“PREVENCIÓN DEL RIESGO BIOLÓGICO EN LABORATORIOS DE INVESTIGACIÓN” INSTITUTO DE BIOLOGÍA Y GENÉTICA MOLECULAR 14 de abril de 2010 SERVICIO DE PREVENCION DE RIESGOS LABORALES DE MADRID • Agentes biológicos - RD 664 / 97 “Microorganismos, con inclusión de los genéticamente modificados (OMG), cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad” CONTAMINANTES BIOLÓGICOS • ORGANISMOS VIVOS: - Agentes biológicos (Virus, Bacterias, Protozoos, Hongos, Endoparásitos, etc) - organismos modificados genéticamente - y cultivos celulares. • SUBPRODUCTOS: Productos derivados de estos organismos, p.ej. Esporas, escamas de piel, pelo, heces, micotoxinas, etc. FUENTES DE CONTAMINACIÓN Personas o animales infectados. Fluidos y muestras biológicas contaminadas. El suelo, agua, etc Contaminantes de alimentos y derivados. Contaminación de desechos y residuos. Contaminación de los climatizadores de aire, etc. Catarro Zoonosis (Hidatidosis) Muestras animales, Muestras de origen clínico (sangre, orina, heces...) Tétanos Botulismo (Manipuladores de alimentos) Brucelosis Salmonella Oportunistas (Control plagas) Legionella, ácaros del polvo, etc Tipos de exposición a CONTAMINANTES BIOLÓGICOS Exposición con intención deliberada Investigación Exposición incidental Gestión residuos Exposición no derivada de la actividad Legionelosis, laboral Gripe, “CALIDAD DE AMBIENTE” Ácaros del polvo, etc Personal investigador, auxiliar, de limpieza, de mantenimiento, etc VÍAS DE ENTRADA DEL MATERIAL INFECCIOSO Control de la formación de aerosoles • Inhalación de aerosoles tuberculosis, gripe, etc • Absorción a través de la piel o mucosas por: 9salpicaduras o producción de aerosoles micoplasmas 9contacto con material contaminado y vísceras •Absorción a través de heridas preexistentes flora gangrena •Absorción a través de las heridas causadas por: 9abrasión 9Cortes 9Arañazos 9Mordeduras Rabia Brucelosis •Picaduras de insectos •Autoinoculación o pinchazos • Ingestión por: 9salpicaduras 9derrames 9pipeteo bucal -RESPIRATORIA -DÉRMICA (PARENTERAL) -DIGESTIVA Utilización de EPI´s Fiebre Q (garrapata) Sida, Hepatitis B y C Botulismo Brucelosis Salmonella Hepatits A Hábitos higiénicas inadecuados, onicofagia, fumadores, etc RIESGOS DERIVADOS DE LA EXPOSICIÓN A AGENTES BIOLÓGICOS 1. Inflamación (inflamaciones locales y crónicas). Paperas 2. Infección (infecciones agudas y enfermedades Hepatitis C y B; Tuberculosis crónicas). 3. Sensibilización y posterior desarrollo de alergias. 4. Portadores sanos. Estaphilococus aureus – gastroenteritis; Salmonelosis 5. Intoxicaciones o envenenamientos. 6. Efectos sobre la reproducción. Tétanos, botulismo Toxoplasmosis, citomegalovirus EFECTOS TERATOGÉNICOS Paperas Acaros, “cualquier cosa” CONTAMINANTES BIOLÓGICOS Para que se produzca enfermedad han de darse simultáneamente: Presencia de Agente infeccioso Vía de transmisión apropiada Presencia de huésped susceptible Concentración suficiente del agente infeccioso OPERACIONES EN LABORATORIOS QUE PRODUCEN AUMENTO DEL RIESGO BIOLÓGICO TRANSPORTE DE MATERIAL BIOLÓGICO INTERNO: Caída y rotura de contenedores, frascos, viales y jaulas EXTERNO: Vertidos Salpicaduras Aerosoles Escape de animales Inexistencia de sistemas de contención. Implicación de terceras personas y medioambiente INFECCIÓN EXPERIMENTAL: Recogida de muestras clínicas, sacrificio de animales, biopsias y necropsias • Toma de muestras de fluídos, excretas y tejidos corporales. • Operaciones que implican utilización de material cortante y punzante. • Proximidad al individuo enfermo (exposición a aerosoles, contacto cutáneo directo y con fluídos corporales y vísceras) OPERACIONES EN LAS QUE SE PRODUCE AUMENTO DEL RIESGO BIOLÓGICO (Cont.) TÉCNICAS DE SUBCULTIVO Y CARACTERIZACIÓN Trasvase de medios de cultivo Mezclado y agitación Inoculaciones Pipeteos repetitivos y rápidos Derrames y salpicaduras Producción de aerosoles Autoinoculación Corte y abrasión TÉCNICAS DE FRACCIONAMIENTO Trituración Homogenización Sonicación Centrifugación Derrames y salpicaduras Producción de aerosoles OTROS FACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO Factores personales - las condiciones del trabajador (sexo, edad, raza, peso,...) - factores