UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA DE ALIMENTOS TEMA: Bioadsorción de metales pesados mediante biomasa extraída de aguas residuales. OBJETIVOS: GENERAL: Aislar una cepa capaz de adsorber metales pesados procedentes de aguas residuales de una industria de producción de lavaduras. ESPECÍFICOS: Determinar la biomasa en función del tiempo de la cepa seleccionada. Determinar la velocidad volumétrica y específica de crecimiento de las cepas seleccionadas. INTRODUCCIÓN: A partir de la revolución industrial los avances en ciencia y tecnología han aumentado la capacidad del ser humano para explotar los recursos naturales, generando perturbaciones en los ciclos biogeoquímicos elementales. Aún cuando muchos de los metales pesados son esenciales para el crecimiento humano como el Na, K, Ca, Mg, V, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn y Mo en bajas concentraciones y como el Cu, Zn, y Mn que son esenciales para el crecimiento microbiano, algunos metales como el Au, Ag, Pb, Cr y Cd no se les conoce función biológica, y pueden ser altamente tóxicos para las células vivas. Sus efectos en los seres humanos son muy variados. Metal Pesado As Cd Cu Hg, Zn, Cr Efectos en la salud humana Fiebre, prurito, altragias, trastornos en el sistema nervioso central (adormecimiento, temblores, parálisis de pies), nauseas, vómitos, diarrea, heptomagalia e ictericia Dolor de cabeza, vértigo, irritabilidad, alteraciones gastrointestinales, vómitos, dolor abdominal, dolor de pecho intenso, deficiencia respiratoria, hemoptisis, fiebre, transpiración profusa, prostación, pneumonitis, edema pulmonar, rinofaringitis, epistaxis, ulceraciones y atrofias muconasales, anospáticas, anemia, fibrosis y enfisema pulmonar Rigidez, disartria, disfagia, temblor, falta de coordinación, movimientos correoatetóicos y ataxia, insuficiencia hepática, afecciones oculares (anillo de Kayser-Fleischer) Trastornos gastrointestinales, respiratorios, en piel (lesiones vesiculares y papulares eritomatosas) y oculares (mercurialmente y constricción de los campos visuales) Los metales pesados más tóxicos son cadmio, cobre, cromo, mercurio, níquel, plomo y zinc. La importancia de este tipo de tóxicos radica en la tendencia a ser acumulados y concentrados por las distintas especies, siendo más peligrosos a medida que se asciende en la cadena evolutiva hacia el hombre. Algunos microorganismos y sus productos son de gran aplicación en procesos de biosorción o bioacumulación de metales pesados en solución, ofreciendo así una alternativa a las técnicas convencionales para la eliminación o recuperación de metales, con base a lo anterior se ha generado un gran interés en la extracción de iones de metales pesados de aguas residuales utilizando procesos biotecnológicos. ANTECEDENTES: Existen varios métodos químicos y biológicos factibles para la recuperación de dichos metales (1): 1. 2. Método físico químicos: Precipitación química, Separación de sólidos, Cementación, Osmosis Inversa, Elestrodiálisis, Intercambio Iónico, Adsorción, Extracción con disolventes. Métodos biológicos: Bioacumulación, Biomineralización, Bio trasformación, Quimiosorción medida por microorganismos, Bioadsorción. Los métodos químicos no son selectivos, son de un costo elevado, req uieren de procedimientos previos. Mientras que los métodos biológicos son más económicos pero limitados debido a la capacidad propia del de los microorganismos a adsorber, acumular, etc. diferentes metales pesados. El proceso de separación destinado al tratamiento de un agua residual puede variar en función del metal contaminante y de la concentración del mismo. JUSFITIFACIÓN: Bibliográficamente (2) se ha determinado que los posibles microorganismos capaces de adsorber metales son: Biomasa Metales estudiados Estado biológico Inmovilización Muerta Ambos Inmovilizada Libre Ambos Muerta Libre Ambos Muerta Ambos Muerta Inmovilizada Bacterias Bacillus sp. Pseudomona aeruginosa Cr, Cu, Fe, Pb Cu, Ni, U Hongos filamentosos Aspergillus niger Cd, Cu, Ni, Pb Aspergillus oryzae Cd, Cu, Pb, Zn Levaduras Saccharomyces Ag, Au, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Hg, Ni, cerevisiae Pb, Zn Saccharomycetes pombe Cd Por otro lado, las biomasas pueden ser utilizadas de dos maneras diferentes: libres, en forma de suspensiones dentro de soluciones metálicas y con agitación, o inmovilizadas, sobre algún tipo de soporte. La utilización de un tipo u otro de biomasa depende principalmente del tipo de escala que se esté utilizando. De este modo, para ensayos de laboratorio, se utiliza de forma preferente, debido a la simplicidad del proceso, biomasa libre en reactores con agitación donde, una vez finalizado el proceso, la biomasa cargada de metal es separada del efluente mediante técnicas de filtración o centrifugación. GRUPO TRÓFICO: La levadura Saccharomyces cerevisiae pertenece al grupo de trófico de quimioorganotrofo debido a que degrada sustancias organicas. MEDIO DE CULTIVO: De acuerdo a la literatura analizada se determinó que las variables de mayor importancia en el proceso de bioadsorción son: el pH, las concentraciones iniciales de metales y el tratamiento previo de la biomasa (2). Para la obtención de biomasa se ha visto determinado que el medio selectivo las muestras serán aislada en clado cerebro corazón y posteriormente sembradas por agotamiento por estría en placas de Petri, en medio Sabouraud Dextrosa Agar e incubadas a temperatura ambiente del laboratorio durante una semana. La identificación de las cepas seleccionadas se realizará mediante estudios morfológicos en microscopía de luz, tamaño, temperatura óptima de crecimiento METODO DE AISLAMIENTO: Debido al aporte bibliográfico se pretenderá hacer este proyecto con la levadura Saccharomyces cerevisiae debido a su gran capacidad de adsorción de metales y la diversidad de adsorción de los mismo. El principal objetivo del pretratamiento de la biomasa es conseguir un aumento en la capacidad de recuperación metálica de la misma. Para este estudio se utilizará Saccharomyces cerevisiae, levadura residual de una empresa local, subproducto del proceso de fermentación de cerveza. La biomasa, tal como se recibe, es de color amarillo y de textura fibrosa y frágil se procederá a purificarla y a la producción de biomasa. Bibliografía 1. Lezcano, J. Universidad Complutense de Madrid. Efecto del pretramiento de la biomasa en la bioadsorción de metales pesados. [En línea] 04 de 08. [Citado el: 06 de 11 de 09.] http://eprints.ucm.es/8620/1/T30768.pdf. 2. Rodriguez, M. Scielo. Efectos de las Condiciones de Operación Sobre la biosorción . [En línea] 08. [Citado el: 11 de 11 de 09.] http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S071807642008000600006&lang=pt. 3. Acosta, M. Scielo. 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