro, C., González, G. (1979). Carotenoides en especies cultivadas del género Vicia, Revista Sociedad Española para el estudio de los pastos (SEEP), 9(2), 125-132. Bautista, C., Ramírez, J., Gaitán, P., Pérez, A., Moreno, R., Lucero, D., & García, C. (2012). Sustitución de grasa animal por aceite vegetal en emulsiones cárnicas y evaluación de sus características de calidad de embutidos escaldados, Revista Púbica de salud y nutrición, 2, 625629. Carrasco, A., & López, E. (2012). Evaluación sensorial de salchicha de pechuga de guajolote criollo (Meleagris gallopavo Linn) alimentado con aceite esencial de orégano (Lippia graveolens), Revista de Universidad Autónoma de Chapingo: Departamento de Enseñanza, Investigación y Servicio en Zootecnia, 2(1), 18-32. Carvajal, G. (2001). Valor nutricional de la carne de: res, cerdo y pollo. Costa Rica: CORFOGA. Chaitow, L., & Walker, J. (2006). Aplicación clínica de las técnicas neuromusculares. (Vol. II). Badalona: Editorial Paidotribo. CODEX. (1981). Grasas y aceites comestibles no regulados por normas individuales. CODEX alimentarius international food standards, 19. Cossio, J. (2008). Evaluación sensorial de canales de pollo enfriadas por inmersión utilizando fosfatos como mejoradores de calidad. Tesis de maestría en ciencias, Escuela de Zootecnia Universidad Autónoma de Chihuahua. México. 71 Diario Hoy., (27 de octubre de 2007), El consumo de embutidos alcanza los $120 millones. Recuperado el 28 de abril de 2013, de HOY: http://www.hoy.com.ec. Diario La Hora. (22 de Noviembre de 2013). El “semáforo” alimenticio tiende al amarillo. Recuperado el 01 de junio de 2014, de La Hora: http://www.lahora.com.ec. FAO. (2007). Meat processing technology for small- to medium- scale producers. Bangkok: FAO. Fernández, M., & Marsó., M. (2003). Estudio de la carne de pollo en tres dimensiones: valor nutricional, representación social y formas de preparacion. Buenos Aires: Instituto Universitario de Ciencias de la Salud Fundación H.A Barceló. García, H., Palo, P., & Salas, J. (2008). Sustitución De Grasa Animal Por Grasa Vegetal En La Elaboración De Salchicha Frankfurt, Revista Salud Pública y Nutrición, 6(6), 42-45. Gaytán, C. (2006). Factores que afectan la calidad de la carne de pollo, Colegio de Postgraduados en Ciencias Agrícolas. México. Gil, A. (2010), Tratado de nutrición (2da ed.). España: Editorial Médica Panamericana. Grüner, H., Metz, R., & Gíl, A. (2005). Procesos de cocina. Madrid: Akal S.A. . Huss, H. (2000). Aseguramiento de la calidad de los productos pesqueros. Dinamarca: FAO. 72 IMNC. (2007). Aceites y grasas. Aceite de aguacate. Especificaciones. Instituto Mexicano de Normalización y Certificación, F 052. INEC. (2011). Registro de Defunciones 2011. Recuperado el 25 de Mayo de 2013, de INEC: http://www.inec.gob.ec. INEN. (2012). Carne y productos cárnicos. Productos cárnicos crudos, productos cárnicos curados-madurados y productos cárnicos precocidos-cocidos. Requisitos. Instituto Nacional Ecuatoriano de Normalización, 1338. INEN. (1999). Control microbiológico de los alimentos. Toma, envío y preparación de muestras para el análisis microbiológico. Instituto Nacional Ecuatoriano de Normalización, 1529-2. Izquierdo, P., García, A., Allara, M., Rojas, E., Torres, G., & González, P., (2007). Análisis Proximal, Microbiológico y Evaluación Sensorial de Salchichas Elaboradas a Base de Cachama Negra (Colossomamacropomum), Revistas científica Facultad de ciencias veterinarias Universidad de Zulia, 7(3), 294-300. Jiménez, F., & Carballo, J. (2002). Principios Básicos de Elaboración de Embutidos, Ministerio de Agricultura y Alimentación, 4(89), 1-20. López, A. (25 de Octubre de 2009). Caracteristicas de la carne de pollo. Recuperado el 15 de abril de 2013, de AYLópez: http://aylopez.com Mataix, J. (2009). Tabla de composición de alimentos (5ta Ed.). Granada: EUG. 73 Mateo, D., Llano, O., Ochoa, F. (2006). La carne de pollo: proteínas de alta calidad, vitaminas, y poca carga calórica, Guía: La Carne de pollo en la alimentación saludable, 1-3. Molina, D., Arango, C., Restrepo, A., & Amézquita., A. (2001). Industria