Documento 764796

DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
IDENTIFICACIÓN DE LA ACTIVIDAD PEDAGÓGICA
PROGRAMA DE FORMACIÓN
UNIDAD DE APRENDIZAJE
ACTIVIDAD
OBJETIVOS
AUXILIAR EN ENFERMERIA II-A
FUNDAMENTOS DE LABORATORIO CLINICO
TIPOS DE PRUEBAS DIAGNOSTICAS: -HORMONALES -INMUNOLOGICAS -OTRAS DE INTERES EN SALUD
PUBLICA MANUAL DE PROCEDIMIENTOS

Conocer los tipos de pruebas diagnosticas hormonales, inmunológicas y otras de interés en salud
públicas y el procedimiento a realizar para el manejo y procesamiento de las muestras.
DESARROLLO DE LA ACTIVIDAD
ACTIVIDAD TEORICA
TIPOS DE PRUEBAS DIAGNOSTICAS: HORMONALES, INMUNOLOGICAS Y
OTRAS DE INTERES EN SALUD PÚBLICA
TIPOS DE PRUEBAS DIAGNOSTICAS: HORMONALES
El perfil tiroideo es fundamental para descartar o determinar padecimientos de la tiroides, en concreto hipotiroidismo (liberación hormonal
insuficiente: genera sensibilidad al frío, estreñimiento, depresión, cansancio, dolor muscular y articular, cabello y uñas quebradizos,
menstruación abundante y aumento de peso involuntario) e hipertiroidismo (producción excesiva de hormonas: ocasiona fatiga, deposiciones
frecuentes, intolerancia al calor, aumento de apetito, sudoración abundante, nerviosismo, menstruación irregular y pérdida de peso).
En concreto, se basa en la medición de cuatro hormonas:
TRIYODOTIRONINA (T3). Desempeña papel importante en el control corporal del metabolismo; por ejemplo, regula el consumo de
TIROXINA (T4). La tiroides secreta esta hormona para que se distribuya por todo el organismo y los tejidos la conviertan en T3 por acción
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oxígeno, la degradación de grasas o la formación de músculos.
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de una enzima especial (5’-desyodasa). Sus funciones son idénticas a las ya mencionadas.
T3 REVERSA (RT3). Es la forma inactiva de las hormonas tiroideas, que normalmente se genera en los tejidos (por acción de la 5desyodasa) cuando hay aumento del metabolismo basal (valor normal de energía necesaria para que las células subsistan), con el fin de
disminuirlo. Dicha sustancia es de desecho y no tiene beneficio para el organismo.
T4 LIBRE. ES HORMONA T4 que se ha liberado de aquellas proteínas que le permiten viajar hacia los distintos tejidos del cuerpo; puede
ser aprovechada para transformarse en T3 y cumplir sus funciones.
PROCEDIMIENTO
1. Es necesario tomar muestra sanguínea, cuya extracción se obtiene de la parte interior del codo o del dorso de la mano.
2. El sitio donde se realizará la punción se asea con antiséptico y luego se coloca banda elástica en la región superior del brazo, a fin de
aplicar presión en el área y hacer que la vena se llene.
3. En bebés o en niños pequeños se puede utilizar instrumento puntiagudo, llamado lanceta, para punzar la piel y hacerla sangrar. Este
líquido se recoge en tubo pequeño de vidrio conocido como pipeta o en portaobjetos.
TIPO DE PRUEBAS INMUNOLÓGICAS
1. Inmunoprecipitación (Precipitar proteína de un antígeno con un anticuerpo)
2. Inmunoensayo ( concentración sustancia en orina/sangre)
4. Rast test (prueba inmunoalergica)
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3. Elisa y Emit (inmunoensayo de enzima)
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5. Radioinmunoensayo (concentración antígeno – hormonas – insulina)
6. Inmunofluorescencia (marcador con tinte fluorescente)
7. Aglutinación (prueba de Coombs)
8. Prueba fijación latex (detecta anticuerpos)
9. Nefelometría (niveles IgM, IgA, IgG)
10. Pruebas de fijación del complemento (para enfermedades reumáticas)
11. Inmunohistoquimica (proteínas en un tejido)
12. Prueba alérgica cutánea (pinchando la piel, parche)
INSTRUCCIONES DE PREPARACIÓN AL PACIENTE PARA MUESTRAS DE SANGRE.
