UNIVERSIDAD EARTH ESTABILIZACIÓN DE LOS LODOS SÉPTICOS QUE PROVIENEN DE UNA COMUNIDAD PEQUEÑA CON MICROORGANISMOS EFICACES (EM) Brenda Nadhiesda Reyes Mendoza Trabajo de Graduación presentado como requisito parcial para optar al título de Ingeniera Agrónoma con el grado de Licenciatura Guácimo, Costa Rica Diciembre, 2004 Trabajo de Graduación presentado como requisito parcial para optar al título de Ingeniera Agrónoma con el grado de Licenciatura Profesor Asesor Jane Yeomans, Ph.D. Profesor Asesor Ing. Carlos Hernández H. Ph.D. Profesor Asesor Shuichi Okumoto, Ph.D. Decano Daniel Sherrard, Ph.D. Candidata Brenda Nadhiesda Reyes M. Diciembre, 2004 ii DEDICATORIA Dedico esta investigación al ser más preciado que tengo, mi padre Francisco Reyes, él por ser la persona quien siempre me ha guiado y apoyado en la vida. Quien confió en mí y brindo todo su apoyo para culminar mis estudios. A mi madre Clariza Mendoza, que tengo en mi corazón siempre, donde quiera que estés. A mis hermanos; Jimmy, Alvaro y Venicio por ser fuente de inspiración en todo lo que hago, por que gracias a ellos pienso en superarme; los adoro. A mi abuelita Concepción sin ella no hubiera crecido. A mi país Nicaragua porque gracias a él, pienso en mejorarlo y me motivo en pensar que con un pequeño cambio puedo hacer mucho. Mi país al quien amo y respeto. En Fin a todos y cada uno de ustedes que siempre están con migo mostrándome lo largo que puedo llegar y lo grande que puedo ser. Brenda iii AGRADECIMIENTO Este trabajo no podría ser culminado sin la ayuda incondicional de la Profesora Jane Yeomans, ella a quien siempre acudí, le agradezco profundamente todo el apoyo brindado. A Dios, quien me guía día a día. A Juan Mairena quien siempre estuvo dispuesto a ayudar sin importar si era de día o de noche, su aptitud hacia el trabajo era siempre el mismo. Orlando por ser quien estuvo dispuesto a ayudar, sus consejos fueron fundamentales en este trabajo. A mis amigos que siempre estaban dispuestos a darme fuerzas para que continuara. A mis compañeros parte fundamental en el desarrollo de cada trabajo. Al personal del Laboratorio de suelos y Aguas. A NORAD, por darme los recursos económicos necesarios para realizar estudios en la Universidad EARTH. A la Universidad EARTH, por tener las puertas abiertas a personas que como yo necesitan de grandes cambios para superarse. Brenda iv RESUMEN El sistema de manejo de excretas más común en Costa Rica se basa en la descarga del residuo a tanques sépticos. El material acumulado, el lodo séptico, contiene biosólidos y patógenos que pueden influenciar negativamente al ambiente y al humano, si estos son utilizados de manera inadecuada. Este proyecto basa sus objetivos en la utilización de Microorganismos Eficaces (EM) para la estabilización de los lodos sépticos que provienen de un tanque séptico, del comedor de la Universidad EARTH. Se realizó el estudio en dos etapas. En la primera etapa, se incubaron anaerobicamente muestras del lodo séptico con cinco concentraciones de EM activado (0%, 2,5%, 5%, 7,5% y 10%, v/v), para hacer las mediciones de diferentes parámetros cada tres días por 15 días, siendo tres repeticiones. En la segunda etapa, se eligieron tres tratamientos de la etapa uno (0%, 2,5% y 5%, v/v EM activado) utilizando 6 repeticiones para hacer las mediciones de diferentes parámetros cada 3 días por 15 días. En los resultados de ambos experimentos del proyecto se observó la diferencia positiva por parte de los tratamientos con EM, en relación con el tratamiento sin EM, observándose en los parámetros de pH, olor, turbidez, sólidos totales, DBO5, DQO, Coliformes, nitrógeno total y nitrógeno en forma de amonio. El tratamiento sin EM mostraba un olor fuerte característico de material fecal en el transcurso del tiempo, muy por el contrario para los tratamientos con EM que mostraron un olor característico a fermentación. Con el EM fue posible eliminar las bacterias coliformes en los lodos. También, se observó una reducción de DBO5, DQO y sólidos totales. En los tratamientos con EM, después de tres días, la cantidad de DBO5 fue menor del límite permisible <300 mg L-1. Sin embargo, no se logró el límite máximo permisible de DQO (<1 000 mg L-1) ni de sólidos totales (<2 000 mg L-1) para descargar esta agua residual en el ambiente durante los 15 días de este experimento. Los resultados demuestran la eficiencia de EM para que estos lodos estabilizados puedan ser reutilizados como fuentes de nutrientes en agricultura. v Palabras claves: Lodos sépticos, biosólidos crudos, Microorganismos Eficaces (EM), estabilización, DBO5, DQO, sólidos totales, patógenos, coliformes. Reyes, B. 2004. Estabilización de los Lodos Sépticos que Provienen de una Comunidad Pequeña con Microorganismos Eficaces. Proyecto de Graduación. Guácimo, Costa Rica, EARTH. 55 p. vi ABSTRACT In Costa Rica, the most common system for management of sewage is the septic tank. The material that accumulates, the septage, contains biosolids and pathogens that can have a negative effect on the environment if it is not managed correctly. The objective of this project was to use Effective Microorganisms (EM) to stabilize septage from the cafeteria’s septic tank at EARTH University. The study was carried out in two stages. In the first, triplicate samples of septage were incubated anaerobically with five concentrations of activated EM (0%, 2.5%, 5%, 7.5%, and 10%, v/v), and samples were analyzed for various parameters every three days for 15 days. In the second phase, six replications of three treatments from phase one (0%, 2.5%, and 5%, v/v activated EM) were incubated anaerobically samples were analyzed for various parameters every three days for 15 days. In both experiments a positive effect of EM at all concentrations, as compared to the treatment without EM was observed in the analyses of samples for pH, odor, turbidity, total solids, DBO5, DQO, Coliforms, total nitrogen and ammonium-nitrogen. Without EM, the septage had the characteristic fecal odor throughout the entire incubation. The samples from the EM treatments had a characteristic odor of fermentation. With the EM treatments it was possible to eliminate the coliforms from the samples. As well, a reduction in DBO5, DQO, and total solids was observed. After three days, in the samples treated with EM, the level of DBO5 was lower than the permissible level of <300 mg L-1. However, after 15 days of anaerobic incubation, the levels of DQO and total solids were still in excess of those permissible by law for discharging the water into the environment (<1 000 mg L-1 and <2 000 mg L-1, respectively). The results showed that EM is effective for stabilizing septage, so that it can be used as a source of nutrients in agriculture. Key words: Septage, biosolids, Effective Microorganisms (EM), stabilization, DBO5, DQO, total solids, pathogens, coliforms. vii TABLA DE CONTENIDO Página DEDICATORIA................................................................................................................ III AGRADECIMIENTO ....................................................................................................... IV RESUMEN ......................................................................................................................... V ABSTRACT .....................................................................................................................VII TABLA DE CONTENIDO..............................................................................................VIII LISTA DE CUADROS....................................................................................................... X LISTA DE FIGURAS........................................................................................................ XI LISTA DE ANEXOS........................................................................................................XII 1 INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 1 2 OBJETIVOS ................................................................................................................. 3 2.1 2.2 3 GENERAL ................................................................................................................. 3 ESPECIFICOS ............................................................................................................ 3 REVISIÓN DE LITERATURA .................................................................................. 4 3.1 AGUAS RESIDUALES ................................................................................................ 4 3.2 LOS LODOS SÉPTICOS ............................................................................................... 5 3.2.1 Características físicas .................................................................................... 6 3.2.2 Características químicas ................................................................................ 7 3.2.3 Características biológicas.............................................................................. 8 3.3 MÉTODOS DE DESCONTAMINACIÓN DE LOS LODOS .................................................. 9 3.3.1 Tratamiento biológico .................................................................................. 11 3.3.2 Tratamiento físico......................................................................................... 12 3.3.3 Tratamiento químico .................................................................................... 12 3.4 MICROORGANISMOS EFICACES (EM) .................................................................... 12 3.4.1 EM y su efecto en las aguas residuales ........................................................ 13 4 MATERIALES Y MÉTODOS.................................................................................. 15 4.1 UBICACIÓN ............................................................................................................ 15 4.2 ETAPA 1................................................................................................................. 