de carnes, Colombia: UNC. Monge, J. (2005). Producción Porcina (2da ed.). Costa Rica: UENED. Mountney, J., & Parkhust, R. (2001). Tecnología de Producción Agrícola. Connecticut: ACRIBIA S.A.. Obenland, D., Collin, s., Sievert, J., Negm, F., & Arpaia, M. (2012). Influence of maturity and ripening on aroma volatiles and flavor in ‘Hass’ avocado. Postharvest Biology and Technology, 71, 41-50. Olaeta, J. (2003). Industrialización del aguacate: estado actual y perspectivas futuras. Proceedings V World Avocado Congress, 749754. Panisello, J. (2004). Las 100 preguntas que siempre quiso hacer: mitos y verdades en torno a la alimentación (Vol. I). Barcelona: Glosa. Paltrinieri, G., & Meyer, M. (2007). Elaboración de productos cárnicos. Manuales para producción agropecuaria (2da ed.). México: Trillas S.A.. Pascual, CH., Ordoñez, S., & Olivares, G. (2002). Elaboración de Salchicha tipo Frankfurt con aceite virgen de oliva, Revista Anales Científicos, 195-219. 74 Pascual, M., & Calderón, V. (2000). Microbiología Alimentaria: Metodología Analítica para Alimentos y Bebidas (2da ed.). Madrid: Díaz de Santos. Ranken, M. (2003). Manual de Industria de la Carne, Madrid: Mundi-Prensa. Rey, J., & Gualdron, L. (2011). Evaluación de la sustitución de grasa animal por grasa vegetal insaturada en la elaboración de un embutido de carne de búfalo (Bubalus bubalis), Información Tecnológica, 22(2), 4354. Ruiz, V. (2010). Acidos grasos trans. Recomendaciones para reducir su consumo, Revista cubana de alimentación y nutrición, 19(2), 364-369. Salgado, C. (2001). Evaluación técnica de una salchicha de desayuno elaborada en Zamorano. Tesis de Pregrado de Ingeniería Agronómica. Escuela Agrícola Panamericana “Zamorano”. Honduras. Selgas, M., Cáceres, E., García, M. (2005). Long-chain soluble dietary fibre as functional ingredient in cooked meat sausages, Food Science and Technology International, 11(1), 1–7. Serna, I. (2010). Guía de Nutrición y Alimentación Saludable: Los Macronutrientes: Hidratos de Carbono, Grasas y Proteínas (4ta ed.). Valencia: Concejalía de Sanidad del Ayuntamiento de Valencia. Silva, P., Campagna, D., Maiztegui, L., Somenzini, D., García, P., Font, M & Di Masso, R. (2006). Espesor y composición de ácidos grasos de la grasa dorsal en cerdos a campo restringidos en días alternos en dos épocas del año, Revista Argentina de Producción Animal, 26, 181191. 75 Torrejón, C., & Uauy, R. (2011). Calidad de grasa, arterioesclerosis y enfermedad coronaria: efectos de los ácidos grasos saturados y ácidos grasos trans, Revista Médica de Chile, 139(7), 924-931. Torricella, R., Zamora, E., & Pulido, H. (2007). Evaluación sensorial aplicada a la investigación, desarrollo y control de la calidad en la industria alimentaria (2da ed.). La Habana: Editorial Universitaria. Uzcátegui, S., Giuffrida, M., Arenas de Moreno, L., Jerez, N. (2010). Contenido proximal, lípidos y colesterol de las carnes de res, cerdo y pollo obtenidas de expendios carniceros de la zona sur de Maracaibo, Revista Venezolana De Tecnología Y Sociedad Instituto Universitario De Tecnología De Maracaibo, 3(1), 13-29. Valenzuela, A., Sanhueza J., & Nieto, S. (2002). ¿Es posible mejorar la calidad nutricional de los aceites comestibles?, Revista Chilena de Nutrición, 29(1). Villalobos, L., Vásquez, C., & Soto, S. (2009). Efecto de la fibra dietética sobre la textura de salchichas tipo Viena, Coloquio nacional en ciencia y tecnología de la carne, 21-23. Yildiz-Turp, G. & Serdaroglu, M. (2012). Partial Substitution of beel Fat with Hazelnut Oil Type Sausages: Effects on Chemical, Physical and Sensorial Quality, Journal of Food Technology, 10(2), 32-38. 76 ANEXOS ANEXO I PROCESO DE ELABORACIÓN OBTENCIÓN DE MATERIA PRIMA: A B ANEXOS C D E F G H ANEXO II PROCESO DE ELABORACIÓN Sal nitral (A); trifosfato de sodio (B); eritorbato de sodio (C); mezcla de conservantes (D); pechuga de pollo (E); grasa dorsal de cerdo (F); Tripa artificial calibre 18 (G); aceite de aguacate (H). RECEPCIÓN DE MATERIA PRIMA: A B Limpieza de carne de pollo (A); limpieza de grasa dorsal de cerdo (B). 