Requieren que el paciente realice un ayuno de 8 horas mínimo. Por lo cual esta instrucción es clave y se ha estandarizado como requisito
fundamental para todos los exámenes de Laboratorio.
Se entiende por Ayuno a la prohibición de ingesta de alimentos por un periodo de tiempo determinado.
Esto tiene por finalidad que los resultados de los exámenes que se realicen a un paciente sean el reflejo de su metabolismo, donde no
existan interferencias por ingestas alimentarias.

En el caso de los adultos se requiere un ayuno previo mínimo de 8 horas

En el caso de Lactantes es suficiente con suspender una tomada de leche o pecho antes de la toma de muestra (3 a 4 horas antes
En resumen:
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de la toma de muestra).
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PERFIL BIOQUIMICO: 8 HRS DE AYUNO
EXÁMENES DE BIOQUÍMICA: 8 HRS DE AYUNO
PERFIL LIPIDICO: 12-14 HRS DE AYUNO ESTRICTO
PERFIL HEPATICO: 8 HRS DE AYUNO
PERFIL PROTEICO: 8 HRS DE AYUNO
HEMOGRAMA/VHS: 8 HRS DE AYUNO
HISTOGRAMA: SIN REQUISITO
PRUEBAS DE COAGULACIÓN: 8 HRS DE AYUNO
PRUEBAS HORMONALES: 8 HRS DE AYUNO
PRUEBAS INMUNOLOGICAS: 8 HRS DE AYUNO
Las muestras obtenidas para los exámenes que aquí se describen.

deben ser enviadas al Laboratorio en forma inmediata.

No deben pasar más de 2 horas desde que se realiza la punción para recolectar las muestras, hasta que esta es recepcionada en la
Unidad de Laboratorio Clínico.
Las muestras de sangre pueden ser de 2 tipos:
1) Aquellas que se obtienen con anticoagulante para estudio de morfología de las células sanguíneas, obtención de plasma para estudio
de coagulación o para algunos análisis químicos que así lo requieren y estudios genéticos en donde se requiere conservar indemnes
las células.
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para múltiples exámenes químicos, hormonales, inmunológicos etc.
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2) Y aquellas que se recolectan en tubo seco o con algún activador de la coagulación, para obtener suero del paciente, el cual sirve
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CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS
Las muestras tomadas por las diferentes Unidades o establecimientos de la red, deben conservarse en recipientes especiales para estos
efectos, que permitan conservar la cadena de frío. Es importante no congelar las muestras, estas son estables a temperatura entre 2-8ºC.
Importante recordar que las muestras no centrifugadas son estables a temperatura ambiente, esto es, entre 20ºC-25ºC solo por un periodo de
1 hora posterior a la toma de muestra.
Si por alguna razón no pudiesen trasladar las muestras en forma inmediata al laboratorio, es importante conservarlas en contenedores que
posean unidades refrigerantes o en refrigerador que mantenga la temperatura entre 2-8ºC, hasta el momento que sean trasladadas.
Se debe excluir de esta medida las muestras tomadas para Cultivo Bacteriológico.
Es necesario recordar que el uso de Unidades Refrigerantes tiene el objeto de proteger a las muestras de la degradación de algunos
metabolitos por efecto de la temperatura ambiente, y que por ningún motivo deben quedar en contacto directo con los tubos o recipientes que
contienen las muestras tomadas.
Se excluye del punto anterior las muestras de Gases
Venosos y Arteriales, y las muestras tomadas para cuantificación de Ácido Láctico, PTH y Amonio, las cuales deben ser colocadas en directo
contacto con las Unidades refrigerantes o en recipientes que contengan hielo.
Para la toma de muestras sanguíneas el establecimiento utiliza tubos desechables y sellados al vacío para los diferentes exámenes. Se debe
respetar el siguiente orden en la obtención de las muestras, de modo de evitar la contaminación de las muestras con los principios activos de
cada tubo particular.
TUBOS TAPA AMARILLA (Contiene Activador de la coagulación y gel separador de fases): Se obtiene suero para para exámenes
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TUBOS TAPA ROJA (Contiene Activador de la coagulación): Se obtiene suero para Exámenes bioquímicos, Inmunológicos y hormonales,
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TUBO TAPA CELESTE (Contiene Citrato de Sodio): Se obtiene plasma para Pruebas de coagulación
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bioquímicos, Inmunológicos y hormonales,
TUBOS TAPA VERDE (Contiene Heparina de Litio): Se obtiene plasma para para exámenes bioquímicos, Inmunológicos y hormonales,
TUBOS TAPA LILA (Contiene EDTA): Se usa para obtener sangre total para Hemogramas, Histogramas y Hemoglobina Glicosilada.
