esterilización por calor húmedo

ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO
Fecha____________________________
OBJETIVO:
El alumno conocerá y aplicará el procedimiento de esterilización por calor
húmedo, así como las ventajas del procedimiento.
MATERIAL
Reloj
Agua destilada
Autoclave
Mechero bunsen
Material de cristalería limpio, seco y empacado
Extran
INTRODUCCIÓN
AGENTES FÍSICOS ANTIMICROBIANOS.
A) CALOR HÚMEDO.- La temperatura elevada, combinada con una humedad
elevada, es uno de los métodos más efectivos para matar microorganismos. El
calor húmedo mata a los microorganismos coagulando sus proteínas. Es
mucho más rápido y efectivo que el calor seco. El vapor a presión proporciona
temperaturas por encima de las que se pueden obtener al hervir. Tiene la
ventaja de un calentamiento rápido, así como penetración rápida y abundante
humedad.
El aparato a esterilizar que utiliza vapor de agua a presión regulada se
denomina autoclave. Consta de una cámara de doble pared que se llena de
vapor saturado libre de aire y se mantiene a la temperatura indicada y a la
presión establecida durante un periodo de tiempo determinado. Generalmente
el autoclave funciona a una presión de 15 libras/ pulgada cuadrada a 121·C (
249·F). El tiempo de funcionamiento para lograr la esterilidad depende de la
naturaleza del material que se va a esterilizar, del tipo de envase y del
volumen del material. Una temperatura de l00°C es la suficiente para matar a
todas las formas bacterianas en 2 o 3 minutos, excepto a las esporas, para
matar a estas se requiere una temperatura de 121°C durante 15 minutos y a
una presión de 15 libras.
Este método es adecuado para esterilizar aparatos que tienen hule, jeringas
que contienen metal, para medios de cultivo que contienen un azúcar especial
como dextrosa. El autoclave se puede sustituir por la olla de presión.
B) CALOR SECO.- En este tipo de esterilización existe una destrucción de los
microorganismos oxidando sus constituyentes químicos, desnaturalizando las
proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las
membranas celulares. Para materiales que deben permanecer secos como
ciertos instrumentos de vidrio de laboratorio tales como: cajas de petri,
pipetas, así como aceites, polvos (por ser impermeables al vapor), los
materiales que no se pueden esterilizar por calor seco son: Material textil
(algodón, sedas, lino, etc.), gomas y materiales sintéticos Todo material que se
altere a la temperatura de trabajo se dispone de hornos eléctricos por los que
circula aire caliente, en vista de que el calor es menos eficaz en materiales
secos, se acostumbra a aplicar una temperatura de 160°C a 170°C durante
una hora o más. Para materiales de vidrio de laboratorio es suficiente una
exposición de dos horas de duración a 160°C (320°F) para que quede
esterilizado. Otras formas útiles de calor seco incluyen incineración para
objetos que deben ser destruidos y flameados por pasaje de agujas o
pequeños instrumentos a través de la llama de un mechero bunsen.
PROCEDIMIENTO
b) ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO (vapor a presión)
1.- Lava el material que te proporcione tu profesor con mezclas adecuadas
como Extran, mezcla Crómica con concentraciones adecuadas tomando en
cuenta lo sucio del material, seca en estufa o en forma manual con papel
absorbente y empácalo. Tenlo listo para su esterilización.
2.- Coloca el agua necesaria en la autoclave u olla de presión hasta la marca e
introduce unas gradillas metálicas que servirán de base al material a
esterilizar. Coloca el material a esterilizar dentro de la autoclave u olla de
presión, evitando que el material toque las paredes.
3.- Cierra el autoclave u olla de presión, cuidando de dejar abierta la válvula
de salida de vapor que ayudará a expulsar el aire contenido dentro y que éste
es desplazado por el vapor que se produce. Si el aire no fue eliminado
totalmente de la autoclave, el manómetro aumentará a 15 libras. Pero la
temperatura no habrá alcanzado los 121˚C Por esto se debe medir el tiempo
cuando la temperatura llegue a l21˚C.
4.- Cierra la válvula cuando el vapor sea continuo. La temperatura de l05°C
indica que está libre de aire. Vigila el termómetro. Cuando vaya en 120°C,
mantenla durante 15 minutos para que se efectúe la esterilización (15 libras
de presión). Transcurrido este tiempo se apaga.
5.-Deja enfriar hasta que el manómetro marque cero. Abre la válvula de salida
de vapor, para expulsar el vapor restante. Abre el autoclave y retira el material
6.- Si el material no está en estado líquido la válvula se puede abrir rápido a
la salida de vapor, pero si está en estado líquido la rápida pérdida de presión
las hace hervir o bien saltar los tapones. Por lo tanto se espera unos minutos
a que se enfríe perfectamente.
CUESTIONARIO.
1.- Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cuál no y ¿Porqué?
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2.- Qué tipo de material se puede esterilizar por calor húmedo?______________
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3.- A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen todas las formas
vegetativas?________________________________________________________________
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4.- A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas?
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5.- Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para
esterilizar por calor seco?___________________________________________________
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6.- Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para
esterilizar por calor húmedo?________________________________________________
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7.-Cómo actúa la esterilización por calor seco en los microorganismos?
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8.- Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos?
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9.- Qué tipo de esterilización es más recomendable y por qué?
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OBSERVACIONES:
Realiza esquemas y dibujos correspondientes a la esterilización por calor
húmedo que realizaste en la práctica.