Documento 770996

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE
SERVICIO DE LABORATORIO
LABORATORIO DE BROMATOLOGIA
PRACTICA Nº 5
DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES
1.- CÓNOCIMIENTO TEORICO
Las son el componente mayoritario de todos los tejidos del organismo. Son
constituyentes de los tejidos (muscular, cardiaco, óseo), de las viceras, de la
sangre (hemoglobina, fibrinogeno, globulinas), de las enzimas, de las hormonas
insulina e hipofisiares, del plasma celular y de los núcleos.
Las proteínas están compuestos por carbono 50 a 55 %, hidrogeno a 7.3 %,
oxigeno 19 a 24 %, nitrógeno 13 a 19 %, azufre 0 a 2.5 %
Existen 8 aminoácidos esenciales y dos semiesenciales
2.- COMPETENCIA (S)
a) Determina el porcentaje de proteínas en una muestra de componente
mayoritario de todos los tejidos del organismo a través de la resolución de
problemas.
b) Compara los resultados con valores de referencia, a través de la resolución de
problemas
PRINCIPIO
Método Kjeldahl. Basado en la destrucción de la materia orgánica con acido
sulfúrico concentrado, formándose sulfato de amonio que en exceso de hidróxido
de sodio liberando amoniaco, el que es destilado recibiéndose en acido sulfúrico
donde se forma sulfato de amonio y el exceso de acido es valorado con hidróxido
de sodio en presencia de rojo de metilo como indicador.
3.- MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPOS
Balanza analítica
Equipo de Kjeldahl
Balones kjeldahl
Bureta de 50 ml
Soporte universal
Matraz erlemeyer de 500 ml
Pipeta volumétrica de 25 ml
Acido sulfúrico concentrado
Tabletas de catalizadores (Sulfato de potasio, sulfato de cobre, oxido de titanio)
Solución de hidróxido de sodio al 45 %
Solución hidróxido de sodio 0.1 N
Solución de acido sulfúrico 0.1 N
Solución indicadora de tashiro ( rojo de metilo y azul de metileno)
4.- TECNICA
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Pesar un papel 1 gramo de muestra, previamente tarado, transferir a un
matraz kjeldahl, añadir una tableta del catalizador y agregar 25 ml de
acido sulfúrico concentrado.
Colocar en el digestor hasta total digestión por lapso de 2 a 4 horas hasta
total carbonización de las materia orgánica, adquiera un color verde.
Enfriar y agregar 200 ml de agua destilada
Agregar lentamente el hidróxido de sodio al 45 hasta total neutralización
lentamente, sin agitar.
Conectar el matraz al aparato de destilación y destilar lentamente no
mas de 150 ml en un matraz que lleva acido sulfúrico 0,1 N en
presencia del indicador .
Titular con hidróxido de sodio 0.1 N hasta cambio de color del indicador.
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5.- MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS
Nt
Vacidox N - V hidroxido x N x 1.4
Pcm - Pcv
Nt – Nitrogeno total
V acido - Volumen de acido
V hidroxido ---Volumen de hidroxido
Pcv - Peso de la capsula vacía
Pcm – Peso de la capsula mas muestra
N normalidad del acido o alcali
Proteina total - Nt x factor
6.- CUESTIONARIO
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Que diferencia entre proteínas de origen animal y vegetal.
Cuales son los factores que se utilizan para el calculo de proteína en caso
de cereales, leche, arroz, pescado.