Instrucciones sobre la preparación de las muestras

Instrucciones sobre la preparación de las muestras
Muestras microbiológicas: Evaluación de rendimiento y control de calidad:
Coliformes y enterococos/estreptococos fecales
Se le han proporcionado dos conjuntos de viales; cada uno contiene una ampolla liofilizada de
microorganismos. Un conjunto se llama “QC” [Control de calidad, por sus siglas en inglés] y tiene un
Certificado de análisis que acompaña, donde se muestran los valores asignados y los límites de confianza
relacionados. El segundo conjunto se llama “PE” [Evaluación de rendimiento, por sus siglas en inglés] y son
muestras desconocidas. Además cada conjunto de muestras está acompañado por una botella de diluyente
esterilizado para volver a hidratar los viales liofilizados, como se detalla a continuación.
Registro de la temperatura: Existen indicaciones en el libro de devolución de datos y en las páginas de entrada
de datos en línea para que registre la temperatura de las muestras microbiológicas cuando las reciba. Siga las
instrucciones que se incluyen a continuación para medir la temperatura de las muestras (Nota: como estas
muestras se utilizarán para pruebas microbiológicas, no medirá la temperatura de las muestras directamente):
1.
2.
Abra el envase que contiene los viales e inserte el termómetro o la sonda en el envase, de manera que
quede inmediatamente adyacente a los viales de vidrio.
Deje que el termómetro se estabilice y registre la temperatura en el espacio adecuado en el libro de devolución
de datos. También se puede ingresar la temperatura en las páginas de entrada de datos en línea.
Almacenamiento de las muestras: Se recomienda encarecidamente comenzar la prueba dentro de los 28 días
de haber recibido el material. Los viales y el diluyente deben tener una temperatura de almacenamiento de
o
entre 2 y 8 C. Cuando esté listo para comenzar la prueba, saque los viales y el diluyente de la refrigeración y
déjelos reposar a temperatura ambiente durante 15 minutos. Una vez rehidratados, todos los viales deben
analizarse inmediatamente después del tiempo de reposo de 10 minutos.
Preparación de las muestras:
1.
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8.
9.
Vuelva a hidratar todos los viales liofilizados agregando 3,0ml del diluyente esterilizado.
Deje reposar a temperatura ambiente durante 10 minutos.
Mezcle el contenido de los viales utilizando un mezclador vortex o agite 25 veces durante 7 segundos. Se
recomienda dejar asentar durante 30 segundos para que no se incorpore espuma en el volumen de la prueba.
Coloque asépticamente 2,0ml del contenido de los viales en 1 000mL de agua desionizada estéril (o destilada).
Agite la botella de la muestra 25 veces para producir la muestra de agua simulada.
Examine la muestra utilizando sus métodos de análisis de rutina.
Se recomienda que para las muestras de evaluación de rendimiento, se realicen diluciones para obtener
resultados numéricos. Los resultados que se envían como “>” no pueden ser evaluados.
Informe los resultados como ufc/100mL o NMP/100mL (cfu/100mL or MPN/100mL).
Consulte la hoja de datos de seguridad de materiales (HDSM) para obtener información sobre los peligros y
las precauciones de seguridad.
PE Microbiology Samples (Muestras microbiológicas para ER)
Analitos
Escherichia coli (FM)
Escherichia coli (NMP)
Coliformes fecales (FM)
Coliformes fecales (NMP)
Coliformes totales (FM)
Coliformes totales (NMP)
Enterococos (MF)
Enterococos (MPN)
Estreptococos fecales (MF)
Estreptococos fecales (MPN)
Unidades
UFC/100mL
NMP/100mL
UFC/100mL
NMP/100mL
UFC/100mL
NMP/100mL
UFC/100mL
NMP/100mL
UFC/100mL
NMP/100mL
Rango de concentración
200 - 400
200 - 400
200 - 400
200 - 400
400 - 800
400 - 800
200 - 400
200 - 400
200 - 400
200 - 400
Microbiología
Control de calidad de coliformes, enterococos/estreptococos fecales
Certificado de análisis
Fecha de emisión: 2 Octubre 2013
Prueba
Pruebas n
Fecha de vencimiento: 4 Enero 2014
Intervalo de
Media geométrica
Media
confianza de 95%
ufc/100mL
Logarítmica10
(IC ) ufc/100mL
Métodos
Coliformes totales
34
120.6
2.08
58.2 – 249.9
Filtración por membrana (FM)
Coliformes fecales
41
50.7
1.71
15.7 – 163.3
Filtración por membrana (FM)
Escherichia coli
32
49.7
1.70
20.5 – 120.1
Filtración por membrana (FM)
Enterococos
32
35.8
1.55
24.2 – 52.8
Filtración por membrana (FM)
Estreptococos fecales
32
35.8
1.55
24.2 – 52.8
Filtración por membrana (FM)
Valores de referencia: La media geométrica y el intervalo de confianza asociado de 95% (IC) se han
vuelto a transformar desde los datos logarítmicos10 con valores atípicos eliminados. Por lo tanto, el IC es
asimétrico (el IC es el rango donde se espera encontrar el 95% de los resultados). n es la cantidad de
resultados utilizados para calcular la media geométrica.
Homogeneidad:
Esta muestra de control de calidad ha sido evaluada como homogénea.
Estabilidad:
Se ha aplicado un período de vencimiento de 6 meses a partir de la fecha de
elaboración, si los viales se almacenan como se indica a continuación.
Almacenamiento:
Almacenar congelados a aproximadamente -20 °C
Política de calidad: Los valores que se muestran han sido generados utilizando el programa de
competencia en microbiología para el control de agua de Global Proficiency. Este programa está
acreditado por el programa de proveedores de evaluación de competencia del Organismo de
Acreditación Internacional de Nueva Zelanda (IANZ) para cumplir con la norma ISO/CEI 17043:2010. Este
material de referencia ha sido desarrollado de acuerdo con los procedimientos operativos de Global
Proficiency. Estos procedimientos se desarrollaron según las Guías ISO 31, 34 y 35, que describen los
requerimientos de producción, certificación y sistemas de calidad de materiales de referencia.
Certificado autorizado por Sandra Mott - Gerenta de competencias
Global Proficiency Ltd
Ruakura Research Centre, Hamilton East, Hamilton 3214, Nueva Zelanda
t +64 7 850 4483 | f +64 7 850 4487 |
p www.global-proficiency.com
Hoja de datos de seguridad de materiales:
Muestras microbiológicas
PROVEEDOR
Global Proficiency
PO Box 20 474
Hamilton, Nueva Zelanda 3241
Descripción del producto

