EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. El
ensayo para cada actividad se realizó al pH óptimo y siti variar
las demás condiciones de la reacción enzimàtica.
La temperatura óptima es función de la duración de la expe
riencia. En el ensayo, se utili/.ó un tiempo de reacción de 30
minutos, encontrándose que la temperatura óptima para la actiyi
dad Jb-( 1 ,3)-glucanasa fué aproximadamente 46^C, estando para
las demás actividades sobre los 5C^C (fig. 6 ) .
DISCUSIÓN
Utilizando el sistema litico de T. harzianum CBS 354-33
frente a micelio de P. chrysogenum y P. urticae, se ha obtenido
una alta eficacia en la liberación de protoplastos de éstas especies fúngicas. Además de las actividades liberadoras de proto
plantos, se ha detectado la presencia en determinados días de
cultivo de actividades deletéreas para éstos.
Por otro lado, ha sido demostrado por numerosos autores
(JEAN MARIE BASTIDE et al., 1979; RAMOS and GARCIA-ACHA, 1975;
LABORDA et al., 1974; SKIJINS et al., 1965), que una mezcla enzimàtica compleja es la responsable de la liberaciór de protoplastos, al menos en aquellos casos en. los cuales se obtiene
una cantidad'apreciable. Una carencia inicial de la mayoría de
los enzimas explicaría su bajo rendimiento durante los primeros
días de cultivo y el incremento progresivo en su eficacia, para
lelo a la liberación por el hongo de un complejo "pool" enzimàtico. Análogamente se podría relacionar el descenso en la
pro
ducción de protoplastos, con la péx'dida total o parcial de algu
na do las actividades enzimáticas antes mencionadas,a lo largo
del período de cultivo. Nosotros hemos encontrado este tipo de
descenso en ciertos períodos del cultivo y en todas las experiencias realizadas para estudiar la obtención de protoplastos,
viéndose siempre confirmados los datos globales de eficacia,con
la liberación paralela de las actividades líticas implicadas en
la degradación de la pared celular del hongo.
Las actividades Jñ-( 1 , 3 ) y fi-( 1 , 6 )-glucanasa y ^-glucosidasa, aumentan,alcanzando niveles muy altos en los primeros días
del cultivo de T. harzianum, en contraste con la ausencia o ba
jo nivel de las demás actividades estudiadas. Como es sabido,la
pared celular fúngica se encuentra constituida por dos superficies claramente diferenciables, una interna denominada ''matriz
amorfa", y otra externa compuesta casi enteramente por material
fibrilar. La aparición de las actividades citadas está claramen
te relacionada con los componentes situados en la superficie ex
terna de la pared celular. Probablemente los mayores componentes de la superficie externa de la pared celular de estas especies de Penicillium seanjS—(1.3) y J3-(1,6)-glucanos y/o polirne