FOJA 1 Muellerstra e 44, A-6020 Innsbruck, Austria Teléfono: ++43 512 9003 70600, Fax: ++ 43 512 9003 73600 Procuraduría General de la República Sara Monica Medina Alegría, QFI Coordinadora General de Servicios Forenses Procuraduría General Perito forense acreditado por tribunal Av. Paseo de la Reforma # 211-213 Col. Cuauhtémoc, Deleg. Cuauhtémoc 06500 DISTRITO FEDERAL CP. MÉXICO PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 Nuestro número de referencia: GMI1409191 Innsbruck, 3 de diciembre de 2014 Opinión Experta de Análisis de ADN En el presente dictamen pericial se presentan los resultados del análisis forense de ADN concerniente a la persona extraviada Alexander Mora Venancio relacionado con el caso PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014, de acuerdo a lo establecido entre la Procuraduría General de la República, México, y el Gerichtsärzte am Institut für Gerichtliche Medizin. El 13 de noviembre de 2014, fue entregada en nuestro laboratorio una muestra Ósea (identificación de la muestra 27-29102014) por Lourdes Lopez Lucho Iturbe, PGR. El 14 de noviembre de 2014, se proporcionaron 134 perfiles genéticos de ADN relacionados a 42 grupos familiares por parte de Sara Mónica Medina Alegria, PGR. Además, el 20 de noviembre de 2014, se proporcionaron 135 perfiles genéticos de ADN relacionados a 42 grupos familiares por parte de Mercedes Doretti, EAAF. © 2014 El Universal Online, S.A. de C.V. __________________________________________________________________________ SP159419.doc Stei FOJA 2 o. Univ. Prof. R. Scheithauer, Gerichtsärzte GMI Innsbruck PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 El grupo familiar número 21 (PGR) consistente en perfiles genéticos de ADN del padre (Ezequiel Mora Chora, muestra identificada como 13MR5470-14) y dos hermanos de la persona extraviada Alexander Mora Venancio (Omar Mora Venancio, Muestra identificada como 13MR5471-14, y Hugo Mora Venancio, Muestra identificada como 13MR5472-14). El grupo familiar 21, arriba mencionado, (PGR) corresponde al código de persona extraviada del EAAF 3-005, código familiar 4-005, Ezequiel Mora Chora (Padre, código de donante IG013), Omar Mora Venancio (hermano, código de donante IG014) y Hugo Mora Venancio (hermano, código de donante IG015). 3 Investigaciones 3.1 Inspección y descripción de los indicios. Muestra ósea 15941901 - 27-29102014: Un fragmento óseo, de aproximadamente 4 x 4 x 1 cm embalado en papel, el cual además estaba embalado en un contenedor de plástico con la etiqueta: “27-29102014, 27-29102014”. Sp159409 a Sp159425 embalados en una caja de cartón etiquetada como: “Indicio, evidencia, Fecha y hora: 0? Noviembre, 2014, Número de indicio o evidencia: 13:35 pm., Número de registro (folio o llamado):, Domicilio exacto del lugar de los hechos y/o hallazgo, ubicación exacta del lugar en donde el indicio fue recolectado, descripción del material: Av. Rio Consulado 715, col. Santa Maria Insurgentes Del. Cuauhtémoc. C.P. 06450, México D. F., Observaciones: 17 muestras de fragmentos, óseos embalados individualmente., Nombre completo sin abreviaturas del agente policía, perito o auxiliar responsable de la recolección y el embalaje: Biol. Martha Acela Valdez González.”. Y además etiquetado como: “Columnas Para, filtrar, Automate Express. Martha Acela Valdez, Carola Romanini,”. 15941901 1: El hueso fue sometido al procedimiento de extracción y usado para análisis de ADN. _____________________________________________________________________ SP159419.doc Seite 2 Stei FOJA 3 o. Univ. Prof. R. Scheithauer, Gerichtsärzte GMI Innsbruck PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 3.2 Análisis de ADN (Referencia: Informe de ADN adjunto) Los análisis de ADN de la muestra ósea 27-29102014 (15941901 1) arrojaron un perfil genético masculino en los 16 loci utilizados. Los perfiles genéticos de ADN del Padre y de los dos hermanos de la persona desaparecida de nombre Alexander Mora Venancio, fueron proporcionados por la PGR y el EAAF. Los datos obtenidos por GMI son concordantes con los proporcionados por PGR y EAAF, en los 16 loci. 4 Bioestadística (procedimiento de identificación) Los procedimientos de identificación utilizando datos STR autosómicos arrojaron evidencia sólida de que el perfil genético de la víctima arriba mencionada coincide con este grupo familiar. Los datos genéticos nucleares obtenidos de la muestra 27-29102014 son consistentes con los restos humanos no identificados, pertenecientes a un hijo biológico del padre 13MR5470-14 (IG013) y a un hermano biológico de 13MR5471-14 (IG014) y 13MR5472-14 (IG015). Basados en los datos de la frecuencia alélica de la población caucásica establecida por el GMI, bajo la hipótesis de que los datos genéticos