Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 1984, 3 (4), 753-774. Septicemia hemorrágica en bovinos y búfalos* M.C.L. D E ALWIS** Resumen : La septicemia hemorrágica en bovinos y búfalos es una enfermedad casi siempre mortal. Está originada por serotipos específi­ cos de Pasteurella multocida. Es una pasteurelosis primaria reproduci­ ble solamente por medio de gérmenes específicos en los animales recep­ tivos. La clasificación de Pasteurella multocida se basa sobre la identi­ ficación de sus antígenos somáticos y capsulares : se pudo así determi­ nar que los dos serotipos, denominados 6:B y 6:E, son responsables de la septicemia hemorrágica. La enfermedad se manifiesta en numerosos países asiáticos, del Cercano y Medio Oriente, Europa meridional y, por último, el Norte, Centro y Este de Africa. La enfermedad es provocada por el serotipo 6:B en Asia y 6:E en Africa. Algunos países poseen ambos serotipos. En la mayoría de los países de Asia, la septicemia hemorrágica es con­ siderada como una enfermedad que acarrea grandes pérdidas económi­ cas. Se ha llevado a cabo en algunos países estudios epidemiológicos. Se observó que la enfermedad evoluciona de manera determinada proba­ blemente bajo el efecto de la interacción de factores climáticos, inmunológicos y epidemiológicos. La enfermedad ataca preferentemente a los búfalos y luego a los bovinos y, en las zonas de enzootia, las vícti­ mas más numerosas se cuentan entre los animales jóvenes. En estas regiones, una proporción variable de animales adultos adquiere inmu­ nidad espontánea. Algunos de estos animales se transforman en porta­ dores de gérmenes y pueden originar nuevos focos. Todos aquellos países, donde la septicemia hemorrágica es enzoótica, han adoptado el método de vacunación. Los caldos bacterianos son los más utilizados pero la inmunidad que confieren es de poca duración. La vacuna de adyuvante oleoso, que procura una inmunidad más prolongada, se utiliza en pocos países debido a su viscosidad y difi­ cultad de inoculación. Se han llevado a cabo recientemente investiga­ ciones con miras a producir emulciones más fluidas, aislar fracciones antigénicas, y producir mutantes avirulentos utilizados como vacunas * Ponencia presentada en la 52 Sesión General de la O.I.E., París, 21-25 de Mayo de 1984 (Tema técnico II). Traducción de la ponencia original titulada : « Haemorrhagic septicaemia in cattle and buffaloes ». ** Instituto de Investigaciones Veterinarias, Gannoruwa, Peradeniya (Sri Lanka). — 754 — vivas. El autor estima que un mejor conocimiento de la epizootiología de la enfermedad puede resultar en un control más eficaz, así como una producción de vacunas mejoradas y, por último, una cobertura de vacunación más importante. INTRODUCCIÓN C o n l o s a d e l a n t o s d e l o s m é t o d o s d e c l a s i f i c a c i ó n d e l o s s e r o t i p o s d e Pasteurella multocida, p u d o reconocerse, de u n a f o r m a evidente, a la septicemia hemorrágica como una entidad diferenciada. Es una enfermedad aguda y septicémica c a u s a d a p o r los serotipos específicos 6:B o 6:E ( N a m i o k a - C a r t e r ) en v a c u n o s y b ú f a l o s . A diferencia d e la m a y o r í a d e las otras pasteurelosis, la s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a es u n a p a s t e u r e l o s i s p r i m a r i a , r e p r o d u c i b l e e n a n i m a l e s r e c e p t i v o s c o n c u l t i v o s p u r o s d e ese ú n i c o o r g a n i s m o e s p e c í f i c o . PRESENCIA Y DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA H a y c a s o s d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a e n el S u r y S u d e s t e a s i á t i c o , i n c l u sive I n d o n e s i a , F i l i p i n a s , T a i l a n d i a y M a l a s i a , e n el C e r c a n o y L e j a n o O r i e n t e , e n el s u r d e E u r o p a ( i n c l u y e n d o a l a U n i ó n S o v i é t i c a ) y e n A f r i c a S e p t e n t r i o n a l , C e n t r a l y O r i e n t a l . A s i m i s m o , se n o t i f i c a r o n c a s o s e n l a R e p ú b l i c a S u d a f r i c a n a ( 1 5 ) . E n 1 9 1 2 , 1922 y 1967 se n o t i f i c a r o n c a s o s d e l a e n f e r m e d a d en bisontes en los P a r q u e s nacionales de los E . U . A . A partir de ese m o m e n t o , y a e x c e p c i ó n d e u n f o c o e x p l o s i v o e n j ó v e n e s v a c a s l e c h e r a s e n N e w J e r s e y e n 1 9 6 9 , e n n i n g u n a o t r a p a r t e d e l o s E . U . A . se n o t a r o n c a s o s de esa e n f e r m e d a d (15). A u s t r a l i a , O c e a n í a , J a p ó n , C a n a d á y E u r o p a Occid e n t a l e s t á n l i b r e s d e l a e n f e r m e d a d . E n el A n u a r i o F . A . O . - O . M . S . - O . I . E . d e S a n i d a d A n i m a l se h a c e m e n c i ó n d e s u p r e s e n c i a e n S u d a m é r i c a , p e r o n o se d i s p o n e d e m a t e r i a l c o m p l e m e n t a r i o s o b r e i d e n t i f i c a c i ó n d e s e r o t i p o p a r a su c o n f i r m a c i ó n . E n el C u a d r o I se s i n t e t i z a l a d i s t r i b u c i ó n d e l a e n f e r m e d a d . L a d i s t r i b u c i ó n d e l a e n f e r m e d a d t i e n e c i e r t a r e l a c i ó n c o n el t i p o d e a n i m a l c r i a d o y c o n el s i s t e m a d e m a n e j o . E s a s i t u a c i ó n es e v i d e n t e e n l a I s l a d e Sri L a n k a , d e 65 0 0 0 k m , q u e c u e n t a c o n u n a v a r i e d a d d e z o n a s a g r o c l i m á t i cas y d e prácticas de z o o t e c n i a , y c o n áreas enzoóticas bien definidas y o t r a s l i b r e s d e l a e n f e r m e d a d . E n l a s r e g i o n e s m o n t a ñ o s a s , e n d o n d e el c l i m a es b e n i g n o y se c r í a n b o v i n o s d e p a í s e s t e m p l a d o s d e r a z a p u r a y c r u z a d a c o n sistemas intensivos, la septicemia h e m o r r á g i c a tiene u n a incidencia p o c o m a r c a d a . P e r o e n las l l a n u r a s s e c a s e n d o n d e l o s v a c u n o s y b ú f a l o s n a t i v o s se d e s p l a z a n l i b r e m e n t e , l a e n f e r m e d a d es e n z o ó t i c a . 2 Incidencia estacional. E n general, la enfermedad está vinculada con clima lluvioso y h ú m e d o , y e n l a m a y o r í a d e l o s p a í s e s , l a i n c i d e n c i a a u m e n t a al c o m i e n z o d e l a e s t a c i ó n d e l a s l l u v i a s . E n e s t u d i o s e p i d e m i o l ó g i c o s m i n u c i o s o s r e a l i z a d o s e n Sri — 755 — CUADRO I Manifestación de septicemia hemorrágica en diferentes países Categoría A . Países en los que, con fundamento clínico o bacteriológico, se notifica presencia de la enfermedad Afganistán Alto Volta Angola A r a b i a Saudita Argentina Bahrain Bangla Desh Belize Bolivia Brunei Birmania Bután Camerún Centroafricana (República) Chad Colombia Comores Costa de Marfil Costa Rica Djibouti Dominicana (República) Ecuador Egipto El Salvador Etiopía Filipinas Gambia Ghana Guatemala Guinea Guinea Ecuatorial Haití Honduras India Indonesia Iraq Italia Kampuchea Kenia Laos Líbano Liberia Libia Malasia Malawi Malí Mauritania México Namibia Nepal Nicaragua Niger Nigeria Pakistán Panamá Paraguay Portugal Sierra Leone Somalia Sri L a n k a Sudáfrica Sudán Tailandia Tanzania T i m o r Oriental Uganda Venezuela Vietnam Zaire Zambia Categoría B. Países en los que se notifica manifestación excepcional de septicemia hemorrágica, o se sospecha su presencia, pero sin confirmación Alemania (Rep. Fed.) Brasil Dinamarca España E.U.A. Finlandia Grecia Guinea (Bissau) Irán Jordania Mozambique Polonia Qatar Ruanda Rumania Samoa Siria Togo Turquía Unión Soviética * Extracto de los Anuarios F.A.O.-O.M.S.-O.I.E. de Sanidad Animal hasta 1981, y de otros informes disponibles. ** Es probable que algunos países del presente grupo estén informando sobre otras formas de pasteurellosis bovina y no específicamente sobre septicemia hemorrágica. L a n k a se d e m u e s t r a q u e l a e n f e r m e d a d a p a r e c e e n t o d a s l a s é p o c a s del a ñ o , p e r o m i e n t r a s q u e en la estación seca los focos están c o n t r o l a d o s , en la estac i ó n d e l a s l l u v i a s t i e n d e n a p r o p a g a r s e . P o s i b l e m e n t e , ese h e c h o se d e b a a l a p r o l o n g a d a s u p e r v i v e n c i a d e l o s g é r m e n e s e n c o n d i c i o n e s h ú m e d a s y al d e s p l a z a m i e n t o de los animales r e l a c i o n a d o c o n las lluvias. — 756 D i s t r i b u c i ó n de l o s s e r o t i p o s . E n p a í s e s a s i á t i c o s , el ú n i c o s e r o t i p o r e g i s t r a d o h a s t a el m o m e n t o es el 6 : B . H a y u n i n f o r m e s o b r e u n a i s l a m i e n t o d e l a c e p a del t i p o D d e l o q u e se c r e e ser u n c a s o d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a e n M a l a s i a ( 2 1 ) . E n g e n e r a l , el tipo D en v a c u n o s está relacionado con síndrome p u l m o n a r , pero en determi­ n a d a s circunstancias p u e d e producir u n a septicemia, condición que p u e d e confundirse c o n la septicemia h e m o r r á g i c a clásica. E n A f r i c a , se i d e n t i f i c ó al 6 : E c o m o el s e r o t i p o p r e d o m i n a n t e . U n o s p o c o s países, p r i n c i p a l m e n t e E g i p t o y S u d á n , r e g i s t r a r o n la presencia d e a m b o s s e r o t i p o s . L a s cepas aisladas de los bisontes de A m é r i c a del N o r t e , q u e a ú n existen en las colecciones de tipos b a c t e r i a n o s en c u l t i v o , p e r t e n e c e n al s e r o t i p o 6 : B . PÉRDIDAS