15 4.2.1 Análisis de muestras ..................................................................................... 16 4.3 ETAPA 2................................................................................................................. 17 4.3.1 Metodología de variables biológicas ........................................................... 18 4.3.2 Metodología de análisis de variables físicas................................................ 18 4.3.3 Metodología de análisis de variables químicas ........................................... 19 4.3.4 Análisis de resultados................................................................................... 20 5 RESULTADOS Y DISCUSIÓN ................................................................................ 21 5.1 ETAPA 1................................................................................................................. 21 viii 5.2 ETAPA 2................................................................................................................. 28 6 CONCLUSIONES ...................................................................................................... 41 7 RECOMENDACIONES ............................................................................................ 42 8 BIBLIOGRAFÍA ........................................................................................................ 43 9 ANEXOS ..................................................................................................................... 46 ix LISTA DE CUADROS Cuadro Página Cuadro 1. Parámetros que se analizan en aguas residuales ..................................5 Cuadro 2. Límites máximos permisibles para el vertido de aguas residuales al alcantarillado sanitario. .....................................................................10 Cuadro 3. Limites permisibles para el reuso de aguas residuales. .......................11 Cuadro 4. Número de unidades que forman colonias de coliformes en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ...........................22 Cuadro 5. Número de unidades que forman colonias de E. coli en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ...........................23 Cuadro 6. Olor en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. .........24 Cuadro 7. Turbidez en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ..................................................................................................26 Cuadro 8. Concentración de los sólidos sedimentales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM.................................................28 Cuadro 9. Concentración de los coliformes en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ......................................................29 Cuadro 10. Olor en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM........30 Cuadro 11. Turbidez en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ................................................................................................31 Cuadro 12. Concentración de los sólidos sedimentales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ..............................................33 x LISTA DE FIGURAS Figura Página Figura 1. Botellas con los lodos sépticos. .............................................................18 Figura 2. Color de los lodos sépticos después de dos semanas...........................25 Figura 3. Concentración del pH en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM..........................................................................27 Figura 4. Concentración del pH en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM..........................................................................32 Figura 5. Concentración de los sólidos totales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ........................................................34 Figura 6. Concentración de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. ..................35 Figura 7. Concentración de la demanda química de oxígeno (DQO) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM..............................36 Figura 8. Porcentaje de nitrógeno total en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM..........................................................................38 Figura 9. Concentración de nitrógeno en forma de amonio en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM..............................39 xi LISTA DE ANEXOS Anexo Página Anexo 1. Concentración del pH en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa I). ..........................................................47 Anexo 2. Concentración del pH en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). .........................................................47 Anexo 3. Temperatura en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). ....................................................................................48 Anexo 4. Concentración de los sólidos totales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). ........................................49 Anexo 5. Porcentaje de reducción de sólidos totales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II)...................................49 Anexo 6. Concentración de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). .......50 Anexo 7. Porcentaje de reducción de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). .........................................................................................50 Anexo 8. Concentración de la demanda química de oxígeno (DQO) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). .............51 Anexo 9. Porcentaje de reducción de la demanda química de oxígeno (DQO) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). ...............................................................................................51 Anexo 10. Porcentaje de nitrógeno total en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). .......................................................52 Anexo 11. Concentración de nitrógeno en forma de amonio en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). ...........52 Anexo 12. Análisis de varianza de la variable: pH (Etapa II).................................53 Anexo 13. Análisis Duncan de la variable: pH (Etapa II). ......................................53 Anexo 14. Análisis de varianza de la variable: Sólidos totales (Etapa II). .............53 Anexo 15. Análisis Duncan de la variable: Sólidos totales (Etapa II). ...................53 Anexo 16. Análisis de varianza de la variable: DBO5 (Etapa II). ...........................54 Anexo 17. Análisis Duncan de la variable: DBO5 (Etapa II)...................................54 Anexo 18. Análisis de varianza de la variable: DQO (Etapa II). ............................54 xii Anexo 19. Análisis Duncan de la variable: DQO (Etapa II)....................................54 Anexo 20. Análisis de varianza de la variable: Nitrógeno en forma de amonio (Etapa II). .................................................................................55 Anexo 21. Análisis Duncan de la variable: Nitrógeno en forma de amonio (Etapa II)...............................................................................................55 xiii 1 INTRODUCCIÓN La problemática global del manejo de los lodos sépticos es preocupante, dado a que la mayor parte no son debidamente tratados, son depositados directamente a cuerpos de agua o se acumulan en tanques sépticos, para luego ser liberados tanto a fuentes acuíferas como a tierras baldías. Estos lodos sin ningún proceso de estabilización, dado a su mal olor, alto contenido de organismos patógenos, materia orgánica y minerales, incurren en un gran impacto para el medio ambiente, generando un desequilibrio que conllevaría a la generación de enfermedades tanto en animales como en el humano. Por ello, uno de los mayores problemas en el manejo de desechos, es el manejo de lodos sépticos, los cuales constituyen al aumento de la crisis ambiental en que se encuentran nuestros países. En Costa Rica solamente un 4% de los lodos sépticos son tratados. Por tal razón y considerando el derecho constitucional de la salud y un ambiente ecológicamente equilibrado, es que la sala constitucional emitió una orden al MINSA y a la municipalidad de San José en la que exigió el tratamiento de los lodos sépticos antes de descargarlos en cualquier ecosistema (Villegas, 2002). Hay una gran variedad de métodos para la descontaminación de aguas, de las cuales tenemos la utilización de microorganismos siendo esta la de mayor importancia, debido a que estos no generan subproductos contaminantes y además son eficientes (López, 1981). Un buen ejemplo es el sistema a partir de lodos activados, el cual se basa en el trabajo de las bacterias, para degradar los desechos existentes en el agua (García, 2001). Se han realizado investigaciones en el campo del manejo de lodos sépticos. Una de ellas fue la realizada por Fioravanti y Vega (2003), donde en su investigación, se demostró que el EM (Microorganismos Eficaces) funciona como una buena herramienta para la estabilización de los lodos sépticos. La estabilización de los lodos sépticos se llevo a cabo mediante la reducción del contenido inicial de microorganismos patógenos, disminución del potencial de 1 putrefacción y generación de olores, los cuales se evaluaran en las variables analizadas. Ellos realizaron la investigación a un plazo de cuatro semanas, haciendo los respectivos análisis en las semanas 2 y 4. Sin embargo, no se determinó que pasó realmente a medida que transcurría el tiempo, es decir no se determinó el tiempo exacto en que se da la estabilización. Por ello, se plantea la siguiente investigación en busca del tiempo necesario, así como también la dosis adecuada de EM para garantizar la eficiencia del proceso de estabilización de los lodos sépticos, reduciendo en su totalidad las cantidades de unidades que forman colonias de Coliformes, bajando las cantidades de Sólidos, Demanda Bioquímica de Oxigeno, Demanda Química de Oxigeno y otros; para posteriormente utilizarlos como abono. 