nucleares obtenidos del fragmento óseo sean de: un hijo biológico del padre 13MR5470-14 (IG013) y de un hermano biológico de 13MR5471-14 (IG014) y de 13MR5472-14 (IG015), es 1 billón de veces más probable en comparación con la de cualquier otro individuo no relacionado. Comentario: Se puede observar una posible mutación de origen paterno entre 13MR5470-14 (IG013) y 13MR5471-14 (IG014) en el locus D8S1171. _________________________________________________________________________________ SP159419.doc Seite 3 Stei FOJA 4 o. Univ. Prof. R. Scheithauer, Gerichtsärzte GMI Innsbruck PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 5 Resúmen 5.1 Una muestra ósea (27-29102014) fue enviada a nuestro laboratorio para realizar análisis de ADN. Por otra parte, las referencias de los perfiles genéticos de ADN, del padre y de los dos hermanos de la persona desparecida de nombre Alexander Mora Venancio fueron puestos a disposición para los procedimientos de identificación en el GMI por PGR. Además, las referencias de los perfiles genéticos de ADN, del padre y de los dos hermanos de la persona desaparecida de nombre Alexander Mora Venancio fueron puestos a disposición para los procedimientos de identificación en el GMI por la EAAF. 5.2 Los análisis de ADN de la muestra ósea (27-29102014) arrojaron un perfil masculino. 5.3 Los perfiles genéticos de ADN del Padre y de los dos hermanos de la persona desaparecida de nombre Alexander Mora Venancio fueron proporcionados por la PGR y la EAAF. Los datos obtenidos por GMI en los 16 loci son análogos, en la gama comparable, con los datos proporcionados por PGR y EAAF. 5.4 Los procedimientos de identificación de la familia genética, utilizando datos STR autosómicos, arrojaron evidencia sólida de que el perfil de la víctima previamente mencionada tiene relación con ese grupo familiar. SP159419.doc Seite 4 Stei FOJA 5 o. Univ. Prof. R. Scheithauer, Gerichtsärzte GMI Innsbruck PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 5.5 Con base en los datos de la frecuencia alélica de la población caucásica establecida por el GMI, los datos genéticos nucleares obtenidos, son de al menos 1 billón de veces más probable de ser observados, bajo el escenario de que sean originados por el hijo biológico del padre Ezequiel Mora Chavez, y hermano biológico de los hermanos (Omar Mora Venancio y Hugo Mora Venancio), de la persona desaparecida Alexander Mora Venancio; en comparación a los de cualquier otro individuo no relacionado. SP159419.DOC Seite 5 Stei FOJA 6 UNIVERSIDAD MÉDICA DE INNSBRUCK INSTITUTO DE MEDICINA LEGAL Departamento de Pruebas de Laboratorio – Director: o. Univ. Prof. DR. med. Richard Scheithauer Departamento Forense de Genética e Investigación de Casos Muellerstrabe 44, A -6020 Innsbruck, Austria Teléfono: ++ 43 512 9003 70600, Fax: ++ 43 512 9003 73600 A. Univ. Prof. Dr. Martin Procuraduría General de la República Steinlechner Sara Mónica Medina Alegría, QFI Investigador Coordinadora General de Servicios Forenses Procuraduría General de la República PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 Nuestro número de referencia: SP159419 GMI1409191 Texto en idioma español. Innsbruck, 03 de diciembre de 2014 Informe de ADN 1. Sección de evidencia: El 13 de noviembre de 2014 recibimos medios de prueba recabados por la Procuraduría General de la República. El objetivo de dicha investigación fue el establecer perfiles de ADN. Las muestras analizadas se encuentran considerados en la tabla 1: Gráfica 1: Código de barras 15941901 1 Muestra 27-29102014, ADN Muestra Ósea Acreditado como un laboratorio de pruebas ISO/IEC 17025, GZ 92714/715-I/12/02 Ministerio de Economía y Trabajo, Austria Sp159419d.doc Página 1 de 5 Stei/CB FOJA 7 Instituto de Medicina Legal, Innsbruck Medical University Departamento Forense Genética e Investigación del Caso PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 2 El método de tipificación de ADN: El análisis de ADN, consta de tres pasos principales: La extracción de ADN (aislamiento de material genético de una mancha), la amplificación (replicación de segmentos cortos de ADN) y la detección (identificación de la secuencia individual de ADN). 2.1. Extracción 2.1.1. Método [DEX06] Fenol-Cloroformo-Alcohol isoamílico Las muestras se limpiaron y purifican antes de la pulverización. El polvo de hueso fue sometido a lisis y el ADN se extrajo de acuerdo con el Método de Fenolcloroformo-Alcohol isoamílico. Posteriormente, el ADN se purificó y se disolvió. Paralelamente, los agentes de extracción se incluyeron en el mismo procedimiento sin adición de material biológico con el fin de controlar la pureza de la reacción (extracción del valor ciego). Después de la etapa de extracción, se determinó la concentración del ADN genómico mediante RTPCR. 