ECONÓMICAS D e s p u é s d e l a e r r a d i c a c i ó n d e l a p e s t e b o v i n a d e casi t o d o s l o s p a í s e s a s i á ­ ticos, la septicemia h e m o r r á g i c a aparece c o m o u n a e n f e r m e d a d de g r a n i m p o r t a n c i a e c o n ó m i c a , y la m a y o r í a de los países la c o n s i d e r a n c o m o la p r i n c i p a l e n f e r m e d a d m o r t a l del b ú f a l o d e a g u a . S u i m p o r t a n c i a e c o n ó m i c a se h a c e s e n t i r d e m o d o e s p e c i a l e n l a r e g i ó n del A s i a , e n d o n d e el b ú f a l o d e a g u a , i m p o r t a n t e p o r s e r v i r d e a l i m e n t o y d e a n i m a l d e t i r o , es p a r t i c u l a r ­ m e n t e receptivo a la e n f e r m e d a d . E n g e n e r a l , la s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a a p a r e c e en áreas en las q u e las p r á c t i c a s d e z o o t e c n i a s o n r u d i m e n t a r i a s y l o s S e r v i c i o s v e t e r i n a r i o s (y c o n s i ­ g u i e n t e m e n t e , los sistemas de notificación de e n f e r m e d a d ) son deficientes. Es p r o b a b l e q u e las p é r d i d a s r e g i s t r a d a s p o r septicemia h e m o r r á g i c a sólo refle­ j e n la t e n d e n c i a g e n e r a l , y q u e las p é r d i d a s reales sean m u c h o m á s e l e v a d a s . Se d e m o s t r ó ese h e c h o e n u n a e n c u e s t a e p i d e m i o l ó g i c a r e a l i z a d a e n Sri L a n k a y p r o b a b l e m e n t e se a p l i c a t a m b i é n a o t r o s p a í s e s e n l o s q u e l a s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a es e n z o ó t i c a . ESPECIES AFECTADAS E n condiciones naturales, la e n f e r m e d a d aparece principalmente en b ú f a ­ los y b o v i n o s . P o c o s s o n los i n f o r m e s s o b r e su aparición en o t r a s especies. E n Sri L a n k a , se r e g i s t r a r o n v a r i o s f o c o s e s p o r á d i c o s d e p a s t e u r e l o s i s s e p t i c é m i c a a g u d a e n p o r c i n o s , r e l a c i o n a d a c o n el s e r o t i p o 6 : B d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a , y e n u n o d e e s o s c a s o s se l a r e l a c i o n ó c o n l a a l i m e n t a c i ó n d e p o r c i n o s c o n s a n g r e d e b u e y e s d e u n m a t a d e r o . C o n ese a i s l a d o se r e p r o d u j o septicemia hemorrágica en bovinos (De Alwis, informe inédito). H a y infor­ mes similares sobre incidencias esporádicas de pasteurelosis septicémica en p o r c i n o s c a u s a d a p o r gérmenes clasificados c o m o de serotipo 6:B en Tailan­ d i a (1) y M a l a s i a (2). Se r e g i s t r a r o n c a s o s s i m i l a r e s e n l a I n d i a , e n d o n d e l o s — 757 — o r g a n i s m o s identificados f u e r o n t i p o I de R o b e r t s o t i p o B de C a r t e r (34, 46). A s i m i s m o , se r e g i s t r a r o n f o c o s e s p o r á d i c o s d e e n f e r m e d a d r e l a c i o n a d a c o n P. multocida e n c a p r i n o s ( 1 , 2 , 3 , 4 , 34) y e n a v e s d e c o r r a l ( 3 8 , 3 9 ) . E n circunstancias diferentes, los o r g a n i s m o s identificados fueron t i p o I de Roberts, tipo B de Carter o serotipo 6:B. E n Sri L a n k a se n o t i f i c a r o n c a s o s d e p a s t e u r e l o s i s s e p t i c é m i c a e n e l e f a n ­ t e s , c a u s a d a p o r el s e r o t i p o 6 : B , c o i n c i d e n t e c o n f o c o s d e s e p t i c e m i a h e m o r ­ rágica en vacunos y búfalos (31, 24, 62). P o r l o t a n t o , se r e g i s t r a r o n f o c o s d e e n f e r m e d a d e s s e p t i c é m i c a s r e l a c i o n a ­ d a s c o n P. multocida e identificadas c o m o tipo I de Roberts o tipo B de Car­ t e r ( c u a l q u i e r a d e l a s c u a l e s p o d r í a n ser 6 : B o 11:B) o s e r o t i p o 6 : B , s e g ú n el sistema de clasificación d e serotipos u s a d o , en especies diferentes de las de v a c u n o s y b ú f a l o s . A e s a s e n f e r m e d a d e s se l a s c o n o c e c o m o « p a s t e u r e l o s i s s e p t i c é m i c a » m i e n t r a s q u e l a e x p r e s i ó n s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a se r e f i e r e , e n general, a la e n f e r m e d a d en b o v i n o s y b ú f a l o s . SÍNTOMAS Y LESIONES L a s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a se m a n i f i e s t a p r i n c i p a l m e n t e e n c o m a r c a s d o n d e las p r á c t i c a s de z o o t e c n i a s o n r u d i m e n t a r i a s y en las q u e los a n i m a l e s se c r í a n e n c o n d i c i o n e s s e m i s a l v a j e s . E n s e m e j a n t e s c o n d i c i o n e s , l o s a n i m a l e s n o e s t á n s o m e t i d o s a o b s e r v a c i ó n c o n s t a n t e y el ú n i c o s í n t o m a o b s e r v a d o es l a m u e r t e s ú b i t a . C o m ú n m e n t e , l a e n f e r m e d a d d u r a 1-3 d í a s . L o s s i g n o s visi­ bles, p o r o r d e n de aparición, son : t e m p e r a t u r a elevada, e d e m a s u b m a n d i b u ­ l a r q u e se e x t i e n d e h a s t a el p e c h o d e l o s a n i m a l e s , s e g u i d o d e u n a d i s n e a p r o ­ g r e s i v a , l u e g o el a n i m a l se d e b i l i t a y m u e r e . L a e x t e n s i ó n d e l a s l e s i o n e s p a t o l ó g i c a s d e p e n d e del c u r s o d e l a e n f e r m e ­ d a d . E n e x p e r i m e n t o s d e i n f e c c i ó n (28) se d e m o s t r ó q u e l o s a n i m a l e s m u e r t o s dentro de 24-36 h o r a s después de la infección sólo sufrían h e m o r r a g i a pete­ quial g e n e r a l i z a d a , m á s m a r c a d a en la b a s e del c o r a z ó n , la p a r e d a b o m a s a l y en m e n o r m e d i d a e n l o s i n t e s t i n o s . Se o b s e r v ó t a m b i é n c o n g e s t i ó n g e n e r a l i ­ z a d a de los p u l m o n e s . C u a n d o la e n f e r m e d a d d u r a b a 48 h o r a s , las h e m o r r a ­ gias e r a n m á s s e v e r a s y e q u i m ó t i c a s , c o n p e r i c a r d i t i s f i b r i n o s a . C u a n d o l a e n f e r m e d a d se p r o l o n g a b a m á s d e 7 2 h o r a s , se n o t a b a c o n s o l i d a c i ó n e x t e n ­ siva d e l o s p u l m o n e s , c o n l o b u l a c i ó n c a u s a d a p o r el m a r c a d o e s p e s a m i e n t o d e l a s e p t a i n t e r l o b u l a r . Se o b s e r v a b a i g u a l m e n t e p e r i c a r d i t i s s e r o f i b r i n o s a y p l e u r e s í a , c o n a d h e r e n c i a s e n t r e el p e r i c a r d i o y l a p l e u r a . E n g e n e r a l , los b ú f a l o s m u e r e n m á s r á p i d a m e n t e y p o r ese m o t i v o las lesiones s o n m e n o r e s . E n los b o v i n o s , la e n f e r m e d a d e v o l u c i o n a m á s l e n t a ­ m e n t e , sufriendo lesiones patológicas m á s p r o n u n c i a d a s . Casi t o d o s los focos d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a s o n t í p i c o s , s i n e m b a r g o se r e g i s t r a r o n u n o s c a s o s d i g n o s d e c o n s i d e r a c i ó n d e s í n d r o m e s a t í p i c o s c a u s a d o s p o r el s e r o t i p o 6 : B . — 758 — E n Sri L a n k a se i n f o r m ó s o b r e u n s í n d r o m e d e p a s t e u r e l o s i s p n e u m ó n i c a c a u s a d o p o r el s e r o t i p o 6 : B ( 2 8 ) . E n B i r m a n i a , se n o t i f i c ó el c a s o d e u n s í n d r o m e r e l a c i o n a d o c o n e d e m a y c o j e r a d e l o s m i e m b r o s d e l a n t e r o s . E n Sri L a n k a se r e g i s t r a r o n c o n f r e c u e n c i a c o j e r a s e n b ú f a l o s j ó v e n e s , y s a n o s b a j o o t r o s aspectos, en áreas enzoóticas d u r a n t e la estación d e septicemia h e m o r r á g i c a . R e s t a a ú n e x a m i n a r e s o s i n f o r m e s . E s p r o b a b l e q u e se t r a t e d e a n i m a les q u e r e s p o n d i e r o n a l a i n f e c c i ó n c o n i n f e c c i o n e s s u b c l í n i c a s o « d e t e n i d a s », y se v o l v i e r o n i n m u n e s ( 2 3 ) . EPIDEMIOLOGÍA 1. M o r b i l i d a d y m o r t a l i d a d . E n l a s z o n a s e n q u e a p a r e c e l a s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a n o es p o s i b l e l a r á p i d a d e t e c c i ó n n i el t r a t a m i e n t o y , p o r l o t a n t o , l a t a s a d e m o r t a l i d a d es casi del 1 0 0 % . A s í , p r á c t i c a m e n t e n o h a y d i f e r e n c i a e n t r e m o r b i l i d a d y m o r talidad. 