II. INFLUENCIA DEL CONTENIDO DE AZÚCARES SOBRE LA TEXTURA E INOCUIDAD MICROBIOLÓGICA DE RODAJAS DE CARAMBOLO (averrhoa carambola L.) MÍNIMAMENTE PROCESADO DURANTE SU ALMACENAMIENTO EN ATMÓSFERA MODIFICADA Diana Blach1, Johanna Donado2, Magda I. Pinzón3 1,2,3 Laboratorio de investigaciones en postcosecha (LIP). Facultad de Ciencias Agroindustriales. Universidad del Quindio. Calle 12 N Carrera 15. Armenia - Quindio - Colombia Tel.: +57-6-7460196; fax: +57-6-7460152. [email protected] RESUMEN Se evaluó la influencia que tiene la concentración de sacarosa, glucosa y fructosa sobre la textura e inocuidad en rodajas de carambolo fresco cortado, durante almacenamiento. Se usaron rodajas de 5 mm de espesor con pretratamiento químico y estado 5 de madurez. Se almacenaron en atmósfera modificada, vacío y granel, durante 28 días, a 7 ºC y 90% HR. Se encontró un comportamiento proporcional entre la presencia de monosacáridos y la disminución de la textura, producto de cambios fisiológicos y descomposición microbiana, manteniendo el empaque en atmósfera modificada características de frescura en el producto por más tiempo; retardando a la vez la degradación de sacarosa, fermentación y pérdida de firmeza. Palabras claves: carambolo (averrhoa carambola L.), azúcar, textura, atmósfera modificada. I. INTRODUCCIÓN El envasado en atmósfera modificada (EAM) extiende la vida útil de productos. Esta técnica utiliza materiales poliméricos que permiten el intercambio gaseoso, se basa en el empleo de nitrógeno sólo o mezclado con CO2, y en la reducción del contenido de oxígeno hasta niveles normalmente inferiores al 1%; para disminuir el deterioro de los productos. Este proceso se consigue realizando vacío y posterior reinyección de la mezcla adecuada de gases, de manera que la atmósfera que se alcanza en el envase, varía con el paso del tiempo en función de las necesidades y respuesta del producto (González-Aguilar et al., 2005). Las frutas mínimamente procesadas son productos que se preparan y manejan para mantener su naturaleza fresca mientras proveen conveniencia al consumidor. El principal problema de estos productos es su alto carácter perecedero, que se incrementa después de los procesos de pelado y cortado como consecuencia del aumento de las reacciones metabólicas que limitan la vida de anaquel del producto (Cantwell, 1992). Se han realizado múltiples trabajos de evaluación de azúcares en vegetales frescos cortados mostrando el efecto positivo en la conservación de sólidos solubles que tiene el empaque en atmósferas modificadas sobre las frutas cortadas mas no sobre las hortalizas cortadas. Perkins-Veazie y Collins (2004), mostraron que el empaque en atmósfera modificada pasiva (5% O2 + 5% CO2) durante el almacenamiento de cubos de sandía puede mantener el producto en buenas condiciones por 10 días a 2 ºC, con una ligera reducción en el contenido de sólidos solubles totales a partir de los 7 días. Zagory (1995), reportó que la reducción en los niveles de oxígeno tiene un efecto benéfico en la textura, ya que puede disminuir el ablandamiento de muchas frutas y el endurecimiento de otras hortalizas frescas cortadas. Rocculi et al. (2005), al almacenar rebanadas de kiwi durante 12 días a 4 ºC, encontraron que el empaque en atmósfera modificada con 90% de N2O + 5% de O2 +5% de CO2 arrojó los mejores beneficios en la vida de anaquel observando un retraso en la disminución de firmeza de las rebanadas del fruto en estas condiciones. El carambolo es un fruto tropical exótico, de alta demanda por parte del mercado internacional, lo que hace necesario implementar alternativas de conservación por períodos de tiempo más largos, pero conservando las características propias del producto fresco y ofreciendo la alternativa de un producto listo para el consumo. Teniendo en cuenta que el empaque en atmósfera modificada permite prolongar la vida de anaquel de vegetales frescos cortados, en esta investigación se busca identificar su efecto sobre el contenido de azúcares, textura e inocuidad microbiológica de rodajas de carambolo fresco cortado con relación al efecto producido por el empaque a vacío y a granel.; y así disminuir el deterioro de las rodajas de carambolo (Averrhoa carambola L.) Fresco cortado para su distribución y comercialización. II. MATERIALES Y MÉTODOS. Se usaron frutos de carambolo (Averrhoa carambola L.), de los almacenes Ley Armenia (Colombia) provistos por la distribuidora FRUVER; en estado de maduración 5, según la Tabla de Color (figura I) establecida por García y Mejía (2004). Figura I. Tabla de color de frutos de Carambolo (Averrhoa carambola Linn. 2.1. Preparación de la muestra El carambolo entero, se lavó por inmersión en una solución de 200 ppm de hipoclorito de sodio, se cortó en rodajas de 0.5 cm de espesor, eliminando las puntas del fruto. Posteriormente, el producto se sometió a tratamiento químico con 200 ppm de hipoclorito de sodio, solución de Cloruro de calcio al 2% como texturizante, solución de ácido ascórbico 500 ppm como antioxidante y solución de ácido cítrico 1000 ppm como preservante. Se escurrió, pesó (aproximadamente 250 g/bolsa) y se empacó en atmósfera modificada, utilizando MAPAX 210: CO2 5 -40% Molar, O2 5 – 25 %Molar, N2 Balance, en bolsas de polietileno de baja densidad (PEBD) de 70 micras. En contraste se realizó el mismo ensayo en empaque a vacío y a granel manteniendo en todos los casos condiciones de almacenamiento de 7 ºC y 90% de humedad relativa. 2.2. Análisis para rodajas frescas cortadas de Carambolo Se analizó la evolución de azúcares, textura y comportamiento microbiológico de rodajas de carambolo fresco cortado empacado en atmósfera modificada, vacío y granel a diferentes tiempos (0, 7, 14, 21, 28 días) de almacenamiento. AZÚCARES: Los azúcares: glucosa, fructosa y sacarosa, se cuantificaron e identificaron por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC). (Pinzón, 2000). TEXTURA: Se utilizó un Texturómetro Stable Micro Systems; Modelo Texture Analyzer – XT plus, se realizaron ensayos de extrusión utilizando la celda Kramer Shear Cell con el objetivo de estudiar parámetros de fuerza máxima de fractura (FF) y área bajo la curva. (Pinzón, 2000). ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS: Según el manual de técnicas del Instituto Nacional de Salud (González, 1981) se realizaron análisis microbiológicos de: recuento de microorganismos mesófilos aerobios viables; recuento de microorganismos psicrófilos aerobios viables y recuento de hongos y levaduras, a los frutos frescos y en cada tiempo de almacenamiento. en un producto almacenado. Los aumentos en la concentración de ésta, se generan por cambios fisicoquímicos en los cuales interviene la degradación de almidones producto de la maduración en postcosecha, mostrando de esta manera la efectividad de los tratamientos a vacío y en atmósfera modificada para retrasar este parámetro. III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN En el empaque a granel se observa un descenso abrupto en la concentración de sacarosa a partir del día 21 el cual se relaciona directamente con la actividad microbiana, indicando fermentación del producto. Un nuevo aumento en la concentración de sacarosa indica retrodegradación de almidones del producto como se observa en el día 21 para el empaque a vacío (figura IIa). Se realizó un análisis de varianza utilizando el programa Statgraphics plus versión 5.1 estudiando cada una de las variables dependientes (contenido de azúcares, textura y recuentos microbiológicos) con respecto a las variables independientes (tipo y tiempo de almacenamiento). El diseño experimental es un diseño factorial con dos factores 3 * 5 con un nivel de significación de 0.05. La prueba de comparación utilizada fue el método de la mínima diferencia significativa (LSD). Los factores fueron: A: Tipo de Almacenamiento (1 Granel, 2 Vacío, 3 Atmósfera modificada 10% MAPAX); B: Tiempo (día 0, 7, 14, 21 y 28). La figura IIa muestra un comportamiento normal de la sacarosa El proceso de degradación de sacarosa se confronta con los resultados obtenidos de los monosacáridos derivados de la misma, glucosa (figura IIb) y fructosa (figura IIc), donde se muestra un comportamiento directamente proporcional; es decir que a medida que la concentración de sacarosa disminuye por degradación, aumenta la concentración de los monosacáridos Figura II. Variación de la concentración (mg/L) de