ELECTROFORESIS VERTICAL 1. FABRICANTE Bio-Rad Laboratories Inc. 2. IDENTIFICACIÓN Celda para electroforesis vertical (Mini-PROTEAN II cell) 3. FECHA DE RECEPCIÓN Enero de 1999 4. FECHA EN QUE FUÉ PUESTA EN SERVICIO 18 de abril del 2000 5. ESTADO EN QUE FUE INCORPORADO Perfecto estado 6. DETALLES DE MANTENIMIENTO La cámara debe enjuagarse con agua destilada después de cada corrido. Las placas de vidrio deben lavarse con un jabón suave de laboratorio. 7. HISTORIAL DE DAÑO No hay daño reportado 8. MANUAL DEL EQUIPO 8.1. EQUIPO PARA ELECTROFORESIS VERTICAL 8.1.1. CELDA PARA ELECTROFORESIS VERTICAL 8.1.2. PLACAS DE VIDRIO, ESPACIADORES Y PEINE 8.1.3. PORTAPLACAS 8.1.4. SOPORTE PARA ALINEACIÓN 8.1.5. DISIPADOR INTERNO 8.2. MONTAJE DE LOS SÁNDUCHES Los sánduches pueden armarse sobre una mesa colocando los espaciadores en cada extremo a lo ancho entre las placas. El portaplacas debe colocarse en el soporte para alineación en la posición que se muestra en la figura. El sánduche se monta en el portaplacas teniendo en cuenta que la placa de mayor tamaño debe quedar de cara a la lámina de acrílico del portaplacas (en la figura se omite en soporte de alineación para mayor claridad) Una vez montado el sánduche en el portaplacas, . con el fin de alinear las placas y los espaciadores se introduce entre ellos la tarjeta de alinación y se procede a apretar los tornillos sosteniendo el montaje. La alineación se comprueba observando que las placas y los espaciadores se encuentren a ras, de no ser así, debe desatornillarse el montaje y alinear de nuevo. 8.3. VACIADO DEL GEL Una vez alineado el sánduche, se procede a montar el portaplacas que lo contiene en el soporte de alineación, con los tornillos hacia el cuerpo de éste, y realizando presión en el sentido y orden que se muestra en la figura. 1 2 Después de asegurado el portaplacas se procede a vaciar la solución de monómero dejándolo caer contra la placa de mayor tamaño mientras se mantiene inclinado el soporte. Si el gel a preparar debe tener pozos para sembrar las muestras, el peine debe mantenerse inclinado aproximadamente 10° mientras se vierte la solución de monómero, para enderezarse después, esto con el fin de minimizar la aparición de burbujas. 8.4. MONTAJE DE LA CELDA Una vez haya polimerizado el gel, el portaplacas se monta en el disipador interno realizando presión en el sentido y orden que se indica en la figura, y si sólo va a correrse una placa, debe colocarse el otro portaplacas conteniendo placas de vidrio sin espaciadores, con el fin de poder contener el baño superior de buffer de corrido. 2 1 Teniendo listo el disipador interno con los portaplacas, se introduce éste en la cámara de corrido, se vierte buffer de corrido en la parte interior del disipador hasta el punto medio entre la parte superior de las placas, y en la cámara hasta un centímetro por encima de la parte inferior de las placas y se tapa la cámara. El vertido de buffer se realiza mejor con ayuda de una varilla de vidrio para evitar la aparición de burbujas (Cuidado!!, no debe haber burbujas en la parte inferior de las placas, pues esto afecta la unifomidad del contacto eléctrico). Se siembran las muestras con una jeringa ó una micropipeta con punta de jeringa y se procede a cerrar la celda. Una vez se ha cerrado la celda, ésta puede conectarse a la fuente de poder e iniciarse el corrido. Para el manejo de la fuente de poder, véase su manual. 9. CALIBRACIÓN No requiere. 10. MARCAJE DEL EQUIPO CON LA ÚLTIMA FECHA DE CALIBRACIÓN No requiere. 11. PRÓXIMA FECHA DE CALIBRACIÓN No requiere.