2 . F a c t o r e s q u e ejercen i n f l u e n c i a en la m o r b i l i d a d y m o r t a l i d a d . a) Especies. L a m a y o r í a d e l o s p a í s e s , e s p e c i a l m e n t e del A s i a , s e ñ a l a n q u e l a s p é r d i d a s de búfalos c a u s a d a s p o r la septicemia h e m o r r á g i c a s o n superiores a las d e los b o v i n o s , p e r o p o c o s c o n f i r m a r o n esa situación. E n M a l a s i a , 7 3 % d e t o d a s l a s p é r d i d a s c a u s a d a s p o r s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a fue d e b ú f a l o s , a p e s a r d e q u e el n ú m e r o d e b o v i n o s es d o s veces s u p e r i o r al d e b ú f a l o s (2). E n u n a e n c u e s t a r e a l i z a d a e n Sri L a n k a se i n d i c a q u e l a t a s a d e i n f e c c i ó n d e r e b a ñ o s es s i m i l a r en b o v i n o s y e n b ú f a l o s , p e r o l a t a s a d e m o r b i l i d a d d e n t r o d e l o s r e b a ñ o s a f e c t a d o s es m u y s u p e r i o r en l o s b ú f a l o s . E n o t r a e n c u e s t a se e s t a b l e c e q u e la m o r t a l i d a d d e l o s b ú f a l o s es t r e s v e c e s s u p e r i o r a l a d e l o s b o v i n o s ( 3 2 , 2 2 ) . U n a e x c e p c i ó n n o t a b l e es l a r a z a B a l i d e v a c u n o s d e I n d o n e s i a q u e , s e g ú n se i n f o r m a , es m u y r e c e p t i v a . b) Edad. A s i m i s m o , l a m a y o r í a d e los p a í s e s a f i r m a q u e l a s p é r d i d a s d e l o s a n i m a les j ó v e n e s s o n s u p e r i o r e s a las d e l o s a d u l t o s , p e r o s o n e s c a s o s l o s c á l c u l o s c u a n t i t a t i v o s . E n e n c u e s t a s l l e v a d a s a c a b o e n Sri L a n k a se d e m o s t r ó q u e 65 % d e t o d a s las p é r d i d a s d e b ú f a l o s c a u s a d a s p o r s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a y 7 7 % d e l o s b o v i n o s a f e c t a b a a a n i m a l e s m e n o r e s d e 2 a ñ o s d e e d a d (32). E n o t r o e s t u d i o r e a l i z a d o e n el m i s m o p a í s se i n d i c a q u e l a e d a d m á s v u l n e r a b l e es e n t r e l o s 6 m e s e s y l o s 2 a ñ o s ( 2 9 ) . E n e s t u d i o s u l t e r i o r e s se d e m o s t r ó q u e e s a r e l a c i ó n e n t r e e d a d y m o r t a l i d a d se a p l i c a s ó l o a z o n a s e n z o ó t i c a s . E n z o n a s e n las q u e a p a r e c e n f o c o s e s t a c i o n a l e s r e g u l a r e s , l a m o r t a l i d a d e n c a d a f o c o es b a j a y se l i m i t a a a n i m a l e s j ó v e n e s . E n c a s o s d e f o c o s e s p o r á d i c o s o c a s i o n a l e s f u e r a d e l a s z o n a s e n z o ó t i c a s , l a m o r t a l i d a d es a l t a y a f e c t a a a n i m a l e s d e t o d a s las e d a d e s (22). E s a r e l a c i ó n t i e n e u n f u n d a m e n t o i n m u - — 759 — n o l ó g i c o , p u e s en las z o n a s e n z o ó t i c a s , en las q u e la s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a es m u y f r e c u e n t e , u n g r a n p o r c e n t a j e d e a n i m a l e s ( p a r t i c u l a r m e n t e l o s a d u l tos) posee i n m u n i d a d a d q u i r i d a n a t u r a l m e n t e (32, 30). c) Zonas enzoóticas y no enzoóticas. E n Sri L a n k a se d e m o s t r ó q u e l a m o r b i l i d a d y m o r t a l i d a d c a u s a d a s p o r septicemia h e m o r r á g i c a v a r í a n entre z o n a s enzoóticas y n o e n z o ó t i c a s . E n las z o n a s enzoóticas, las p é r d i d a s son regulares, l i m i t á n d o s e a u n a d e t e r m i n a d a estación, y afectan p e q u e ñ a s cantidades de animales, q u e a veces n o l l a m a n la atención. P o r o t r a p a r t e , c u a n d o aparecen focos ocasionales en z o n a s n o e n z o ó t i c a s , las p é r d i d a s p u e d e n a l c a n z a r p r o p o r c i o n e s a l a r m a n t e s . L a e p i z o o t i a p u e d e a l c a n z a r p r o p o r c i o n e s d e s m e s u r a d a s c u a n d o se i n t r o d u c e p o r p r i m e r a v e z l a e n f e r m e d a d e n el p a í s o c u a n d o e s c a p a d e u n f o c o e n z o ó t i c o a o t r a s z o n a s . E n Z a m b i a y Sri L a n k a se o b s e r v a r o n p a u t a s e p i d e m i o l ó g i c a s s u m a m e n t e s i m i l a r e s . E n Sri L a n k a , d e s d e 1915 se r e g i s t r a r o n anualmente unos pocos casos de septicemia hemorrágica en determinados focos. E n 1955, la e n f e r m e d a d a p a r e c i ó p o r p r i m e r a vez en las l l a n u r a s secas y c a u s ó u n a altísima m o r t a l i d a d de v a c u n o s y b ú f a l o s de t o d a s las e d a d e s . A p a r t i r d e e n t o n c e s , se l o g r ó u n a e s t a b i l i z a c i ó n e n l a p a u t a d e l a i n c i d e n c i a . E n e s a s z o n a s , l a e n f e r m e d a d se v o l v i ó e n z o ó t i c a y c a d a a ñ o c o n t i n ú a m u r i e n d o un pequeño n ú m e r o de animales jóvenes por septicemia hemorrágica. E n Z a m b i a , d e s d e l a d é c a d a d e l 3 0 l a e n f e r m e d a d se l i m i t ó a c i e r t o s f o c o s e n z o ó t i c o s p e r o e n 1978 e s t a l l ó c o m o u n a e p i z o o t i a v i o l e n t a . A p a r t i r d e e n t o n c e s , l a t e n d e n c i a es s i m i l a r a l a d e Sri L a n k a . d) Sistema de ganadería. A p a r e n t e m e n t e , la incidencia de septicemia h e m o r r á g i c a e s t á r e l a c i o n a d a c o n el s i s t e m a d e g a n a d e r í a , p u e s es s u m a m e n t e b a j a e n p e q u e ñ o s r e b a ñ o s c e b a d o s e n e s t a b l o s y e l e v a d í s i m a e n r e b a ñ o s n ó m a d a s y g r a n d e s . Se d e m o s t r a r o n a m b a s situaciones en u n m i s m o país (32). A d e m á s , d e n t r o de u n a z o n a e n z o ó t i c a l a i n c i d e n c i a d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a p u e d e ser 4-5 v e c e s s u p e rior en g r a n d e s r e b a ñ o s d e m á s d e 50 a n i m a l e s q u e en p e q u e ñ o s d e m e n o s de 10 a n i m a l e s , l o q u e i n d i c a c o n c l a r i d a d l a r e l a c i ó n d e l a i n c i d e n c i a c o n l o s diferentes m é t o d o s de ganadería. 3. Inmunidad adquirida naturalmente. B a i n (9) d e s c u b r i ó q u e a l g u n o s b ú f a l o s e x a m i n a d o s e n T a i l a n d i a e s t a b a n n a t u r a l m e n t e i n m u n i z a d o s c o n t r a la septicemia h e m o r r á g i c a . E n esa fecha n o se c o m p r e n d i ó l a i m p o r t a n c i a d e e s e d e s c u b r i m i e n t o e n l a e p i d e m i o l o g í a d e l a s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a y se c o n c l u y ó q u e a p r o x i m a d a m e n t e 1 0 % d e l o s vacunos y búfalos asiáticos poseían esa i n m u n i d a d n a t u r a l . E n estudios realiz a d o s e n Sri L a n k a a fines d e l a d é c a d a del 7 0 ( 3 0 , 23) se s e ñ a l a q u e l a p r o porción de animales naturalmente inmunizados varía de un r e b a ñ o a o t r o , y d e v e z e n c u a n d o d e n t r o del m i s m o r e b a ñ o . H a y r e l a c i ó n e n t r e ese f e n ó m e n o y l a r e c i e n t e p r e s e n c i a d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a e n el r e b a ñ o o e n l a l o c a l i d a d . Si b i e n se d e s c u b r i e r o n u n o s p o c o s c a s o s d e v a c u n o s n a t u r a l m e n t e — 760 — i n m u n i z a d o s c o n t r a l a e n f e r m e d a d e n A u s t r a l i a ( 1 0 ) , E . U . A . (26) y e n C h a d ( P e r r e a u c i t a d o e n 11), d o n d e n o e r a e v i d e n t e l a e x p o s i c i ó n n a t u r a l , D e A l w i s p r e s e n t ó p r u e b a s s u f i c i e n t e s (23) e n u n e s t u d i o s o b r e el e s t a d o d e i n m u n i d a d de los búfalos expuestos a septicemia h e m o r r á g i c a p a r a concluir q u e la infecc i ó n s u b c l í n i c a o « d e t e n i d a » es l a f u e n t e p r i n c i p a l d e l a i n m u n i d a d o b t e n i d a n a t u r a l m e n t e e n l o s p a í s e s e n z o ó t i c o s . E n s i t u a c i o n e s e n l a s q u e n o se p r a c t i c a l a v a c u n a c i ó n , es e v i d e n t e q u e l a s p a u t a s d e m o r b i l i d a d y d e m o r t a l i d a d se g u í a n e n g r a n p a r t e p o r l a p r o p o r c i ó n d e a n i m a l e s n a t u r a l m e n t e i n m u n e s y n o i n m u n e s e n el m o m e n t o d e l b r o t e d e l a e n f e r m e d a d . A s í , e n z o n a s e n z o ó t i c a s , e n l a s q u e s o n f r e c u e n t e s l o s f o c o s , es e l e v a d a l a p r o p o r c i ó n d e a n i m a les n a t u r a l m e n t e i n m u n i z a d o s y , p o r l o t a n t o , s ó l o m u e r e u n p e q u e ñ o n ú m e r o de animales n o expuestos a ú n a la e n f e r m e d a d . C u a n d o la enfermed a d a p a r e c e d e s p u é s d e u n l a r g o i n t e r v a l o , es e l e v a d a l a p r o p o r c i ó n d e a n i m a l e s n o i n m u n i z a d o s y r e c e p t i v o s , y las e r u p c i o n e s de la e n f e r m e d a d s o n explosivas. 4. Animales portadores. Es bien conocido que u n cierto n ú m e r o de bovinos y búfalos sanos alberg a n p a s t e m e l a s p a t ó g e n a s en sus nasofaringes (58, 63). A c o m i e n z o s d e la d é c a d a del 6 0 , G u p t a (37) e n l a I n d i a d e s c u b r i ó u n a r e l a c i ó n m ú t u a e n t r e l a i n c i d e n c i a d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a y el e s t a d o del « p o r t a d o r » . D u r a n t e u n a epizootia de septicemia hemorrágica en u n a aldea, 7 , 5 % de animales s a n o s f u e r o n l o s p o r t a d o r e s , p e r o 4 0 d í a s d e s p u é s e n l a m i s m a a l d e a n o se detectó ningún p o r t a d o r . L a p r o p o r c i ó n de p o r t a d o r e s varía según la incidencia de la e n f e r m e d a d , o s c i l a n d o e n t r e 0 % en z o n a s libres del m o r b o y 6 , 1 % en á r e a s d e e l e v a d a i n c i d e n c i a . M u s t a f a y c o l . (47) e n S u d á n y H i r a m u n e y D e A l w i s (43) e n Sri L a n k a , c o n f i r m a r o n e s o s r e s u l t a d o s . E s t o s d o s ú l t i m o s investigadores descubrieron t a m b i é n que era m á s elevada la tasa de p o r t a d o res e n t r e los a n i m a l e s c l í n i c a m e n t e n o a f e c t a d o s i n m e d i a t a m e n t e después d e u n a e p i z o o t i a y q u e d i m i n u í a a c e l e r a d a m e n t e e n 6-9 s e m a n a s . E n el C u a d r o I I se p r e s e n t a l a p r o p o r c i ó n d e p o r t a d o r e s d e t e c t a d a p o r v a r i o s i n v e s t i g a d o r e s . P u e d e n ser p o r t a d o r e s l o s a n i m a l e s n a t u r a l m e n t e i n m u n i z a d o s o l o s q u e h a n p a s a d o