Informe de investigación

¿Sabe cual es el alimento específico
para Proteger a cada Perro?
CACHORROS
razas pequeñas
todos los tamaños
de razas
razas grandes
ADULTOS
razas pequeñas
todos los tamaños
de razas
razas grandes
MAYORES
sobrepeso/obeso
piel sensible
DE 7 AÑOS
La última
tecnología
en protección
de cachorros
PURINA PRO PLAN
OptiStart Plus
®
PRESENTAMOS EL NUEVO
®
Co nt e ni d os
Las Claves de la Protección Pro Plan Puppy
4
El Período de Baja en la Inmunidad
6
La Mejor Protección para tu Cachorro
8
Comprobaciones detrás de OptiStart Plus
10
Informe de investigación
18
Nuestra filosofía
38
3
Las Claves de la Protección Pro Plan Puppy
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Los beneficios del calostro.
Términos clave en protección
Los cachorros enfrentan mucho estrés durante su primer año de vida,
lo cual puede afectar su salud desfavorablemente. Durante este período sufren
muchos cambios: una nueva casa, ser bañado por primera vez y recibir vacunas. El
estrés puede causar la supresión del sistema inmunológico y una alteración en el
tracto gastrointestinal, dos de los sistemas naturales de protección. Un alto número
de bacterias patógenas en el intestino y una disminución en la función protectora
de la barrera intestinal son algunas de las consecuencias del estrés. La nutrición
apropiada es primordial durante este período tan demandante de crecimiento y
desarrollo para ayudar a aliviar algo del estrés psicológico al cual los cachorros son
sujetos.
A medida que la ciencia nutricional avanza, se han identificado algunos nutrientes e
ingredientes que proporcionan mayores beneficios de lo que se pensaba debido a la
presencia de compuestos bioactivos que influencian positivamente tanto al sistema
inmunológico como al sistema gastrointestinal. El calostro bovino ha sido
identificado como un ingrediente inmuno-estimulador bioactivo. Estudios recientes
muestran que los anticuerpos naturales (también llamados inmunoglobulinas) y
otros factores de crecimiento bioactivos encontrados en el calostro pueden ayudar
a fortalecer el sistema inmunológico inmaduro de un cachorro. Puede ayudar a
balancear las bacterias benéficas y dañinas del intestino, lo cual no sólo promueve
la absorción de nutrientes facilitada por la microflora del colon, sino que también
disminuye el riesgo potencial de las infecciones, diarrea e inflamación intestinal.
Además, es una buena fuente de aminoácidos disponibles para la salud de las
células del intestino y la función de la barrera intestinal.
Ahora PURINA® PRO PLAN® Puppy ha sido formulado con OptiStart
Plus® , una mezcla única de ingredientes que incluye calostro bovino
inmuno-potenciador.
4
El Sistema Inmunológico
Es una red compleja de trabajo en el cuerpo diseñada para proteger contra invasores
externos que afectan negativamente el bienestar.
El trabajo del sistema inmunológico es reconocer y después repeler o destruir a los agentes
invasores tales como virus, bacterias, parásitos, alérgenos y toxinas. El sistema inmunológico
actúa sistemicamente en todo el organismo, pero también trabaja localmente para
proporcionar protección a sitios específicos del cuerpo como el sistema digestivo y el de piel
y pelaje.
El Sistema Digestivo
Las principales funciones del sistema digestivo son digerir y absorber nutrientes esenciales
que pueden ser utiilizados por otros sistemas de protección, así como también proteger el
cuerpo contra agentes dañinos (como bacterias y toxinas) que intenten entrar al cuerpo del
exterior (a través de la ingestión). En este papel, el sistema digestivo actúa no sólo como una
importante barrera física y química, sino que también proporciona defensas inmunológicas
críticas. De hecho, el sistema digestivo es el sitio principal para la respuesta del sistema
inmunológico del cuerpo, conteniendo hasta el 70% de todas las células de defensa del
organismo.
El Sistema de Piel y Pelaje
Tanto la piel como el pelaje tienen una variedad de funciones de protección que van desde
proporcionar una barrera física para el resto del cuerpo hasta defensas inmunológicas contra
las bacterias y toxinas que tratan de entrar al cuerpo del exterior (a través de la piel). La piel
es el órgano principal a través del cual el cuerpo interactúa con el medio ambiente. Protege
al cuerpo al limitar la pérdida de agua hacia el medio ambiente y retrasando o previniendo la
entrada de agentes no deseados.
5
El Período de Baja en la Inmunidad.
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Podemos ayudar a los cachorros
a acortar el período de baja en la inmunidad.
Cuando su madre lo estaba alimentando, el cachorro recibió anticuerpos de su leche que le dio cierto
nivel de inmunidad. Una vez destetado, sus niveles de anticuerpos disminuyen, dejando una baja en su
protección mientras su propio sistema inmunológico se desarrolla. La inmunidad en cachorros se
mantiene baja hasta los 5 meses de edad*. Esto significa que en el tiempo en el que el cachorro se va a
vivir con su nuevo dueño, se encuentra en el período de baja de la inmunidad.
Ahora los nutricionistas y Médicos Veterinarios de PURINA han desarrollado el Nuevo PURINA PRO
PLAN® Puppy con OptiStart Plus® que le ayuda a reforzar el período de baja de la inmunidad. Pro
Plan® Puppy con OptiStart Plus® contiene calostro, del cual se ha probado que sus anticuerpos
naturales mejoran el sistema inmunológico y ayudan al cachorro a reforzar la protección natural que su
madre le dio**. Además, estos anticuerpos naturales ayudan a balancear las bacterias "buenas" y
"malas" en su tracto digestivo, ayudándole a absorber los nutrientes de su alimento, a ganar peso y a
desarrollarse.
PURINA PRO PLAN® Puppy con OptiStart Plus®, ayuda a dar al cachorro una protección
natural con cada comida y el mejor comienzo posible para una vida larga y saludable.
Respuesta del sistema
inmunológico
Los niveles de inmunidad bajan
entre las 3 semanas y los
5 meses de vida.
PURINA PRO PLAN llena
el período de baja en
la inmunidad.
Nuestros ingredientes.
Ingredientes científicamente seleccionados
Los sistemas de protección del cachorro deben trabajar juntos y en
armonía para apoyar su salud general. Si el desempeño de uno de
ellos es menor al 100%, puede traerle problemas a todos los sistemas
del cachorro.
Cada uno de estos sistemas de protección puede trabajar
eficientemente cuando se le suministran niveles óptimos de
nutrientes esenciales.
Es por eso que los ingredientes naturales del alimento en todas las
fórmulas de PURINA PRO PLAN® con OptiStart Plus® son
científicamente seleccionadas para su efectividad en el cuidado de los
sistemas de protección del cachorro.
Algunos ingredientes benéficos para el organismo como el calostro -la
primera leche- vitamina E, ácidos grasos omega 3 y omega 6 y
vitaminas y minerales esenciales son incluidos en los niveles óptimos
para protección. Con pollo de alta calidad como primer ingrediente y
sin colorantes ni preservantes, PURINA PRO PLAN® con OptiStart
Plus® es tan palatable como nutritivo*.
** Datos en archive, 2006
*Ishikawa H, Tabuchi H, Ohashi E. Changes in the serum immunoglobulin concentrations in puppies. J. Vet Med. Japan. 1998; 51:801-805
** Datos en file, 2006
6
* Otros alimentos super premium sólo ofrecen harinas de subproductos de pollo ( principalmente vìsceras) o arroz como primer ingrediente y BHA
como conservante y antioxidante artificial en sus fòrmulas.
7
La Mejor Protección para los Cachorros
Además de reforzar los sistemas naturales de protección de los cachorros, el Nuevo PURINA PRO
PLAN con OptiStart Plus está especialmente formulado para satisfacer sus necesidades metabólicas
específicas basadas en el tamaño de su raza:
RECOMENDACIONES DE ALIMENTACIÓN DIARIA: 1 TAZA / RACIÓN DIARIA*
Nutrición con tecnología de punta para una protección completa.
• Anticuerpos naturales del calostro y otras proteínas de alta calidad que ayudan a extender la
protección de la madre durante el primer año formativo del cachorro.
• Proporción óptima de proteína y grasa que promueve un crecimiento saludable al desarrollar
músculos fuertes y magros sin excesos de grasa corporal.
• Ingredientes de calidad altamente digeribles como el pollo y el arroz aseguran una absorción
de nutrientes óptima y heces pequeñas y firmes.
• Una relación balanceada de calcio y fósforo ayudan a desarrollar huesos y dientes fuertes en
los cachorros en crecimiento.
• El DHA del aceite de pescado ayuda a mejorar el desarrollo del cerebro y la visión.
Nutrición con tecnología de punta para la protección de cachorros de raza pequeña.
• Anticuerpos naturales del calostro y otras proteínas de alta calidad que ayudan a extender la
protección de la madre durante el primer año formativo del cachorro.