2 2 2.1 OBJETIVOS GENERAL Determinar las propiedades físicas, químicas y biológicas de los lodos sépticos que provienen de una comunidad pequeña después de la estabilización anaeróbica con Microorganismos Eficaces (EM). 2.2 ESPECIFICOS Determinar las características físicas, químicas y biológicas de los lodos provenientes de uno de los tanques sépticos de la Universidad EARTH. Estabilizar los lodos sépticos con diferentes concentraciones de EM. Evaluar el comportamiento de los lodos tratados a través del tiempo. Determinar las características físicas, químicas y biológicas de los lodos después de la estabilización con EM. 3 3 REVISIÓN DE LITERATURA El desbalance entre el recurso hídrico y el crecimiento explosivo de las grandes ciudades ha obligado a priorizar el uso de aguas superficiales para abastecimiento público y generación de energía eléctrica. Como lógica consecuencia, la actividad agrícola ubicada en la periferia de las ciudades se ha visto seriamente afectada y ha optado por el uso de aguas residuales como única alternativa de supervivencia. Esto se refleja en la existencia de más de 400 000 ha agrícolas irrigadas con estas aguas en forma directa, la mayoría sin tratamiento previo. El uso de aguas residuales para el riego de cultivos de consumo humano incrementa los factores de riesgo para la salud de la población. Las situaciones endémicas de diarreas, parasitismo, fiebre tifoidea y salmonellosis que imperan en nuestro continente no son más que el reflejo de esta crítica situación, a la que vino a sumarse el cólera (Moscoso y León, 1994). 3.1 AGUAS RESIDUALES Las aguas residuales son aquellas que han recibido algún uso, y se le han incorporado agentes contaminantes disminuyéndole su calidad (MINSA, 1997). Además, generalmente se componen de 99,9% agua, 0,1% sólidos de los cuales el 70% es orgánico (proteínas, carbohidratos, grasas, etc) y 30% inorgánico (metales, sales y gravas, etc) (EMBRAPA, 2000). Dichas aguas se dividen en residuales de tipo ordinario y especial. Las de tipo ordinario son las que provienen de inodoros, duchas, lavaderos, lavado de ropa, fregaderos; y las especiales las de uso industrial. Según Pérez y Espigares (1999), las de tipo ordinario contienen heces, orinas, microorganismos y restos de productos de limpieza. En Costa Rica, las aguas residuales ordinarias las dirigen a tanques sépticos, donde empieza la decantación de sólidos y la formación de los lodos sépticos. 4 3.2 LOS LODOS SÉPTICOS Los lodos sépticos, que se acumulan en tanques sépticos, son de un material sumamente concentrado y variable. Estos tienen contenidos orgánicos y de sólidos, los que normalmente están disueltos, en suspensión y flotación, que usualmente no pasan de los 1 000 ppm del total (Seoanez, 1999). Las concentraciones de amoníaco en los lodos sépticos son habitualmente 10 o más veces mayores a los de las aguas residuales municipales (Montangero y Strauss, 2000). Para Spellman (1997), los lodos sépticos es el producto obtenido de la primera decantación de las aguas residuales en los tanques sépticos. Este producto está formado por agua y sólidos sedimentables. En la década de los 90s se le dio otro término a esos lodos, con el fin de tener una percepción más positiva por parte de las personas, y de esta manera se empezó a llamar biosólidos (Evanylo, 1999). En el Cuadro 1 se puede observar alguna de las características fundamentales a conocer de los lodos sépticos, siendo estás parámetros cuantificables. Cuadro 1. Parámetros que se analizan en aguas residuales Físicas Químicas Biológicas Temperatura Olor Color pH Materia orgánica Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) Demanda Química de Oxigeno (DQO) Grasas y Aceites Amoníaco Metales pesados Nutrientes Hongos Bacterias Virus Sólidos totales Sólidos sedimentables Sólidos suspendidos Turbidez Fuente: Bautista (2003). 5 Protozoarios 3.2.1 Características físicas Según Seoanez (1999) las características físicas son adquiridas en su mayor parte, por el contenido total de sólidos, en sus diferentes variantes, de materiales flotantes, sustancias coloidales, y productos disueltos. Color: El color varía entre gris y pardo pero estos pueden pasar a negros debido a procesos anaeróbicos descontrolados (Pérez y Espigares, 1999). Olor: El olor es desagradable ya que este material contiene altos contenidos de productos pútridos (Gamrasni, 1985). De igual forma durante el proceso de biodegradación se producen gas sulfhídrico, amonio, aminas y diaminas; dichos compuestos son los principales responsables de los olores desagradables (EMBRAPA, 2000). Temperatura: Hasta el momento no se ha definido ninguna temperatura adecuada de estos lodos ya que ésta puede variar con el clima del lugar. La medición de temperatura es importante puesto que con ella se define que tipo de microorganismos dominen, según su rango de tolerancia térmica (Pérez y Espigares, 1999). Turbidez: Este parámetro muestra la cantidad de materia en suspensión que contienen los cuerpos líquidos y afectan la cantidad de luz en el medio acuático (Pérez y Espigares, 1999). La turbidez en los biosólidos es pronunciada o muy alta. Sólidos suspendidos: Los sólidos suspendidos son las partículas con un tamaño superior a 1 µm de diámetro y la cantidad presente en los lodos sépticos es de 120 mg L-1 aproximadamente (Ugarte et al., 2001). Sólidos sedimentables: Son la fracción de sólidos suspendidos que se decantan en el fondo de un cilindro de altura específica durante una hora (Pérez y Espigares, 1999). El contenido de sólidos sedimentables de los biosólidos es de aproximadamente 0,2 mg L-1 a los 10 minutos y 2,2 mg L-1 a las dos horas (Ugarte et al., 2001). 6 Sólidos totales: Son la porción de materia sólida que contienen los lodos sépticos. 3.2.2 Características químicas Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5): El DBO5 es un índice de contaminación del agua que representa el contenido de substancias bioquímicamente degradables en el agua. En este análisis, se mide la cantidad de oxígeno que necesitan las bacterias para oxidar la materia orgánica; generalmente se mide en miligramos por litros. La DBO5 de los biosólidos crudos es muy alta, varía entre 600 y 35 000 mg L-1 (Montangero y Strauss, 2000). Demanda Química de Oxígeno (DQO): El DQO es la medida de la capacidad de consumo de oxígeno de la materia orgánica biodegradable y no biodegradable presente en el agua o aguas residuales. Se expresa como la cantidad de oxígeno consumida por un oxidante químico en una prueba específica. Debido al consumo de oxígeno por compuestos orgánicos muy complejos y difíciles a degradar, y por la materia orgánica no biodegradable, en la oxidación, este parámetro siempre va a ser mayor que la DBO5 (Pérez y Espigares, 1999). En el caso de los biosólidos, la DQO varía entre 1 700 y 45 000 mg L-1 (Ugarte et al., 2001). Potencial Hidrógeno (pH): Es una característica determinante de los biosólidos crudos, debido a que afecta la actividad biológica de las aguas (la sobrevivencia de microorganismos patógenos), la solubilidad de sustancias, el grado de corrosividad del material y el grado de toxicidad de algunas sustancias y metales pesados (CWMI, 2003). Los biosólidos crudos suelen tener un pH próximo al neutro; aunque de acuerdo a CWMI (2003) el pH puede variar entre 4 y 12, dependiendo del origen del material (Pérez y Espigares, 1999). Materia orgánica: La materia orgánica, es uno de los residuos fundamentales en los lodos sépticos y los organismos anaeróbicos en general consiguen su energía a partir de la oxidación de los complejos que forma la materia orgánica (Seoanez, 1999). 7 Nitrógeno: La urea, el amoníaco y las proteínas constituyen las principales fuentes de nitrógeno en los biosólidos crudos. La urea y las proteínas son fácilmente degradables por las bacterias que las transforman en amonio y a partir de éste producen nitritos y nitratos (Pérez y Espigares, 1999). El contenido de nitrógeno total de este material en peso seco es de 2-7% (King, 1986). Fósforo: Este nutriente compone entre un 0,2-4% del material seco. El fósforo está presente principalmente en forma inorgánica en este tipo de material (King, 1986). Potasio: El porcentaje de este nutriente en los biosólidos es bajo, varía de O,2 a 2,5% (Gamrasni, 1985; King,1986; Chicón, 2000). Su baja presencia se debe a la solubilidad de este elemento, por lo que se mueve con las aguas residuales, quedando muy poco en los lodos. Metales pesados: Son elementos traza que a determinados niveles pueden ser de carácter tóxico para el suelo y para los seres humanos. Generalmente están presentes en los biosólidos debido al uso doméstico de ciertas sustancias de limpieza, vertidos clandestinos industriales, talleres y pequeñas industrias urbanas (Chicón, 2000). Entre los metales pesados que pueden causar problemas de toxicidad en la agricultura están el cobre, níquel y zinc; mientras que cualquier exceso de metal pesado puede causar problemas de salud a los humanos (King, 1986). 3.2.3 Características biológicas En los biosólidos crudos se pueden encontrar un sin número de microorganismos, muchos de ellos patógenos, los cuales mantienen la actividad biológica, produciendo fermentaciones, descomposición y degradación de la materia orgánica e inorgánica (Seoanez, 1999). Los organismos encontrados pueden ser vegetales o animales, entre los que tenemos (Seoanez, 1999): Vegetales: Espermatofitos, Micofitos, Euglenofitos, Ficofitos, Bacteriofitos y Virus. 