hereditarios - enfermedades padecidas y crónicas - inmunocomprometidos - alergias a agentes y/o medicamentos - tratamientos médicos, vacunaciones, estados especiales (embarazo, lactancia, etc). TIPO DE LABORATORIO Factores laborales -la experiencia y conocimientos de los trabajadores TIPO OPERACIONES - Tipo de laboratorios / actividades (infraestructura y equipamiento) - frecuencia de la exposición - procedimientos de trabajo - comodidad e impacto estético de los equipos de protección individual; ergonomía; estado general de los equipos y máquinas, condiciones medioambientales, etc. FACTORES ADICIONALES QUE MODIFICAN O AUMENTAN EL RIESGO •Factores psicológicos y de la organización del trabajo - penosidad o dificultad del trabajo - condiciones del contrato de trabajo (precariedad, contratos basura, etc) - carga de trabajo (nivel de exigencia, intensidad, monotonía) - nivel de responsabilidad del trabajador sobre su propio puesto - grado de motivación - características de los lugares de trabajo, etc. •Factores medioambientales - humedad, - temperatura, - iluminación, - renovaciones del aire (ventilación), - sinergismo de contaminantes, etc CLASIFICACIÓN A.BIOLÓGICOS z A.B. del Grupo de Riesgo 1 GR 1 z A.B. del Grupo de Riesgo 2 GR 2 z A.B. del Grupo de Riesgo 3 GR 3 z A.B. del Grupo de Riesgo 4 GR 4 Menor peligrosidad Mayor peligrosidad Anexo II del RD 664/97: Lista de agentes biológicos (modificada por la Orden de 25 de marzo de 1998) A: posibles efectos alérgicos, D: conservar lista de personal más de 10 años después de la última Exposición, T: producción de toxinas, V: si existe vacuna eficaz disponible, (*): normalmente no infeccioso a través del aire, “spp”: otras especies del género, además de las indicadas, pueden constituir riesgo para la salud Notificación de primer uso (art.10 RD 664/97) P1, P2, P3 y P4 CLASIFICACIÓN (Art.3, RD 664/97) Agente biológico del grupo de riesgo Riesgo infeccioso Riesgo de propagación a la colectividad Profilaxis o tratamiento eficaz 1 Poco probable No Innecesario 2 Puede causar enf. y constituir peligro para trabajadores Poco probable Posible generalmente 3 Puede causar enf. Grave y constituir serio problema para trabajadores Probable Posible generalmente Provocan Se establece en función de: enf.grave grave y Capacidad patógena del microorganismo constituir serio Modo de transmisión Disponibilidad de medidas de prevención eficaces: ppeligro para Profilaxis por administración de vacunas o sueros, lucha trabajadores contra los reservorios animales o artrópodos vectores… Elevado No conocido en la actualidad - + 4 Disponibilidad de tratamiento eficaz LABORATORIOS DE BIOSEGURIDAD EN EL IC: • 1 LABORATORIOS P-2 / CSB II Ejemplos VIRUS HUMANOS • • • • • • • • • • Vaccinia virus Herpes simplex Virus Sindbis Virus de la estomatitis vesicular Adenovirus Virus de la gripe Poliovirus Encefalovirus Citomegalovirus humano Retrovirus: anfotrópicos, ecotrópicos, xenotrópicos • Reovirus tipo 3 • Virus Epstein Barr • Baculovirus 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 A.B. nivel II: PARASITOS Leishmania infantum Leishmania major 2 2 BACTERIAS Legionella pneumophila Salmonella ssp. Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli (EPEC) Enterococcus faecium 2 2 2 2 2 HONGOS Saccharomyces cerevisiae 1 Saccharomyces pombe 1 Schizosaccharomyces pombe 1 LINEAS CELULARES ESTABLECIDAS 2 HeLa /HMy2-C1r (humanas)/ Daudi (humana)/ 143B (humana)/ Hibridomas /T2 (humana) HEK293 (humana)/CV-1/Cos (simio)/U-937 (humana)/RMA y RMA/s (ratón)/T2 (humana)Células COS7/ Jurkat (humana) MUESTRAS HUMANAS 2 Timo Liquido cefaloraquideo (Corea Huntington) Células endoteliales humanas de cordón umbilical (HUVECs) Linfocitos humanos de sangre periférica (PBLs) ¡¡ NUNCA SANGRE PROPIA!! Cultivos celulares de origen humano o simio Muestras de origen humano (sangre, tejidos, líquido cefalorraquídeo, etc) Tejidos de origen animal, procedentes de mataderos EL TERMINO CONTENCIÓN EN BIOSEGURIDAD ”Se utiliza para describir los métodos de seguridad necesarios para la correcta gestión de la utilización y almacenamiento en los laboratorios de agentes biológicos infecciosos y organismos modificados