p o r l a e t a p a d e p o r t a d o r , p u e s a m b o s f e n ó m e n o s se r e l a c i o n a n c o n incidencia reciente d e la e n f e r m e d a d (véase C u a d r o I I I ) . A l g u n o s a f i r m a n q u e l a v a c u n a c i ó n r e g u l a r e l i m i n a r á l a c o n d i c i ó n del p o r t a d o r . E n u n a i s l a d e I n d o n e s i a se i n t e n t ó u n p r o g r a m a d e e r r a d i c a c i ó n m e d i a n t e v a c u n a c i ó n a n u a l i n t e n s i v a . D e s p u é s d e c o n c l u i r el p r i m e r a ñ o d e v a c u n a c i ó n t o d a v í a se d e t e c t ó 2 , 3 % d e p o r t a d o r e s , p e r o n i n g u n o d e s p u é s del s e g u n d o a ñ o . E n u n e s t u d i o m á s r e c i e n t e r e a l i z a d o e n Sri L a n k a ( W i j e w a r d a n a y D e A l w i s , i n f o r m e i n é d i t o ) se i n d i c a q u e l a c o n d i c i ó n d e p o r t a d o r n a s o f a r í n g e o es m o m e n t á n e a y q u e a n i m a l e s d i f e r e n t e s s o n p o r t a d o r e s e n d i s t i n t o s m o m e n t o s d u r a n t e l a s p r i m e r a s s e m a n a s d e s p u é s del b r o t e d e l a e n f e r m e d a d . L o s m i s m o s investigadores d e t e c t a r o n t a m b i é n q u e los a n i m a l e s a l b e r g a n p a s t e u r e l a s v i r u l e n t a s en s u s n ó d u l o s l i n f á t i c o s r e t r o f a r í n g e o s , s i n descubrir n i n g u n a en sus nasofaringes. Es bien conocido que la condición de p o r t a d o r n a s o f a r í n g e o es s ó l o m o m e n t á n e a , p e r o n o se s a b e d u r a n t e c u á n t o — 761 — CUADRO Detección Autor de portadores por diferentes II de septicemia investigadores Resultados (%) País hemorrágica Método de identificación de gérmenes Singh (1948) India 3 , 5 % en animales vivos, 7 % en animales sacrificados. Aglutinación con suero p r e p a r a d o c o n t r a la cepa virulenta. Wijewantha y Karunaratne (1968) Sri L a n k a 15% portadores. 43 casos aislados sobre 45 pertenecían a 6:B. Dos a 11:B. Clasificación p o r tipo somático y capsular. G u p t a (1962) India 7 , 5 % en animales vivos y sanos d u r a n t e la manifestación de la enfermedad. 0 % en los mismos animales, 40 días después. Mustafa y col. (1968) Sudán 0 % , 3,84% y 5 , 5 5 % en tres rebaños que n o presentaban signos clínicos. 4 4 , 4 % en animales sanos en un r e b a ñ o afectado p o r la septicemia hemorrágica. Clasificación p o r tipo capsular. Hiramune y De Alwis (1982) Sri L a n k a 2 2 % en r e b a ñ o s , u n a semana después de la aparición de la enfermedad, disminuyendo a 1,9% seis semanas después. Clasificación por tipo somático y capsular. CUADRO Animales en relación III portadores y naturalmente con la incidencia de septicemia Animales portadores (%) en India* Zonas de baja incidencia Zonas de incidencia m o d e r a d a Zonas de alta incidencia inmunizados hemorrágica Animales naturalmente inmunizados (%) en Sri Lanka** 0 1,9 5,0-6,0 * Informe del país, Grupo de trabajo sobre septicemia hemorrágica, diciembre de 1979. * De Alwis y Sumanadasa (1982). 0,47 7,2 36,1 — 762 — t i e m p o s o b r e v i v e el o r g a n i s m o e n l o s n ó d u l o s l i n f á t i c o s r e t r o f a r í n g e o s , n i si p u e d e s o b r e v i v i r e n c u a l q u i e r a n i m a l o s ó l o en a l g u n o s a n i m a l e s i n m u n o d e f i cientes. El d e s c u b r i m i e n t o de animales q u e son de nasofaringe negativos p e r o d e n ó d u l o s l i n f á t i c o s p o s i t i v o s c a m b i ó t o t a l m e n t e el c o n c e p t o d e p o r t a d o r . P a r e c e r a z o n a b l e designar a los de nasofaringes positivas c o m o « p o r t a d o r e s activos » o « e s p a r c i d o r e s » y a los de n a s o f a r i n g e n e g a t i v a y d e n ó d u l o s linf á t i c o s p o s i t i v o s , « p o r t a d o r e s l a t e n t e s » . T o d a v í a r e s t a p o r d e t e r m i n a r si u n p o r t a d o r latente p u e d e convertirse en activo y en q u é circunstancias p u e d e o c u r r i r ese c a m b i o . 5 . El ciclo e p i d e m i o l ó g i c o . E s p r o b a b l e q u e l a a p a r i c i ó n e s p o n t á n e a d e u n f o c o en u n r e b a ñ o c e r r a d o se d e b a a l a t r a n s f o r m a c i ó n d e u n p o r t a d o r l a t e n t e e n a c t i v o y q u e el a n i m a l e m p i e c e a e s p a r c i r p a s t e m e l a s v i r u l e n t a s . O q u e se i n t r o d u z c a e n el r e b a ñ o a u n p o r t a d o r a c t i v o . E l f o c o c o m e n z a r á s ó l o c u a n d o el g e r m e n e x c r e t a d o se e n c u e n t r a en c a n t i d a d suficiente p a r a c o n t a m i n a r u n a n i m a l receptivo. L a m a g n i t u d del f o c o d e p e n d e r á d e l a p r o p o r c i ó n d e a n i m a l e s r e c e p t i v o s e n el r e b a ñ o o en l a a l d e a . U n ciclo s e m e j a n t e se p r e s e n t a e n l a F i g u r a 1. Portador oculto Malestar ortador activo (esparcidor) Portador activo (esparcidor) (6-9 semanas) Esparcimiento intermitente Contaminación de pastura, agua, etc. fección directa Animal naturalmente inmunizado Caso clínico Infección directa Animal receptivo Infección subclínica FIG. 1 El ciclo e p i d e m i o l ó g i c o en la s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a — 763 DIAGNÓSTICO 1. D i a g n ó s t i c o c l í n i c o . E l d i a g n ó s t i c o c l í n i c o se b a s a e n el h i s t o r i a l , l o s s i g n o s y l a s l e s i o n e s . E l historial incluye la p a u t a d e m o r t a l i d a d en relación c o n las c i r c u n s t a n c i a s e x t e r n a s : p r e s e n c i a p r e v i a d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a e n el r e b a ñ o , z o n a enzoótica, e d a d y especie a f e c t a d a s , y antecedentes de v a c u n a c i ó n . L a s tasas de m o r t a l i d a d p u e d e n oscilar entre 5 % en u n r e b a ñ o de bovinos en u n a z o n a e n z o ó t i c a c o n epizootia a n u a l regular y casi 1 0 0 % en b ú f a l o s d e á r e a libre d e e n f e r m e d a d q u e e x p e r i m e n t a u n f o c o e s p o r á d i c o d e s p u é s d e 10 a ñ o s . L o s signos y lesiones o b s e r v a d o s d e b e n e x a m i n a r s e t a m b i é n d e s d e la perspectiva del c o n t e x t o . 2 . D i a g n ó s t i c o de l a b o r a t o r i o . B i o q u í m i c a m e n t e , l a s c e p a s d e P. multocida que causan septicemia h e m o r r á g i c a n o s o n d i f e r e n t e s d e o t r o s m i e m b r o s d e l g r u p o y s ó l o se l a s puede diferenciar por serología. Los primeros ensayos serológicos que recib i e r o n a c e p t a c i ó n f u e r o n el e x p e r i m e n t o d e p r o t e c c i ó n p a s i v a e n r a t ó n y d e a g l u t i n a c i ó n e n p l a c a d e L i t t l e y L y o n (45) y el e x p e r i m e n t o d e p r o t e c c i ó n en r a t ó n de R o b e r t s (56). R o b e r t s identificó 4 t i p o s serológicos diferentes, a los q u e d e s i g n ó de I a I V . T o d a s las cepas de septicemia h e m o r r á g i c a p e r t e n e c í a n a l t i p o I . C a r t e r ( 1 3 , 14) i d e ó u n a p r u e b a d e h e m a g l u t i n a c i ó n i n d i recta e identificó 4 tipos diferentes, A , B , D y E , b a s a d o s en los antígenos c a p s u l a r e s . Se p u s o en evidencia las l i m i t a c i o n e s d e a m b a s técnicas c u a n d o N a m i o k a y M u r a t a (50) i d e n t i f i c a r o n 1 1 t i p o s « s o m á t i c o s » . D e s c u b r i e r o n d o s t i p o s s o m á t i c o s e n el t i p o I d e R o b e r t s y e n el B d e C a r t e r , u n o d e ellos c a u s a b a s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a ( t i p o 6) y el o t r o n o ( t i p o 11). N a m i o k a y M u r a t a (49) d e s c r i b i e r o n t a m b i é n u n a t é c n i c a s i m p l i f i c a d a d e t i p i f i c a c i ó n d e l a n t í g e n o c a p s u l a r . H e d d l e s t o n y c o l . (42) i n f o r m a r o n s o b r e u n a p r u e b a d e p r e c i p i t a c i ó n e n gel d e a g a r ( A G P T ) c o n a n t í g e n o t e r m o e s t a b l e , e i d e n t i f i c a r o n 16 t i p o s d i f e r e n t e s d e P. multocida. A v e c e s se l o s c o n o c e c o m o tipos « somáticos », p o s i b l e m e n t e p o r q u e los serotipos de s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a d e l t i p o 2 d e H e d d l e s t o n se a s e m e j a n a l t i p o s o m á tico 6 de N a m i o k a . E n el C u a d r o I V se p r e s e n t a n l a s d i f e r e n t e s t é c n i c a s s e r o l ó g i c a s e l a b o r a d a s y la u b i c a c i ó n d e los s e r o t i p o s de s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a en c a d a sist e m a . E n c a d a m é t o d o d e t i p i f i c a c i ó n se o b s e r v a u n a p e q u e ñ a c a n t i d a d d e cepas, bioquímicamente identificadas c o m o « Pasteurellas » y relacionadas c o n l a e n f e r m e d a d , q u e e s c a p a n a l a t i p i f i c a c i ó n . B r o g d e n y P a c k e r (12) e n u n e s t u d i o c o m p a r a t i v o d e d i s t i n t o s m é t o d o s d e t i p i f i c a c i ó n d e P. multocida concluyeron q u e los serotipos d e t e r m i n a d o s p o r u n sistema n o coinciden con aquellos identificados por otro sistema. Esa conclusión n o sorprende, p o r q u e el t i p o d e p r e p a r a c i ó n d e a n t í g e n o u s a d o y l a s t é c n i c a s a d o p t a d a s v a r í a n e n cada caso. — 764 — CUADRO IV Sistemas adoptados para la clasificación de Pasteurella m u l t o c i d a y la posición de los serotipos de septicemia