8 Animales: Cordados, Metazoarios triblásticos, Protozoarios, Rizópodos, Flagelados, Ciliados. Mohos: Estos son hongos que se implantan en la materia orgánica en descomposición; los más importantes son: Mucor, Oidium, Aspergillus y Penicillium. Bacterias: Las bacterias son organismos unicelulares móviles o inmóviles de formas diversas, de tamaño y modo de vida diferente. Las bacterias son las que se encuentran en mayor número y provocan enfermedades. El grupo de bacterias coliformes es el indicador más utilizado para determinar contaminación biológica en las aguas y lodos, debido a que este grupo es el más persistente en el ambiente (Seoanez, 1999). Si hay alta cantidad de coliformes, es muy probable que existan otros patógenos como los del género Salmonella; por lo tanto, de su ausencia o reducida presencia se puede inferir que la calidad biológica del lodo o agua es buena (Spellman, 2002). Protozoarios: En esta podemos encontrar los rizópodos (Amoebas), flagelados y ciliados (Paramecium, Colpidium, Vorticela) (Seoanez, 1999). El agua es un excelente medio para su desarrollo. Virus: Son de efecto nocivo, como agente productores de enfermedades. En un gramo de heces se puede encontrar hasta 109 partículas de virus infecciosas. Los virus más comunes en los lodos sépticos son: poliovirus, coxsackievirus (causante de meningitis y miocarditis), echovirus (meningitis y enteritis), reovirus (enteritis), adenovirus (enfermedades respiratorias), rotavirus (diarrea), infecciones hepáticas (ictericia) y otros (Seoanez, 1999). 3.3 MÉTODOS DE DESCONTAMINACIÓN DE LOS LODOS En la mayoría de los casos, los lodos fecales (LF) son descargados o usados sin tratar en la agricultura, lo que conduce a enormes riesgos para la salud, a una degradación estática y olfativa de los asentamientos y a una contaminación de las aguas (Moscoso y León, 1994). En muchas ciudades, los vertederos y campos abiertos de defecación se encuentran cerca de zonas 9 formales o informales de ingresos bajos, donde presentan un riesgo para la salud de este segmento de la población en continuo aumento. Un gran riesgo existe especialmente para los niños, visto que pueden entrar en contacto con las excretas dispuestas de manera incontrolada. El MINSA (1997) explica que en pro de la salud pública existes limites permisibles para el vertido de aguas residuales (Cuadro 2). Los parámetros son tomados en consideración dependiendo de la influencia que esta pueda tener, en las aguas de alcantarillado y por ende de las personas. Cuadro 2. Límites máximos permisibles para el vertido de aguas residuales al alcantarillado sanitario. Parámetro Límite Máximo 300 mg L-1 DBO5,20 1 000 mg L-1 DQO 500 mg L-1 Sólidos suspendidos 1 500 mg L-1 Sólidos disueltos 1 mg L-1 Sólidos sedimentables 100 mg L-1 Grasas/aceites Potencial hidrógeno 6a9 Temperatura T < 40°C Fuente: MINSA (1997). En Costa Rica existes limites de los parámetros de DBO y coliformes fecales, para el vertido de las aguas residuales a cualquier cuerpo de agua. Los límites permisibles dependen del reuso en el que se estará empleando el agua a re-usar (Cuadro 3). 10 Cuadro 3. Limites permisibles para el reuso de aguas residuales. Tipo de Reuso Parámetros DBO5,20 (mg L-1) Coliformes fecales (UFC) Urbano ≤ 40 < 100 Riego con acceso restringido --- < 1 000 Reuso agrícola en cultivos de alimentos que no se procesan comercialmente --- <100 Reuso agrícola en cultivos de alimentos que se procesan comercialmente --- < 1 000 Reuso agrícola en cultivos no alimenticios --- < 1 000 Reuso recreativo ≤ 40 ≤ 1 000 Reuso paisajístico ≤ 40 --- Reuso en construcción --- ≤ 100 Fuente: MINSA (1997). Los lodos tiene diferentes métodos de descontaminación: físicos, químicos, y biológicos. Estos métodos en muchos casos se complementan y en la mayoría de los casos se utilizan para: reducción de la Demanda Química de Oxígeno (DQO)/Demanda Biológica Del Oxígeno (DBO5), retiro de la grasa y del aceite, retiro de los minerales, retiro de los pesticidas, decoloración, desecación del lodo, nitrificación y desnitrificación (Tchobanoglous y Burton, 1991b). 3.3.1 Tratamiento biológico Es básicamente la utilización de microorganismos que, al alimentarse de los contaminantes, causan la destrucción de éstos y la producción de dióxido de carbono (CO2) y agua (Bautista, 2003). En los tratamientos biológicos hay que tener en cuenta el tipo de microorganismo, el pH, la temperatura, y el aporte de oxigeno, ya que el fundamento de las técnicas biológicas consiste en una 11 aireación, y trata de la utilización de filtros biológicos, de lagunas de aireación o de lodos activados. En aquellos procesos de tratamientos de aguas en la que existe alcalinidad es necesario aplicar un medio ácido (Bautista, 2003). 3.3.2 Tratamiento físico En este tipo de tratamiento se utiliza medios mecánicos, para separar sólidos en suspensión. También permiten la separación de determinadas sustancias, como pueden ser los aceites y grasas presente en el medio acuoso, mediante un separador de placas (Bautista, 2003). La filtración permite la retención y separación del agua de partículas y materiales (Bautista, 2003). 3.3.3 Tratamiento químico Este tratamiento se basa en la utilización de reactivos químicos, ácidos o básicos, en función de la composición del lodo, con el fin de mejorar o acelerar los tratamientos físicos (Bautista, 2003). Los principales inconvenientes son los elevados costos y el manejo técnico que requiere, para evitar riesgos. 3.4 MICROORGANISMOS EFICACES (EM) La tecnología EM, la cual se refiere a “Microorganismos Eficaces”, provoca cambios significativos en diversas áreas, como la agricultura, medio ambiente y medicina. El nombre se acuñé a un gran número de microorganismos responsables del proceso regenerativo; las bacterias fotosintéticas, levaduras, bacterias de ácidos lácticos y hongos son solo algunos de los microorganismos anaeróbicos pertenecientes al grupo EM (Higa 1993). El EM es un producto creado hace 34 años (1970) por el japonés Dr. Teruo Higa, miembro de la facultad de la Universidad Ryukyus. Dicha tecnología es usada en 51 países alrededor del mundo entre los cuales se encuentran Estados Unidos, Tailandia, Europa, Brasil y Japón. El producto EM es utilizado en la producción agrícola, acuicultura, lecherías, y manejo industrial de aguas residuales (Higa, 1993). 12 La base fundamental del EM esta cimentado en dos tipos de microorganismos, los cimógenos y los sintetizantes. La materia orgánica se reduce a un estado soluble por la descomposición citogénica y las bacterias sintetizantes lo consumen rápidamente produciendo antioxidantes Estos microorganismos en reposo se produce la autólisis que trae consigo que las bacterias desaparezcan (Higa 1993). Los microorganismos presentes en el EM se autodestruyen y se consumen entre si. 3.4.1 EM y su efecto en las aguas residuales El sistema de manejo de aguas residuales con la utilización de EM, es una forma de obtener un nivel deseable de pureza del agua con la utilización de microorganismos efectivos, para descomponer la materia orgánica de las aguas residuales. El EM es utilizado en fosas sépticas para tratar aguas domesticas, retretes, cocinas y lavaderos (Higa, 1993). Dentro de los múltiples efectos de los microorganismos efectivos en los sistemas de tratamientos de desechos líquidos y sólidos se pueden mencionar los siguientes (Higa 1993): • Decremento del DBO, SST, y SDT del agua residual • Incremento en la eficiencia y estabilidad de digestores aeróbicos y anaeróbicos • Prevención del crecimiento y desarrollo de microbios patógenos como E. coli • Reciclaje del agua residual • Rápida degradación de materias de desecho orgánico provenientes de formas solubles de plantas y animales • Fácil conversión de desechos orgánicos a fertilizantes orgánicos Existen experiencias realizadas en años anteriores en la Universidad EARTH, en donde se logró comprobar el uso positivo del EM en la estabilización y producción de los lodos. Para el caso se cuenta con la Tesis de Fioravnti y Vega (2003), y de Bravo y Moreno (2003). La tesis de Fioravanti y Vega (2003), se baso en la estabilización de los lodos sépticos provenientes del tanque séptico ubicado 13 cerca del comedor en donde llegan los lodos de algunas residencias estudiantiles, del comedor, baño y Laboratorio de Suelos y Aguas. Los resultados que se obtuvieron dieron señas positivas para el EM, disminuyendo algunos parámetros que se evaluaron, dando consigo una mejor apreciación de los lodos. En la tesis de Bravo y Moreno (2003), la experiencia fue basada en la utilización del EM para la activación de lodos, los cuales fueron utilizados en el sistema de tratamientos de aguas en el Laboratorio de Procesamiento de Alimentos de la Universidad (tanque de aireación y sedimentación del sistema). Los resultados obtenidos de DBO5, pH, nitratos, fosfatos y sólidos suspendidos, en los diferentes equipos del sistema ratificaron que la técnica de descontaminación era efectiva. 14 4 4.1 MATERIALES Y MÉTODOS UBICACIÓN El proyecto se llevó a cabo en el laboratorio de suelos y aguas de la Universidad EARTH, ubicada en la zona Atlántica de Costa Rica, en el cantón de Guácimo, provincia de Limón entre los 32 y 107 msnm. Cuenta con una precipitación media anual de 3 200 mm, humedad relativa de 90,25% y una temperatura media anual aproximadamente es de 28,2oC, para los primeros 9 meses del 2004 (Rodríguez, 2004). El proyecto es realizado en dos etapas, con el objetivo de evaluar y determinar la mejor dosificación de Microorganismos Eficaces (EM), para la estabilización de los lodos sépticos. Los lodos evaluados son los provenientes del tanque séptico que recibe las aguas residuales del comedor, oficinas del comedor, la cocina, bodega y los edificios residenciales Surá y Gavilán. Estos lodos fueron extraídos directamente del tanque y depositados en las botellas de muestreo, con sus respectivas cantidades. 4.2 ETAPA 1 La primera etapa es una etapa de aproximación con la cual se pretendió determinar cuales de los tratamientos evaluados son más eficientes. En esta etapa se realizarán 5 tratamientos con tres (3) repeticiones cada uno. Los tratamientos fueron realizados de manera anaeróbica y representaron las variables a evaluar con diferentes concentraciones de EM activado al 0%, 2,5%, 5%, 7,5% y 10% (v/v). El EM activado esta elaborado con una mezcla de EM, melaza, y agua a una relación 1:1:8 respectivamente, y luego de una fermentación anaeróbica se utilizó en los tratamientos. La cantidad de lodos totales utilizados fue de 525 L repartidos de la siguiente manera: 105 botellas ámbar de 1 L y 105 botellas plásticas de 1,5 L. Las botellas se incubaron selladas, esto con el propósito de crear un ambiente anaeróbico, para que se un proceso fermentativo. Las muestras fueron incubadas 15 en el Laboratorio de Suelos y Aguas, en un área cerrada con plástico negro, evitando así la entrada de luz al sistema. El plástico pudo ejercer un ambiente de calor en el sistema, sin embargo como era bajo techo en un ambiente cerrado la acción de éste pudo ser mínima con respecto a la temperatura. Esta etapa duró 15 días, donde se realizaron muestreo destructivo cada tres días. Las variables a evaluar por cada muestra fueron las que se consideraban más críticas tales como: presencia de coliformes, olor, color, turbidez, pH y sólidos sedimentables. Para el análisis de estas variables se recurrió a las siguientes metodologías. 