Descontaminación de Bromuro de Etidio.

Protocolos y métodos
Laboratorio de Genómica Viral y Humana
Facultad de Medicina UASLP
Descontaminación de Bromuro de Etidio
Creado: 02 de Marzo del 2007
Ultima modificación: 16 de Mayo del 2011
Descontaminación de Bromuro de Etidio
El Bromuro de Etidio (también conocido como Bromuro de Homodio y Bromuro de 2,7-Diamino-10-etil-6-fenilfenantridinio)
es un agente intercalante comúnmente empleado para teñir ácidos nucleicos en diversas técnicas moleculares y citogenéticas. El
bromuro de etidio es un mutágeno conocido y posiblemente también actúe como carcinógeno y teratógeno (aunque esto no ha
sido comprobado). A altas concentraciones el bromuro de etidio es irritante para los ojos, la piel, las membranas mucosas y las
vías aéreas superiores. La manipulación de soluciones de bromuro de etidio y de las herramientas contaminadas por ellas
(peines, charolas, tanques de electroforesis y transiluminadores) debe realizarse con guantes de nitrilo ya que los guantes de
látex son más susceptibles a ser permeados. Los laboratorios de biología molecular tradicionalmente emplean tanto soluciones
concentradas de Bromuro de Etidio (solución stock a 10 mg/ml) así como soluciones diluidas (buffers de electroforesis a 0.5
µg/ml). Los geles de agarosa, toallas de papel y guantes contaminados con bromuro de etidio al igual que el carbón activado
empleado para descontaminar los buffers deben ser colocados en bolsas de RESIDUOS TOXICOS (color amarillo) al término
de su uso. Los buffers contaminados con Bromuro de Etidio deben ser descontaminados de acuerdo a este protocolo antes de
ser desechados hacia el drenaje principal. Los buffers descontaminados no poseen bromuro de etidio por lo que pueden
manejarse como residuos de laboratorio de bajo impacto ambiental.
Procedimiento:
1.
Etiquete un garrafón de plástico de 20 litros de capacidad con el siguiente rótulo laminado. Dicho recipiente deberá ser
reciclado para la recoleccion de buffers contaminados por bromuro de etidio pero para NINGUN OTRO FIN FUERA
DE ESTE.
2.
Cuando el laboratorio ya no utilice el bromuro de etidio ni requiera de la descontaminación de buffers, el contenedor
deberá ser perforado y destruido como RESIDUO TOXICO para evitar su empleo ulterior y con otros fines.
Laboratorio de Genómica Viral y Humana
–
Facultad de Medicina
–
Universidad Autónoma de San Luis Potosí
Protocolos y métodos
Laboratorio de Genómica Viral y Humana
Facultad de Medicina UASLP
Descontaminación de Bromuro de Etidio
Creado: 02 de Marzo del 2007
Ultima modificación: 16 de Mayo del 2011
3.
Vierta en el interior del garrafón de 20 litros 60 gramos de carbón activado (300 mg de carbón activado por cada 100
mL de buffer a descontaminar).
4.
Conforme vaya desechando los buffers contaminados por bromuro de etidio, recoléctelos en dicho garrafon hasta
llenarlo por completo.
5.
Permítale al último volúmen de buffer colocado en el garrafón descontaminarse en el carbón activado durante al
menos 48 horas.
6.
Al término de las 48 horas, vierta el buffer descontaminado al drenaje del laboratorio teniendo cuidado de cribar el
carbón activado para evitar obstruir la cañería.
7.
Coloque el carbón activado que fue cribado en una bolsa o recipiente de plástico y deséchelo como RESIDUO
TOXICO. Los residuos tóxicos de laboratorio deben ser recolectados periódicamente por la autoridad facultada para
ello y turnados para su destrucción en hornos cementeros o metalúrgicos.
8.
Agregue nuevamente 60 gramos de carbçon activado y continue recolectando el buffer contaminado.
Notas:
1.
En realidad este procedimiento únicamente elimina el Bromuro de etidio presente en el buffer. El carbón activado
retiene el bromuro de etidio en estado tóxico por lo cual es necesario eliminarlo apropiadamente para evitar la
liberación del bromuro de etidio al medio ambiente.
Referencias:
1.
2.
3.
4.
Wikipedia contributors. Ethidium Bromide. Wikipedia, The Free Encyclopedia. Jun 08, 2008, at 04:15 UTC.
Available at: http://en.wikipedia.org/wiki/Ethidium Bromide.
Current Protocols in Molecular Biology, Chapter 2.5 A9, Frederick M. Ausubel et al. 2003.
Bensaude, O. Ethidium Bromide and Safety- Readers Suggest Alternative Solutions. Trends Genet. 4:89; 1988.
Lunn, G.; Sansone, E.B. Decontamination of Ethidium Bromide Spills. Appl. Ind. Hyg. 4: 234-237; 1989.
Laboratorio de Genómica Viral y Humana
–
Facultad de Medicina
–
Universidad Autónoma de San Luis Potosí