• Con croquetas de menor tamaño y una nutrición concentrada, además de altos niveles de
proteína y calorías para satisfacer las necesidades metabólicas únicas de los cachorros de
razas pequeñas.
• Ingredientes de calidad altamente digeribles como el pollo y el arroz aseguran una absorción
de nutrientes óptima y heces pequeñas y firmes.
• Una una relación balanceada de calcio y fósforo ayudan a desarrollar huesos y dientes fuertes
en los cachorros en crecimiento.
• El DHA del aceite de pescado ayuda a mejorar el desarrollo del cerebro y la visión.
Nutrición con tecnología de punta para la protección de cachorros de raza grande.
• Los anticuerpos naturales del calostro y otras proteínas de alta calidad que ayudan a extender
la protección de la madre durante el primer año de formación del cachorro.
• Las croquetas más grandes, con alto contenido de proteínas de alta calidad y reducidos
niveles de grasa y calorías para satisfacer las necesidades metabólicas únicas de los cachorros
de razas grandes.
• Con una relación balanceado de calcio y fósforo que ayudan a desarrollar huesos y dientes
fuertes en los cachorros en crecimiento.
• Con DHA del aceite de pescado ayuda a mejorar el desarrollo del cerebro y la visión.
Peso del Perro
Adulto
1 1/2 - 3 meses
4 - 5 meses
6 - 8 meses
9 - 11 meses
Toy
(1,3-5,5 kg)
1/2 - 2/3 taza
(56-75 g)
2/3 - 1 taza
(75-112 g)
1/2 - 1 taza
(56-112 g)
Pro Plan Adult
Pro Plan Adult
Pequeño
(5,5-9 kg)
1/2 - 1 taza
(56-112 g)
1 - 1 1/3 tazas
(112-149 g)
2/3 - 1 tazas
(75-112 g)
1 taza
(112 g)
1 - 1 1/4 tazas
(112-140 g)
Mediano
(9-22,5 kg)
1/2 - 1 tazas
(56-112 g)
1 1/2 - 2 tazas
(168-224 g)
1- 1 2/3 tazas
(112-187 g)
2 tazas
(224 g)
2-3 tazas
(224-336 g)
Grande
(23,2-34,1 kg.)
1/2 - 1 2/3 tazas
(56-187 g)
1 1/2 - 2 3/4 tazas
(168-308 g)
1 1/3 - 2 2/3 tazas
(149-299 g)
Gigante
(34,1-45 kg)
3/4 - 2 1/2tazas
(84-280 g)
2 1/4 - 4 1/4 tazas
(252-476 g)
4 - 4 2/3 tazas
(448-523 g)
Extra Grande
(+45 kg)
2 1/2 tazas (280 g)
más 1/4 (28 g) por cada
4.5 kg de peso adicional.
4 1/4 tazas (476 g) 4 2/3 tazas (523 g)
más 1/3 (37 g) por cada
más 1/3 (37 g) por cada
4.5 kg de peso adicional.
4.5 kg de peso adicional.
1 - 2 años
2 1/3 - 3 1/3 tazas 2 1/2 - 4 1/3 tazas
(261-373 g)
(280-485 g)
6 1/2 - 8 tazas
(728-896 g)
5 1/3 - 7 2/3 tazas
(597-859 g)
8 tazas (896 g)
7 2/3 tazas(859 g)
RECOMENDACIONES DE ALIMENTACIÓN DIARIA: 1 TAZA / RACIÓN DIARIA*
4 - 5 meses
6 - 8 meses
1/2 taza (56 g)
1/2 taza (56 g)
1/2 taza (56 g)
Pro Plan Adult
Pro Plan Adult
Toy
(3,2-5,5 kg)
3/4 - 1 taza
(84-112 g)
1 taza
(112g)
1 taza
(112g)
1 taza
(112g)
1 taza
(112g)
Mediano
(5,9 - 9 kg)
1/2 - 1 taza
(56-112 g)
1 taza
(112 g)
1 taza
(112 g)
1 taza
(112 g)
Toy
(1,3-2,7 kg)
1 1/2 - 3 meses
1 - 1 1/4 taza
(112-140 g)
9 - 11 meses
1 - 2 años
*Cada taza contiene aproximadamente 112 g de Pro Plan® Puppy Small Breed (usando una taza de 250ml).
Las cantidades recomendadas son para un perro cachorro con un nivel de actividad normal. Recuerde que los requerimientos
de ingesta varían según la edad del perro, actividad o el entorno del mismo, y deberán ajustarse según esas condiciones.
RECOMENDACIONES DE ALIMENTACIÓN DIARIA: 1 TAZA / RACIÓN DIARIA*
Peso del Perro
Adulto
1 1/2 - 3 meses
4 - 5 meses
6 - 8 meses
Grande
23-34 kg
1 1/2 - 2 1/2 tazas
(165-275- g)
2 3/4 - 3 1/2 tazas
(300-385- g)
4 - 4 3/4 tazas
(440-520- g)
3 3/4 - 4 1/2 tazas
(410-495- g)
3 3/4 - 4 tazas
(410-440- g)
Grande
34,5-45 kg
2 1/2 - 3 2/3 tazas
(275-400 g)
3 1/2 - 4 1/2 tazas
(385-495 g)
4 3/4 - 5 1/2 tazas
(520-605 g)
4 1/2 - 5 1/2 tazas
(495-605 g)
4 - 4 2/3 tazas
(440-510 g)
Extra Grande
+45 kg
3 2/3 - 4 1/2 tazas
(400-495 g)
4 1/2 - 6 tazas
(495-660 g)
5 1/2 - 7 1/2 tazas
(520-825 g)
5 1/2 - 9 1/4 tazas 4 1/2 - 7 1/3 tazas
(605-1015 g)
(495-805 g)
9 - 11 meses
1 - 2 años
*Cada taza contiene aproximadamente 112 g de Pro Plan® Puppy Large Breed (usando una taza de 250ml).
Las cantidades recomendadas son para un perro cachorro con un nivel de actividad normal. Recuerde que los requerimientos
de ingesta varían según la edad del perro, actividad o el entorno del mismo, y deberán ajustarse según esas condiciones.
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ANÁLISIS GARANTIZADO
Proteína cruda (min.) 29,0%; Grasa cruda (min.) 18,0%;
Fibra cruda (max.) 3,0%; Humedad (max.) 12,0%; Ácido
linoleico (min.) 1,6%; Minerales (max.) 7,5%; Calcio
(min./max.) 1,0% / 1,4%; Fósforo (min./max.) 0,8% / 1,3%
más 1/3 (37 g) por cada más 1/3 (37 g) por cada
4.5 kg de peso adicional.
4.5 kg de peso adicional.
* Cada taza contiene aproximadamente 112 g de Pro Plan® Puppy Formula (usando una taza de 250ml).
Las cantidades recomendadas son para un perro cachorro con un nivel de actividad normal. Recuerde que los requerimientos
de ingesta varían según la edad del perro, actividad o el entorno del mismo, y deberán ajustarse según esas condiciones.
Peso del Perro
Adulto
INGREDIENTES: Pollo, Arroz de cervecería, Harina
de subproductos avícolas, Gluten de maíz, Trigo
molido, Maíz amarillo molido, Grasa de res preservada
con tocoferoles mezclados (fuente de vitamina E),
Salvado de maíz, Digesto animal (sabor natural de
pollo), Productos del huevo, Levadura seca de
cervecería, Sal, Aceite de pescado, Calostro vacuno
(fuente natural de anticuerpos), Fosfato bicalcico,
Citrato de potasio, Cloruro de colina, DL-Metionina,
Ácido ascórbico (fuente de vitamina C), Sulfato de
zinc, Sulfato ferroso, Suplementos vitamínicos (A,D-3,
E, B-12), Sulfato de manganeso, Niacina, Pantotenato
de calcio, Suplemento de riboflavina, Sulfato de cobre,
Biotina, Clorohidrato de piridoxina, Mononitrato de
tiamina, Ácido fólico, Complejo bisulfito menadiona
sódico (fuente de actividad de vitamina K), Iodato de
calcio, Selenito de sodio.
9
11
INGREDIENTES: Pollo, Arroz de cervecería, Harina
de subproductos avícolas, Harina de gluten de maíz,
Maíz amarillo molido, Grasa de res preservada con
tocoferoles mezclados (fuente de vitamina E), Digesto
animal (sabor natural de pollo), Salvado de maíz,
Productos del huevo, Levadura seca de cervecería,
Sal, Aceite de pescado, Calostro vacuno (fuente
natural de anticuerpos), Cloruro de potasio, L-lisina,
Fosfato bicalcico, Cloruro de colina, DL-Metionina,
Ácido ascórbico (fuente de vitamina C), Sulfato de
zinc, Suplementos vitamínicos (A,D-3, E, B-12), Sulfato
ferroso, Suplemento de riboflavina, Niacina,
Pantotenato de calcio, Sulfato de manganeso, Biotina,
Mononitrato de tiamina, Ácido fólico, Sulfato de cobre,
Clorohidrato de piridoxina, Complejo bisulfito
menadiona sodico (fuente de actividad de vitamina K),
Iodato de calcio, Selenito de sodio.
