Manejo del Microscopio MATERIALES:

Manejo del Microscopio
Para realizar las preparaciones vamos a alistar los siguientes elementos.
MATERIALES:
Agua estancada o de solución de tierra de infusorios
Papel milimetrado
Recorte de periódico con la letra asimétrica: Pude ser la letra e o la letra a
Goteros
Láminas portaobjetos
cubreobjetos
Papel absorbente
Lamina con extendido coloreada
Microscopio
Aceite de inmersión
Papel de Arroz o de óptica
Alcohol isopropílico
Realización de Montaje húmedo
Tome con una pipeta agua estancada o de solución de tierra de infusorios
Coloque la gota de agua estancada o de solución de tierra de infusorios sobre una
lámina porta-objeto
Tome una laminilla cubreobjetos, en posición oblicua, (45 grados) y apoyando una
arista sobre la lámina al lado de la gota, déjela caer suavemente.
Manejo del microscopio
Encienda el microscopio
Coloque el objetivo de menor aumento 4X
Baje la platina completamente girando el tornillo macrométrico.
Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas
condiciones
Tome la lámina con la preparación fíjese que esté completamente seca en la parte
inferior
Coloque la lámina con la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas.
Procure que la preparación quede centrada, girando el tornillo para desplazamiento del
carro móvil
Gire el tornillo macrométrico en sentido contrario a las agujas del reloj para subir la
platina hasta el tope. Debe hacerlo mirando directamente y no a través del ocular, ya
que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación.
Cierre o abra el diafragma hasta una posición intermedia, accionando su perilla en
sentido contrario a las agujas del reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni
demasiado tenue.
Inicie la observación con el objetivo de 4X.
Mirando a través de los oculares, separe lentamente el objetivo de la preparación con
el tornillo macrométrico en sentido de las agujas del reloj.
Hasta lograr observar la imagen
Cuando se observe algo nítida la muestra, gire el tornillo micrométrico hasta obtener
un enfoque fino
Gire el revolver
Coloque el objetivo de 10X
Visualice con el objetivo de 10X y detalle las estructuras
Gire el revólver y visualice con el objetivo de 40X enfoque con el tornillo micrométrico
y detalle las estructuras
Detalle como el campo se reduce y el alga y el protozoo se observan mejor.
Observación con el objetivo de inmersión 100X
Se utiliza para la observación de muestras fijadas, no para muestras frescas
Coloque el objetivo de inmersión de manera que el orificio de la platina quede entre el
objetivo de 100X y el de 40X
Suba totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habrá que aplicar el aceite
Coloque una gota de aceite de inmersión sobre la preparación en el círculo de luz
Coloque una lámina coloreada sobre la platina
Ubique el objetivo el objetivo de 100x
Suba la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de aceite
Observe la imagen con aumento de 100X
En esta preparación se muestran eosinófilos un tipo de células sanguíneas coloreados
con colorante de Wright
Limpie el objetivo de inmersión con un papel especial para óptica y alcohol isopropílico
Deje el objetivo de menor aumento en posición de trabajo
En la siguiente dirección encuentra un excelente ejercicio en línea sobre las partes del
microscopio y su función.
http://personales.ya.com/geopal/g-b_1bach/ejercicios/act10tema6.htm
PROCEDIMIENTO:
2.1 En la siguiente representación gráfica de un microscopio, reconozca y ubique cada
una de las siguientes partes y su función
Tubo
Oculares
Brazo
Objetivos de 4x, 10x, 40x y 100x
Platina
Condensador
Fuente de iluminación
Tornillo macrométrico y micrométrico
Pie
2.2 Clasifique en el cuadro las partes mecánicas y ópticas del microscopio.
Partes mecánicas
Partes ópticas
2.9 Defina los tipos de montaje que se pueden hacer en el laboratorio.
2.13 ¿Al mover el portaobjetos de derecha a izquierda a qué lado se mueve la imagen?
2.14 ¿Con qué objetivo se logra un campo de visión más grande?
2.17 ¿Qué función cumple el aceite de inmersión? ¿Con qué objetivo se utiliza?
2.18 ¿Cuál es el poder de aumento cuando se estén utilizando cada uno de los
objetivos de 4X, 10X, 40X y el ocular de 10X?
2.19 Conclusiones: cuáles son las propiedades del microscopio?
3. Uso del microscopio
Procedimiento Organizado en Forma de Diagrama de Flujo
Tome una gota de
la muestra de agua
estancada
Dibuje
sus
observaciones
anotando
el
aumento utilizado
Colóquela sobre una
lámina portaobjetos,
y cúbrala con una
laminilla.
Retire
el
exceso
de
agua por los
bordes,
usando papel
absorbente.
Observe
el
montaje
realizado
al
microscopio en
4x, 10x y 40x.
3.1. De la muestra de agua estancada tome una gota y colóquela en una lámina
portaobjetos, cubra con una laminilla.