4.2.1 Análisis de muestras 4.2.1.1 Coliformes y Escherichia coli Estos parámetros fueron evaluados mediante el uso de paletas Hy-Labs para la determinación de ausencia o presencia. Estas paletas fueron adquiridas en el laboratorio de Microbiología de Alimentos e Industrial Suplilab. S.A., ubicado en San José, San Francisco de Dos Ríos, de la iglesia católica, 500 m al sur y 25 m oeste. 4.2.1.2 Olor La medición de olor fue evaluada subjetivamente. La metodología utilizada para determinar este parámetro en cada una de las muestras fue por un proceso numérico de grado de apreciación organoléptico (Faña 1999). Para efectuar la prueba se tomó una muestra en un beaker de 40 mL, se agitó durante 5 segundos, para luego olerlo por un segundo. La intensidad del olor fue expresada por un número entre cero y cinco, siguiendo la siguiente clasificación: (0) ninguno, (1) muy ligero, (2) ligero, (3) distintivo, (4) marcado, (5) muy marcado. Si el olor percibido es distintivo del olor a séptico o materia fecal, se multiplicara el número por 2. 4.2.1.3 Color Este parámetro fue evaluado subjetivamente. A la vez, se tomaron fotos para comparar efectivamente la diferencia de color entre los tratamientos. 16 4.2.1.4 Turbidez Para la medición de turbidez se prescindió del uso de turbidímetros, pero también puede evaluar este parámetro subjetivamente. En la metodología descrita por Faña (1999), se analiza el nivel de turbidez a través del sentido de la vista, clasificándolo en cuatro grados de apreciación organoléptica: (1) inapreciable, (5) ligera, (10) pronunciada, (20) muy alta. 4.2.1.5 pH Se usó el pH-metro directamente en los lodos sin dilución (Clesceri et al., 1999). 4.2.1.6 Sólidos sedimentables Los sólidos sedimentables fueron analizados mediante gravimetría con el uso del cono de Imhoff (Tchobanoglous y Burton, 1991a). Se utilizó el método de muestras destructivas, por lo que, a medida que se realizaron los respectivos análisis en el tiempo correspondiente, se desecharon. Sin embargo los recipientes utilizados en la primera etapa fueron reutilizados en la segunda. 4.3 ETAPA 2 En la segunda etapa del proyecto se utilizó 227,5 L de lodos, extraídos del mismo tanque séptico de la primera etapa. En esta etapa se realizarán tres (3) tratamientos con seis (6) repeticiones cada uno. Los tratamientos fueron realizados de manera anaeróbica y representaron las variables a evaluar con diferentes concentraciones de EM activado al 0%, 2,5% y 5% (v/v). La cantidad de lodos totales utilizados fue de 525 L repartidos de la siguiente manera: 91 botellas ámbar de 1 L y 91 botellas plásticas de 1,5 L (Figura 1). La incubación de las botellas se dio de igual forma que la primera etapa. Esta etapa duró 15 días, donde se realizaron muestreo destructivo cada tres días. Las variables a evaluar por cada muestra fueron la presencia de coliformes, olor, color, turbidez, pH, temperatura, sólidos sedimentables, sólidos totales, demanda bioquímica de oxígeno, demanda química de oxígeno, nitrógeno total y nitrógeno en forma de 17 amonio. Para el análisis de estas variables se recurrió a las siguientes metodologías. Figura 1. Botellas con los lodos sépticos. 4.3.1 Metodología de variables biológicas 4.3.1.1 Coliformes Este parámetro fue evaluado mediante el uso de paletas Hy-Labs para la determinación de ausencia o presencia. Estas paletas fueron adquiridas en el laboratorio de Microbiología de Alimentos e Industrial Suplilab. S.A., ubicado en San José, San Francisco de Dos Ríos, de la iglesia católica, 500 m al sur y 25 m oeste. 4.3.2 Metodología de análisis de variables físicas 4.3.2.1 Olor La medición de olor es evaluada subjetivamente. La metodología utilizada para determinar este parámetro en cada una de las muestras fue por un proceso numérico de grado de apreciación organoléptico (Faña 1999), como está explicado en Etapa 1. 4.3.2.2 Color Este parámetro fue evaluado subjetivamente. A la vez, se tomaron fotos para comparar efectivamente la diferencia de color entre los tratamientos. 18 4.3.2.3 Turbidez También este parámetro puede evaluar subjetivamente (Faña, 1999), como se explicado en Etapa 1. 4.3.2.4 pH Se usó el pH-metro directamente en los lodos sin dilución (Clesceri et al., 1999). 4.3.2.5 Temperatura Fue realizado con la utilización del termómetro de mercurio (Clesceri et al., 1999). 4.3.2.6 Sólidos sedimentables Los sólidos sedimentables fueron analizados mediante gravimetría con el uso del cono de Imhoff (Tchobanoglous y Burton, 1991). 4.3.2.7 Sólidos Totales Este parámetro fue realizado por el método gravimetrito, donde se tomó 1L de lodo y se puso a 45 oC hasta que pasará de líquido a sólido (Clesceri et al., 1999). 4.3.3 Metodología de análisis de variables químicas 4.3.3.1 Demanda bioquímica de oxígeno La determinación de la DBO se basa en las determinaciones de oxígeno disuelto (OD) a diferentes intervalos de tiempo. Consecuentemente la exactitud de los resultados se ve afectada grandemente por el cuidado al efectuar el análisis. Normalmente el período utilizado para la medida es de cinco días y se denomina DBO5. Representa aproximadamente el 68% de la oxidación completa (Tchobanoglous y Burton, 1991). 4.3.3.2 Demanda química de oxígeno Se mide el equivalente de oxígeno en la materia orgánica que se puede oxidar usando un agente oxidante fuerte en un medio ácido. Dicromato de potasio 19 es excelente para la prueba, con temperatura elevada y en la presencia de un catalizador (Tchobanoglous y Burton, 1991). 4.3.3.3 Nitrógeno total Este parámetro fue analizado bajo el método de Kjeldahl en donde hace una digestión y luego después de añadir un base, se titula con un ácido mineral, estandardizado (Clesceri et al., 1999). 4.3.3.4 Nitrógeno en forma de amonio En una reacción de amonio, hipoclorito y fenol, catalizado con nitroprusido de sodio, se forma un compuesto, indofenol, de color azul intenso. Posteriormente, se hace la lectura con un espectrofotómetro (Clesceri et al., 1999). 4.3.4 Análisis de resultados Los resultados fueron analizados mediante la utilización de programas estadísticos: SAS y Duncan; haciendo comparaciones entre los tratamientos para las diferentes variables. 20 5 RESULTADOS Y DISCUSIÓN El objetivo del presente estudio fue la determinación de las propiedades físicas, químicas y biológicas de los lodos sépticos que provienen de una comunidad pequeña después de la estabilización anaeróbica con Microorganismos Eficaces (EM). La estabilización de los lodos sépticos se llevo a cabo mediante la reducción del contenido inicial de microorganismos patógenos, disminución del potencial de putrefacción y generación de olores, los cuales se evaluaron en las variables analizadas. Para lograr el objetivo del estudio, se tenía que estabilizar primero los lodos sépticos con diferentes concentraciones de EM para establecer la dosificación más efectiva de este producto por dicha estabilización (Etapa I). Con esta información, se montó el segundo experimento (Etapa II) en donde se evaluó el comportamiento de los lodos tratados con EM, a través del tiempo, con el fin de determinar las propiedades físicas, químicas y biológicas de estos lodos después de la estabilización. 5.1 ETAPA 1 En la primera etapa se evaluó cinco concentraciones de EM activado, 0%, 2,5%, 5%, 7,5% y 10% (v/v), para la estabilización de lodos sépticos que proviene del tanque séptico ubicado cerca del comedor de la universidad. Por cada muestra se evaluó las variables críticas en el transcurso de la estabilización: presencia de coliformes, olor, color, turbidez, pH y sólidos sedimentables. Con un aumentó en la dosificación de EM, disminuyó el tiempo necesario para eliminar las bacterias coliformes en los lodos (Cuadro 4). El tratamiento que mayor respondió a menor tiempo fue el de 10% EM, ya que al sexto día redujo en totalidad las cantidades. Sin embargo, la tendencia entre los tratamientos con EM fue similar; en cambio para el tratamiento al 0% de EM no se redujo las cantidades de UFC de coliformes. El conjunto de estos microorganismos es el indicador más utilizado para determinar contaminación biológica en las aguas y lodos, debido a que este grupo es el más persistente en el ambiente (Spellman, 2002). Si hay alta cantidad de coliformes, es muy probable que existan otros patógenos como los del 21 género Salmonella; y de su ausencia o reducida presencia indica que la calidad biológica del lodo o agua se mejoró (Spellman, 2002). Los resultados fueron similares para los análisis de coliformes fecales (Cuadro 5) sin embargo, la eliminación de estos patógenos fue en menos tiempo y con concentraciones más bajas de EM, que las coliformes (Cuadro 4). También, el número de UFC de coliformes fecales fue menor que del número de UFC de coliformes. Cuadro 4. Número de unidades que forman colonias de coliformes en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% 7,5% 10% ----------------------------- Coliformes (UFC)† ----------------------------- 3 400 4 000 4 000 667 4 000 6 400 7 000 400 67 0 9 4 000 100 400 367 67 12 67 0 0 0 0 15 700 33 33 0 0 † UFC: Unidades que forman colonias. Aunque parece que a veces hubo un aumento en el número de UFC en las muestras (Cuadros 4 y 5), esto se debe a la metodología usada para el muestreo. En el sistema de muestras destructivas, en lugar de incubar una muestra entera y tomar sub-muestras de esta para los