ANÁLISIS GARANTIZADO
Proteína cruda (min.) 32,0%; Grasa cruda (min.)
20,0%; Fibra cruda (max.) 3,0%; Humedad (max.)
12,0%; Ácido linoleico (min.) 1,8%; Minerales (max.)
7,5%; Calcio (min./max.) 1,0% / 1,4%; Fósforo
(min./max.) 0,9% / 1,3%
INGREDIENTES: Pollo, Arroz de cervecería, Harina
de subproductos avícolas, Maíz amarillo molido,
Harina de gluten de maíz, Trigo molido, Fibra de avena,
Grasa de res preservada con tocoferoles mezclados
(fuente de vitamina E), Digesto animal (sabor natural
de pollo), Productos del huevo, Levadura seca de
cervecería, Sal, Aceite de pescado, Calostro vacuno
(fuente natural de anticuerpos), Fosfato bicalcico,
Citrato de potasio, Cloruro de colina, L-lisina, Cloruro
de potasio, DL-Metionina, Ácido ascórbico (fuente de
vitamina C), Sulfato de zinc, Sulfato ferroso,
Suplementos vitamínicos (A,D-3, E, B-12), Sulfato de
manganeso, Niacina, Pantotenato de calcio,
Suplemento de riboflavina, Sulfato de cobre, Biotina,
Clorohidrato de piridoxina, Mononitrato de tiamina,
Ácido fólico, Complejo bisulfito menadiona sodico
(fuente de actividad de vitamina K), Iodato de calcio,
Selenito de sodio.
ANÁLISIS GARANTIZADO
Proteína cruda (min.) 28,0%; Grasa cruda (min.) 13,0%; Fibra
cruda (max.) 6,0%; Humedad (max.) 12,0%; Ácido linoleico
(min.) 1,6%; Minerales (max.) 7,5%; Calcio (min./max.) 1,0% /
1,4%; Fósforo (min./max.) 0,8% / 1,3%
Comprobaciones detrás de OptiStart Plus
..........................................
OptiStart Plus optimiza el sistema inmunológico
El nuevo PURINA® PRO PLAN® Puppy con OptiStartPlus® contiene anticuerpos
naturales del calostro, una de las formas de la leche de la vaca, que ayuda a reforzar
la protección que el cachorro recibió de la leche materna y que favorece el
desarrollo de sus sistemas de protección.
Una Fórmula Única.
PURINA®
PLAN®
Aumento significativo de la respuesta inmunológica.
Plus®
PRO
Puppy con OptiStart
está ahora formulado con una mezcla especial y
única de ingredientes que incluyen anticuerpos naturales del calostro, antioxidantes (como vitaminas
E y C), ácidos grasos (omega 3 y omega 6), minerales y vitaminas para ayudar a los cachorros a
protegerse mejor reforzando sus tres sistemas naturales de protección, permitiendo que trabajen
juntos de manera óptima.
Reducción del período de baja en la inmunidad.
Los anticuerpos naturales del calostro en esta nueva fórmula se combinan con los anticuerpos propios
del cachorro para ayudar a fortalecer su sistema inmunológico inmaduro y reducir el período de baja
en la inmunidad que se produce entre el destete y la etapa adulta, favoreciendo la autoprotección
contra riesgos potenciales de salud.
El GALT, tejido linfoide asociado del intestino, es el órgano inmunológico más grande del intestino.7
Aunque el neonato canino nace con un sistema inmunológico funcional, todavía se encuentra
inmaduro en el momento del nacimiento.8-3 Su respuesta ante cualquier estimulación inmunológica es
una primera exposición, que requerirá un período prolongado para producir inmunoglobulinas.
Mientras tanto, el cachorro es susceptible a las infecciones. Durante este período de transición, la
ingestión del calostro y la leche materna es crítica no sólo para proteger la salud del cachorro, sino
para el desarrollo del tracto gastro-intestinal. El calostro proporciona inmunoglobulinas y otros
factores bioactivos del crecimiento que estimulan el desarrollo del tracto Gastroentérico19.
10
Los anticuerpos naturales del calostro científicamente probados aumentan la respuesta
inmunológica en un 50 %.
El rol de los anticuerpos naturales y otros ingredientes bioactivos del calostro.
El calostro utilizado en OptiStart Plus® se produce de acuerdo a estrictos estándares de
elaboración y de salud animal. Proviene de instalaciones agropecuarias lecheras certificadas por
la USDA y la FDA.
Es recolectado y procesado dentro de las 12 horas de su producción en vacas alimentadas con
dietas sin hormonas sintéticas, pesticidas ni antibióticos.
Numerosos estudios sugieren que varios componentes de la leche son bioactivos debido a sus
efectos positivos en la salud. Por ejemplo, los componentes de la leche bovina representan una
manera potencialmente útil para modular la microflora intestinal y la inmunidad. El calostro bovino
y la fracción de suero (un complejo rico en proteína derivado de la leche bovina) contienen no
sólo inmunoglobulinas sino también lactoferina, b-lactoglobulina y a-lactoalbumina. Todos éstos
han demostrado modular la función inmunológica así como la microflora intestinal.11-18
11
Comprobaciones detrás de OptiStart Plus
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OptiStart Plus® optimiza el sistema digestivo
Ayuda a prevenir temas relacionados con el estrés que resultan del destete.
La respuesta inmunológica.
Perros alimentados con un tratamiento que contenía inmunoglobulinas naturales y otros agentes bioactivos
del calostro tuvieron estadísticamente mejores respuestas a las vacunas que los logrados en el grupo control
[p<0.05] y claramente continúan manteniendo el punto máximo en la respuesta a las vacunas por otros siete
meses, y lo hicieron hasta el final de la prueba. En resumen, este grupo tuvo y mantuvo una respuesta de
anticuerpos de un 50 % o más al Virus del moquillo Canino pero también fue un indicador de un sistema de
respuesta mejorado. Mantener el sistema inmunológico preparado significa una respuesta más rápida y fuerte
cuando el cuerpo está expuesto a los patógenos.
Estos datos indican claramente que mientras el calostro aumentó una respuesta inmunológica específica
(como la indicada por la respuesta a la vacuna del Virus del moquillo Canino), no hubo ninguna sobre
estimulación en el sistema inmunológico causada por las dietas. Esto es un signo de un sistema inmunológico
saludable, que responde sólo cuando es retado. Los animales alimentados con dietas suplementadas con
calostro responderán bien a un desafío inmunológico tal como la exposición a una infección, pero no sufrirán
de un sistema inmunológico hiperactivo.
El destete está asociado con cambios de gran escala en la composición de la microflora del TGI.
La habilidad de organismos patógenos o benéficos para establecerse es mucho mayor durante este
período de transicóin en la microflora.19-20
El estrés adicional luego del destete puede causar cambios en la población de la microflora,
aumentando la población de bacterias patógenas y disminuyendo la función de la
barrera intestinal protectora.
Una gran cantidad de investigaciones han demostrado la importancia del calostro para ayudar a
establecer una población de microflora intestinal saludable.
Mantener el equilibrio digestivo.
Los anticuerpos naturales también ayudan a estabilizar el sistema digestivo en desarrollo del cachorro
al mantener el equilibrio en el tracto digestivo para ayudar a prevenir la diarrea relacionada con el
estrés y optimizar la absorción de nutrientes.
La estabilidad de la microflora intestinal
Los cachorros alimentados con la dieta del tratamiento tuvieron más similitud en su población
microbiana en los diferentes tiempos de muestreo. Estos descubrimientos indican una estabilidad en
la población microbiana al enfrentarse al estrés, lo que nos lleva a una absorción de nutrientes
optimizada y disminución en la susceptibilidad a la diarrea inducida o relacionada al estrés.
12
13
Comprobaciones detrás de OptiStart Plus
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OptiStart Plus® optimiza el sistema de piel,
pelaje y la salud en general.
Balanceando las bacterias buenas y malas.
Los anticuerpos naturales del calostro encontrados en OptiStart Plus® balancean las cantidades de
bacterias buenas y malas en el tracto digestivo del cachorro y aumentan la respuesta inmunológica
para ayudar a resistir enfermedades comunes del intestino como diarrea.
El destete está asociado con cambios de gran escala en la composición de la microflora del TGI.
La habilidad de organismos patógenos o benéficos para establecerse es mucho mayor durante este
período de transición de la microflora.19-20
El estrés adicional después del destete puede causar aumentos en la población de la microflora,
aumentar el desprendimiento de bacterias patógenas y una disminución en la función protectora de la
barrera intestinal.
Una gran cantidad de investigación demuestra la importancia del calostro en ayudar a establecer una
población de microflora intestinal saludable.