azúcares. Sacarosa (a), Glucosa (b) y Fructosa (c), en rodajas de carambolo fresco cortado y almacenado a granel, vacío y atmósfera modificada en función del tiempo de almacenamiento. El análisis estadístico indica que el empaque en atmósfera modificada mantiene los niveles de azúcar relativamente constantes por más tiempo, retardando de esta manera la maduración y fermentación del producto. Comportamientos similares han sido reportados por Del Caro et al. (2004), quien concluyó que el empaque en atmósfera modificada de cítricos Tangelo Minneola, mandarina Palazelli y naranja Shamouti, mantienen el contenido de sólidos solubles totales, retrasando su pérdida durante el almacenamiento por 12 días a 4 ºC. Al igual HabibunnisaBaskaran et al. (2001, mostraron que el empleo de atmósfera modificada 2-7% O2 + 15% de CO2, extiende la vida de anaquel de cubos de calabaza a 20 días a 5 ºC, y reduce los cambios en sólidos solubles totales y ácido ascórbico. El análisis estadístico de textura arrojó diferencias significativas entre los tratamientos. En la figura III se observa cómo las rodajas de carambolo almacenadas a vacío y en atmósfera modificada presentan un comportamiento diferente a las almacenadas a granel, estas últimas en el día 28 muestran un notable descenso en el área bajo la curva (figura IIIb); contrario al comportamiento de los otros tratamientos en los cuales se mantienen la tendencia. Este comportamiento se relaciona con procesos de maduración, y degradación de almidones en azúcares (figura II), lo cual disminuye la turgencia del producto, mostrando un cambio de textura característico del carambolo de fracturable a gomoso (Blach. D; Donado J., 2007). Esta tendencia es más notable en las rodajas de carambolo empacadas a vacío, lo que muestra que el daño mecánico ejercido en el momento de empaque encuentra repercusiones en la textura del producto al final del almacenamiento. En la figura IIIa se corrobora este comportamiento, al mostrar que las rodajas de carambolo empacadas en atmósfera modificada poseen los valores más altos de fuerza máxima de ruptura a lo largo del almacenamiento, representando una textura fresca y crujiente por mayor tiempo. Este comportamiento también fue observado por Rojas-Graü et al. (2007) quienes encontraron que el uso de atmósferas con bajos niveles de O2 y elevados niveles de CO2 mantenían la calidad de frescura (color y textura) de manzanas cortadas, por más de 1 mes de almacenamiento en refrigeración, especialmente en las manzanas en estados de madurez menores. Figura III. Variación de la fuerza máxima de ruptura y área bajo la curva del parámetro de textura, de las rodajas de carambolo fresco cortado almacenadas a granel, vacío y atmósfera modificada en función del tiempo de almacenamiento. En el recuento de mesófilos aerobios viables (figura IV) se observa una tendencia similar para los tratamientos a vacío y en atmósfera modificada, evidenciándose un máximo el día 14 y 21 de almacenamiento, respectivamente. . Figura IV. Recuento de mesófilos aerobios viables, hongos y levaduras y psicrófilos aerobios viables para rodajas de carambolo fresco cortado almacenado a granel, vacío y atmósfera modificada en función del tiempo de almacenamiento. El tratamiento a granel llega al límite unidades máximo permitido, 106 formadoras de colonia por gramo (ufc/g), aproximadamente en el día 14; lo que se relaciona directamente con la disminución en la concentración de sacarosa a partir de este día (figura IIa) en el empaque a granel; explicado por la presencia microbiana que genera degradación de azúcares y fermentación IV.CONCLUSIONES Un comportamiento similar al recuento de mesófilos se presenta para hongos y levaduras, aunque con una mayor proliferación microbiana, donde el empaque a granel muestra su máximo permisible en el día 9. El empaque en atmósfera modificada extiende la vida de anaquel de rodajas de carambolo mínimamente procesado, disminuyendo los cambios en sólidos solubles (sacarosa, glucosa y fructosa); al retrasar los principales procesos de respiración y fermentación microbiana que utilizan como sustratos los azúcares y ácidos orgánicos, manteniendo los niveles de éstos compuestos por un