CITOESQUELETO I PROFESOR JUAN FERNANDEZ 2011 CELULA EN CULTIVO TEÑIDA CON COOMASSIE AZUL (TINCIÓN DE PROTEINAS) NUCLEO Y RED CITOPLASMATICA Alberts et al., 2002 LOS COMPONENTES DEL CITOESQUELETO VISUALIZADOS CON DEFERENTES TECNICAS Y EN DIFERENTES LUGARES Filamentos de acina Microtúbulos Filamentos intermedios Alberts et al., 2002 ESTRUCTURA DE LOS MICROTUBULOS SUBUNIDAD- β En rojo: sitios de unión as GTP SUBUNIDAD- α Alberts et al., 2002 ME CRECIMIENTO DE MICROTUBULOS DESDE LOS EXTREMOS DE UN AXONEMA (CILIO DESNUDO) EXTREMO(+) Pulso de tubulina marcada EXTREMO(-) Alberts et al., 2002 “TREADMILLING” E INESTABILIDAD DINAMICA EN EL MICROTUBULO DE UNA CELULA VIVA -----(-) (+) --Treadmilling Microtúbulos fluorescentes pseudo coloreados verde Mt. estacionario --------------Inestabilidad dinámica Alberts et al., 2008 ------- MICROFOTOGRAFIA QUE MUESTRA LA INESTABILIDAD DINAMICA DE LOS MICROTUBULOS EN UNA CELULA VIVA Microtúbulos fluorescentes pseudo coloreados Alberts et al., 2002 ESTABILIZACION Y DESTABILIZACION DE LOS MICROTUBULOS Alberts et al., 2008 POLARIDAD DE LOS MICROTÚBULOS Y DINÁMICA DE SUS EXTREMOS. INESTABILIDAD DINAMICA Crecimiento Catástrofe Rescate GTP y estabilidad de los extremos Alberts et al., 2008 Microfotografías electrónicas PROTEINAS ASOCIADAS A LOS MICROTUBULOS, ESTABILIDAD Y ARREGLOS ESTRUCTURALES Nucleación Bloqueo Unión a otras estructuras Catástrofe Estabilización y ensamblaje Estabilización Formación de manojos Unión a filamentos intermedios Alberts et al., 2008 DIAGRAMA QUE MUESTRA LA ESTRUCTURA DE UN CENTROSOMA Alberts et al., 2002 CENTRÍOLO DEL CENTROSOMA DE UNA CELULA PANCREATICA EMBRIONARIA -Triplete de mts (9x3 + 0) -Densidades pericentriolares -Microtúbulos Fawcett, 1966 MICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA DE UN CENTROSOMA Centríolo y material pericentriolar Alberts et al., 2002 POLIMERIZACION DE TUBULINA NUCLEADA POR EL COMPLEJO DE ANILLO DE γ-TUBULINA M.E. de γ-TuRC γ-TuRC y microtúbulos Alberts et al., 2002 ESTRUCTURA DE UN MONOMERO Y DE UN FILAMENTO DE ACTINA Modelo estructural Alberts et al., 2002 Micr. Elect. CURSO TEMPORAL DE LA POLIMERIZACION DE ACTINA EN UN TUBO DE ENSAYO Sin partidor (nucleador) Alberts et al., 2002 Con partidor PROTEINAS ASOCIADAS A LOS FILAMENTOS DE ACTINA ESTABILIDAD Y ARREGLOS ESTRUCTURALES Promueve crecimiento Previene crecimiento Promueve nucleación Promueve crecimiento Estabiliza filamento Fragmentación Arreglos estructurales -----------------> Alberts et al., 2008 DIAGRAMAS Y MICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA QUE ILUSTRAN LA NUCLEACION DE ACTINA Similitud estructural Complejo Arp 2/3 y nucleación Nucleación dendrítica Alberts et al., 2002 MAQUINARIA INVOLUCRADA EN LA NUCLEACION DE ACTINA Dos Remedios et al., 2003 MOTILIDAD DURANTE LA LOCOMOCION DE UNA CELULA Cambios de forma generalizados en el desplazamiento de una célula Mitchison y Cramer, 1996 QUERATOCITOS MIGRATORIOS DE LA EPIDERMIS DE UN PEZ Alberts et al., 2002 ACUMULACION DE ACTINA RAMIFICADA EN EL FRENTE DE AVANCE DE UNA CELULA (KERATOCITO DE PECES) (Microscopía electrónica de barrido) Svitkina y Borisy, 2006 LOCALIZACION INMUNOFLUORESCENTE E INMUNO-ORO PARA DEMOSTRAR LA DISTRIBUCION DE ACTINA Y DEL COMPLEJO Arp2/3 Queratocito Inmunofluorescencia Fibroblasto Inmunofluorescencia Svitkina y Borisy, 2006 Queratocito Inmuno-oro (Arp 2/3). M.E. Barrido Fibroblasto Inmuno-oro (Arp 2/3). M.E. Barrido LOCALIZACION DE COFILINA (VERDE) Y ACTINA (ROJO) EN EL QUERATOCITO DE RANA Queratocito Inmunofluorescencia Actina + ADF-cofilina Queratocito en movimiento Queratocito Inmuno-oro de Cofilina M.E. Barrido Svitkina y Borisy, 2006 EFECTO DE RHO, RAC Y CDC 42 (ACTIVADOS) SOBRE LA ORGANIZACION DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA (FLUORESCENTES) DE FIBROBLASTOS Alberts et al., 2002 DIAGRAMA QUE ILUSTRA LOS MECANISMOS MOLECULARES INVOLUCRADOS EN LA NUCLEACION DE ACTINA EN VARIOS PATOGENOS Alberts et al., 2002 DIAGRAMA Y MICROFOTOGRAFIA DE INMUNOFLUORESCENCIA QUE MUESTRAN EL MOVIMIENTO DE LA BACTERIA LISTERIA MONOCYTOGENES Propulsión por nucleación de actina Alberts et al., 2002 POLIMERIZACION DE ACTINA EN BOLITAS DE LATEX CUBIERTAS DE Arp 2/3 Y SU MOVIMIENTO EN METIL CELULOSA INSTANTANEAS DE UNA ANIMACION Wiesner et al., 2003 INMUNOFLUORESCENCIA DE ACTINA Y DEL COMPLEJO Arp2/3 EN COMETAS FABRICADOS A PARTIR DE BOLITAS DE LATEX Wiesner et al., 2003 ACCIÓN DE DROGAS SOBRE MICROTUBULOS Y FILAMENTOS DE ACTINA Alberts et al., 2008 INMUNOFLUORESCENCIA DE CELULAS EPITELIALES CON FILAMENTOS DE QUERATINA ASOCIADOS A DESMOSOMAS Alberts et al., 2002 MICROTOGRAFIAS ELECTRONICAS DE FILAMENTOS INTERMEDIOS Neurofilamentos Filamentos gliales Congelación-grabado Alberts et al., 2002 Neurofilamentos Micr. Electr. MICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA Y DIAGRAMAS QUE MUESTRAN LA ESTRUCTURA DE LOS FILAMENTOS INTERMEDIOS α-hélice Micr. Electr. Doble α-hélice Tetrámero Tetrámeros en tándem Filamento intermedio Alberts et al., 2002 DINAMICA DE LOS FILAMENTOS INTERMEDIOS: INTERCAMBIO DE FRAGMENTOS O SUBUNIDADES (VIMENTINA Y NEUROFILAMENTOS) Intercalación de subunidades Unión extremoextremo: crecimiento Incorporación de subunidades Liberación de subunidades Colakoglu and Brown, 2009