Reforzando la piel y el pelaje.
Los ácidos grasos omega 3 y omega 6, junto con las vitaminas y minerales como el cobre, zinc y
selenio, promueven el crecimiento de las células de la piel que da como resultado una piel más
gruesa y elástica que ayuda a protegerlo de amenazas externas.
Ingredientes de alta calidad para obtener mejores resultados.
Con ingredientes de alta calidad, que incluyen pollo y arroz altamente digestibles, aseguran una
óptima absorción de nutrientes, lo que da como resultado menor desperdicio y heces pequeñas y
firmes.
Nutrición para un comienzo perfecto.
• Con una proporción balanceada de calcio y fósforo que ayuda a los cachorros en crecimiento a
desarrollar huesos fuertes y dientes saludables.
• El DHA, como el que se encuentra en la leche materna, ayuda a los cachorros a lograr el
desarrollo óptimo de la visión y el cerebro.
14
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Comprobaciones detrás de OptiStart Plus
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Conclusiones.
Sistema inmunológico.
Una dieta completa y balanceada, suplementada con calostro, aumentó el status de la inmunidad
sistémica de los cachorros, como se demostró a través de las respuestas significativamente más
altas a la vacuna del Moquillo Canino sin causar una sobreactivación inmunológica. Los niveles de
CRP en el rango normal junto con la ausencia de cambios en el total plasmático de IgA, IgG e IgM
validan este resultado. El sistema inmunológico de los perros alimentados con la dieta que contiene
calostro es más probable que responda mejor cuando está expuesto a un agente infeccioso o a
vacunas administradas como parte de la rutina del cuidado veterinario.
Referencias:
17 Wong CW, Seow HF, Husband AJ, Regester GO, Watson DL (1997) Effects of purified
1 Heird WC, Schwarz SM, Hansen IH. Colostrum induced enteric mucosal growth in
bovine whey factors on cellular immune functions in ruminants. Vet Immunol
beagle puppies . Pediatric Res. 1984; 18:512-515
Immunopathol 56:85-96.
2 Ishikawa H, Tabuchi H, Ohashi E. Changes in the serum immunoglobulin
18 Otani H, Horimoto Y, Monnai M (1996) Suppression of interleukin -2 receptor
concentrations in puppies. J. Vet Med. Japan. 1998; 51:801-805
expression on mouse CD4+ T cells by bovine kappa caseinoglycopeptide. Biosci
3 Scott DW, Miller WH, Griffin CE, eds. Nutritional skin diseases. In: Muller and Kirk's
Biotech Biochem 60:1017-1019.
Small Animal Dermatology. Philadelphia: WB Saunders; 2001:1112-1124.
19 Buddington RK (2003) Postnatal changes in bacterial populations in the
4 Ishikawa H, Tabuchi H, Ohashi E. Changes in the serum immunoglobulin
gastrointestinal tract of dogs. Am J Vet Res 64:646-651.
concentrations in puppies. J. Vet Med. Japan. 1998; 51:801-805
20 Cebra JJ (1999) Influences of microbiota on intestinal immune system development.
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6 Gopal PK and Gill MS (2000). Oligosaccharides and glycoconjugates in bovine milk
and colostrum. Br. J Nutr 2000; 84:S69-S74.
7 Bauer JE, Heinemann KM, Bigley KE, et al. (2004) Maternal diet - linoleic acid during
gestation and lactation does not increase docosaexaenoic acid in canine milk. J Nutr
134:2035S-2038S
8 Kelley RL, Lepine AJ, Burr JR, et al. (2004) Effect of dietary fish oil on puppy
Sistema digestivo.
Hubo un aumento en la consistencia de la población bacterial en el intestino a pesar de los eventos
estresantes, lo que nos lleva a tener población estable en la flora intestinal de los cachorros
alimentados con calostro, la cual puede ayudar a prevenir problemas intestinales. Además, los
cachorros alimentados con calostro tuvieron un nivel de IgA fecal más alto, lo cual indica un alto
funcionamiento en el sistema inmunológico intestinal contra los perros control. Los anticuerpos
naturales y otros bioactivos en el calostro ayudan a balancear las bacterias intestinales buenas y
las potencialmente dañinas. Al estabilizar la microflora intestinal, el calostro promueve una
absorción de nutrientes facilitada por la microflora fecal y disminuye el riesgo potencial a
infecciones y diarrea, así como la inflamación intestinal.
trainability. Proc International Society for the Study of Fatty Acids and Lipids. June 20July 1. Brighton, UK. Abstr 1-5
9 Toman M, Faldyna M, Knotigova P, et al. (2002) Postnatal development of leukocyte
subset composition and activity in dogs. Vet Immunol Immmunopathol 87:321-326
10 Jensen RG. Handbook of Milk Composition. Academic Press, San Diego 1995.
11 Otani H and Monnai M(1993) Inhibition of proliferative responses of mouse spleen
lymphyocytes by bovin milk kappa-casein digests. Food Agric Immunol 5:219-229
12 Otani H and Hata I (1995) Inhibition of proliferative responses of mouse spleen
lymphyocytes and rabbit Peyer's patch cells by bovine milk caseins and their digests.
JDairy Res 62:339-348
13 Otani H and Odashima M (1997) Inhibition of proliferative responses of mouse
spleen lymphyocytes by lacto- and ovotransferrins. Food Agric Immunol 9:193-201
14 Otani H, Monnai M, Hosono A (1992) Bovine Kappa-casein as inhibitor of the
proliferation of mouse splenocytes induced by lipopolysaccharide stimulation.
Milchwissenschaft 47:512-515.
15 Otani H, Monnai M, Kawasaki Y, Kawakami H, Tanimoto M (1995) Inhibition of
mitogen-induced proliferative responses of lymphocytes by bovine kapacaseinopeptides having different carbohydrate chains.
J Dairy Res 62:349-357.
16 Wong CW, Seow HF, Liu AH, Husband AJ, Smithers GW, Watson DL (1996)
Modulation of immune responses by bovine beta-casein. Cell Biol 74:323-239
16
17
Informe de investigación
....................................................................................................
Efectos beneficiosos de los anticuerpos
naturales en los perros
Los cachorros afrontan muchos factores estresantes durante su primer año de vida, los cuales
pueden afectar su salud de manera adversa. Durante este primer año, los cachorros se someten a
muchísimos cambios que abarcan desde ir a un nuevo hogar, a ser bañado por primera vez, hasta
recibir vacunas; todos estos hechos pueden llegar a ser estresantes para un cachorro. El estrés
puede producir la inhibición del sistema inmunológico y una alteración en el tracto gastrointestinal,
dos de los sistemas naturales de protección. Una mayor cantidad de bacterias patógenas en el
intestino y la disminución en la función protectora de la barreraintestinal son algunas de las
ramificaciones producidas por el estrés. Por lo tanto, es vital una nutrición apropiada durante este
período de crecimiento y desarrollo tan demandante con el fin de ayudar a atenuar algo del estrés
fisiológico al cual los cachorros se encuentran sujetos.
A medida que la ciencia de la nutrición ha avanzado, se han identificado ciertos nutrientes e
ingredientes como proveedores de más beneficios al animal de lo que antes se creía debido a la
presencia de compuestos bioactivos que influyen positivamente tanto en el sistema inmunológico
como en el sistema gastrointestinal. El calostro bovino se ha identificado como uno de esos
compuestos bioactivos que son estimuladores inmunológicos [Gopal P K, and Gill HS. 2000].
Investigaciones recientes han demostrado que los anticuerpos naturales (también llamados
inmunoglobulinas) y otros factores bioactivos de crecimiento encontrados en el calostro pueden
contribuir a fortalecer el sistema inmunológico inmaduro del cachorro. El calostro ayuda a
equilibrar las bacterias beneficiosas y perjudiciales en el intestino, lo cual no sólo promueve la
absorción de nutrientes facilitada por la microflora colónica, sino que también disminuye el
Ahora, Purina® Pro Plan® Puppy ha sido formulado con Optistart Plus®, una
combinación única de ingredientes entre los cuales se encuentra el calostro
bovino que mejora la inmunidad.
18
potencial de que se produzca una infección, una diarrea o una inflamación intestinal. Asimismo, es
una buena fuente de aminoácidos de fácil disponibilidad para la salud de las células intestinales y la
función de la barrera intestinal.
Funciones inmunológicas del tracto gastrointestinal pediátrico
Existen varias funciones de protección del tracto gastrointestinal (GI) que ayudan a prevenir la
invasión de patógenos y a neutralizar las toxinas. Estas complejas funciones de protección se
llevan a cabo mediante medios físicos (no inmunológicos) como así también inmunológicos.
Específicamente, el tracto GI posee cuatro defensas principales: la digestión, las barreras físicas, el
tejido linfoide asociado al intestino, y la microflora.
La digestión puede ayudar a eliminar los patógenos potenciales. La extrema acidez del estómago
destruye muchos organismos, mientras que otros son destruidos por las enzimas digestivas del
estómago y los intestinos.