mayor periodo de tiempo confiriendo una mejor calidad. Se ha encontrado previamente un mayor crecimiento de hongos y levaduras que de bacterias, en los vegetales frescos cortados, ya que los exudados de las frutas proveen nutrientes para las levaduras, especialmente levaduras pigmentadas como especies de Rhodotorula (González-Aguilar, 2005). El recuento de microorganismos psicrófilos aerobios viables con carga inicial <10 ufc/g nunca supera los valores máximos permitidos (figura IV), aunque muestra una tendencia al crecimiento hasta el día 14 de almacenamiento para las rodajas de carambolo fresco cortado empacadas a granel, con una aparente estabilidad el día 21 que corresponde a la fase de latencia para luego iniciar la muerte microbiana. Según el análisis estadístico el empaque a vacío resulta ser el mejor tratamiento para mantener la inocuidad microbiológica del producto durante 28 días de almacenamiento. De acuerdo con los resultados fisicoquímicos y microbiológicos, se establece que el almacenamiento en atmósfera modificada de rodajas de carambolo fresco cortado presenta el mejor comportamiento, ya que permite conservar por 21 días características similares a las del producto fresco. V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Blanch, D., Donado, J. (2007). Caracterización y vida útil de rodajas de carambolo (Averrhoa Carambola L.) fresco cortado almacenado en atmósfera modificada; Trabajo de grado, Programa de Química, Facultad de ciencias básicas y tecnologías, Universidad del Quindío. Armenia, Colombia. Cantwell, M. (1992). Postharvest handling systems: Minimally processed fruits and vegetables. In: Postharvest Technology of Horticultural Crops. 2nd ed. Division of Agricultural and Natural Resources. AA Kader. (Ed.) University of California Publication 3311. p 277281 Del Caro A, A Piga, V Vacca, M Agabbio. (2004). Changes of flavonoids, vitamin C and antioxidant capacity in minimally processed citrus segments and juices during storage. Food Chem. 84 (1): 99-105. García, S., Mejía, G. (2004). Evolución de las propiedades físicas y bioquímicas durante la cinética de deshidratación osmótica del carambolo (Averrhoa carambola L.) var, Icambola. Trabajo de grado, Programa de Química, Facultad de ciencias básicas y tecnologías, Universidad del Quindío. Armenia, Colombia. Pinzón Fandiño, Magda Ivonne. Propiedades físicas de cosecha y postcosecha de frutos de lulo La Selva In: 3er Seminario de ¨Frutales de clima frío moderado, (2000). er Manizales. Memorias 3 Seminario de Frutales de Clima Frío Moderado. Manizales: Litógrafos AsociadosLITOAS-, 2000.1. p.1– 406. Rocculli P, S Romani, M Dalla Rosa. (2005). Effect of MAP with argon and nitrous oxide on quality maintenance of minimally processed Kiwifruit. Postharvest Biol. And Technol. 35:319328. González-Aguilar G. A, Gardea AA, Cumenea N. F. (2005). Nuevas tecnologías de conservación de productos vegetales frescos cortados. Centro de investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. (CIAD, A.C.). México. Rojas-GRAÜ, M.A., Grassa-Guillem, R., Martín-Belloso, O. (2007). Quality Changes in Fresh-Cut Fuji Apple as Affected by Ripeness Stage, Antibrowning Agents, and Storage Atmosphere. J. of Food and Sci. 72 (1): S36-S43 González G. E. (1981). Manual de técnicas recomendadas para el análisis microbiológico de los alimentos. MINSALUD, INAS. Laboratorio de alimentos y microbiología de alimentos. Bogotá. ZAGORY D. (1995). Principles and practice of modified atmosphere packaging of horticultural commodities. In: Principles of Modified-Atmosphere and Sous Vide Product Packaging. Faber JM, KL Dodds (Eds.). Cap. 8. Technomic Publishing Co., Inc. Lancaster, PA. Pp. 175-206. Habibunnisa-Baskaran R, R Prasad, KM Shivaiah. (2001). Storage behavior of minimally processed pumpkin (Cucurbita maxima) under modified atmosphere packaging conditions. Eur. Food Res. and Technol. 212 (2): 165169. Perkins-Veazie P, JK Collins. (2004). Flesh quality and lycopene stability of fresh-cut watermelon. Postharvest Biol. And Technol. 31 (2): 159-166. Agradecimientos: Grupo de investigación en Ciencia y Tecnología de Alimentos–CYTA, Laboratorio de Postcosecha (LIP) Universidad del Quindío. Colombia.