TUBOS TAPA GRIS (Contiene Fluoruro): Se obtiene plasma para para Glicemias ya que el Fluoruro es un Inhibidor de la Glicolisis.
MUESTRAS DE SANGRE ARTERIAL.
Seguir el protocolo de identificación del paciente que se realiza para muestras de sangre venosa.
Explique el procedimiento a realizar.
Lávese las manos y colóquese los guantes
Acomode al paciente y la extremidad a puncionar
Informarse de la coagulación de la persona
Si el Paciente padece algún trastorno de la coagulación debe avisar al médico quien puede autorizar la ejecución del procedimiento.
Comprobar la disposición del material
Colocar al paciente en una posición adecuada, dependiendo de la arteria seleccionada, de tal modo que el paciente esté cómodo.
Aseptizar la zona con alcohol 70° y dejar secar al aire.
Palpar la arteria y sentir su pulso.
Inmovilizarla con los dedos índice y medio para fijarla al plano profundo.
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brusca, hasta que se acceda al vaso sanguíneo y se llene el cono.
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Puncionar con un ángulo adecuado (60 ° si es la humeral y 45 ° si es la arteria radial) sobre la Superficie de la piel de forma enérgica, pero no
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Deje fluir la sangre que llena por la presión la jeringa.
Retirar la aguja y sellar la jeringa.
EN EL CASO DE JERINGAS PARA GASES ARTERIALES
Antes de tomar la muestra no retraer el embolo, ya que la jeringa contiene Heparina de Litio liofilizada. Una vez tomada la muestra apoyar la
jeringa en posición vertical sobre una superficie lisa, empujando el embolo hacia adelante. Con este ejercicio se eliminara el aire que quede
dentro de la jeringa a través del embolo especial que contienen las Jeringas para gases.
El embolo contiene una membrana que se distiende al contacto con la sangre, bloqueando el embolo, impidiendo así que entre aire del medio
ambiente o por mala manipulación de la muestra.
Enviar la muestra directamente al laboratorio debidamente identificada en un sistema de frío, no más allá de 15 minutos una vez obtenida la
muestra.
Recoger el material, lavarse las manos y acomodar al paciente.
Las muestras de sangre tomadas por punción venosa o arterial (según corresponda), deben ser colocadas en gradillas las cuales permiten
que se conserven en posición vertical, y luego deben ser depositadas en los contenedores de transporte, junto a unidades refrigerantes para
evitar el deterioro de las muestras.
Las Unidades refrigerantes deben poder mantener la temperatura de los contenedores entre 2ºC-8ºC.
Las muestras tomadas para análisis de Gases y pH en sangre, deben ser colocadas directamente en Unidades refrigerantes y se deben
transportar inmediatamente al Laboratorio.
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horas desde la obtención de la muestra.
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Una vez obtenidas las muestras y depositadas en los contenedores, deben ser transportadas prontamente al Laboratorio, no superando las 2
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Es muy importante que se conserve la cadena de frío durante la conservación y transporte de las muestras, lo cual permite disminuir la tasa
de metabolismo celular, obteniéndose resultados más representativos de la realidad del paciente en el momento de la toma de muestra.
TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA PARA EXÁMENES DE INMUNOLOGÍA
PROPÓSITO:
Obtener sangre venosa para realizar pruebas de inmunología.
MUESTRA REQUERIDA:
5 mL de sangre venosa sin anticoagulante.
MATERIALES:
- Jeringa estéril para extraer 5 mL con aguja 21 X 1 ½ o sistema de extracción al vacío.
- Torundas de algodón.
- Alcohol etílico (70%).
- Marcador de vidrio.
- Torniquete.
- Tubos sin anticoagulante 13 x 100 mm y tapón de hule o tubos del sistema de extracción al vacío.
- Gradilla para tubos.
- Guantes descartables
.
PROCEDIMIENTO:
- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
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- Identificar el tubo de acuerdo a la solicitud.
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- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.
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- Sentar cómodamente al paciente para la extracción tomando en cuenta que el área de Sangría debe contar con suficiente iluminación.