3.2 Retire el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente.
3.3 Observe el montaje realizado al microscopio en 4x, 10x y 40x.
En el informe debe incluirse el siguiente cuadro que debe registrar las observaciones
realizadas.
OBJETO
AUMENTO
OBSERVADO UTILIZADO
Agua
4X
estancada
10X
DIBUJO
ANÁLISIS Y
CONCLUSIONES
40X
3.4 ¿Qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada?
3.5 ¿Son todos de igual tamaño y forma?
3.6 ¿Se observan organismos móviles o estáticos?
4. Comprobación de los poderes o capacidades del microscopio óptico
4.1 Defina los siguientes poderes o capacidades del microscopio
a.
b.
c.
d.
Poder
Poder
Poder
Poder
de
de
de
de
Aumento
definición
Resolución
Penetración de Foco o Campo
4.2 Realice un montaje húmedo con la letra asimétrica y obsérvela al microscopio
siguiendo los pasos anteriores.
4.3 Calcule el aumento del tamaño del objeto observado para cada objetivo del
microscopio con el cual le correspondió trabajar.
4.4 ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento al observar la letra?
5. Realice un montaje húmedo con un centímetro cuadrado de papel milimetrado y
obsérvelo al microscopio
5.1 Calcule el diámetro del campo de visión para un aumento de 4x en un cuadrado
de 1 cm de lado de papel milimetrado.
Para calcular el diámetro del campo de visión para un determinado aumento hay que
seguir los siguientes pasos:
a) Recortar un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.
b) Ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos
C) Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr
que la línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual
d) Enfocar con el objetivo de menor aumento 4X hasta que se vea con claridad.
Enfocar la preparación quiere decir situarla a la distancia del objetivo que permite su
observación nítida. Esta distancia s e conoce como distancia de trabajo y es tanto
menor cuanto mayor es el poder de aumento del objetivo
e) Medir el campo visual haciendo coincidir una de las líneas del papel milimetrado con
el borde del campo de visión.
f) Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos
líneas es un milímetro) y estimar aproximadamente la fracción sobrante, si la hay. El
resultado será el diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular).
g) Si queremos calcular el diámetro del campo de visión para aumentos mayores, hay
que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo será menor, es decir,
se verá menos de la muestra que estemos observando. De forma que, si el aumento es
el doble, el campo será la mitad, si el aumento es el triple, el diámetro será la tercera
parte, etc. (inversamente proporcionales). Por tanto, bastará con realizar un sencillo
cálculo matemático para saber el nuevo diámetro.
Así se puede calcular los diámetros de objetos microscópicos, células, amibas, vistos.
5.2 Calcule el diámetro del campo de visión para aumentos de 10X, 40X del mismo
cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.
5.3 Compare la anchura del campo visual con cada uno de los tres objetivos
5.4 ¿Con cuál objetivo el campo de visión es mayor con el de mayor o menor
aumento?
6. Realice un montaje húmedo con tres hebras de hilo superpuestas y obsérvelas al
microscopio
6.1 Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine:
a.
b.
c.
d.
¿Cómo
¿Cómo
¿Cómo
¿Cómo
se
se
se
se
manifiesta
manifiesta
manifiesta
manifiesta
el
el
el
el
poder
poder
poder
poder
de
de
de
de
resolución?
aumento?
definición?
penetración o profundidad?
6.2 ¿Cuál es la utilidad del microscopio?
6.3 ¿En qué montaje se observó mejor el poder de penetración?
7. Comprobación de los principios ópticos del microscopio
Después de observar la letra asimétrica, Conteste las siguientes preguntas:
7.1 ¿Al observar la letra asimétrica: ¿Se ve invertida, o en la misma posición en que
estaría si se viera a simple vista? ¿Parece como si se viera por un espejo?
7.2 ¿Al mover la preparación hacia la derecha. ¿Hacia dónde se mueve la imagen?
7.3 ¿Al alejara el portaobjeto o la muestra de usted hacia donde se nueve la imagen?
7.4 ¿Si la distancia focal es mayor el tamaño del objeto es mayor o menor?
8. Tome la lámina con el extendido coloreado y obsérvela en el microscopio enfocando
primero con el objetivo de 10x, luego ponga una gota de aceite de inmersión sobre el
extendido y ubique el objetivo de 100x.
Al finalizar el trabajo deje el microscopio en su correcta posición, limpie los objetivos,
colóquele la funda y guarde en su puesto.
Al terminar de desarrollar las prácticas usted debe ingresar al foro colaborativo del
curso y participar con sus 4 compañeros de grupo colaborativo en la elaboración del
informe de laboratorio respondiendo a las anteriores preguntas compare las respuestas
de los 5 integrantes y consolidelas en un solo documento que enviarán al foro para la
retroalimentación y calificación por parte de su tutor.