Cuando los cachorros nacen, se produce un cambio abrupto en la función de la barrera intestinal ya
que el intestino cambia de procesar líquido amniótico a digerir leche. La transición a una barrera
física totalmente funcional se completa en algún momento entre las 12 semanas y las 22 semanas
de vida [Weber, 2002]. Con el fin de funcionar más eficazmente, las células de la mucosa intestinal
requieren grandes cantidades de glutamina para el combustible de las células, la producción
celular y la función óptima de la barrera. La glutamina se puede sintetizar a partir de los
aminoácidos de cadena ramificada y de otros aminoácidos esenciales encontrados en el calostro
[Ha and Zemel 2003].
El tejido linfoide asociado al intestino (GALT, por su sigla en inglés) es el órgano inmunológico más
grande en el cuerpo [Bauer et al., 2004]. Si bien el cachorro nace con un sistema inmunológico
funcional, éste es aún inmaduro e inexperto al momento del nacimiento [Kelley et al., 2004 y Toman
et al., 2002]. Su respuesta a cualquier inmunoestimulación se da en la primera exposición,
19
Informe de investigación
....................................................................................................
IgA Fecal
requiriendo un período prolongado para producir inmunoglobulinas. Mientras tanto, el cachorro se
encuentra susceptible a una infección.
Durante este período de transición, la ingesta tanto del calostro como de la leche de la madre es
crucial no sólo para proteger la salud del cachorro, sino también para el desarrollo de su tracto GI.
El calostro provee inmunoglobulinas y otros factores bioactivos de crecimiento que estimulan
el desarrollo del tracto GI [Jensen RG. 1995; Fox PF, y Flynn A. 1992].
En los casos en los cuales el calostro canino no se encuentra disponible para los cachorros recién
nacidos, el calostro bovino puede constituir una alternativa adecuada. Aun en cachorros
completamente destetados, el calostro bovino puede producir beneficios. Se sugiere que los
compuestos bioactivos tales como las inmunoglobulinas y los factores de crecimiento pueden brindar
protección del lumen también en los cachorros de mayor edad.
Los cachorros destetados a los cuales se les suministró una suplementación con calostro bovino
durante 10 días después de haber llegado al pet shop experimentaron una mejora en la calidad de la
materia fecal [Gifford et al., 2004]
Otros estudios han demostrado en cachorros
destetados y en crecimiento un beneficio al
ESTIMULACIÓN DEL SISTEMA
INMUNE DE LAS MUCOSAS
incluir inmunoglobulinas en la dieta, utilizando
huevos de gallina hiperinmunizados. La
1.5
alimentación con huevo en polvo enriquecido
1
con inmunoglobulinas produjo una mejor salud
0.5
digestiva (estabilización de la microflora
0
intestinal) y la estimulación del sistema
inmunológico de la mucosa [Reynolds and
Dieta de control
Tratamiento con
Knorr, 2006] (Figura 1).
inmunoglobulinas naturales
Figura 1.
Otra importante parte del sistema de defensa
Estimulación del sistema inmunológico de la mucosa
con inmunoglobulinas naturales provenientes de huevo
del tracto GI es la microflora residente que
en polvo hiperinmunizado
20
habita en el lumen intestinal. El tracto GI del recién nacido es
estéril, pero rápidamente comienza a acumular microflora. La
composición de esta población impacta profundamente en la salud
inmunológica.
La microflora como modulador inmunológico del intestino
Uno o dos días después del nacimiento, todo el tracto digestivo del
recién nacido se encuentra poblado con microorganismos
provenientes del medio ambiente, los cuales se transmitieron
principalmente a partir del calostro de la hembra [Martin et al., 2003].
Mediante la fermentación en el intestino, las bacterias colónicas
producen una amplia gama de compuestos que afectan tanto la
fisiología del intestino como, a una mayor escala, otros sistemas del
cuerpo. Los microorganismos que promueven la salud actúan
mediante la estimulación del sistema inmunológico de protección
tanto de manera local en el intestino como a nivel de todo el cuerpo.
La microflora GI cumple una función crucial en el desarrollo del
sistema inmunológico del huésped [Bauer, 2004; Cebra, 1999;
Deplancke and Gaskins, 2001; Bourlioux et al., 2003] y es el principal
estímulo para el desarrollo del GALT. Asimismo, estas "bacterias
buenas" sintetizan vitaminas, inhiben el crecimiento de bacterias
perjudiciales, y colaboran en la digestión. Por otro lado, las
bacterias perjudiciales / patógenas pueden ocasionar diarrea,
producir carcinógenos o compuestos intestinales putrefactivos que
causan flatulencia y malestares intestinales.
El destete se encuentra asociado a cambios en gran escala en la
21
Informe de investigación
....................................................................................................
composición de la microflora GI. La capacidad de organismos beneficiosos y patógenos para
establecerse es mucho mayor durante este período de transición de la microflora [Buddington, 2003
and Cebra, 1999]. El estrés adicional después del destete puede producir cambios en la población
microbiana, mayor propagación de bacterias patógenas, y una menor función protectora de la barrera
intestinal.
Gran cantidad de investigaciones demuestran la importancia del calostro en ayudar a establecer una
población saludable en la microflora intestinal. Estudios realizados en seres humanos muestran que
los bebés alimentados con pecho poseen un predominio de bacterias beneficiosas (bifidobacterias y
lactobacilos) y menor pH de la materia fecal en comparación con aquellos alimentados con una
fórmula a base de leche de vaca pasteurizada.
La microflora intestinal endógena compite con los patógenos y brinda un ambiente que favorece a las
bacterias beneficiosas. Además de la barrera física suministrada por las membranas mucosas que
recubren el tracto GI y el poder inmunológico del GALT, la microflora intestinal desempeña un papel
muy importante como parte del sistema de defensa natural del cuerpo.
El rol de los anticuerpos naturales y de otros ingredientes bioactivos
encontrados en el calostro.
El calostro utilizado en Optistart Plus se produce de acuerdo con estrictos estándares de fabricación
y salud animal. El calostro proviene de explotaciones vacunas que se encuentran certificadas por el
Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA, por su sigla en inglés) y por la Dirección
de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA, por su sigla en inglés) y se lo recoge
dentro de un período de 12 horas de producción a partir de vacas que son alimentadas con dietas
libres de hormonas sintéticas, pesticidas y antibióticos. Una vez recogido el calostro, se lo pulveriza
en seco utilizando métodos que ayudan a asegurar la biodisponibilidad de los componentes
bioactivos y factores nutricionales. Cada lote de calostro se somete a pruebas para verificar una
variedad de componentes. Utilizando análisis microbiológicos y químicos húmedos, se realizan
pruebas al calostro y se confirma el resultado negativo en cuanto a residuos de antibióticos,
pesticidas y bacterias patógenas. Se utiliza infrarrojo cercano (NIR, por su sigla en inglés) para
evaluar las proteínas, la grasa, la ceniza de lactosa y el contenido de humedad. La inmunodifusión
radial, el ensayo inmunoabsorbente ligado a las enzimas (ELISA, por su sigla en inglés) y la
cromatografía líquida de alta presión (HPLC, por su sigla en inglés) se utilizan para determinar el
contenido de compuestos bioactivos del calostro.
Se están conduciendo nuevas investigaciones a fin de analizar el uso de ingredientes específicos o
compuestos bioactivos en el calostro para mejorar la inmunidad y modular la microflora intestinal
tanto en cachorros como en perros adultos. El calostro es una combinación de secreciones de la
glándula mamaria y proteínas transmitidas del flujo sanguíneo [Tizard, 2004]. La composición del
calostro está dictaminada por la estructura de la placenta. Los perros poseen placenta
endoteliocorial, por ende, existeaproximadamente un 5 – 10 % de IgG transmitido de la hembra al feto.
En las vacas hay cero transferencias de inmunoglobulinas debido a que las vacas poseen placentas
sindesmocoriales. Por lo tanto, la composición del calostro bovino es diferente; provee más IgG e
IgM y menos IgA que el calostro canino. Muchos estudios
sugieren que varios componentes de la leche son
bioactivos debido a sus efectos positivos para la salud. Por
Proteína
ejemplo, los componentes de la leche bovina representan
del suero:
20 %
una manera potencialmente útil de modular la microflora e
inmunidad intestinal. El calostro bovino y la fracción de
suero (un complejo rico en proteínas derivado de la leche
Caseína: 80 %
bovina) contienen no sólo inmunoglobulinas sino también
lactoferrina, (Figura 2).