hemorrágica Número de tipos Técnica Autores Posición de serotipos de septicemia hemorrágica Little y Lyon (1943) Aglutinación en placas y prueba de protección pasiva de r a t ó n . l,2y3 2 Roberts (1947) P r u e b a de protección pasiva de r a t ó n . I a IV I Carter (1955) Clasificación p o r tipo capsular mediante hemaglutinación indirecta, u s a n d o antígeno termoinestable (56°C durante 30 minutos). A , B, D y E B y E Namioka y Murata (1961) Clasificación simplificada p o r tipo capsular en prueba de aglutinación en placas, usando cultivos recientes. Idem ByE Namioka y Murata (1961) Clasificación por tipo « somático » en prueba de aglutinación, usando células sometidas a H C l 1 a 11 6 Heddleston y col. (1972) P r u e b a de inmunodifusión en gelosa, usando antígeno termoresistente (100°C durante 1 h o r a ) 1 a 16 2y 5 a) Un sistema práctico de identificación de serotipos. A fin d e d e t e r m i n a r l o s c u l t i v o s , t o d o s l o s p a í s e s d e b e n a d o p t a r u n sis­ t e m a u n i f o r m e y p r á c t i c o d e i d e n t i f i c a c i ó n d e s e r o t i p o s . E n el G r u p o d e t r a ­ bajo F . A . O . / A . P . H . C . A . sobre septicemia hemorrágica realizado en C o l o m b o e n 1979 se r e c o m e n d ó el u s o d e u n a c o m b i n a c i ó n « s o m á t i c o c a p s u l a r » ( N a m i o k a - C a r t e r ) . L a t i p i f i c a c i ó n del a n t í g e n o c a p s u l a r es r e l a t i ­ v a m e n t e s e n c i l l a , p e r o l a t i p i f i c a c i ó n del a n t í g e n o s o m á t i c o exige l a p r o d u c ­ ción de antisueros específicos del t i p o , q u e requiere u n c o m p l e j o sistema de a b s o r c i ó n (48) s e g ú n se i n d i c a e n el C u a d r o V . P o r c o n s i g u i e n t e , e n l a m a y o r í a d e l o s p a í s e s se p r a c t i c a l a t i p i f i c a c i ó n c a p s u l a r y e n r e l a t i v a m e n t e — 765 — CUADRO Cepas Grupo « O » 1. V y antisueros usados en la preparación del factor para la clasificación por tipo somático* Cepas usadas para la absorción Antisueros (ml) Número de placas Y P C Dilución en solución fisiológica 15 1:10 1:10 1:10 P 8 2. 3397 (0,3); Kobe 5 (0,5); M 4 (0,2) P 27 (0,6); Kobe 6 (0,2) Kobe 5 15 3. 4. 5. P 8 (1,0) M 17 (0,6); M 11 (0,4) T S 8 (0,5); V A 3 (0,5) M 17 M 4 Kobe 6 15 15 10 6. 7. R 479 (1,0) P M (1,0) Kobe 6 10 15 8. 147 (1,0) Hígado TS 8 Kobe 5 9. 10. T S 9 (1,0) P 8 P 27 11. 989 (1,0) R 479 suero 10 10 10 10 1:10 1:10 1:10 1:10 1:10 1:10 1:10 1:10 * Según Namioka (1978). p o c o s l a s o m á t i c a . E n el I n s t i t u t o d e I n v e s t i g a c i o n e s V e t e r i n a r i a s d e Sri L a n k a , l a t i p i f i c a c i ó n del a n t í g e n o s o m á t i c o se e f e c t ú a p o r m e d i o d e l m é t o d o de aglutinación en t u b o s con diferentes diluciones de s u e r o . L o s antisueros, n o a b s o r b i d o s , s o n p r o d u c i d o s en conejos c o n t r a la t o t a l i d a d de g é r m e n e s u s a n d o e x t r a c t o s , t r a t a d o s c o n H C l , d e l a c e p a d e p r u e b a , q u e es el s e r o t i p o asiático 6:B de la septicemia h e m o r r á g i c a : l a c e p a a f r i c a n a d e septicemia h e m o r r á g i c a (6:E) y u n a cepa a u s t r a l i a n a (11:B) q u e n o p r o d u c e la septicemia h e m o r r á g i c a s o n u t i l i z a d o s c o m o t e s t i g o . Se p u e d e l l e v a r a c a b o ese p r o c e d i ­ m i e n t o c o n el a n t í g e n o c a p s u l a r B , q u e s ó l o p o s e e d o s t i p o s s o m á t i c o s (6 y 11), y c o n el a n t í g e n o c a p s u l a r E , d e u n s o l o t i p o s o m á t i c o ( 6 ) , y a q u e a m b o s c o r r e s p o n d e n a los s e r o t i p o s d e la septicemia h e m o r r á g i c a . C a r t e r y C h e n g a p p a (19) s u g i r i e r o n c o m b i n a r l o s s i s t e m a s d e H e d d l e s t o n y C a r t e r . L a t i p i f i c a c i ó n d e H e d d l e s t o n ( p o r A G P T ) es a v e c e s u t i l i z a d a p a r a la t i p i f i c a c i ó n s o m á t i c a y u s a u n a n t í g e n o s o b r e n a d a n t e t e r m o r e s i s t e n t e (100°C d u r a n t e 1 h o r a ) en lugar de las células residuales s o m e t i d a s a H C l del sistema de N a m i o k a . b) Metodología rápida para diagnóstico experimental. E n g e n e r a l , el m a t e r i a l q u e l l e g a al l a b o r a t o r i o e s t á c o n t a m i n a d o y , c o m ú n m e n t e , el c u l t i v o d i r e c t o n o l o g r a a i s l a r l a P a s t e u r e l l a . L a i n o c u l a c i ó n d e r a t ó n p u e d e s e r v i r d e « s e l e c c i ó n b i o l ó g i c a » p a r a p u r i f i c a r el c u l t i v o y , al m i s m o t i e m p o , a s e g u r a r s u v i r u l e n c i a p a r a e s t e a n i m a l , q u e es i m p o r t a n t e p a r a el d i a g n ó s t i c o . E l c u l t i v o p u r i f i c a d o p u e d e s o m e t e r s e a t i p i f i c a c i ó n c a p - — 766 — sular simplificada m e d i a n t e la p r u e b a de aglutinación en p l a c a s , u s a n d o los cultivos recientes y sueros h i p e r i n m u n e s de conejo. Este procedimiento descrito p e r m i t e realizar u n d i a g n ó s t i c o definitivo d e n t r o de las 48 h o r a s de la r e c e p c i ó n del m a t e r i a l . Se e x p u s i e r o n t a m b i é n ( 5 , 64) l a s p r u e b a s r á p i d a s d e doble inmunodifusión en gelosa, u s a n d o antisueros de conejo y antígeno de C a r t e r (calentado a 5 6 ° C d u r a n t e 30 m i n u t o s ) , y las p r u e b a s de i n m u n o d i f u sión radial, u s a n d o antisueros h i p e r i n m u n e s de t e r n e r o . L a p r i m e r a m e t o d o logía identifica f u n d a m e n t a l m e n t e lo conocido c o m o antígeno « capsular » y , e n r e a l i d a d , se l a u s a p a r a d i s t i n g u i r l a s c e p a s e n c a p s u l a d a s d e las n o e n c a p s u l a d a s (26). R e c i e n t e m e n t e , se p r o p u s i e r o n m é t o d o s m á s a c e l e r a d o s p a r a i d e n t i f i c a r los s e r o t i p o s d e P. multocida responsables de la septicemia hemorrágica. H a s t a el m o m e n t o , l a p r o d u c c i ó n d e h i a l u r o n i d a s a fue c o n s i d e r a d a c o m o una propiedad limitada a algunas bacterias G r a m positivas. Carter y Cheng a p p a (17) a n a l i z a r o n 7 4 c e p a s d e P. multocida, y d e s c u b r i e r o n q u e el s e r o t i p o 6 : B p r o d u c e h i a l u r o n i d a s a e n f o r m a c o n s t a n t e . T o d o s los c a s o s a i s l a d o s del s e r o t i p o a f r i c a n o 6 : E q u e p r o d u c e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a y d e l a u s t r a liano 11:B, q u e n o p r o d u c e la e n f e r m e d a d , r e s u l t a r o n negativos. E s o s investig a d o r e s u s a r o n la m e t o d o l o g í a r á p i d a de estrías s o b r e placas en las cuales los cultivos de la p r u e b a fueron colocados en u n m e d i o c o m p u e s t o de h i a l u r o n i d i t a d e s o d i o y f r a c c i ó n V d e a l b ú m i n a b o v i n a . P a r a el a n á l i s i s d e l s u b s t r a t o n o d e g r a d a d o se i n u n d a l a p l a c a c o n á c i d o a c é t i c o : d e e s t a m a n e r a se d e t e c t a la d e g r a d a c i ó n del s u b s t r a t o q u e r o d e a las c o l o n i a s . D e b e e x a m i n a r s e u n a g a m a m á s amplia de cultivos p a r a determinar esa p r o p i e d a d (producción de hialuronidasa) q u e , u n a vez clarificada, p u e d e convertirse en p r u e b a r á p i d a y útil d e d i a g n ó s t i c o d e ese s e r o t i p o . C a r t e r y C h e n g a p p a (18) d e s c r i b i e r o n el u s o d e c o n t r a - i n m u n o e l e c t r o f o r e s i s p a r a l a r á p i d a i d e n t i f i c a c i ó n d e l o s t i p o s B y E . Se u s a r o n el antígeno I H A (56°C d u r a n t e 30 m i n u t o s ) y antisueros de conejo. Los tipos B y E c o n sueros h o m ó l o g o s d u r a n t e 30 m i n u t o s p r o d u j e r o n b a n d a s precisas de p r e c i p i t a c i ó n , sin r e a c c i o n e s c r u z a d a s . TRATAMIENTO R a r a v e z se i n t e n t a el t r a t a m i e n t o , p u e s si se l o l l e v a a c a b o d e s p u é s d e l a a p a r i c i ó n d e s i g n o s d e l a e n f e r m e d a d es m u y b a j a l a t a s a d e r e s u l t a d o s s a t i s f a c t o r i o s . E n c o n s e c u e n c i a , en las c o n d i c i o n e s p r e d o m i n a n t e s en las áreas e n z o ó t i c a s d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a , l a t a s a d e m o r t a l i d a d es c a s i del 1 0 0 % . E l t r a t a m i e n t o es e f i c a z s ó l o e n l a s fases i n i c i a l e s . E l ú n i c o m é t o d o p r á c t i c o es c o n t r o l a r r e g u l a r m e n t e ( d o s v e c e s p o r d í a ) l a t e m p e r a t u r a r e c t a l d e t o d o s l o s a n i m a l e s del r e b a ñ o , d e s p u é s d e l a n o t i f i c a c i ó n del p r i m e r c a s o , y c o m e n z a r d e i n m e d i a t o el t r a t a m i e n t o c o n a n t i b i ó t i c o s . E n m u c h o s p a í s e s se s i g u e o b s e r v a n d o l a v i e j a p r á c t i c a d e l a s s u l f a m i d a s . L a s o l u c i ó n al 3 3 % d e s u l f a d i m i d i n a s ó d i c a a p l i c a d a p o r v í a i n t r a v e n o s a e n d o s i s d e 1 ml p o r — 767 2 , 2 6 k g d e p e s o c o r p ó r e o es e f i c a z , p e r o n o es el m e j o r m e d i c a m e n t o . L a s dificultades prácticas de la t e r a p é u t i c a i n t r a v e n o s a y las consecuencias de la f i l t r a c i ó n e n t e j i d o s s u b c u t á n e o s d e s a c o n s e j a n ese t r a t a m i e n t o . E l a u t o r d e s c u b r i ó la conveniencia y eficacia de la aplicación i n t r a m u s c u l a r de e s t r e p t o m i c i n a u oxitetraciclina. P o c o s son los informes s o b r e septicemia h e m o r r á g i c a d e c e p a s P. multocida resistentes a los antibióticos. E n experimentos real i z a d o s e n Sri L a n k a c o n c e p a s d e M a l a s i a , I n d o n e s i a , T a i l a n d i a , B i r m a n i a , I n d i a y Sri L a n k a se o b s e r v a r o n s e n s i b i l i d a d a l o s 10 a n t i b i ó t i c o s c o m u n e s u s a d o s , sólo la c e p a d e T a i l a n d i a m a n i f e s t ó resistencia parcial a la e s t r e p t o micina. Los antibióticos usados fueron penicilina, ampicilina, estreptomicina, tetraciclina, cloramfenicol, eritromicina, neomicina, sulfadiacina y u n a c o m b i n a c i ó n d e s u l f a m i d a - t r i m e t o p r i m a . C a s i n u n c a se i n t e n t a el t r a t a m i e n t o c o n s u e r o h i p e r i n m u n e . E n e x p e r i m e n t o s , 6 0 - 1 0 0 ml d e s u e r o h i p e r i n m u n e a p l i c a d o a b ú f a l o s d e 2 a ñ o s d e e d a d ( a p r o x . 