- Seleccionar la vena apropiada para la punción.
- Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al 70% de adentro hacia fuera.
Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente que abra y cierre la mano varias veces para favorecer la dilatación
de las venas.
- Proceder a puncionar la vena seleccionada.
- Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.
- Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de 1 a 1.5 cm.
- Tirar hacia atrás el émbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre la sangre en la jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre
necesaria. Si utiliza sistema de sangrado al vacío introducir el tubo en el dispositivo (holder) de manera que al ejercer presión se atraviese el
extremo inferior de la aguja, para que la sangre fluya hacia el tubo por efecto del vacío.
- Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda de algodón sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de la
aguja.
- Extraer la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de algodón, pedir al paciente que presione firmemente la torunda durante
3 minutos con el brazo extendido.
- Separar la aguja de la jeringa o del holder cuidadosamente, llenar los tubos deslizando la sangre por las paredes del mismo.
- Esperar que la muestra se coagule a temperatura ambiente.
- Centrifugar la muestra a 3000 rpm por 10 minutos.
- Separar el suero del paquete globular.
- Verificar nuevamente la identificación del paciente.
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- Prolongada aplicación del torniquete.
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FUENTES DE ERROR
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- Extracción violenta de la sangre, que puede provocar hemólisis.
- Empleo de tubos mal lavados.
- Depositar la sangre en el tubo en forma violenta.
- Dejar los tubos con muestras destapados.
Que el paciente no cumpla con las indicaciones de acuerdo al análisis químico a realizar.
- Separación inadecuada del coagulo antes de centrifugar (no poner en baño de María).
- Centrifugación inadecuada de la muestra.
PRUEBA RÁPIDA DE REAGINA (Método RPR)
PROPÓSITO:
Detectar y cuantificar anticuerpos reagínicos en suero (son las inmunoglobulinas IgG e IgM), que corresponde a un diagnostico presuntivo de
Sífilis, La prueba de RPR, es una modificación del antígeno VDRL (pruebas no treponémicas).
El RPR es una prueba que contiene micropartículas de carbón para visualizar la reacción antígeno– anticuerpo.
MUESTRA REQUERIDA:
5mL de sangre sin anticoagulante de preferencia tomada en ayunas (para obtener de 2 a 3 mL de suero).
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tarjeta o lámina en círculos de 18 mm.
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- Tapadera plástica para formar cámara húmeda.
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- Dispensadores de 50 uL.
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- Frasco plástico con aguja calibrada para depositar 16uL.
- Antígeno: Cardiolipina, Lecitina, Colesterol y partículas de carbón.
- Agua destilada.
- Papel toalla.
- Aplicadores de madera.
- Solución salina 0.85%.
- Puntas plásticas.
- Marcador de vidrio.
- Tubos 12x75 mm.
- Gradilla para tubos.
- Guantes descartables.
EQUIPO:
- Reloj marcador.
- Rotador serológico de 100 rpm.
- Macrocentrífuga.
- Micropipeta automática regulable.
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- Centrifugar la sangre a 2,500 rpm durante 5 minutos.
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PROCEDIMIENTO:
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- Separar los sueros del paquete globular.
- Identificar los sueros.
DETECCIÓN DE ANTICUERPOS DEL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (Prueba rápida)
PROPÓSITO:
Detectar in vitro los anticuerpos formados en el torrente sanguíneo por el virus de la Inmunodeficiencia
Humana (VIH 1 y VIH 2).
MUESTRA REQUERIDA:
Suero, plasma y sangre completa.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de ensayo 12 x 75 mm.
- Tubos de ensayo 13 x 100 mm.
- Gradilla para tubos.
- Puntas plásticas.
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- Aplicadores de madera.
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- Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer.
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- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
- Papel toalla.
- Protocolo de trabajo. (Anexo 10)
- Tiras reactivas sensibilizadas con antígeno VIH 1 y VIH 2.
EQUIPO:
- Macrocentrífuga.
- Pipeta automática de volumen variable.
- Reloj marcador.
PROCEDIMIENTO:
- Centrifugar la sangre a 2,500 rpm durante 5 minutos.
- Separar los sueros del paquete globular.
- Llevar a temperatura ambiente las tiras reactivas a utilizar.
- Preparar el protocolo de trabajo.
- Cortar la línea de puntos de la bolsa para retirar las tiras reactivas.
- Retirar el plástico de protección de cada tira.