La lactoferrina inhibe la microflora indeseable al secuestrar
Composición de la proteína de la leche
el hierro en el intestino [Arnold, 1977], mientras promueve
Proteína del suero: 20 % Caseína: 80 %
el crecimiento de las bacterias beneficiosas, lactobacilos y
Figura 2. Composición del calostro y el suero
22
23
Informe de investigación
....................................................................................................
bifidobacterias [Artym and Zimecki, 2005]. El glicomacropéptido se conoce por regular el apetito así
como también por actuar como un prebiótico e inmunoestimulante [Brody, 2000], y los factores de
crecimiento (por ejemplo, el factor transformante de crecimiento- crecimiento similar a la insulina
[IGF, por su sigla en inglés]) desempeñan un importante papel para mantener la pared intestinal
saludable [Donnet-Hughes et al., 2000, Murphy 1998, Ko et al., 1997, Dignass and Sturm, 2001, y Chen
et al., 1999].
Las inmunoglobulinas son moléculas con forma de Y; el brazo más corto de la Y se denomina
fragmento Fab (sigla en inglés correspondiente a fragmento de fijación al antígeno) y el cuerpo más
largo se denomina región Fc (fragmento cristalino).
La región Fab se fija a antígenos específicos, mientras que la región Fc es responsable de la mayoría
de la actividad biológica y de interactuar con las células inmunológicas [Abbas and Lichtman, 2006].
Trabajos realizados en seres humanos y en ratones confirman que gran parte de las inmunoglobulinas
introducidas en el intestino permanecen intactas a través del estómago hacia el intestino delgado
donde residen las células inmunológicas. De hecho, una leve desnaturalización puede en realidad
mejorar la capacidad de la región Fc para fijar células inmunológicas y estimular el sistema
inmunológico [Hammarstrom and Robertson 1997; Kelly et al. 1997; Yokoyama et al., 1993; Blum et al.,
1981]. Cuando el calostro se entrega junto con una dieta completa y equilibrada como Pro Plan Puppy
Optistart Plus existe una amplia matriz alimentaria disponible para la degradación por parte de las
enzimas del estómago y menor pH. Las inmunoglobulinas son pequeñas y, por lo tanto, el estómago
no las considera con una alta prioridad para ser procesadas antes de que ingresen al intestino
delgado.
Basándose en estudios realizados en otras especies, los componentes relevantes de las
inmunoglobulinas permanecen intactos a través de la digestión y poseen un efecto inmunomodulador
positivo sobre la digestión. Por lo tanto, el beneficio fundamental de las inmunoglobulinas es su
capacidad para fijarse a las células inmunológicas del intestino y estimular el sistema inmunológico,
mejorando así el estado de inmunidad.
24
Estudios de investigación identifican beneficios de los anticuerpos naturales
Recientemente, Nestlé Purina ha evaluado el beneficio de incluir fuentes naturales de
inmunoglobulinas en sus dietas para cachorros [Reynolds and Knorr, 2006]. En un estudio, se utilizó
polvo de huevo hiperinmunizado como fuente de inmunoglobulinas naturales. El huevo en polvo
hiperinmunizado se produjo al inmunizar a las gallinas contra diversos patógenos, entre ellos:
Salmonella sp., E. coli, Clostridium sp., y rotavirus, y al procesar los huevos obtenidos de manera tal
que conservaran sus inmunoglobulinas y su valor biológico natural. En este estudio, dos grupos de 18
cachorros de raza Alaskan Husky (edades: 12 – 16 semanas) sometidos a un programa de ejercicios
controlados se alimentaron con dietas idénticas excepto por el agregado de huevo en polvo
hiperinmunizado. La suplementación con huevo en polvo en la dieta:
a) Incrementó los niveles de IgA en la materia fecal. Una mayor cantidad de IgA en la materia fecal
indica una estimulación inmunológica de la mucosa en el tracto GI, en otras palabras, un efecto
localizado, que respalda la función de protección del intestino.
b) Estabilizó la microflora intestinal. Una flora intestinal estable ayuda a optimizar la absorción de
nutrientes y a reducir la diarrea relacionada con o inducida por el estrés.
Los beneficios en el tracto gastrointestinal hallados en este primer estudio condujeron a Nestlé
Purina a evaluar otros ingredientes potenciales que no sólo permitan un sistema digestivo e
inmunológico local más saludable, sino que también brinden una respuesta inmunológica sistémica
positiva. Por lo tanto, Nestlé Purina ha evaluado la capacidad del calostro para mejorar la inmunidad
y la salud del intestino en los perros. El calostro se evaluó debido a que, del mismo modo que el
huevo en polvo hiperinmunizado, contiene inmunoglobulinas naturales como así también otros
componentes bioactivos.
25
Informe de investigación
....................................................................................................
Metodología:
Dietas y recolección de muestras
Veinticuatro perros adultos de raza cruzada con Alaskan Husky se
colocaron en un régimen pre-prueba. Todos los perros se
alimentaron con un alimento para cachorros completo y equilibrado
(Pro Plan Puppy Chicken and Rice) durante el período anterior a la
prueba que se prolongó por ocho semanas. Después de cuatro
semanas en el período de pre-prueba, se tomaron las mediciones
base o de punto de partida y los perros se separaron en grupos para
las diferentes dietas basándose en su peso, edad, sexo y estado
inmunológico inicial (Figura 3).
Pre-prueba
Prueba
período de prueba de 40 semanas. Todos los perros recibieron el refuerzo de la vacuna contra el
moquillo canino (VMC) en la semana 0. Mensualmente se recolectaron muestras de sangre y materia
fecal para su análisis (Tabla 1); también se registraron los pesos corporales. Los perros realizaron
ejercicios tres días a la semana durante las 40 semanas en que consistió el estudio. Las sesiones de
ejercicios comenzaron con tres millas y gradualmente se incrementaron a catorce millas por sesión.
En la semana 38, los perros se sometieron a un protocolo de estrés leve con el fin de evaluar la
respuesta inmunológica durante un hecho estresante. El protocolo de estrés consistió en un período
de descanso de 2 días seguido de una carrera de 10 millas en un arnés deslizando a un conductor
sobre un trineo. Cada equipo estaba formado por una combinación lo más similar posible de perros
de control y de tratamiento. Se recolectaron hisopados rectales para el análisis mediante
electroforesis en gel con gradiente temporal de temperatura (TTGE, por su sigla en inglés) en los
perros un día antes del hecho estresante, justo antes de comenzar el hecho estresante e
inmediatamente después del hecho estresante, un día después, y 3 días después del hecho
estresante para estudiar el efecto de este estrés sobre los perfiles microbianos.
Sangre
Análisis completo
-4 sem.
0 sem.
20 semanas
38 sem. 40 sem.
Muestras mensuales
Figura 3. Línea cronológica del proyecto
Al finalizar el período pre-prueba, la semana 0, los perros se
alimentaron o bien con la misma dieta
utilizada en el período pre-prueba (Grupo de control) o con la misma
dieta suplementada con calostro (Grupo de tratamiento) durante un
26
Análisis de muestras
Materia fecal
IgA
IgA
Calidad de las deposiciones
IgM
Toxina A de C. perfringens
IgG
Salmonella
Proteína C reactiva
E. coli
Títulos de moquillo canino
Proteínas
Tabla 1.
Parámetros medidos a intervalos de 4 semanas
27
Las muestras de sangre y de materia fecal
se obtuvieron a intervalos regulares y se
llevó a cabo una secuencia de ensayos para
determinar el efecto de los tratamientos
dietarios sobre la salud inmunológica e
intestinal.
A fin de medir la salud inmunológica,
mensualmente se midieron los anticuerpos
específicos de la vacuna contra el VMC y en
las semanas 0, 20 y 40 se midieron los
Informe de investigación
....................................................................................................
niveles de la IgA en la materia fecal. Para las mediciones de la IgG específica de la vacuna contra el
VMC se utilizó un ensayo ELISA desarrollado internamente. Resumiendo, una placa de 96 hoyos se
recubrió con el Virus del Moquillo Canino (marca VMRD Inc, 210-80-CDV) se dejó durante toda la
noche a 4°C con una disolución 1:1000 de solución salina amortiguada con fosfato (PBS, por su sigla
en inglés) y luego se lavó con el amortiguador de lavado PBS-Tween 20. Los lugares de fijación se
bloquearon con el amortiguador ELISA durante 2 horas a 37°C y luego se utilizó PBS-Tween 20 para
lavar. Las muestras se colocaron en los hoyos y se incubaron durante 2 horas a 37°C; luego se
lavaron con PBS-Tween 20. La placa se incubó con una disolución 1:10.000 de anticuerpo secundario
anti IgG canina (marca Bethyl, A40-118P) conjugado con peroxidasa de rábano picante (HRP, por su
sigla en inglés) en amortiguador ELISA durante 1 hora a 37°C; luego se lavó con PBS-Tween 20.
Continuó el desarrollo con 50 µl de un sistema de sustrato peroxidasa tetrametilbenzidina (TMB)
(marca KPL, 50-76-00) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La reacción se detuvo con 50
µl de 1 M de ácido sulfúrico. El desarrollo del color se leyó a 450 nm y los resultados se expresaron
como valores DO (densidad óptica; OD en inglés).