180 k g d e p e s o ) e n d i f e r e n t e s m o m e n t o s , d e s d e 6 h o r a s a n t e s d e l a i n f e c c i ó n h a s t a 18 h o r a s d e s p u é s de la m i s m a , n o p r o d u c e efecto t e r a p é u t i c o (44). CONTROL T o d o s l o s p a í s e s , e n l o s q u e se p r e s e n t a l a s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a , c o i n c i d e n e n q u e l a v a c u n a c i ó n es el m é t o d o d e c o n t r o l . L a m a y o r í a d e l a s v a c u n a s d e s t i n a d a s a e s a f i n a l i d a d se p r o d u c e n e n l o s p a í s e s u s u a r i o s . L a m a y o r í a de los países u s a n la v a c u n a de caldo b a c t e r i a n o o la precipit a d a con alumbre (APV) y unos pocos, u n a vacuna con adyuvante oleoso ( O A V ) . S ó l o T a i l a n d i a u s a u n a v a c u n a d e gel d e h i d r ó x i d o d e a l u m i n i o . L a m a y o r í a d e las v a c u n a s u s a d a s n o s o n p r o d u c t o s u n i f o r m a d o s . L a s v a c u n a s p r o d u c i d a s e n d i f e r e n t e s p a í s e s v a r í a n e n l a c e p a d e l g e r m e n u s a d o , e n el m é t o d o de cultivo y principalmente en la cantidad de bacterias contenidas en u n a dosis (factor decisivo en la i n m u n i z a c i ó n ) . 1. S e l e c c i ó n de c e p a s p a r a v a c u n a s . I n d i a u s a l a c e p a « P 5 2 » q u e se c o n s i d e r a p o s e e p r o p i e d a d e s e s p e c i a l e s d e i n m u n i z a c i ó n . I n d o n e s i a u s a la c e p a b i r m a n a « K a t h a », p o r la m i s m a r a z ó n . Casi t o d o s los o t r o s países e m p l e a n cepas locales. M a l a s i a u s a 5 cepas p r o c e d e n t e s d e 5 regiones diferentes del p a í s . B a i n (10) l l e v ó a c a b o p r u e b a s d e i n m u n i d a d a c t i v a e n r a t o n e s u s a n d o Pasteurella multocida p r o d u c i d a en p r i m o c u l t i v o s y en subcultivos de células b o v i n a s . D e s c u b r i ó q u e , u s a n d o l o s p r i m o c u l t i v o s d e b a c t e r i a s , se o b t e n í a u n a p r o t e c c i ó n c r u z a d a e n t r e las cepas asiáticas (6:B) y las c e p a s a f r i c a n a s de septicemia h e m o r r á g i c a (6:E) así c o m o la c e p a a u s t r a l i a n a « 989 » (11:B) q u e n o p r o d u c e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a . C o n t r a r i a m e n t e al u s a r l o s s u b c u l t i v o s , d e s a p a r e c í a l a p r o t e c c i ó n c r u z a d a y s ó l o se o b t e n í a p r o t e c c i ó n h o m ó l o g a . D e Alwis ( d a t o s inéditos) c o m p a r a n d o la i n m u n o g e n i c i d a d de las c e p a s de M a l a s i a , I n d o n e s i a , T a i l a n d i a , B i r m a n i a , I n d i a y Sri L a n k a , d e s c u b r i ó v a r i a c i o n e s — 768 — i n t e r - c e p a s e i n t r a - c e p a s , e x p r e s a d a s p o r el r e n d i m i e n t o e n p e s o s e c o d e l a s bacterias c u a n d o crecen en c o n d i c i o n e s iguales. E n c a m b i o , en los análisis de protección activa c r u z a d a efectuados en r a t o n e s , utilizando dosis uniformes b a s a d a s s o b r e el p e s o s e c o , n o se o b s e r v a r o n d i f e r e n c i a s i n m u n ó g e n a s i m p o r t a n t e s e n t r e las c e p a s . 2 . C o n s e r v a c i ó n del l o t e de s i e m b r a . Es de c o m ú n aceptación q u e los mejores agentes de i n m u n i z a c i ó n son los c u l t i v o s a i s l a d o s f r e s c o s . P o r e s o , p e r i ó d i c a m e n t e se i n t r o d u c e el l o t e d e s i e m b r a p a r a v a c u n a s en b o v i n o s o b ú f a l o s r e c e p t i v o s , d e l o s q u e en l a e t a p a s e p t i c é m i c a se e x t r a e s a n g r e q u e se c o n s e r v a p o s t e r i o r m e n t e en e s t a d o c o n g e l a d o . C o m o m e d i o p a r a el s u b c u l t i v o d e s a n g r e i n f e c t a d a y c o n g e l a d a , se u s a t r i p tosa agar con 0 , 3 % de extracto de levadura y 5 % de sangre de buey o búfalo. E l s u b c u l t i v o p u e d e c o n t i n u a r t o d o el t i e m p o q u e se f o r m a n g r a n d e s c o l o n i a s e n c a p s u l a d a s (de 2 m m d e d i á m e t r o ) e n m e n o s d e 2 4 h o r a s a 3 7 ° C . E n c u a l q u i e r e t a p a del p r o c e s o del s u b c u l t i v o p u e d e o c u r r i r d i s o c i a c i ó n e s p o n t á n e a , o r i g i n a n d o c o l o n i a s p e q u e ñ a s y p r e c i s a s ; e s o s c u l t i v o s d e b e n ser e x c l u i d o s . 3 . C u l t i v o de bacterias para la p r o d u c c i ó n de v a c u n a s . a) Método. M u c h o s son los m é t o d o s de cultivo u s a d o s en los diferentes países, q u e fluctúan d e s e n c i l l o s c u l t i v o s e s t á t i c o s d e c a l d o y d e n s o s c u l t i v o s a i r e a d o s al uso de fermentadores c o m p l e j o s . L o s caldos ordinarios p a r a cultivos p u e d e n usarse p a r a la p r o d u c c i ó n de v a c u n a s b a c t e r i a n a s simples o p a r a la v a c u n a precipitada con a l u m b r e . L o s cultivos densos, diluidos a d e c u a d a m e n t e en c a s o d e n e c e s i d a d , s i r v e n p a r a l a p r o d u c c i ó n d e v a c u n a p r e c i p i t a d a al a l u m bre y, en especial, de la v a c u n a con adyuvante oleoso. E l u s o d e r e c i p i e n t e s p r o v i s t o s d e u n s i s t e m a d e a g i t a c i ó n es el m é t o d o m á s p o p u l a r p a r a la p r o d u c c i ó n de cultivos densos, p e r o tiene la desventaja d e e x p e r i m e n t a r u n a c o n t a m i n a c i ó n f r e c u e n t e (6). I n d i a e I r a q n o t i f i c a r o n el u s o d e u n a s u s p e n s i ó n d e g e l o s a ( 3 , 7 ) . E s e es u n p r o c e s o difícil y , c o n s i g u i e n t e m e n t e , se i n f o r m a q u e s ó l o 2 , 8 % del t o t a l d e l a p r o d u c c i ó n d e l a I n d i a e s t á c o n s t i t u i d o p o r l a v a c u n a d e a d y u v a n t e o l e o s o . Sri L a n k a p r e f i e r e u s a r b o t e l l a s P y r e x d e 10-20 l i t r o s , o u n r e c i p i e n t e e s c a l o n a d o s i m p l e d e c u l t i v o l l a m a d o f e r m e n t a d o r (Bellco G l a s s I n c . , E . U . A . ) c o n filtro d e a i r e . E s t e ú l t i m o i n s t r u m e n t o , d o t a d o d e b r a z o s l a t e r a l e s y u n s i f ó n i m p r o v i s a d o , fue u s a d o t a m b i é n p a r a la producción de cultivos continuos. b) Medios de cultivo. Se e m p l e a r o n m e d i o s b a s a l e s c o n d i v e r s a s f o r m a s d e e n r i q u e c i m i e n t o y a l g u n o s d e ellos se p r e s e n t a n e n el C u a d r o V I . c) Densidad de bacterias. L a d e n s i d a d es i m p o r t a n t e p o r q u e d e t e r m i n a l a p o t e n c i a d e l a v a c u n a y l a e c o n o m í a en l a p r o d u c c i ó n d e l a v a c u n a . E s d e a c e p t a c i ó n g e n e r a l i z a d a q u e — 769 — p a r a i n m u n i z a r u n b o v i n o se r e q u i e r e a p r o x i m a d a m e n t e 2 m g d e b a c t e r i a seca y q u e , p o r lo t a n t o , debe establecerse u n c o n t e n i d o m í n i m o de bacterias por dosis. CUADRO Algunos medios de cultivos usados contra la septicemia VI en la preparación hemorrágica de vacunas Medio recomendado en la monografía sobre septicemia hemorrágica de la F . A . 0 . (Bain y col., 1982) Tryptone (Oxoid) o casitone (Difco) 120 g Sucrosa 48 g HNa PO -12 HO 172 g KH PO -7 HO 44 g MgSO -7 H O 24 g Extracto de levadura 100 g Caseína hidrolizada (a partir de 400 g de caséina p o r autodigestión del páncreas (filtrado con el sistema Seitz) 1 litro A g u a destilada, hasta 25 litros 2 4 2 2 4 4 2 2 Medio usado en Malasia ( T h o m a s , 1968) P e p t o n e (Oxoid) L a b Lemco (Oxoid) Cloruro de sodio Bicarbonato de sodio Glucosa Extracto de levadura Páncreas porcino autodigerido (filtrado con el sistema Seitz) A g u a destilada, hasta Medio usado en Egipto (Geneidy y col., 1967) « Casamino acids » Casitone (Difco) o tryptone (Oxoid) Extracto de levadura Sucrosa MgSO T a m p ó n de fosfato A g u a destilada 4 Medio * * * usado en Sri Lanka (Arawwawela y col., 1981) Caseína hidrolizada (BDH) Azúcar de caña Extracto de levadura Cloruro d e sodio H i d r ó g e n o dipotásico (anhidroso) Fosfato monopotásico dihidrógeno (anhidroso) P u e d e añadirse un extracto pépsico de sangre en la concentración final de 0 , 5 % * P r e p a r a d o c o m o c o n c e n t r a d o , esterilizado con filtro y a ñ a d i d o . 