77 DETERMINACIÓN DE pH: Determinación de pH en pH-metro Martini Mi 151. PROCESO DE PICADO: A B Picado de carne de pollo (A); picado de grasa dorsal de cerdo (B). 78 PROCESO DE MOLIDO: A B Molido de carne de pollo (A); molido de grasa dorsal de cerdo (B). Proceso realizado en molino semi industrial HOBBART modelo 4B12. PROCESO EN CUTTER: A B C D Continúa… 79 E F Adición de carne de pollo (A); Adición de sal, nitritos y fosfatos (B); adición de hielo (C); adición de mezcla de conservantes y especias (D); adición de grasa dorsal de cerdo (E); adición de aceite de aguacate (F). Proceso realizado en cutter marca TALSA modelo T-3394. PROCESO DE EMBUTIDO: Proceso realizado en embutidora manual en marca SIRMAN serie 03LOO898. 80 PROCESO DE ESCALDADO: PROCESO DE EMPACADO: Proceso realizado en empacadora marca CITALSA modelo KOMET VACUBOY. 81 ANEXO II TRATAMIENTOS ELABORADOS DE SALCHICHA DE POLLO TIPO SUIZA EN SUSTITUCIÓN PARCIAL Y TOTAL DE LA GRASA DE CERDO EN SALCHICHAS TIPO SUIZA A B C D E F ANEXO III TRATAMIENTOS ELABORADOS DE SALCHICHA DE CORTE TRANSVERSAL: A B C D E F Salchicha de pollo con 100 % de grasa dorsal de cerdo (A); salchicha de pollo con 100 % de grasa dorsal de cerdo con colorante (B); Salchicha de pollo con 50 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante (C); Salchicha de pollo con 75 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante (D); Salchicha de pollo con 100 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante (E); Salchicha de pollo con 100 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo (F). 82 ANEXO III TEST SENSORIAL ANEXO IV TEST SENSORIAL 83 ANEXO IV DESARROLLO DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL PRESENTACIÓN DE TRATAMIENTO EVALUADOS A B C ANEXO V DESARROLLO DEL ANÁLISIS DE ACEPTABILIDAD SENSORIAL Salchicha de pollo con 50 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante (A); Salchicha de pollo con 75 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante (B); Salchicha de pollo con 100 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante (C). 84 EVALUACIÓN DE TRATAMIENTOS POR PANELISTAS NO ENTRENADOS Evaluación de aceptabilidad para los atributos color, olor, sabor y textura para las salchicha de pollo con 50 %, 75 % y 100 % de aceite de aguacate en sustitución parcial de la grasa dorsal de cerdo con colorante. 85 ANEXO V RESULTADOS ANÁLISIS FISICO-QUIMICOS GRASA DORSAL DE CERDO Perfil lipídico de la grasa dorsal de cerdo 86 ACEITE DE AGUACATE Perfil lipídico del aceite de aguacate 87 SALCHICHA CON 100 % DE GRASA DORSAL DE CERDO Análisis de proteína, grasa y perfil lipídico 88 SALCHICHA CON 100 % ACEITE DE AGUACATE Contenido de proteína, grasa y perfil lipídico 89 ANEXO VI RESULTADOS ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS SALCHICHA CON 100 % DE GRASA DORSAL DE CERDO RECUENTO Aerobios mesófilos: A B C ANEXO VII Dilución 10-1 (A); Dilución 10-2 (B); Dilución 10-3 (C). Placas para Recuento de Aerobios 3MTM PetrifilmTM. 90 RECUENTO Staphylococcus aureus: A B C Prueba confirmativa en dilución 10-1 (A); Dilución 10-2 (B); Dilución 10-3 (C). Recuentro en Sistema 3MTM PetrifilmTM Staph Express. RECUENTO Escherichia coli: A B C Dilución 10-1 (A); Dilución 10-2 (B); Dilución 10-3 (C). Crecimiento de Coliformes, ausencia de E.coli. Recuento en Placas 3MTM PetrifilmTM para E. coli/Coliformes. 91 ANÁLISIS Salmonella: Análisis de laboratorio para recuento de Salmonella. 92 SALCHICHA CON 100 % DE ACEITE DE AGUACATE RECUENTO Aerobios mesófilos: A B C Dilución 10-1 (A); Dilución 10-2 (B); Dilución 10-3 (C). Placas para Recuento de Aerobios 3MTM PetrifilmTM. RECUENTO Staphylococcus aureus: A B C Prueba confirmativa en dilución 10-1 (A); Dilución 10-2 (B); Dilución 10-3 (C). Recuentro en Sistema 3MTM PetrifilmTM Staph Express. 93 RECUENTO Escherichia coli: A B C Dilución 10-1 (A); Dilución 10-2 (B); Dilución 10-3 (C). Crecimiento de Coliformes, ausencia de E.coli. Recuento en Placas 3MTM PetrifilmTM para E. coli/Coliformes. 94 ANÁLISIS Salmonella: Análisis de laboratorio para recuento de Salmonella. 95