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FUENTE DE ERROR
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- Identificar las tiras reactivas a utilizar.
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- Reactivos vencidos y en mal estado.
- Tiras reactivas que no estén a temperatura ambiente.
- Concentraciones bajas de anticuerpos.
- Pacientes con transfusiones masivas.
- Manipular las tiras reactivas con guantes empolvados.
- Infección con una variante del virus que no reacciona con los antígenos específicos utilizados en la configuración del ensayo.
ANTÍGENOS FEBRILES
PROPÓSITO:
Investigar en el suero del paciente anticuerpos producidos por infecciones causadas por Salmonellas,
Brucellas, Rickettsias u otras infecciones bacterianas, por las cuales el organismo del paciente reacciona con la producción de anticuerpos
específicos.
MUESTRA REQUERIDA:
Suero.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de ensayo 12 x 75 mm.
- Tubos de ensayo 13 x 100 mm.
- Lámina de reacción.
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- Puntas plásticas.
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- Gradilla para tubos.
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- Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer.
- Aplicadores de madera.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
- Papel toalla.
- Solución salina 0.85%.
- Antígeno somático “O”.
- Antígeno flagelar “H”.
- Antígeno paratyphico “A”.
- Antígeno paratyphico “B”.
- Antígeno somático O X 19.
- Antígeno somático Brucella abortus.
- Control negativo y control positivo.
EQUIPO:
- Macrocentrífuga.
- Reloj marcador.
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- Rotador serológico.
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- Pipetas automáticas.
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PROCEDIMIENTO:
- Centrifugar la sangre a 2,500 rpm durante 5 minutos.
- Separar los sueros del paquete globular.
- Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.
TIPEO SANGUÍNEO
PRUEBA DIRECTA EN TUBO
PROPÓSITO:
Investigar en la sangre la presencia o ausencia de los antígenos A, B y Rh que se localizan en la superficie de los glóbulos rojos, utilizando
anticuerpos específicos para cada uno de ellos.
MUESTRA REQUERIDA:
1 mL de Sangre completa con o sin anticoagulante.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de ensayo 12 x 75 mm.
- Gradilla para tubos.
- Puntas plásticas.
- Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer.
- Marcador de vidrio.
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- Frasco lavador.
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- Aplicadores de madera.
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- Guantes descartables.
- Papel toalla.
- Solución salina 0.85%.
- Antisuero “A”.
- Antisuero”B”.
- Antisuero RH (anti-D).
EQUIPO:
- Macrocentrífuga.
- Reloj marcador.
Pipetas automáticas.
- Lámpara para lectura de aglutinación.
PROCEDIMIENTO:
- Identificar previamente los tubos.
- Depositar 2-3 gotas de sangre en un tubo.
- Realizar 3 veces el lavado de células de la siguiente manera:
a) Agregar 1 mL de solución salina 0.85%.
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c) Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm .
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b) Mezclar y llenar con solución salina 0.85% el tubo hasta 3/4 partes.
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d) Descartar toda la solución salina quedando en el fondo un paquete de glóbulos rojos.
- Preparar una suspensión al 5%, colocando una gota de los glóbulos rojos lavados y 19 gotas de solución salina y mezclar.
- Rotular 3 tubos con las letras A, B, Rh por cada muestra a analizar, a cada uno agregar una gota de glóbulos rojos al 5%.
- Depositar los antisueros respectivos:
a) Tubo A antisuero A.
b) Tubo B antisuero B.
c) Tubo Rh antisuero D.
- Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm .
- Leer la presencia o ausencia de aglutinación agitando suavemente los tubos.
FUENTES DE ERROR:
- Reactivos vencidos o deteriorados.
- No llevar a temperatura ambiente los reactivos.
- Hemólisis de los glóbulos rojos por mezcla inadecuada.
- Presencia de enfermedades autoinmunes.
DETERMINACIÓN DE VARIANTE Du
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Comprobar si una persona es verdadero positivo o negativo con respecto al factor Rh (D). La variante Du se determina cuando el factor Rh es
negativo.
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PROPÓSITO:
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MUESTRA REQUERIDA:
Suspensión de eritrocitos al 5%.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de ensayo 12 x 75 mm.
- Gradilla para tubos.
- Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
- Papel toalla.
- Albúmina bovina.
- Suero antihumano (coombs).
EQUIPO:
- Baño de María.
- Centrífuga.
- Lámpara para lectura de aglutinación.