análisis, inicialmente se divida la muestra entera en las sub-muestras para la incubación. Por cada muestreo, se usaron submuestras destructivamente para los análisis. Para el siguiente tiempo de muestreo, se usaron otras sub-muestras. De dicha manera, en cada muestreo se disminuía la cantidad de sub-muestras. La ventaja de este sistema de muestreo 22 para un experimento de fermentación es que cada sub-muestra está en una condición anaeróbica hasta el tiempo para el muestreo. La desventaja es la variabilidad en los resultados, particularmente en los análisis de parámetros biológicos. Cuadro 5. Número de unidades que forman colonias de E. coli en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% 7,5% 10% -------------------------------- E. coli (UFC)† ------------------------------- 3 0 400 100 33 67 6 3 700 400 100 367 33 9 400 33 33 0 0 12 0 67 33 33 0 15 0 0 0 0 0 † UFC: Unidades que forman colonias. Otro parámetro muy importante, aunque muy subjetivo, en la evaluación de la estabilización de los lodos sépticos es el olor. Por la putrefacción que se da en los estanques, el olor es uno de los parámetros que no permite verter estos biosólidos en áreas de influencia humana. En el Cuadro 6 se muestran las variaciones que existieron en cuanto a la evolución de los olores generados por los biosólidos de los tratamientos con las diferentes dosificaciones de EM. Se observa que para el tratamiento al 0% el olor es “muy fuerte” y distintivo del olor a séptico o materia fecal. Esto se mantuvo en el transcurso de todo el experimento. En cambio para los tratamientos con EM la disminución de los olores fue reducido en el transcurso del tiempo del experimento lo que indica que estos entraron en un 23 proceso de fermentación, apreciándose en la reducción del olor (Cuadro 6). Particularmente para los tratamientos de 7,5% y 10% de EM, el olor es distintivo y ligero para el noveno y doceavo día. Cuadro 6. Olor en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% 7,5% 10% ------------------------------------ Olor † ----------------------------------- 3 10 8 8 6 6 6 10 10 8 6 6 9 10 10 8 3 3 12 10 3 3 2 2 15 8 3 3 2 2 † (0) ninguno, (1) muy ligero, (2) ligero, (3) distintivo, (4) marcado, (5) muy marcado. Si el olor percibido es distintivo del olor a séptico o materia fecal, se multiplicara el número por 2. En la Figura 2 se puede observar que el color después de dos semanas varió de un color oscuro opaco a un amarillo intenso. Estos colores se mantienen y cambian únicamente de tonalidades a más brillantes, durante el transcurso del experimento. Al hacer el análisis de un experimento, el color brillante se debe a la acción de las bacterias ácidos lácticas y levaduras (Wood et al., 2002). 24 Figura 2. Color de los lodos sépticos después de dos semanas. La turbidez muestra la cantidad de materia en suspensión y en los biosólidos pude ser pronunciada o muy alta (Pérez y Espigares, 1999). Esto fue el resultado en este experimento (Cuadro 7). La turbidez fue más intensa en el tratamiento 0%, en el cual no hubo reducción de este parámetro durante el paso del tiempo. Para los tratamientos con EM la turbidez disminuyó a una clasificación “muy alta”, aún no se logró bajar la turbidez completamente en el transcurso del tiempo de este experimento incluso con el tratamiento de EM al 10% siendo éste el más alto (Cuadro 7). 25 Cuadro 7. Turbidez en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% 7,5% 10% ---------------------------------- Turbidez † --------------------------------- 3 20 20 20 10 20 6 20 20 20 10 10 9 20 10 20 10 10 12 20 10 10 10 10 15 20 10 10 10 10 † (1) inapreciable, (5) ligera, (10) pronunciada, (20) muy alta. Con el uso de EM la reacción que se lleva a cabo es de fermentación anaeróbica, debido a los microorganismos que se encuentran en él (Higa, 1993). Esto se puede corroborar en la Figura 3, que nos muestra la diferencia de pH entre los tratamientos. Para el tratamiento sin EM hubo una reducción de pH, pero sin gran influencia como en los otros tratamientos. Después de 12 días se logró el pH que indica la fermentación. En contrasté con los tratamientos con EM, hubo una reducción rápida en el pH, debido a este proceso fermentativo. Lo interesante fue que no hubo una diferencia significativa entre las diferentes dosificaciones de EM. También, igual que en el tratamiento sin EM, se observó una baja en el pH después de 12 días. Esto se puede manifestar debido a la producción de otra clase de ácidos en el proceso de fermentación. 26 EM 0% 2.5% 5% 7.5% 10% 5.6 5.4 5.2 5.0 pH 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3.8 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 3. Concentración del pH en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Se observa que en el Cuadro 8 que las cantidades de sólidos sedimentables en todos los tratamientos son variables. Según Ugarte et al. (2001) el contenido de sólidos sedimentables de los biosólidos es de 0,2 mg L-1 a los 10 minutos y 2,2 mg L-1 a las dos horas. Se puede apreciar que algunas de las muestras de este tanque séptico tenían mucho más de estos sólidos. En el transcurso del experimento, con los tratamientos de EM particularmente de 7,5% y 10%, lograron bajar la cantidad de sólidos sedimentables al límite máximo permisible de estos sólidos, 1 mL L-1, que exige la Ley de Costa Rica (MINSA, 1997). 27 Cuadro 8. Concentración de los sólidos sedimentales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 5.2 0% 2,5% 5% 7,5% 10% -------------------- Sólidos sedimentales (mL L-1) --------------------- 3 35 <1 1 2 20 6 38 <1 <1 <1 3 9 1 <1 <1 <1 <1 12 16 1 2 <1 <1 15 19 7 1 <1 <1 ETAPA 2 En la segunda etapa del proyecto se realizarán tres tratamientos con las concentraciones más bajas de EM del experimento en Etapa I: 0%, 2,5% y 5%. Dichas muestras se eligieron descartándose a las que tenían dosificaciones de 7,5% y 10% de EM activado, debido a que la eficiencia de las últimas era igual a las que tenían menores cantidades. Las variables a evaluar por cada muestra fueron los que evaluaron en la primera etapa: la presencia de coliformes, olor, color, turbidez, pH y sólidos sedimentables. Adicionalmente se analizaron las muestras para los siguientes parámetros: temperatura, sólidos totales, demanda bioquímica de oxígeno (DBO5), demanda química de oxígeno (DQO), nitrógeno total y nitrógeno en forma de amonio (NH4-N). En esta etapa, los resultados de los análisis para la presencia de coliformes, olor, color, turbidez, pH y sólidos sedimentables fueron muy similares de los resultados obtenidos en Etapa I. En los análisis de coliformes y su reacción respecto al EM, ésta se redujo significativamente (Cuadro 9) y para el tratamiento con 5% de EM la reducción total se dio a partir del día 3. 28 Cuadro 9. Concentración de los coliformes en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ----------------------- Coliformes (UFC)† ------------------------ 0 100 000 100 000 100 000 3 100 000 1 000 0 6 10 000 100 0 9 10 000 0 0 12 1 000 0 0 15 100 0 0 † UFC: Unidades que forman colonias. De acuerdo con Montangero (2000) la eliminación e inactivación de los patógenos excretados es de primera importancia a fin de reducir los riesgos para la salud pública en zonas urbanas con densa población y en sitios con demanda de biosólidos provenientes de efluentes tratados. De acuerdo con los resultados del presente estudio, se puede eliminar este riesgo con 2,5% de EM en nueve días. De igual forma se puede observar que el tratamiento al 0% EM, no redujo satisfactoriamente las unidades de coniformes. Lo mismo se aprecia en la Etapa I (Cuadro 4) siendo esto uno de los factores que hacen ineficiente su uso en actividades agrícolas. El olor es una de las características subjetivas de este análisis, sin embargo el resultado es totalmente importante como indicador de un buen tratamiento de los biosólidos. Los resultados demostraron que en el transcurso del experimento la reducción de los olores no fue totalmente (Cuadro 10). Para el tratamiento sin EM (0%) el olor se redujo de un nivel 10 (muy marcado y distintivo del olor a séptico o materia fecal) hasta un nivel seis, todavía con el olor séptico. Los tratamientos con 29 EM se redujo hasta un nivel cinco (2,5% EM) y tres (5% EM). En el tratamiento de 5% EM, el olor era marcado a fermentación y no se sentía el olor a material fecal, característico de los otros tratamientos (Cuadro 10). Cuadro 10. Olor en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ------------------------- Olor † ------------------------- 0 10 10 10 3 10 10 8 6 5 8 4 9 9 4 4 12 7 6 3 15 6 4 3 † (0) ninguno, (1) muy ligero, (2) ligero, (3) distintivo, (4) marcado, (5) muy marcado. Si el olor percibido es distintivo del olor a séptico o materia fecal, se multiplicara el número por 2. La turbidez es otro de los factores subjetivos del experimento: estos fueron evaluados dependiendo de la cantidad de materia en suspensión de las muestras. En el día cero (o) para todos los tratamientos la turbidez era muy alta, con partículas de sólidos (Cuadro 11). Para el día seis (6) los tratamientos con EM habían reducido la turbidez. Para el tratamiento con 2,5% de EM la reducción llegó a nivel 10 que indica que la turbidez es pronunciada y se mantuvo en el transcurso de los días. La reducción fue mayor para el tratamiento con 5% de EM, llegando a un nivel de cinco (5) lo cual indica que la turbidez es ligera, o sea que es observable, pero muy ligera. Como observó en la primera etapa, se puede apreciar que la reducción en la turbidez no fue totalmente. 