150 150 75 75 30 60 750 15 g g g g g g ml litros 500 120 100 45 25 g g g g g 25 litros 0,2 0,6 0,6 0,5 0,86 0,136 % % % % % % — 770 — P o c o s p a í s e s t i e n e n e n c u e n t a el c o n t e n i d o d e b a c t e r i a s s e c a s p a r a e x p r e s a r l a p o t e n c i a d e l a v a c u n a . Se i n f o r m a q u e el c a l d o b a c t e r i a n o d e M a l a s i a contiene u n a d e n s i d a d m e d i a d e 0,297 m g / m l y la v a c u n a de a d y u v a n t e o l e o s o u n p r o m e d i o d e 3 , 8 8 m g / d o s i s (2). E n Sri L a n k a , e n 12-16 h o r a s se o b t i e n e u n a d e n s i d a d d e c u l t i v o d e 1,5-2,0 m g / m l d e p e s o s e c o . O t r o s p a r á m e t r o s u s a d o s p a r a e x p r e s a r l a d e n s i d a d del c u l t i v o s o n l a t u r b i e d a d y l a n u m e r a c i ó n t o t a l y v i a b l e . T e n i e n d o p r e s e n t e q u e l a c a n t i d a d del a n t í g e n o c a p s u l a r p u e d e v a r i a r e n t r e l a s c e p a s , p a r e c e ser m á s v a l i o s a l a t u r b i e d a d q u e la n u m e r a c i ó n de células. d) Vacuna bacteriana. E s a es l a v a c u n a m á s p o p u l a r e n l a m a y o r í a d e los p a í s e s , p e r o se h a d e d i c a d o p o c o e s f u e r z o p a r a d e t e r m i n a r su p o t e n c i a . E s v a r i a b l e l a d u r a c i ó n d e la i n m u n i d a d a l e g a d a , fluctuando d e 10-12 s e m a n a s ( d e s p u é s d e 2 i n o c u l a c i o n e s r e a l i z a d a s c o n 2-3 s e m a n a s d e i n t e r v a l o ) en Z a m b i a , h a s t a 9 m e s e s d e i n m u n i d a d a l e g a d a en S u d á n . e) Vacuna precipitada con alumbre. P a r e c e q u e es l a v a c u n a m á s p o p u l a r e n l o s p a í s e s a s i á t i c o s . Se a l e g a q u e l a i n m u n i d a d d u r a 5-6 m e s e s . E n e x p e r i m e n t o s c o n t r o l a d o s r e a l i z a d o s e n Sri L a n k a con v a c u n a u n i f o r m a d a de 2,5 m g de c o n t e n i d o de bacterias p o r dosis se d e t e r m i n ó q u e l a d u r a c i ó n d e l a i n m u n i d a d c o n r e s p e c t o a l a i n o c u l a c i ó n de p r u e b a e r a d e 3-4 m e s e s ( 3 3 ) . f) Vacuna de gel de hidróxido de aluminio. S ó l o se u s a e n T a i l a n d i a y se a l e g a u n a i n m u n i d a d d e 4 m e s e s . g) Vacuna con adyuvante oleoso. D e t o d a s l a s v a c u n a s d i s p o n i b l e s es l a m á s p o t e n t e p e r o se p r o d u c e e n r e l a t i v a m e n t e p o c o s p a í s e s ( M a l a s i a , I n d o n e s i a , Sri L a n k a , E g i p t o , I r a q y u n a p e q u e ñ a p a r t e de la p r o d u c c i ó n total de India y B a n g l a D e s h ) . Su p o t e n cia es m u y v a r i a b l e . E n e x p e r i m e n t o s c o n t r o l a d o s l l e v a d o s a c a b o en I n d o n e sia y Sri L a n k a se r e g i s t r a r o n u n a d u r a c i ó n d e 6-9 m e s e s d e i n m u n i d a d , y d e 1 a ñ o e n M a l a s i a . B a n g l a D e s h a l e g a 21 m e s e s d e i n m u n i d a d e I n d i a 2 8 m e s e s (4, 3 ) . E n Sri L a n k a , l o s e x p e r i m e n t o s se r e a l i z a r o n e n t e r n e r o s d e 4-6 m e s e s de e d a d , con dosis única de v a c u n a oleosa y criados en a m b i e n t e s t o t a l m e n t e libres d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a y en c o n t a c t o c o n a n i m a l e s t e s t i g o s n o v a c u n a d o s . E n experimentos idénticos llevados a c a b o en zonas enzoóticas de septicemia h e m o r r á g i c a , los a n i m a l e s seguían i n m u n i z a d o s c o n t r a la e n f e r m e d a d 14 m e s e s d e s p u é s d e l a v a c u n a c i ó n , el m á s p r o l o n g a d o p e r í o d o d e e s t u d i o . Algunos animales testigos no v a c u n a d o s t a m b i é n adquirieron i n m u n i d a d d u r a n t e e s t e p e r í o d o . E n z o n a s e n z o ó t i c a s , p a r e c e q u e l a e x p o s i c i ó n a la infección p r o l o n g a la i n m u n i d a d de los a n i m a l e s v a c u n a d o s . L a elevada viscosidad y la consiguiente dificultad de i n o c u l a c i ó n dificult a n e n o r m e m e n t e el u s o d e v a c u n a c o n a d y u v a n t e o l e o s o . E n Sri L a n k a se l o g r ó r e d u c i r en c i e r t a m e d i d a l a v i s c o s i d a d u s a n d o s ó l o 4 % d e l a n o l i n a e n l u g a r del 8 - 1 2 % i n d i c a d o e n a l g u n a s f ó r m u l a s . — 771 4 . C o n t r o l de las v a c u n a s . L a m a y o r í a d e los países a c e p t a q u e u n a p r u e b a d e la eficacia de la v a c u n a es l a a u s e n c i a d e e n f e r m e d a d d e s p u é s d e l a v a c u n a c i ó n . A l p a r e c e r , l a m a y o r í a de los l a b o r a t o r i o s n o p u e d e llevar a c a b o p r u e b a s rutinarias de vacunas en bovinos o b ú f a l o s , o en otros animales de l a b o r a t o r i o diferentes d e l o s r a t o n e s . E n M a l a s i a , I n d i a y Sri L a n k a se i n t e n t ó r e a l i z a r p r u e b a s d e p o t e n c i a e n r a t o n e s ( 5 2 , 4 1 , 2 0 , 6 0 ) . Se e l a b o r a r o n d i v e r s o s e s q u e m a s d e v a c u n a c i ó n - c o n f r o n t a c i ó n p a r a o b t e n e r r e s u l t a d o s r á p i d o s . C o n este o b j e t i v o , t o d o s los i n v e s t i g a d o r e s a d o p t a r o n la técnica de Ose y M u e n s t e r (54). D e b e i n d i c a r s e , sin e m b a r g o , q u e l o s r e c i é n n o m b r a d o s n o u s a r o n s e r o t i p o s d e Pasteurella que producen septicemia hemorrágica. Arbitrariamente a d a p t a r o n l a p r o t e c c i ó n d e 2 u n i d a d e s l o g r e g i s t r a d a s e n r a t o n e s v a c u n a d o s (en c o m p a r a c i ó n c o n los testigos n o v a c u n a d o s ) c o m o índice de p r o t e c c i ó n a d e c u a d a en b o v i n o s , p e r o n o p u d i e r o n establecer u n a correlación entre potencia de v a c u n a en r a t o n e s y p o t e n c i a en b o v i n o s . P o r c o n s i g u i e n t e , las p r u e b a s actuales sirven de guía a p r o x i m a d a p a r a determinar la conveniencia de u n a v a c u n a , p e r o existe l a n e c e s i d a d d e e s t a b l e c e r l a c o r r e l a c i ó n r e a l e n t r e p o t e n cia e n r a t o n e s y p o t e n c i a e n b o v i n o s o b ú f a l o s m e d i a n t e u n a v a c u n a u n i f o r m e c o n t r a la septicemia h e m o r r á g i c a . P a r a l a p r u e b a d e p r o t e c c i ó n c o n r a t o n e s d e O s e y M u e n s t e r , si se l a l l e v a a c a b o e n l a f o r m a m á s e c o n ó m i c a , se r e q u i e r e n a p r o x i m a d a m e n t e 5 0 r a t o n e s p o r l o t e d e v a c u n a . E s p r o b a b l e q u e ese t i p o d e e x p e r i m e n t o s se e n c u e n t r e f u e r a del a l c a n c e m e d i o d e l o s l a b o r a t o r i o s d e A s i a y A f r i c a y q u e s ó l o p u e d a n llevar a c a b o p r u e b a s c o n a l g u n o s lotes o c a s i o n a l e s . E n la p r u e b a r u t i n a ria de t o d o s los lotes de v a c u n a s debe asegurarse la p u r e z a , aglutinabilidad y el c o n t e n i d o d e a n t í g e n o v a l i é n d o s e d e m é t o d o s r á p i d o s t u r b i d i m é t r i c o s . 5 . M é t o d o s de v a c u n a c i ó n . Diferentes países a d o p t a n diversos planes de v a c u n a c i ó n , q u e oscilan entre : c a m p a ñ a de v a c u n a c i ó n a n u a l , v a c u n a c i ó n alrededor de los focos o la v a c u n a c i ó n a n t e s del c o m i e n z o d e l a e s t a c i ó n d e s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a . E l ú l t i m o m e n c i o n a d o es el p l a n m á s p o p u l a r p o r q u e e n l a m a y o r í a d e l o s p a í s e s l a e n f e r m e d a d t i e n e u n a i n c i d e n c i a e s t a c i o n a l . E s m a y o r el p r e d o m i n i o d e l a e n f e r m e d a d en aquellas Zonas del Tercer M u n d o en las q u e las prácticas d e zootecnia son primitivas y los g a n a d e r o s a c e p t a n difícilmente la v a c u n a c i ó n . Sólo ante la aparición de focos, la m a y o r í a de los g a n a d e r o s desea c o o p e r a r en l a v a c u n a c i ó n . E n Sri L a n k a , el m a y o r o b s t á c u l o al p r o g r a m a d e v a c u n a c i ó n fue l a f a l t a d e c o o p e r a c i ó n d e l o s h a c e n d a d o s ( 2 5 ) . A e x c e p c i ó n d e l o s p r o g r a m a s de v a c u n a c i ó n intensivos especiales en z o n a s específicas, la cobert u r a d e v a c u n a c i ó n es s u m a m e n t e b a j a y f l u c t ú a e n t r e 2 0 y 4 0 % . E n u n e s t u d i o d e t a l l a d o r e a l i z a d o e n Sri L a n k a se i n d i c ó q u e l a c o b e r t u r a t o t a l a n u a l es de a p r o x i m a d a m e n t e 6 0 % del g a n a d o r e c e p t i v o en las z o n a s e n z o ó t i c a s y q u e casi l a m i t a d fue v a c u n a d o s ó l o a n t e l a a p a r i c i ó n d e f o c o s . S o n p o c a s l a s e v a l u a c i o n e s c i e n t í f i c a s d e la e f i c a c i a d e l o s p r o g r a m a s d e i n m u n i z a c i ó n . U n a e v a l u a c i ó n r e a l i z a d a e n Sri L a n k a i n d i c ó q u e l a v a c u n a - — 772 — c i ó n r u t i n a r i a c o n v a c u n a p r e c i p i t a d a al a l u m b r e p r o d u j o u n a d i s m i n u c i ó n d e i m p o r t a n c i a e s t a d í s t i c a e n el p o r c e n t a j e d e r e b a ñ o s i n f e c t a d o s , p e r o n o e n l a t a s a d e m o r b i l i d a d d e s p u é s del a s e n t a m i e n t o d e l a e n f e r m e d a d e n el r e b a ñ o (32). E s e h e c h o i n d i c a el r e d u c i d o g r a d o y l a b r e v e d u r a c i ó n d e l a i n m u n i d a d o f r e c i d a p o r las v a c u n a s : o f r e c e s u f i c i e n t e p r o t e c c i ó n p a r a p r e v e n i r la a p a r i c i ó n del p r i m e r c a s o , p e r o es i m p o t e n t e a n t e el g r a n p e s o d e l a i n f e c c i ó n d e n t r o del r e b a ñ o , e n el c u a l l a e n f e r m e d a d c l í n i c a se i n s t a l a . 