PROCEDIMIENTO:
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- En el tubo 1: colocar una gota de suero anti D y agregar una gota de suspensión de eritrocitos al 5% a estudiar.
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- Identificar dos tubos
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
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- Mezclar suavemente.
- En el tubo 2 (control): colocar una gota de albúmina bovina y agregar una gota de suspensión de eritrocitos al 5% a estudiar.
- Mezclar suavemente.
- Centrifugar ambos tubos a 3400 rpm por 15 segundos.
- Desprender suavemente el botón de células del fondo del tubo.
Observar presencia o ausencia de aglutinación frente a la luz de una lámpara.
- Si no se observa aglutinación se incuban los tubos a 37°C por 15 minutos.
- Lavar los glóbulos rojos de ambos tubos cuatro veces llenándolos con solución salina al
0.85%.
- Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm cada vez y descartar la solución después de cada lavada.
- Agregar a cada tubo 2 gotas de suero Coombs.
- Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm.
- Leer frente a la luz de una lámpara y buscar aglutinación tratando de desprender suavemente el botón de células.
- Observar aglutinación.
FUENTES DE ERROR:
- Reactivos vencidos o deteriorados.
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- Hemólisis de los glóbulos rojos por mezcla inadecuada.
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- No llevar a temperatura ambiente los reactivos.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
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- Presencia de enfermedades autoinmunes.
PRUEBA DE EMBARAZO
PROPÓSITO:
Investigar en orina la presencia de la hormona gonadotropina coriónica (HCG); el método se basa en la reacción de aglutinación de una
suspensión de Látex recubiertas con anticuerpos monoclonales
Anti-hormona gonadotropina coriónica.
MUESTRA REQUERIDA:
Orina, se recomienda utilizar la orina de la primera hora de la mañana, ya que generalmente contiene mayor concentración de hormona.
Muestras de orina: estable 48 horas a 2-8°C o 3 meses a -20°C.
MATERIALES Y REACTIVOS:
-Tarjetas o láminas de reacción.
- Papel toalla.
- Marcador de vidrio.
- Dispensadores plásticos.
- Tubos cónicos.
- Guantes descartables.
- Anti-hormona gonadotropina coriónica humana.
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- Suspensión de partículas de látex con anticuerpo monoclonal
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- Gradilla para tubos.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
- Control positivo: orina humana con una concentración conocida de hormona gonadotropina
coriónica.
- Control negativo: suero animal sin presencia de hormona gonadotropina coriónica.
9.7.4. EQUIPO:
- Macrocentrífuga.
- Rotador serológico.
PROCEDIMIENTO:
- La muestras de orina que presente turbidez debe centrifugarse antes de iniciar la prueba.
- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las muestras.
- Identificar correctamente lámina o tarjeta.
MICROBIOLOGIA BASICA
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS PARA CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS.
PREPARACIÓN DE UN EXTENDIDO DE MUESTRA
PROPÓSITO:
Pus, esputo, orina y secreciones.
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MUESTRA REQUERIDA:
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Estudiar mediante un frotis teñido la presencia de bacterias, lo cual aporta una información útil para el diagnóstico de la enfermedad del
paciente y contribuye a establecer un tratamiento inmediato.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
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MATERIALES Y REACTIVOS:
- Asa bacteriológica o aplicador de madera.
- Lámina portaobjeto.
- Marcador de vidrio.
- Papel toalla.
- Gasa.
- Fósforos.
- Guantes descartables.
EQUIPO:
Mechero.
PROCEDIMIENTO:
- Identificar la lámina porta objeto.
- Extender en el centro de una lámina portaobjeto una porción de la muestra con asa o aplicador de madera en forma de capa fina, trazando
una espiral del centro a la periferia.
- Dejar secar completamente al aire libre.
- Fijar al calor.
- Aplicar coloración que corresponda, según agente a investigar.
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- Dejar enfriar.
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- Fijar al calor pasándolo rápidamente sobre la llama de un mechero, tres veces en forma horizontal con la muestra hacia arriba.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
FUENTES DE ERROR:
- Sobre calentar el frotis o no fijarlo.
- Frotis gruesos o muy delgados.
- No dejar enfriar el frotis.
PROPÓSITO:
Colorear las bacterias presentes en un frotis mediante la tinción de Gram, la cual permite diferenciar en dos grandes grupos, bacterias
grampositivas que toman el color violeta y bacterias gramnegativas que toman el color rosado.