2.2. Amplificación 2.2.I. Descripción de los loci de STR- analizado [DPC13, DPC18] Durante la amplificación de PCR de segmentos definidos de ADN (llamados Short Tandem Repeats (STR 's)) fueron replicados y se enumeran a continuación: STR-locus D3Sl358 VWA D16S539 D2S1338 D8S1179 FGA localización en el Cromosoma 3p l2pl2-pter 16q24-qter 2q35-37.1 8 4q28 Nota del traductor: STR significa “repeticiones cortas en tándem” SP159419D.DOC Página 2 de 5 Stei/CB FOJA 8 Instituto de Medicina Legal, Innsbruck Medical University Departamento Forense Genética e Investigación del Caso PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 D21S 11 Dl8S51 D195433 THO1 D55818 D13S3l7 D7S820 CSF1PO TPOX 21q11-21 18q21.3 19q12-13.1 11p15-15.5 5 13 7 5 2 Los marcadores de STR anteriormente mencionados son aceptados por la Comunidad Forense, científicamente analizados en detalle y validados para fines forenses con estudios poblacionales realizados en nuestro instituto. 2.2.2. Marcador de género específico Amelogenina [DPC013, DPC18] El sistema PCR de Amelogenina fue utilizado para la determinación del sexo de muestras forenses. En el cromosoma X se replica un fragmento de 106 bp del intrón 1. El fragmento homólogo del cromosoma Y tiene una longitud de 112 bp . Las muestras de individuos femeninos son homocigotos (XX), las muestras de individuos masculinos son heterocigotos (XY). 3 Detección [DVB03, DCE01, DCEO2] Los STR Amplificados fueron separados por medio de electroforesis capilar y detectados por fluorescencia. 4 Garantía de la Calidad Junto con las muestras, la muestra problema y una muestra sin ADN (control negativo de amplificación) se procesaron con el fin de monitorear la ausencia de cualquier contaminación de los productos químicos utilizados. Además, se amplificó un ADN-Standard internacionalmente aceptado con el fin de controlar la calidad de los productos químicos PCR y el desempeño de los sistemas de electroforesis (control positivo de amplificación). SP159419D.DOC Página 3 de 5 Stei/CB Instituto de Medicina Legal, Universidad de Medicina de Insbruck Departamento de Genética Forense y Estudios de Caso _____________________________________________________ PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 FOJA 9 Los resultados de las muestras analizadas, incluyendo las reacciones de control de extracción (valor ciego de extracción) y amplificación (control de amplificación positiva y negativa), se encuentran almacenados como archivos electrónicos en el Instituto. Se han utilizado los más altos estándares internacionales durante todo el proceso. Nuestro Instituto realiza exitosamente pruebas de aptitud internacionales para el control de calidad. 5 Resultados [DAW01] Normalmente, los resultados de un perfil positivo de una muestra, son dos alelos por locus-STR. Esta situación es conocida como heterocigótico. Si los dos alelos en un locus particular son iguales, únicamente se observa una de las señales, la situación es llamada homocigótico. El nombramiento de los alelos de los loci-STR analizados, es realizado de acuerdo con una nomenclatura internacional. La suma de los alelos de todos los loci-STR analizados en una muestra es llamada Perfil genético de ADN o tipo de ADN. Los resultados de STR autosómicos (perfiles) de las muestras analizadas, se muestran en las tablas 2a – 2d Tabla 2a: Código de Muestra D8S1179 D21S11 D7S820 CSF1PO Barras 15941901 1 27-29102014, Muestra ósea de ADN Tabla 2b: Código de Muestra Barras 10/14 29/32.2 11/12 10/12 D3S1358 TH01 D13S317 D16S539 15941901 1 27-29102014, Muestra ósea de ADN 15 7/9.3 9/10 10/11 Tabla 2c: Código de Muestra Barras D2S1338 D19S433 VWA TPOX 15941901 1 23 13.2/15.2 17 8/9 Tabla 2d Código de Muestra Barras D18S51 Amelogenina D5S818 FGA 15941901 1 16/25 X/Y 19/25 27-29102014, Muestra ósea de ADN 27-29102014, Muestra ósea de ADN 10/11 _________________________________________________________________________________ SP159419d.doc Página 4 de 5 Stei/CB FOJA 10 Instituto de Medicina Legal, Universidad de Medicina de Insbruck Departamento de Genética Forense y Estudios de Caso _________________________________________________________ PGR/SEIDO/UEIDMS/871/2014 Los análisis fueron concluidos el 1 de Diciembre de 2014. 6. Conclusiones. La muestra ósea 27-29102014 (15941901 1) dio resultados positivos en los dieciséis loci analizados. (FIRMADO) O. Prof. Univ. Dr. Richard Scheithauer Director (FIRMADO) A. Prof. Univ. Dr. Martin Steinlechner Nota: Este Informe de ADN no debe ser copiado parcialmente, sin autorización por escrito del laboratorio de ADN. _________________________________________________________________________________ SP159419d.doc Página 5 5 Stei/CB STR=Sistema de Prueba Forense de ADN