6. A s p e c t o s e c o n ó m i c o s del c o n t r o l . S o n p o c o s los d a t o s s o b r e l o s a s p e c t o s e c o n ó m i c o s d e l a l u c h a c o n t r a l a septicemia hemorrágica. E n u n p r o g r a m a intensivo de inmunización, con c o b e r t u r a d e t r e s d i s t r i t o s e n z o ó t i c o s d e Sri L a n k a , l a v a c u n a c i ó n d e c a d a animal cuesta sólo 0,66 dólar a m e r i c a n o . El 1 0 % de esa cantidad representa el c o s t o d e l a v a c u n a o l e o s a p r o d u c i d a en u n l a b o r a t o r i o l o c a l d e m e d i o s m o d e s t o s y q u e tiene u n a c a p a c i d a d de 2 millones de dosis p o r a ñ o . El 9 0 % r e s t a n t e c o n s t i t u y e el c o s t o d e l a s i n t e r v e n c i o n e s d e l o s s e r v i c i o s v e t e r i n a r i o s e n el t e r r e n o . 7. P e r s p e c t i v a s de m e j o r a s d e l o s m é t o d o s de c o n t r o l . L a posibilidad de m e j o r a r los actuales m é t o d o s de c o n t r o l d e p e n d e de la o b t e n c i ó n de u n a c o b e r t u r a m á s elevada de i n m u n i z a c i ó n y de la p r o d u c c i ó n d e u n a v a c u n a m e j o r , m á s fácil d e i n o c u l a r y q u e o f r e z c a u n p e r í o d o m á s prolongado de inmunidad. R e c i e n t e m e n t e se i n t r o d u j e r o n d i v e r s a s v a c u n a s n u e v a s , p e r o n i n g u n a fue comercializada. a) Vacuna de doble emulsión. L a p r o d u j e r o n e n l a I n d i a G u p t a y c o l . (40) p a r a r e d u c i r l a v i s c o s i d a d d e l a v a c u n a c o n a d y u v a n t e o l e o s o . L a v a c u n a o r i g i n a l fue r e e m u l c i o n a d a c o n T w e e n 80 a 0 , 2 % d e p o l i s o r b a t o 8 0 . E l l í q u i d o r e s u l t a n t e t e n í a u n a c o n s i s t e n c i a l e c h o s a m u y fluida, p e r o l a p o t e n c i a d e l a v a c u n a e r a i n f e r i o r a l a d e l a vacuna de adyuvante oleoso. b) Vacuna de extracto capsular purificado. D h a n d a (35) i n t e n t ó i d e n t i f i c a r l a s f r a c c i o n e s a n t i g é n i c a s , e n d é c a d a s p a s a d a s , e n I n d i a , a fin d e u s a r l a s p a r a i n m u n i z a r b o v i n o s , p e r o ese t r a b a j o n o culminó en u n a v a c u n a práctica. M á s r e c i e n t e m e n t e , P e n n y N a g y (55) y N a g y y c o l . (53) o b t u v i e r o n e x t r a c t o s c a p s u l a r e s c o n p r e c i p i t a c i ó n d e s o l v e n t e del p r o d u c t o s o b r e n a d a n t e d e P. multocida t i p o B c r i a d a en f e r m e n t a d o r . Es p r o b a b l e q u e la c o m p l e j a t e c n o l o g í a r e q u e r i d a p a r a l a p r o d u c c i ó n d e v a c u n a d e este t i p o e s t é f u e r a del alcance de m u c h o s l a b o r a t o r i o s p r o d u c t o r e s de v a c u n a s en países afectados p o r s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a . A d e m á s , l a v a c u n a e r a del t i p o d e a d y u v a n t e o l e o s o q u e p o r s u e l e v a d a v i s c o s i d a d n o es v e n t a j o s a . — 773 — c) Vacunas vivas. P e r i ó d i c a m e n t e se i n t e n t a p r o d u c i r v a c u n a s v i v a s c o n t r a d i v e r s a s f o r m a s d e p a s t e u r e l o s i s . E l p r i n c i p a l p r o b l e m a c o n s i s t e e n l o g r a r la e s t a b i l i d a d d e l a c e p a a t e n u a d a o m u t a n t e . Se l o g r a r o n r e s u l t a d o s s a t i s f a c t o r i o s c o n el c ó l e r a a v i a r (Pasteurella aviseptica), p e r o n o se d e s c u b r i ó n i n g ú n m u t a n t e a p r o p i a d o p a r a la i n m u n i z a c i ó n c o n t r a la septicemia h e m o r r á g i c a . R e c i e n t e m e n t e se p r o d u j e r o n m u t a n t e s a v i r u l e n t o s d e p e n d i e n t e s d e e s t r e p t o m i c i n a m e d i a n t e m u t a g é n e s i s q u í m i c a d e c e p a s 6 : B ( 6 1 , 2 7 ) . U n o d e e s o s m u t a n t e s se u s ó s a t i s f a c t o r i a m e n t e p a r a i n m u n i z a r b o v i n o s y b ú f a l o s (26). L a g r a n c a n t i d a d de e s o s m u t a n t e s ( 1 0 - 1 0 ) r e q u e r i d a p a r a p r o d u c i r la i n m u n i d a d n o p e r m i t i e r o n l a e l a b o r a c i ó n d e u n a v a c u n a c o m e r c i a l . Se l o g r ó i n m u n i z a c i ó n s a t i s f a c toria con mutantes independientes de estreptomicina por reversión y también c o n u n a c e p a n a t u r a l m e n t e v a r i a n t e (« A T C C 19427 » ) , c o n c a n t i d a d m u c h o m e n o r d e g é r m e n e s , p e r o ese r e s u l t a d o exige i n v e s t i g a c i ó n u l t e r i o r p a r a q u e se o b t e n g a u n a v a c u n a p r á c t i c a ( D e A l w i s , i n f o r m e i n é d i t o ) . 1 0 1 1 C o n la d i s p o n i b i l i d a d de e q u i p o de liofilización, existe la perspectiva de p r o d u c i r u n a v a c u n a v i v a en f o r m a l i o f i l i z a d a . * * * Anexo 52 a SESIÓN G E N E R A L DE LA O.I.E. R E S O L U C I Ó N N ° II SEPTICEMIA HEMORRÁGICA DE BOVINOS Y BÚFALOS CONSIDERANDO q u e , en m u c h o s países, t o d a v í a n o está r e c o n o c i d a c l a r a m e n t e la septicem i a h e m o r r á g i c a c o m o u n a e n t i d a d nosológica específica; q u e m u c h o s países s e ñ a l a n la existencia de la septicemia h e m o r r á g i c a sin p r o c e d e r a l a i d e n t i f i c a c i ó n s e r o l ó g i c a del g e r m e n r e s p o n s a b l e ; q u e , a p e s a r d e q u e se h a y a r e c o n o c i d o q u e l a v a c u n a c o n a d y u v a n t e o l e o s o es el m e j o r m e d i o d e p r e v e n c i ó n d e q u e se d i s p o n e en l a a c t u a l i d a d , m u c h o s países siguen u s a n d o caldos bacterianos simples de escasa actividad; q u e las v a c u n a s f a b r i c a d a s y utilizadas en los distintos países n o están n o r m a l i z a d a s a nivel i n t e r n a c i o n a l ; q u e el e f i c i e n t e c o n t r o l d e l a e n f e r m e d a d d e p e n d e d e : a) l a i d e n t i f i c a c i ó n d e l o s s e r o t i p o s p r e s e n t e s e n c a d a p a í s ; b) u n m e j o r c o n o c i m i e n t o d e s u e p i z o o t i o l o g í a en c a d a p a í s ; — 774 — c) l a e l a b o r a c i ó n y a p l i c a c i ó n d e p r o g r a m a s e s t r a t é g i c o s d e v a c u n a c i ó n ; y d) l a e l a b o r a c i ó n d e v a c u n a s m u y a c t i v a s , EL COMITÉ RECOMIENDA 1. Q u e se d e f i n a l a d e n o m i n a c i ó n « s e p t i c e m i a h e m o r r á g i c a » c o m o u n a f o r m a específica de pasteurelosis p r i m a r i a de los b o v i n o s y b ú f a l o s , q u e c a u s a elevada m o r t a l i d a d e n t r e los casos clínicos, y c u y o s g é r m e n e s r e s p o n s a ­ bles s o n s i e m p r e l o s t i p o s 6 : B ó 6 : E d e Pasteurella multocida. 2. Q u e se p r o s i g a n l o s e s f u e r z o s c o n o b j e t o d e m e j o r a r l o s m é t o d o s d e d i a g n ó s t i c o r á p i d o y d e t i p i f i c a c i ó n s e r o l ó g i c a c o m p l e t a d e Pasteurella mul­ tocida. 3 . Q u e se a d o p t e n d i s p o s i c i o n e s p a r a l a i d e n t i f i c a c i ó n y t i p i f i c a c i ó n s e r o ­ l ó g i c a d e l a s c e p a s e n a q u e l l o s p a í s e s e n l o s q u e t o d a v í a n o se l o h a y a h e c h o . 4 . Q u e se e l a b o r e n n o r m a s p a r a l a v a c u n a c o n a d y u v a n t e o l e o s o c o n t r a la septicemia hemorrágica. 5. Q u e se a d o p t e n d i s p o s i c i o n e s p a r a q u e t o d o s l o s p a í s e s e n l o s q u e e s t é p r e s e n t e l a e n f e r m e d a d p u e d a n f a b r i c a r su p r o p i a v a c u n a c o n a d y u v a n t e o l e o s o a t e n i é n d o s e a l a s n o r m a s a q u e se r e f i e r e el p á r r a f o 4 . 6. Q u e se d o t e a l o s l a b o r a t o r i o s n a c i o n a l e s o r e g i o n a l e s d e l o s e q u i p o s a d e c u a d o s p a r a q u e p u e d a n a s e g u r a r los servicios n e c e s a r i o s . 7 . Q u e se p r o s i g a n l a s i n v e s t i g a c i o n e s s o b r e : a) l a e p i z o o t i o l o g í a d e l a e n f e r m e d a d en los d i s t i n t o s p a í s e s ; b) l a e l a b o r a c i ó n d e v a c u n a s m á s p o t e n t e s y m á s fáciles d e u t i l i z a r e n el campo. 8. Q u e , d o n d e s e a p o s i b l e , se a p l i q u e n m e d i d a s s a n i t a r i a s , t a l e s c o m o el c o n t r o l de los m o v i m i e n t o s de los a n i m a l e s a p a r t i r de las z o n a s i n f e c t a d a s , la d e s t r u c c i ó n a d e c u a d a d e las canales y o t r o s o b j e t o s c o n t a m i n a d o s , así c o m o la a d o p c i ó n de m é t o d o s m e j o r a d o s de cría, p a r a reducir la incidencia y la propagación de la e n f e r m e d a d . (Adoptada 1984.) por el Comité internacional de la O.I.E. * * * BIBLIOGRAFÍA (véase p á g . 726) el 23 de Mayo de