MUESTRA REQUERIDA:
Frotis de la muestra a analizar correctamente identificado.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Aceite de inmersión.
- Papel filtro.
- Embudo.
- Bandeja o soporte de coloración.
- Guantes descartables.
- Marcador de vidrio.
- Cristal violeta modificado por Hucker.
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- Papel limpia lente.
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- Papel toalla.
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Código: FOR-GA-83/Versión 2
- Lugol o solución de Yodo para Gram.
- Alcohol Acetona.
- Safranina.
EQUIPO:
- Reloj marcador.
- Microscopio.
PROCEDIMIENTO: COLORACIÓN DE GRAM
- Filtrar los colorantes antes de utilizar.
- Colocar los frotis a colorear en la bandeja o soporte de coloración.
- Cubrir el frotis completamente con Cristal Violeta, durante un minuto.
- Enjuagar con agua corriente y escurrir.
- Cubrir el frotis completamente con Lugol o solución de Yodo para Gram durante un minuto.
- Enjuagar con agua corriente y escurrir.
- Aplicar alcohol acetona gota a gota hasta que no salga Cristal Violeta.
- Enjuagar con agua corriente y escurrir.
- Cubrir el frotis con Safranina.
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- Enjuagar suavemente con agua corriente.
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- Dejar reposar por 30 segundos.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
- Dejar secar al aire libre.
FUENTES DE ERROR:
- Colorante de Cristal Violeta que presenta sedimentos.
- Remoción incompleta del Lugol.
- Decoloración insuficiente del frotis.
- Tiempo prolongado con Safranina.
DIRECTO AL FRESCO DE SECRECIÓN VAGINAL
PROPÓSITO:
Investigar en una muestra de secreción vaginal, la presencia de Trichomonas vaginalis, levaduras
y/o pseudohifas.
MUESTRA REQUERIDA:
Secreción vaginal, tomada con un hisopo estéril y colocada en un tubo con 2 mL de solución salina estéril 0.85%.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de vidrio 16 x 150 mm.
- Gradilla para tubos.
- Lámina portaobjeto.
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- Hisopos estériles.
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- Laminilla cubreobjeto.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
- Marcador de vidrio.
- Papel toalla.
- Gasa.
- Solución salina estéril 0.85%.
EQUIPO:
- Microscopio.
PROCEDIMIENTO:
- Identificar la lámina portaobjeto.
- Colocar una gota en el portaobjeto y cubrir con laminilla cubre objeto, con el cuidado de no formar burbujas de aire.
FUENTES DE ERROR:
- Contaminación de la muestra.
- Solución salina contaminada.
- Dejar secar la preparación.
- Formación de burbujas de aire en la preparación.
DIRECTO DE SECRECIÓN VAGINAL COLOREADO CON GRAM
PROPÓSITO:
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MUESTRA REQUERIDA:
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Investigar en una muestra de secreción vaginal coloreada, la presencia de Lactobacilos, mobiluncos,o gardnerella.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
Secreción vaginal, tomada con un hisopo estéril y colocada en un tubo con 2 mL de solución salina estéril 0.85%.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de vidrio 16 x 150 mm.
- Gradilla para tubos.
- Lámina portaobjeto.
- Hisopos estériles.
- Marcador de vidrio.
- Papel toalla.
- Guantes descartables.
- Gasa.
- Aceite de inmersión.
- Solución salina estéril 0.85%.
EQUIPO:
- Microscopio.
PROCEDIMIENTO:
- Identificar la lámina portaobjeto.
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- Proceder a la elaboración de frotis y coloración de Gram.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
DIRECTO DE SECRECIÓN URETRAL COLOREADO CON GRAM
PROPÓSITO:
Investigar en una muestra de secreción uretral coloreada, la presencia de Diplococos gramnegativos intracelulares (leucocitos) y
extracelulares.
MUESTRA REQUERIDA:
Secreción uretral, tomada si es posible en las primeras horas de la mañana antes de que el paciente haya orinado.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Lámina portaobjeto.
- Aplicador de madera o asa bacteriológica.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
- Papel toalla.
- Gasa.
- Aceite de inmersión.
- Solución salina estéril 0.85%.
- Papel limpia lente.
- Alcohol Acetona.
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- Lugol o solución de Yodo para Gram.
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- Cristal violeta modificado por Hucker.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
- Safranina.