A fin de descartar la sobre-estimulación del sistema inmunológico, se midió la proteína C reactiva
(PCR) a la semana 40 y se midieron mensualmente los niveles totales en plasma de IgG, IgA e IgM. La
PCR se midió utilizando un kit para PCR canina [BD. Canine CRP ELISA Kit, BD Bioscience, San José,
CA] en muestras que se tomaron durante el final de la prueba.
Para las mediciones de los niveles totales en plasma de IgG, IgM e IgA se utilizaron kits ELISA para
IgG en perros, IgM en perros e IgA en perros de Bethyl Labs [Bethyl, Inc. Montgomery, Texas 77356
http://www.bethyllabs.com] de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Para el análisis de la IgA en la materia fecal, se recubrió una placa de 96 hoyos dejándola durante
toda la noche a 4°C con una disolución 1/100 de anti IgA canina de ratón (marca Serotec, MCA631) en
50 µl de amortiguador de borato y luego se lavó con PBS-Tween 20. La composición del amortiguador
de borato era 6,2 g/l H3BO3, 9,54 g/l Na2B4O7 x 10 H20, 4,4 g/l NaCl, pH 7. Los lugares de fijación libre
se bloquearon con 100 µl de PBS conteniendo 5 % de suero de feto de ternero (FCS, por su sigla en
28
inglés) y 0,1 % de Tween 20 (amortiguador ELISA) durante 1 hora a 37°C. El doble de la materia fecal
se incubó con amortiguador ELISA (volumen final 50 µl) durante 2 horas a 37°C y luego se lavó con
PBS-Tween 20. La placa se incubó con una disolución 1/10.000 de anticuerpo policlonal de cabra anti
IgA canina conjugado con HRP (marca Serotec, AAI31P) en amortiguador ELISA (volumen final 50 µl)
durante 1 hora a 37°C; luego se lavó con PBS-Tween 20. Continuó el desarrollo con 50 µl de un
sistema de sustrato peroxidasa tetrametilbenzidina (TMB) (marca KPL, 50-76-00) de acuerdo con las
instrucciones del fabricante. La reacción se detuvo con 50 µl de 1 M de ácido fosfórico. El
desarrollo del color se leyó a 450 nm y los resultados se expresaron como valores DO. Los valores de
la IgA en la materia fecal se normalizaron con el contenido de proteína total. Dicho contenido se
midió utilizando un kit para el ensayo de proteínas con ácido bicinconínico (BCA, por su sigla en
inglés) (marca Pierce, 23225).
A fin de medir la salud del intestino, se llevó a cabo un perfil de la microflora intestinal utilizando
métodos de cultivo microbiológicos estándar como así también herramientas tales como la
electroforesis en gel con gradiente temporal de temperatura (TTGE, por su sigla en inglés).
El efecto de la dieta sobre la microflora de la materia fecal se analizó utilizando medios selectivos y
no selectivos. Las muestras para la caracterización de las bacterias aeróbicas se pesaron sobre la
mesa y se diluyeron en peptona amortiguada (Oxoid, Montreal, Canadá); todas las manipulaciones se
realizaron sobre la mesa. Las placas se incubaron aeróbicamente a 37°C durante 48 horas.
El ADN genómico proveniente de los hisopados rectales se obtuvo utilizando el método de extracción
modificado descripto por Tsai y Olsen. Las modificaciones consistieron en remover un ml de lisado
para la extracción de ADN y en la precipitación del ADN a –80°C durante al menos 16 horas.
Se realizó la TTGE sobre el ADN extraído utilizando el sistema Bio-Rad D-Code TM. Los fragmentos
de la reacción en cadena de la polimerasa se separaron en 10 % de geles desnaturalizantes de
poliacrilamida (7M urea). El amortiguador de corrida fue 1,25 x amortiguador TAE [tris acetato EDTA
–ácido etileno diamino tetracético-] (50 mM Tris-acetato pH 7,4, 25 mM acetato de sodio, 1,25 mM
Na2EDTA). La separación se logró utilizando un incremento constante del gradiente de temperatura
29
....................................................................................................
30
ril
Ab
ro
re
Fe
b
e
vi
em
br
e
No
br
m
tie
Nestlé Purina PTC posee una estricta política y una fervorosa convicción en realizar investigaciones
no invasivas. Estudios anteriores han probado que la respuesta a la vacuna es un eficaz marcador del
estado inmunológico [Benyacoub et al, 2003]. Por lo tanto, se utilizó el VMC como un marcador de la
respuesta inmunológica sistémica por dos razones: 1) era una manera mensurable de determinar la
respuesta del calostro en la dieta, y 2) formaba parte del protocolo de rutina para el cuidado de la
salud de los perros en este estudio.
Todos los perros recibieron el refuerzo de la vacuna contra el VMC en la semana '0' antes de cambiar
de las dietas de control a la dieta de la prueba (Figura 3). Las muestras de sangre se recolectaron
cada dos meses y los niveles de la IgG específica de la vacuna contra el VMC se midieron utilizando
Se
p
Respuesta inmunológica
lio
Resultados y conclusiones:
un ensayo ELISA. Como se describe en el diseño del estudio, todos los perros que formaban parte de
la prueba poseían diferentes niveles de anticuerpos para la vacuna contra el VMC antes de comenzar
la prueba debido a vacunaciones anteriores. Por lo tanto, la respuesta a la vacuna contra el VMC en
diferentes momentos durante la prueba se evaluó como el cambio en números de veces (fold-change)
sobre el punto de partida.
Como se observa en la Figura 4, los niveles de los anticuerpos para la vacuna contra el VMC en los
perros del grupo de control gradualmente se incrementaron después de administrar el refuerzo de la
vacuna y alcanzaron su pico más alto a los dos meses de haber recibido dicho refuerzo y, como se
esperaba, los niveles descendieron a los valores que tenían en el punto de partida a los cuatro meses
de haberse aplicado el refuerzo. Sin embargo, a diferencia del grupo de control, los perros
alimentados con la dieta de tratamiento, la cual contenía inmunoglobulinas naturales y otros
componentes bioactivos del calostro, presentaron respuestas estadísticamente mayores a la vacuna
en comparación con el grupo de control [p<0.05] y claramente continuaron manteniendo la respuesta
máxima a la vacuna durante siete meses más,
hasta el final de la prueba.
Respuesta a la vacuna contra el VMC
1,80
En resumen, este grupo alcanzó y mantuvo una
1,60
respuesta de los anticuerpos al VMC 50 % superior
*
*
*
1,40
o incluso mayor, en comparación con el grupo de
1,20
dieta de control. La respuesta inmunológica fue
1,00
específica contra la vacuna del VMC pero también
0,80
fue indicativa de una mejor respuesta sistémica.
0,60
Mantener el sistema inmunológico en su apogeo
D. de control
* p < 0,05
implica obtener una respuesta más rápida como
Grupos de tratamiento (n = 12)
Calostro
así también más enérgica cuando el cuerpo se
Figura 4.
expone a un patógeno.
El calostro aumenta la respuesta a la vacuna
contra el virus del moquillo canino en los perros
A pesar de la mejor respuesta inmunológica ante
Ju
de 59°C a 69°C a un ritmo de 0,6°C/hora. La electroforesis se llevó a cabo a 50V y duró 16 horas 20
minutos. Se crearon escalas estándar de bacterias al amplificar, de manera individual por medio de la
reacción en cadena de la polimerasa, el ADN extraído de las cepas predominantes del intestino y al
combinar los productos de la mencionada reacción en cadena de la polimerasa. Los iniciadores
utilizados para la construcción de la escala se identificaron con "verde" (6-FAM). La escala se cargó
junto con la muestra en cada carril y se utilizó para mapear los contornos del gel y corregir las
diferencias en la longitud de migración dentro y entre los geles. Las imágenes de los geles se
capturaron usando un fluorómetro Hitachi y se digitalizaron utilizando el software FMBIOII (versión
1.1). Las imágenes digitalizadas se analizaron empleando el software para el análisis de geles
GelCompar II (versión 2.0). Se establecieron las clases de bandas y se tabularon las densidades de
las bandas (basándose en la altura y la superficie de la banda) dentro de cada clase. Cada clase de
banda contenía todas las bandas que migraron a la misma ubicación modificada en los geles.