Viales liofilizados: Programa GEMS/Agua de las Naciones Unidas
Aplicación
Las muestras microbiológicas distribuidas como parte del programa GEMS de las Naciones Unidas serán utilizadas in vitro
en el laboratorio solamente y contienen organismos microbiológicos.
Forma

El producto liofilizado se suministra en viales de vidrio de 5ml, sellados al vacío con un tapón de goma y una tapa
de aluminio. El producto se presenta como un comprimido blanco y es hidroscópico.
Identificación de peligros y manipulación
El material de prueba microbiológico es “potencialmente contagioso”, y deben tomarse precauciones por riesgos
biológicos. Para ingresar en el programa GEMS de las Naciones Unidas, los participantes deben considerar lo siguiente:
 que las instalaciones del laboratorio sean adecuadas para asegurar la manipulación segura de estos organismos
durante la participación en el programa;
 que los miembros del equipo que evalúan las muestras estén completamente capacitados en el manejo y
manipulación de microorganismos;
 que se encuentren disponibles equipos protectores y de confinamiento y se utilicen cuando es apropiado.
Se recomienda que las personas comprometidas inmunológicamente no participen en la evaluación de estas muestras.
Viales liofilizados
Los contenidos se almacenan al vacío. Se aconseja a los participantes que retiren los tapones de goma con cuidado (cerca
de un mechero Bunsen o en un gabinete con seguridad para riesgos biológicos), para asegurar que no se libere material
particulado con el vacío.
Almacenamiento
°
Antes de realizar la prueba, las muestras deben estar almacenadas a 4 C.
Eliminación
Una vez finalizada la prueba, elimine los viales, envases y todos los materiales de prueba contaminados en contenedores
de seguridad para riesgos biológicos, para que se esterilicen en autoclave o se incineren cuando sea apropiado.
Derrames
Si se produce un derrame, limpie el área contaminada con un desinfectante adecuado (p. ej., Virkon de 1%) y déjelo
actuar por el tiempo recomendado por el proveedor (p. ej., al menos 15 minutos con Virkon de 1%).
Primeros auxilios
Inhalación/ingestión:
Contacto con la piel:
Contacto con los ojos:
En caso de ingestión o inhalación, busque asistencia médica de inmediato. Infórmele al médico
que las muestras contienen E. coli y estreptococos fecales.
Lave bien la piel contaminada con agua y jabón antiséptico. Si la piel está lastimada y se
sospecha una contaminación en la herida, busque asistencia médica.
Si se produce contacto con los ojos, lave inmediatamente el área con abundante agua durante al
menos 15 minutos. Quítese las lentes de contacto y abra bien los ojos. Busque asistencia médica.
GEMS – Naciones Unidas
HDSM de micro