EQUIPO:
- Microscopio.
PROCEDIMIENTO:
- Identificar la lámina portaobjeto.
- Tomar la muestra aplicando una ligera presión en el pene de atrás hacia delante de manera que salga una gota de pus por el meato, la cual
será recibida en una lámina portaobjeto.
- Cuando la muestra es demasiada espesa, agregar una gota de solución salina estéril 0.85%.
- Proceder a la elaboración de frotis y coloración de Gram como está descrito en los procedimientos de: “Preparación de un extendido de
muestra” y “Coloración de Gram” de este manual, páginas 109 – 112.
- Observar en el microscopio con objetivo de inmersión 100x, la presencia de
Diplococos gramnegativos de forma arriñonadas, tanto intracelulares (leucocitos) como extracelulares.
- Prestar especial atención a las orillas del frotis donde los elementos se extienden en una capa más delgada, son más fáciles de reconocer y
la tinción es menos concentrada.
- Reportar lo observado.
FUENTES DE ERROR:
- Coloración o frotis inadecuado.
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La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la identificación de microorganismos
patógenos, como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre otros.
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DIRECTO PARA ÁCIDO ALCOHOL RESISTENTE (Tuberculosis)
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
TÉCNICA
Esta técnica puede realizarse tanto en muestras histológicas como citológicas.
MATERIALES Y REACTIVOS
- Lámina portaobjeto.
- Aplicador de madera o asa bacteriológica.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
- Papel toalla.
- Gasa.
- Aceite de inmersión.
Papel limpia lente.
Fucsina-fenicada
Alcohol-ácido.
Azul de metileno
Hacer un frotis de la muestra.
-
La fijación al calor asegurará de que el frotis quede adherido al portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle resultados falsamente
negativos y un frotis muy grueso puede desprenderse del portaobjetos durante la tinción.
-
Utilizando pinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de tinción con los extendidos hacia arriba. Nunca tiña más de 12
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-
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PROCEDIMIENTO
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2
Dejar el frotis sobre el puente de tinción.
-
Aplicar fucsina-fenicada.
-
Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos durante 5 minutos. Mantenga el calor durante este período.
-
Calentar con un mechero hasta la emisión de vapores (3-5 minutos).
-
Se requiere el tiempo adecuado para que la fucsina fenicada penetre y tiña la pared celular de la bacteria. No deje que hierva o se
seque el colorante.
-
Lave suavemente el colorante de cada portaobjetos con agua corriente fría hasta que toda la tinción libre quede lavada. Lave
suavemente de manera que el extendido no se barra del portaobjetos. Retire el exceso de agua.
-
Decolorar con alcohol-ácido.
-
Cubra cada portaobjetos con la solución decolorante, tal como alcohol ácido y manténgalo sobre el portaobjetos durante 7 minutos. Si
no se decolora suficientemente, el contenido del esputo que no son bacilos Tuberculosos puede permanecer teñido. Enjuague con
agua una vez más los portaobjetos y quite el exceso de agua. Si los portaobjetos aún están rosa, aplique una cantidad adicional de la
solución decolorante de 1 a 3 minutos.
-
Aplicar azul de metileno (1 minuto).
-
Aplique la solución de contraste, azul de metileno, durante 1 minuto.
-
Enjuagar con agua
-
Vuelva a enjuagar con un leve chorro de agua e incline cada portaobjetos hasta drenar el exceso de agua. Finalmente, coloque cada
portaobjetos en una gradilla a que sequen al aire.
ACTIVIDAD
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portaobjetos a la vez.
DESARROLLO DE ACTIVIDADES PEDAGÓGICAS
Código: FOR-GA-83/Versión 2

Análisis y discusión sobre temas preestablecidos.

Conceptualización, generalización y/o definición.

Taller integral pedagógico
RECURSOS Y EQUIPOS REQUERIDOS
TABLERO MARCADOR BORRADOR COMPUTADOR VIDEO BEAM GUÍA DE APRENDIZAJE AMBIENTE DE APRENDIZAJE
BIBLIOGRAFIA
http://asp.salud.gob.sv/regulacion/pdf/manual/Manual_procedimientos_lab_clinico.pdf
http://www.slideshare.net/libiamitsuko/laboratorio-de-inmunologa
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http://www.saludymedicinas.com.mx/centros-de-salud/obesidad/analisis-y-estudios-de-laboratorio/perfil-tiroideo.html