genéticamente”. CONTENCIÓN PRIMARIA • Equipos de protección colectivo - CSB CONTENCIÓN SECUNDARIA CONTENCIÓN TERCIARIA • Diseño de la instalación • Protección sobre el individuo ELIMINACIÓN O REDUCCIÓN DEL RIESGO BARRERAS PRIMARIAS Equipos de protección colectiva Cabinas de Seguridad Biológica (NTP 233) Objetivo: confinamiento del agente biológico Clase I Clase II Clase III Clase I Clase II IIA, recircula el 70 % IIB, recircula el 30 % Utilizarlas en aquellas operaciones que: - puedan producir aerosoles, - trituración, - manipulación de material susceptible de estar contaminado Clase III BARRERAS SECUNDARIAS Objetivo: prevenir fallos en barreras primarias Materiales de suelos y paredes Puertas de cierre automático y exclusas Tomas de aire y presiones negativas Depuración del aire expulsado BARRERAS TERCIARIAS Objetivo: actuar directamente sobre el trabajador EPI´s Vigilancia médica, inmunización Higiene personal Buenas prácticas de laboratorio - BPL (NTP 376) Buenas prácticas de laboratorio BPL (NTP 376) Procedimientos de trabajo seguros Prohibir comer, beber y fumar (almacenar alimentos) Orden y limpieza escrupuloso en el lugar de trabajo Cuartos de aseo apropiados que dispongan de productos antisépticos para ojos y piel (10 min) Almacenamiento y mantenimiento de EPI´s Utilizar ropa de protección adecuada y evitar ir con ella a zonas comunes u otros servicios Después del trabajo lavar escrupulosamente las manos Prohibir la limpieza de ropa de trabajo en el domicilio particular Evitar materiales punzantes, ¡no reencapsular agujas! CONTROL DE CONTAMINANTES Protección individual (EPI´s) - Marcado CE, certificados según legislación vigente BATA - Instrucciones de uso y mantenimiento Protección respiratoria P1 P2 - Caducidad P3 MANTENIMIENTO EPI´s DE ACUERDO A LAS INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE ¡ Sustitución periódica ! ¡ Desechables ! ¡Látex! No tocar cara, ojos, etc ¡¡ Lavado de manos !! NORMAS ESCRITAS DE ACTUACIÓN ANTE UNA EMERGENCIA • Tener previsto un Plan de emergencia para cada AB • Organización de recursos humanos (identificados) y sus responsabilidades • Localización de zonas de riesgo elevado. Señalización. • Vigilancia médica de las personas expuestas • Lista de las instalaciones donde puedan recibir asistencia las personas expuestas • Transporte de personas expuestas ACTUACIÓN ANTE UNA EMERGENCIA • Tratamiento médico de emergencia para las personas expuestas y lesionadas • Lista de depositarios de suero inmune, vacunas, medicamentos necesarios, material y suministros especiales • Provisión y ubicación del material de emergencia: ropa de protección, desinfectantes, equipos de desinfección… • Normas y procedimientos de descontaminación ¿alguna pregunta? LABORATORIOS DE NIVEL 1 9Riesgo biológico prácticamente nulo 9Características de diseño básicas 9Los sistemas especiales de contención no son necesarios 9Aplicación de las buenas prácticas del laboratorio LABORATORIOS DE NIVEL 2 AB GR2 Sangre, tejidos y cultivos de origen humano OMG en ACT2 9Riesgo biológico moderado para el personal expuesto 9Riesgo biológico muy bajo para el público y el medio ambiente “Es necesario establecer barreras entre el material biológico y el personal expuesto, manteniendo ciertas medidas de contención que impidan escapes significativos de material biológico al medio ambiente externo” LABORATORIOS DE NIVEL 2 Aspectos a tener en cuanta en la CONCEPCIÓN GENERAL •Confinar el riesgo biológico •Control de acceso •Cambio de ropa de trabajo •Gestión de residuos biosanitarios •Procedimientos de trabajo seguros 9Sectorización del laboratorio 9Esclusa de acceso 9Cabinas de bioseguridad 9Autoclave LABORATORIOS DE NIVEL 2 CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS: •Construcción: 9uniones suelo-pared en escocia 9ventanas herméticas 9control de acceso, enclavamiento •Tratamiento de aire: 9unidad de tratamiento independiente 9sin recirculación o con ésta y filtración HEPA 9depresión en determinados casos •Aparataje de seguridad: 9cabinas de bioseguridad clase II 9autoclave de bioseguridad 9SAS •Descontaminación: 9pila, ducha y lavaojos de emergencia en zona •Sistema contraincendios: 9detección, telefonía y extintores