30 Cuadro 11. Turbidez en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ------------------------ Turbidez † ------------------------ 0 20 20 20 3 20 20 20 6 20 10 5 9 20 10 5 12 20 10 5 15 20 10 5 † (1) inapreciable, (5) ligera, (10) pronunciada, (20) muy alta. Un pH ácido es una indicación del proceso de fermentación. Igual que en la Etapa I de este estudio hubo variaciones significativas en el pH (Anexos 12 y 13), que indican que hubo diferenciaciones en el transcurso de los días y entre los tratamientos. El pH en las muestras se bajo durante el transcurso del tiempo del experimento (Figura 4). En esta etapa el pH inicial fue 5,2 en contraste con la primera que tiene un pH inicial > 5,4. Por esta razón, particularmente con la dosis de 5% EM, el pH después de tres días fue más baja también. A diferente del primer experimento, el pH empezó a subir después de nueve días. En el proceso de la fermentación, los cambios en pH se deben a compuestos producidos de los substratos de dicho proceso. Normalmente los productos son ácidos, por lo tanto, el pH se baja. Sin embargo, dependiendo de los substratos y las poblaciones de microorganismos presentes, se puede producir compuestos que afectan en el pH también (Pelczar y Chan, 1988). 31 5.4 EM 0% 2.5% 5% 5.2 5.0 pH 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 4. Concentración del pH en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Según el MINSA de Costa Rica (1997) cualquier agua residual que sea vertida en fuentes de agua, tiene que tener un contenido de sólidos sedimentables de no más de 1 mL L-1. En base a esto se pude decir que los lodos sépticos en este experimento, sin EM como con EM, necesitan de un tratamiento adicional, ya que el límite permisible no fue alcanzado (Cuadro 12). Se puede apreciar que la cantidad de sólidos es variable en los diferentes tratamientos; para el tratamiento sin EM la cantidad de sólidos sedimentables al paso de 15 días fue de 11 mL L-1, y para el tratamiento con EM al 5% la cantidad de sólidos fue de 30 mL L-1 (Cuadro 12). Sin embargo no se encontró diferencia significativa entre los tratamientos. 32 Cuadro 12. Concentración de los sólidos sedimentales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% -------------- Sólidos sedimentales (mL L-1) -------------- 0 4 4 4 3 147 160 123 6 83 52 47 9 170 41 73 12 15 6 124 15 11 123 30 Las muestras fueron incubadas a temperatura ambiente en el laboratorio. El proceso de fermentación no tuvo un efecto en la temperatura. La temperatura promedio de cada tratamiento fue 29°C (Anexo 3). La temperatura promedio entre el día para los meses del experimento fue 28,2°C (Rodríguez, 2004). Las diferencias entre los tratamientos con EM y el sin EM para el análisis de sólidos totales fueron significativas (Anexo 14), siendo para los tratamientos con EM no significativas entre si y de estos con el tratamiento al 0% EM diferentes (Anexo 15). En la Figura 5 se puede observar la diferencia entre la cantidad de sólidos totales del control (tratamiento sin EM) y los tratamientos con EM (2,5% y 5%). Para el tratamiento sin EM, los cambios entre los días fueron variables, con una tendencia de una reducción en la cantidad total. En cambio al día tres (3) los tratamientos con EM tuvieron una reducción en la cantidad de sólidos, el porcentaje de reducción para el tratamiento que contenía 2,5% EM fue de un 80,77% y para el tratamiento con 5% EM fue un 85,4% (Anexo 5), siendo para el control (0% EM) un 33,67% de reducción al día 3. De igual forma se puede 33 observar que el mayor porcentaje de reducción se dio en el día 3, ya que para los demás días el porcentaje fue mínimo (Anexo 5). Sin embargo, no se alcanzó el límite máximo permisible para descargar esta agua en el ambiente, <2 000 mg L-1 (MINSA, 1997). 35 EM 0% 2.5% 5% -1 Sólidos totales (x 1000 mg L ) 30 25 20 15 10 Límite máximo permisible 5 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 5. Concentración de los sólidos totales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. La DBO5 es un índice de contaminación del agua que representa el contenido de substancias bioquímicamente degradables en el agua. Se puede apreciar que este parámetro fue muy alto en los lodos sépticos del experimento, > 800 mg L-1 (Figura 6). Según Montangero y Strauss (2000) la DBO5 de los biosólidos crudos siempre es muy alta y varía entre 600 y 35 000 mg L-1. En el transcurso del tiempo, la cantidad de DBO5 en los tratamientos fue mayor en el control (0% EM) que en los otros tratamientos que tenían una reducción significativa en la demanda en el tercer día (Figura 6). Esto indica que la 34 cantidad de materia orgánica presente en los tratamientos con EM fue disminuida por la actividad de los microorganismos del EM. Higa (1993) indica que la materia orgánica se reduce a un estado soluble por la descomposición citogénica, provocada por los microorganismos citogenicos. Los resultados presentados en la Figura 5 corroboran este dato observándose que la cantidad de sólidos totales disminuyeron en los tratamientos con EM (2,5% y 5%). 1000 EM 0% 2.5% 5% -1 DBO5 (mg L ) 800 600 Límite máximo permisible 400 200 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 6. Concentración de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. En el Anexo 16, se observa que hubo una diferencia significativa entre los tratamientos con EM y sin EM, siendo este último diferente a los tratamientos al 2,5% y 5 % de EM, que no obtuvieron diferencias significativas entre ambos (Anexo 17). Al mismo tiempo se puede apreciar que el nivel de DBO5 fue menos que el límite máximo permisible para descargar esta agua en el ambiente, <300 mg L-1 (MINSA, 1997). El porcentaje de reducción (Anexo 7) para el tratamiento 2,5% EM fue de 74,2% al día tres, y de 90% para el tratamiento con 35 5%. En cambio para el tratamiento 0% EM el porcentaje de reducción de la DBO5 fue bajo en un 6,2%. De igual forma se observa que para el tratamiento 2,5% la reducción de la DBO5 se mantiene dando mayor seguridad en la reducción (Anexo 7). Otro parámetro que es utilizada como un indicador de los compuestos orgánicos en el agua residual es la DQO. En contraste con la DBO5, la DQO es un índice de contaminación del agua que representa no solamente el contenido de substancias bioquímicamente degradables en el agua pero también el contenido de compuestos orgánicos muy complejos y difíciles a degradar y la materia orgánica no biodegradable. Por esta razón, este parámetro siempre va a ser mayor que la DBO5 (Pérez y Espigares, 1999). 40 EM 0% 2.5% 5% -1 DQO (mg L x1000) 30 20 10 Límite máximo permisible 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 7. Concentración de la demanda química de oxígeno (DQO) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. 36 En la Figura 7, se puede observar que el nivel de DQO inicial es alrededor de 25 000 mg L-1, debido a la alta cantidad de natas o espuma y líquido con natas en los lodos, compuestos por grasas y otros materiales orgánicos. Según Ugarte et al. (2001) la DQO de los biosólidos varía entre 1 700 y 45 000 mg L-1. Con el tratamiento al 0% de EM, la DQO varía mucho en el transcurso del experimento y después de 15 días todavía fue más que 25 000 mg L-1 (Figura 7). Para los tratamientos con EM la DQO disminuyó significativamente y después de tres días bajó menos de 10 000 mg L-1. Era aparente una alta cantidad de grasas en estas muestras, un orgánico muy difícil a degradar. Por esta razón, no se puede lograr el límite máximo permisible de DQO para descargar esta agua residual en el ambiente, <1 000 mg L-1 (MINSA, 1997). Al igual que la DBO5, el DQO presenta diferencias significativas entre los tratamientos con EM y el sin EM (Anexo 18), pero no entre los tratamientos 2,5% y 5% EM (Anexo 19). El porcentaje de reducción de la DQO fue mayor en el tratamiento con 5% EM. Para el tratamiento con 2,5% EM, el porcentaje de reducción de la DQO fue de 70,24% (Anexo 9). Se puede observar que el porcentaje de reducción mayor se dio para el día 3, y las reducciones posteriores fueron bajas. En el transcurso de los días del experimento, observó un incremento en la cantidad de nitrógeno total en las muestras. Para todos los tratamientos, sin EM como, con EM, existió mucha variabilidad en la concentración del nitrógeno total (Figura 8). Se puede explicar este fenómeno debido a la variabilidad en la cantidad de grasas en las muestras. Las grasas contienen una alta cantidad de carbono que diluye la concentración de nitrógeno. Para tener menos variabilidad de este parámetro debe separar las natas antes de analizar las muestras. 37 2.4 EM 0% 2.5% 5% 2.2 Nitrogeno total (%) 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 8. Porcentaje de nitrógeno total en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. De acuerdo con Bettiol y Camargo (2000), el proceso fermentativo ocasiona una pérdida de nitrógeno inorgánico, debido al consumo del mismo por parte de los microorganismos que ejercen funciones como respiración. Esto se puede apreciar en el tratamiento con 5% de EM (Figura 9). El tratamiento con 2,5% de EM, empezó con mineralización de nitrógeno orgánico, y después de tres días, obtenía inmovilización de amonio. En el tratamiento sin EM, la mineralización de amonio duro nueve días antes de tener inmovilización que puede ser una indicación de fermentación (Figura 9). En el mismo día empezó a bajar la cantidad de DBO5 y DQO con este tratamiento (Figuras 6 y 7, respectivamente). 38 700 EM 0% 2.5% 5% 600 -1 NH4 -N (mg L ) 500 400 300 200 100 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Tiempo (días) Figura 9. Concentración de nitrógeno en forma de amonio en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM. El incremento en la concentración de amonio indica la presencia de materia orgánica no muy complejo en los lodos que los microorganismos puedan descomponer rápido con producción de CO2 y este nitrógeno inorgánico. En los tratamientos con EM existía una competencia entre los microorganismos autóctonos de los lodos y los exógenos del EM. Con 5% EM tenía más inmovilización por los exógenos que mineralización por los autóctonos. Después de nueve días, obtenía otro incremento en la concentración amonio (Figura 9), el mismo tiempo que tenía un incremento en el pH (Figura 4), que puede ser más descomposición, producto de fermentación (Pelczar y Chan, 1988). Pese a esto la diferencia significativa existente es entre los tratamientos con EM, y el sin EM, no entre los tratamientos 2,5% y 5% de EM (Anexos 20 y 21). 