Cambio –en n° de veces- en los
anticuerpos contra VMC
Informe de investigación
31
....................................................................................................
micrograms/ml
Niveles de IgG en plasma
Niveles de IgM en plasma
25
25
20
15
10
5
0
1
2
3
4
Dieta de control
Calostro
5
6
7
Dosis nominal estándar
Figura 6. Los perros alimentados con
calostro no poseen mayores niveles de IgG
20
15
10
5
0
1
2
Dieta de control
Calostro
3
4
5
6
7
Dosis nominal estándar
Figura 7. Los perros alimentados con
calostro no poseen mayores niveles de IgM
4 .4 2
32
Niveles de IgA en plasma
16
IgA en microgramos/ml
3 .6 9
bien el calostro mejoró significativamente una respuesta inmunológica específica [como se indica
por la respuesta a la vacuna contra el VMC], no hubo una sobre-estimulación del sistema
inmunológico producida por las dietas. Este es el indicador de un sistema inmunológico saludable:
responder sólo cuando se lo provoca. Los animales alimentados con dietas suplementadas con
calostro, por lo tanto, responderían bien ante una provocación inmunológica tal como la exposición a
una infección, pero no presentarán un sistema inmunológico hiperactivo. Una de las funciones de
protección del intestino es eliminar las bacterias patógenas y neutralizar las toxinas.
IgM en microgramos/ml
la vacuna, no se observó una sobre-estimulación del sistema inmunológico en este estudio. Cuatro
marcadores diferentes de la actividad del sistema inmunológico se controlaron para determinar si la
respuesta positiva al VMC consistía en una mejor respuesta inmunológica sistémica o una indicación
de una enfermedad inflamatoria. La PCR es una proteína de fase aguda producida por el hígado en
respuesta a la inflamación [Marnell L, et al. 2005]. La PCR normalmente se mide durante el examen
clínico de rutina para descartar la existencia de cualquier infección en el sujeto tanto en la medicina
de los seres humanos como en la medicina veterinaria [Golbasi Z et al. 2002]. Por lo tanto, la PCR
constituye un buen marcador para la sobre-estimulación en este estudio. Un nivel normal de PCR en
plasma en los perros oscila entre 0,8 y 16,4 µg/ml [Otabe K. et al. 1998]. Los perros que padecen de
enfermedades inflamatorias tienden a tener niveles mucho más altos, por ejemplo en un estudio
publicado los perros con pancreatitis presentaron niveles de PCR de 56,4 µg/ml [Holm J L et al. 2004].
Los niveles de la PCR correspondientes a los perros del grupo de control y a los del grupo de
tratamiento se muestran en la Figura 5. Los valores de la PCR se encuentran perfectamente dentro de
los rangos normales informados anteriormente para
la PCR y no fueron significativamente diferentes
Niveles de proteína C reactiva
80
entre ellos. Los mayores niveles de
70
60
50
inmunoglobulinas en plasma son indicativos de una
40
30
enfermedad inflamatoria generalizada.
20
10
Las Figuras 6, 7, y 8 muestran los valores en plasma
0
Dieta de control
Calostro
de la IgG, la IgM y la IgA, respectivamente.
• La proteína C reactiva es una proteína de fase aguda que aumenta en el plasma
durante la inflamación.
No existen diferencias significativas en los niveles
• Niveles normales de PCR = 0,8 a 16,4 mg/ml PCR.2
• Durante episodios inflamatorios, tal como una pancreatitis, los niveles de la PCR = 56, 1 mg/ml.3
• Dosis nominal estándar
de inmunoglobulinas entre el grupo de control y el
El sistema inmunológico en los animales alimentados con una dieta con
grupo de tratamiento. Por lo tanto, todas las
calostro no es hiperactivo; sólo responde cuando se lo provoca.
mediciones de la estimulación inmunológica no
Figura 5.
resultaron diferentes en comparación con el grupo
Los perros alimentados con calostro
de control. Estos datos claramente indican que si
no presentaron una estimulación inmunológica ostensible
IgG en microgramos/ml
Informe de investigación
14
12
10
8
6
4
2
0
1
2
Dieta de control
Calostro
3
4
5
6
7
Dosis nominal estándar
Figura 8.
Los perros alimentados con
calostro no poseen mayores niveles de IgA
33
Informe de investigación
IgA en materia fecal microgramos/ml
Niveles de IgA en plasma
50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
Julio
Dieta de control
Calostro
Noviembre
Abril
* GALT: tejido linfoide asociado al intestino
Dosis nominal estándar
Figura 9. El calostro estimula al GALT* para
aumentar la producción de la IgA secretora
-1
post
Dieta
de control
+1
-1
pre
post
Tratamiento
+1
Muestra:
-1; antes; después; +1
-1; antes; después; +1
Los compuestos bioactivos en el calostro se fijan a receptores
específicos en las células inmunológicas del intestino y las activan
para secretar mayores niveles de IgA dentro del lumen. La IgA
secretora previene la adherencia de patógenos a las superficies de
la mucosa, transporta a los potenciales patógenos fuera de las
células dentro del lumen y se fija a los virus y previene la
replicación. Finalmente, la IgA intestinal se excreta en las heces.
Por lo tanto, un mayor nivel de IgA en la materia fecal es deseable,
ya que indica la estimulación del sistema inmunológico de la
mucosa. El calostro estimula el sistema inmunológico del intestino
para secretar mayores niveles de la IgA secretora en comparación
con el grupo de control [p < 0,05] (Figura 9).
Estabilidad de la microflora intestinal
Sample
pre
....................................................................................................
* TTGE: electroforesis en gel con
gradiente temporal de temperatura
Figura 10. Ejemplo de Bandas de TTGE* en
perros alimentados con inmunoglobulinas
naturales y perros alimentados con
la dieta de control
Las poblaciones bacterianas se encuentran en constante flujo
en el intestino debido a la producción celular, la incorporación
de alimentos, y la interacción del microambiente intestinal.
Con el fin de evaluar la población microbiana intestinal en su
conjunto, se obtuvo un perfil microbiano a partir de hisopados
rectales.
El porcentaje de similitud de bandas es una indicación de los
cambios en la población microbiana en respuesta al estrés
(Figura 10). A mayor porcentaje de similitud, menor el cambio
producido en la población microbiana.
34
%
ESTABILIDAD DE LA BANDA
P < 0,05
90
80
70
60
50
40
Dieta de control
30
Calostro
20
10
0
Los perros alimentados con la dieta de tratamiento presentaron
mayor similitud en su población microbiana a lo largo de los
diversos momentos de las muestras.
Estos hallazgos indican una estabilidad de la población microbiana
ante el estrés, lo cual conduce a una óptima absorción de
nutrientes y una menor susceptibilidad a la diarrea relacionada
con o inducida por el estrés (Figura 11).
Figura 11. Los perros alimentados con
calostro poseen poblaciones microbianas
más estables
Calidad de la materia fecal y peso corporal
No hubo ningún efecto debido a la incorporación de calostro en la dieta sobre el puntaje de la
materia fecal (Figura 12) o sobre el peso corporal a lo largo de toda la prueba (Figura 13).
Peso corporal
100
60.00
50.00
Puntaje de la materia fecal
90
40.00
80
30.00
20.00
70
10.00
0
Junio Julio Agos. Sept. Oct. Nov.
Dieta de control
Calostro
60
Dic. Enero Febr. Marzo Abr. May
* GALT: tejido linfoide asociado al intestino
Dosis nominal estándar
Figura 13. El peso corporal fue el mismo
entre los perros alimentados con la dieta
de control y los alimentados con calostro
Junio Julio Agos. Sept. Oct. Nov. Dic. Enero Febr. Marzo Abr. May
Dieta de control
Calostro
Dosis nominal estándar
Figura 12. La calidad de la materia fecal fue
la misma entre los perros alimentados con la
dieta de control y los alimentados con calostro
35
Informe de investigación
....................................................................................................
Referencias:
Resumen:
Una dieta completa y equilibrada suplementada con calostro mejoró el estado inmunológico sistémico
de los perros como se demostró a través de las respuestas significativamente mayores a la vacuna
contra el VMC sin provocar una activación inmunológica ostensible. Los niveles de la PCR dentro del
rango normal y los niveles totales en plasma de la IgA, la IgG, y la IgM sin cambios validan este
resultado.
Existió una mayor consistencia en las poblaciones bacterianas del intestino independientemente de
los hechos estresantes, conduciendo a una población de la flora intestinal más estable en los perros
alimentados con calostro, lo cual puede ayudar a prevenir los malestares intestinales.
Asimismo, los perros alimentados con calostro presentaron mayores niveles de IgA en la materia
fecal, lo cual indicó un mayor funcionamiento del sistema inmunológico del intestino en comparación
con los perros del grupo de control.
Los anticuerpos naturales y los otros componentes bioactivos del calostro ayudan a equilibrar las
bacterias intestinales beneficiosas y potencialmente perjudiciales.
Al estabilizar la microflora intestinal, el calostro promueve la absorción de nutrientes facilitada por la
microflora colónica y disminuye el potencial de que se produzca una infección, una diarrea como así
también una inflamación intestinal.
El sistema inmunológico de los perros alimentados con una dieta que contiene calostro
probablemente responda mejor cuando se encuentre expuesto a un agente infeccioso o a las
vacunas que se administran como parte de los cuidados veterinarios de rutina.
36
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Nuestra filosofía
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Las mascotas son nuestra pasión. Como uno de los líderes mundiales en el
cuidado de las mascotas, hemos estado sirviendo a las mascotas y a sus dueños
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