39 Las cantidades de nitrógeno en forma de amonio en el tratamiento sin EM pueden resultar toxicas si aplican este lodo al suelo. En el suelo, el amonio puede pasar a amoniaco espontáneamente y este en el suelo resulta toxico en unas 500 veces más que el amonio. También puede nitrificar el amonio a nitrato, y en altas cantidades este nitrato puede lixiviar hasta el agua del nivel freático o puede causar eutrificación si llega a un cuerpo de agua. Por tal razón no se recomienda la aplicación de los lodos sépticos con las cantidades de amonio tan altas (Figura 9). En cambio hasta 9 días en los lodos tratados con EM, las cantidades de amonio son permisibles para su aplicación en el suelo. Los resultados de este trabajo con los de la investigación de Fioravanti y Vega (2003), indican que fueron iguales, ya que la diferencia entre los tratamientos con EM y sin EM, siendo para el tratamiento con EM la estabilización positiva. Con el experimento se puede demostrar que la estabilización de los lodos sépticos se logra a un tiempo corto (tres días) para la mayoría de las variables analizadas. No pudiéndose observar lo mismo en los resultados de Fioravanti y Vega (2003), siendo en sus resultados la falta de análisis consecutivos. 40 6 CONCLUSIONES El uso de EM en este proyecto resultó ser eficiente, por lo que se concluye que es un excelente estabilizador de biosólidos crudos. En los tratamientos con EM, las coliformes totales y fecales habían sido eliminadas totalmente para el día 9 de ambos experimentos. Durante el transcurso del tiempo de ambos experimentos, en los tratamientos con EM, el cambio en olor, que había pasado de un olor fecal a un olor ligero característico de alcoholes, y la reducción en el pH indicaron que había ocurrido un proceso de fermentación. Para los tratamientos con EM, la presencia de un color amarillo intenso se debió a la acción de las bacterias lácticas y levaduras, otra indicación de que ocurrió un proceso de fermentación. Una reducción en la turbidez, sólidos totales, DBO5 y DQO, para los tratamientos con EM, indicó una reducción en la materia orgánica en los lodos sépticos. Aunque la reducción de sólidos totales y DQO en los tratamientos con EM fue significativa, este descenso no llegó a los límites permisibles de estos parámetros (<1 000 mg L-1 y <2 000 mg L-1, respectivamente). En los tratamientos con EM, la reducción en la DBO5 fue significativa y menor de lo permisible, <300 mg L-1, para descargar esas aguas en el ambiente. En base a los resultados, la concentración más baja de EM y el tiempo menor para que ocurra una estabilización efectiva de los lodos sépticos, fueron el tratamiento con 2,5% de EM activado y un tiempo no mayor que 5 días. 41 7 RECOMENDACIONES La utilización de Microorganismos Eficaces (EM) es adecuada para la estabilización de lodos sépticos determinándose una dosis y un tiempo de estabilización. La dosis que se recomienda es de 2,5% (v/v) de EM activado y el tiempo de estabilización es de 5 días. Los lodos analizados en estos experimentos fueron del tanque séptico del comedor de la Universidad y podrían no ser representativos de los lodos que se pueden encontrar en otros tanques sépticos del campus. Es recomendable hacer experimentos similares para determinar las características de los lodos sépticos en otras áreas del campus. Los análisis para coliformes totales y coliformes fecales fueron de tipo ausencia-presencia en paletas Hy-Labs. Es recomendable realizar el análisis de Número Más Probable para coliformes totales, bacterias fecales (Escherichia coli y Streptococcus faecalis) y patógenos como Salmonella en los lodos sépticos antes y después de estabilización. Otros experimentos realizados en otros estudios establecieron que los lodos sépticos del tanque séptico del comedor no tenían cantidades significativas de metales pesados. Sin embargo, es recomendable realizar un análisis de metales pesados en los lodos de los otros tanques sépticos en el campus, particularmente aquellos que reciben lodos de tipo industrial. Se recomienda experimentar con la estabilización de los lodos en tanques grandes para determinar si es posible alcanzar un ambiente anaeróbico y por ende un estado de fermentación y estabilización de los lodos. Más estudios son necesarios para determinar los niveles de nutrientes en el lodo estabilizado y la disponibilidad de dichos nutrientes para la absorción por las plantas. 42 8 BIBLIOGRAFÍA Bautista, C. 2003. Aguas: Guía Técnico -Jurídica. Madrid, ES. Aedos. 360 p. Bravo, M; Moreno, A. 2003. Implementación y Monitoreo de la Etapa Inicial del Sistema de Tratamientos de Aguas Residuales del Laboratorio de Procesamiento de Alimentos de la Universidad EARTH. Tesis Lic. Ing. Agr. Guácimo, CR, EARTH. 92 p. Chicón, L. 2000. Especiación de metales pesados en lodos de aguas residuales de origen urbano y aplicación de lodos digeridos como mejoradores de suelos (en línea). Trabajo de investigación del Programa de Doctorado en Ingeniería Ambiental de la Universidad de Málaga. Consultado el 10 mayo del 2004. Disponible en http://usuarios.lycos.es/ambiental/lodos.html Clesceri, LS; Greenberg, AE; Eaton, AD. (Eds.) 1999. Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, 20th Edition. 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Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ----------------------------------- pH ---------------------------------- 0 5,20 5,20 5,20 3 5,11 4,45 4,20 6 4,89 4,41 4,23 9 4,79 4,37 4,17 12 4,93 4,53 4,29 15 4,92 4,49 4,33 47 Anexo 3. Temperatura en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% -----------‘’’--------- Temperatura (°C) ------‘’’-------------- 0 29,0 29,0 29,0 3 29,0 29,0 29,0 6 29,0 29,2 29,0 9 28,7 29,0 29,0 12 28,7 29,0 28,8 15 29,5 29,0 29,5 48 Anexo 4. Concentración de los sólidos totales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% -------------- Sólidos totales (x 1 000 mg L-1) -------------- 0 30,89 30,89 30,89 3 20,49 5,94 4,51 6 23,32 5,55 4,19 9 18,97 3,80 3,38 12 18,51 4,25 4,38 15 15,04 5,03 3,05 Anexo 5. Porcentaje de reducción de sólidos totales en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ----------- Reducción de sólidos totales (%) ----------- 0 0 0 0 3 33.67 80.77 85.40 6 -13.8 6.56 7.00 9 18.65 31.53 19.33 12 2.42 -11.84 -29.58 15 18.74 -18.35 30.36 49 Anexo 6. Concentración de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ----------------------- DBO5 (mg L-1) ----------------------- 0 838 838 838 3 786 216 84 6 735 101 88 9 892 98 93 12 648 94 96 15 483 85 131 Anexo 7. Porcentaje de reducción de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO5) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ---------------- Reducción de DBO5 (%) ---------------- 0 0 0 0 3 6,2 74,2 89,98 6 6,48 53,24 -4,76 9 -21,36 2,97 -5,68 12 27,35 4,08 -3,23 15 25,46 9,57 -36,45 50 Anexo 8. Concentración de la demanda química de oxígeno (DQO) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ------------------------ DQO (mg L-1) ------------------------ 0 24 200 24 200 24 200 3 25 367 7 203 5 616 6 28 617 6 274 5 383 9 33 408 5 983 6 591 12 23 033 6 966 5 683 15 21 825 5 566 4 966 Anexo 9. Porcentaje de reducción de la demanda química de oxígeno (DQO) en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ------------------- Reducción DQO (%) -------------------- 0 0 0 0 3 -4,82 70,24 76,79 6 -12,81 12,89 4,14 9 -16,74 4,64 -22,44 12 31,05 -16,4 13,78 15 5,24 20,10 12,62 51 Anexo 10. Porcentaje de nitrógeno total en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% --------------------Nitrógeno total (%) -------------------- 0 0,88 0,88 0,88 3 1,72 1,29 1,68 6 1,64 2,04 2,30 9 1,77 1,44 1,75 12 1,38 1,64 1,99 15 1,92 1,35 1,62 Anexo 11. Concentración de nitrógeno en forma de amonio en los tratamientos con diferentes concentraciones de EM (Etapa II). Concentración de EM (v/v) Tiempo días 0% 2,5% 5% ----------------------- NH4-N (mg L-1) ---------------------- 0 118,8 118,8 118,8 3 134,8 253,7 34,4 6 476,0 215,7 92,9 9 598,4 155,0 107,6 12 506,5 184,8 160,3 15 404,2 309,5 319,7 52 Anexo 12. Análisis de varianza de la variable: pH (Etapa II). Fuente de Variación Grados de libertad Suma de Cuadrados Cuadrado medio F p Tratamientos 2 7,74740214 3,87370107 464,09 <0,0001 Error 88 0,73452753 0,00834690 Total 90 8,48192967 CV = 2,0% Anexo 13. Análisis Duncan de la variable: pH (Etapa II). Agrupaciones Medias Muestras Tratamientos EM A 4,93516 31 0% B 4,44833 30 2,5% C 4,24233 30 5% Anexo 14. Análisis de varianza de la variable: Sólidos totales (Etapa II). Fuente de Variación Grados de libertad Suma de Cuadrados Cuadrado medio F Tratamientos 2 4758,761100 2379,380550 76,02 Error 88 2754,288804 31,298736 Total 90 7513,049903 p <0,0001 CV = 58,3% Anexo 15. Análisis Duncan de la variable: Sólidos totales (Etapa II). Agrupaciones Medias Muestras Tratamientos EM A 19,641 31 0% B 4,913 30 2,5% B 3,901 30 5% 53 Anexo 16. Análisis de varianza de la variable: DBO5 (Etapa II). Fuente de Variación Grados de libertad Suma de Cuadrados Cuadrado medio F p Tratamientos 2 7227828,17 3613914,08 69,05 <0,0001 Error 88 4605913,16 52339,92 Total 90 11833741,33 CV = 71,3% Anexo 17. Análisis Duncan de la variable: DBO5 (Etapa II). Agrupaciones Medias Muestras Tratamientos EM A 713,03 31 0% B 118,70 30 2,5% B 118,05 30 5% Anexo 18. Análisis de varianza de la variable: DQO (Etapa II). Fuente de Variación Grados de libertad Suma de Cuadrados Cuadrado medio F p Tratamientos 2 8499,43372 4249,71686 79,31 <0,0001 Error 88 4715,14167 53,58116 Total 90 13214,57538 CV = 56,5% Anexo 19. Análisis Duncan de la variable: DQO (Etapa II). Agrupaciones Medias Muestras Tratamientos EM A 26 400 31 0% B 6 397 30 2,5% B 5 640 30 5% 54 Anexo 20. Análisis de varianza de la variable: Nitrógeno en forma de amonio (Etapa II). Fuente de Variación Grados de libertad Suma de Cuadrados Cuadrado medio Tratamientos 2 1113599.183 556799.591 Error 88 4084148.058 47490.094 Total 90 5197747.240 F p 11.72 <0.0001 CV = 84.6% Anexo 21. Análisis Duncan de la variable: Nitrógeno en forma de amonio (Etapa II). Agrupaciones Medias Muestras Tratamientos EM A 411,29 31 0% B 223,74 30 2,5% B 142,96 30 5% 55